Trabajo de Investigacion Pda

I.
Introducción
II. REVISIÓN DE LITERATURA
II.1. Medio de cultivo
Son soluciones estériles que tienen macro y micronutrientes, sustancias

que permiten el crecimiento de organismos.
Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que

permite el desarrollo de microorganismos. En las condiciones de laboratorio
para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las
muestras en las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar
colonias
II.2. Tipos de medios de cultivos

II.2.1. Medios generales
Son aquellos que permiten el crecimiento de una gran variedad de

microorganismos.
II.2.2. Medios de enriquecimiento
Son aquellos que favorecen el crecimiento de u determinado tipo de

microorganismo sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento de los demás.
II.2.3. Medios selectivos
Son aquellos que permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos

determinado, inhibiendo el desarrollo de los demás.
II.2.4. Medios diferenciales
Son aquellos en los que se pone de manifiesto propiedades que un

determinado tipo de microorganismos posee.
2.5. Clasificación de medios de cultivos

2.5.1. Según su origen
a) Naturales: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen
animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición
química no se conoce exactamente.
b) Sintéticos: son los medios que contienen una composición química
definida cuali y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados
reproducibles.
c) Semisintéticos: son los sintéticos a los que se les añaden factores de
crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por
ejemplo extracto de levadura.
2.6. Condiciones generales para el cultivo de microorganismos
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se

ve afectado por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos
casos, son ajenos por completo al propio medio.
2.6.1. disponibilidad de nutrientes adecuados
Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de

contener, como mínimo, carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas.
En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias
inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias
adecuadas para ejercer de donantes o captadores de electrones para las
reacciones químicas que tengan lugar.
Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de

infusiones de carne, extractos de carne o extractos de levadura. Sin embargo,
la preparación de estas sustancias para su aplicación a los medios de cultivo
provocaba la pérdida de los factores nutritivos lábiles. Ciertas bacterias tienen
necesidades nutritivas específicas por lo que se añade a muchos medios
sustancias como suero, sangre, líquido ascítico, etc. Igualmente pueden ser
necesarios ciertos carbohidratos y sales minerales como las de calcio,
magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias promotoras del
crecimiento, generalmente de naturaleza vitamínica.
2.6.2. Condiciones adecuadas de humedad
Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmósfera,

es imprescindible para un buen desarrollo de las células vegetativas
microbianas en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas
condiciones mínimas en las estufas de cultivo a 35 - 37ºC proporcionando una
fuente adecuada de agua que mantenga la humedad necesaria para el
crecimiento de los cultivos y evitar así que se deseque el medio.
2.6.3. Temperatura
Los microorganismos mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas

entre 15 y 43ºC. Otros como los psicrófilos crecen a 0ºC y los temófilos a 80ºC
o incluso a temperaturas superiores (hipertemófilos). En líneas generales, los
patógenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho más cortos,
alrededor de 37ºC, y los saprofítos tienen rangos más amplios.
2.6.4. Luz ambiental
La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad

que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sería el caso
de los microorganismos fotosintéticos.
2.6.5. pH
La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el

crecimiento de los microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor
en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios más o
menos ácidos. No se debe olvidar que la presencia de ácidos o bases en
cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo
inhibirlo o incluso alterar sus procesos metabólicos normales.
2.7. Agar papa dextrosa (PDA)
El PDA es utilizado por varios investigadores para el aislamiento de especies

de Fusarium. No se recomienda este medio para estos propósitos, ya que
varios hongos saprófitos y bacterias también pueden crecer en el medio e
interferir con la recuperación de hongos del género Fusarium presentes. Si se
utiliza PDA para la recuperación de los hongos provenientes de la plantas,
entonces se debe reducir la concentración de papa y dextrosa ente un 50 a 75
% y añadir antibióticos de amplio aspectro para inhibir el crecimiento de
bacterias (LESLIE Y COOL., 2006)
III. Materiales y metodología
III.1. Lugar de ejecución
El presente trabajo de investigación cientifico se inició el … de … de

2014 y se dio por finalizada el día ….. de … del 2014 teniendo una
duración de … días; se realizó en el laboratorio de …….,se encuentra
ubicado dentro de la Universidad Nacional Agraria de la Selva,
distrito……, provincia…., departamento….
III.2. Ubicación geográfica
- Altitud :
- Latitud sur :
- Longitud oeste :
- Temperatura :
- Precipitación :
III.3. Equipos y materiales
III.3.1. Equipos
- Auto clave
- Olla a presión
- Cocina a gas
- Refrigeradora
- Microondas
- Balanza analítica
- Cámara fotográfica
III.3.2. Materiales
- Papa
- Agar
- Botellas de néctar.
- Recipientes de platico
- Cuchillo
- Agua destilada
- Algodón
- Papel
- Lapiceros y cuaderno de apuntes
Metodo:
Se preparó el agar
Se lavó y peló la papa.
Se puso a hervirla la papa.
El agua hervida que sale de la papa se mezcló con el agar y se movió para
mezclar y obtener el PDA.
Se lavaron las botellas y se procedieron a llevar con PDA que se preparó.
Se esterilizaron las botellas en autoclave o en olla a presión.
La esterilización de las botellas se hizo a diferentes prolongaciones de tiempo,

un grupo en autoclave y otro en olla a presión.
Se esperó a que las botellas enfriaran y se dividieron en grupos para ponerlas

en diferentes ambientes.
Se pusieron 15 botellas en refrigeración, 15 en total obscuridad y 15 al aire

libre.
De las 15 botellas 4 fueron esterilizadas en olla a presión durante 30 min,4 a 25

min ,4 a 20 min y 3 en autoclave durante 15 min.

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II.1. Medio de cultivo

Son soluciones estériles que tienen macro y micronutrientes, sustancias

Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que

II.2. Tipos de medios de cultivos

Son aquellos que permiten el crecimiento de una gran variedad de

II.2.2. Medios de enriquecimiento

Son aquellos que favorecen el crecimiento de u determinado tipo de

II.2.3. Medios selectivos

Son aquellos que permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos

II.2.4. Medios diferenciales

Son aquellos en los que se pone de manifiesto propiedades que un

2.5. Clasificación de medios de cultivos

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se

2.6.1. disponibilidad de nutrientes adecuados

Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de

Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de

2.6.2. Condiciones adecuadas de humedad

Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmósfera,

Los microorganismos mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas

2.6.4. Luz ambiental

La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad

La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el

2.7. Agar papa dextrosa (PDA)

El PDA es utilizado por varios investigadores para el aislamiento de especies

III.1. Lugar de ejecución

El presente trabajo de investigación cientifico se inició el … de … de

Se lavó y peló la papa.

Se puso a hervirla la papa.

Se lavaron las botellas y se procedieron a llevar con PDA que se preparó.

Se esterilizaron las botellas en autoclave o en olla a presión.

La esterilización de las botellas se hizo a diferentes prolongaciones de tiempo,

Se esperó a que las botellas enfriaran y se dividieron en grupos para ponerlas

Se pusieron 15 botellas en refrigeración, 15 en total obscuridad y 15 al aire

De las 15 botellas 4 fueron esterilizadas en olla a presión durante 30 min,4 a 25

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