Este documento describe varios métodos de análisis de alimentos y nutrientes, incluyendo la detección de proteínas mediante la reacción de Biuret, la determinación de fibra cruda, azúcares y acidez total. Cada método detalla los materiales necesarios y los pasos del procedimiento.
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Este documento describe varios métodos de análisis de alimentos y nutrientes, incluyendo la detección de proteínas mediante la reacción de Biuret, la determinación de fibra cruda, azúcares y acidez total. Cada método detalla los materiales necesarios y los pasos del procedimiento.
Este documento describe varios métodos de análisis de alimentos y nutrientes, incluyendo la detección de proteínas mediante la reacción de Biuret, la determinación de fibra cruda, azúcares y acidez total. Cada método detalla los materiales necesarios y los pasos del procedimiento.
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MÉTODOS DE ANÁLISIS
Detección de proteína por medio de la reacción de Biuret
Materiales Suplemento proteico Gelatina sin sabor Huevo 5 tubos de ensayo 4 pipetas Agua destilada 3 vasos de precipitado 1 radilla Reactivo Biuret 1.- Agregamos una pequeña cantidad del suplemento en un vaso de precipitado y lo diluimos con agua destilada. Con una pipeta medimos 3 ml y lo pasamos a un tubo de ensayo. 2.- Agregamos una pequeña cantidad de polvo de gelatina sin sabor en un vaso de precipitado y lo diluimos con agua destilada. Con una pipeta medimos 3 ml y lo pasamos a un tubo de ensayo. 3.- Separamos la clara y la yema de un huevo, solo se utilizara la clara. Se agrega la clara en un vaso de precipitado, con una pipeta medimos 3 ml y lo pasamos a un tubo de ensayo. 4.- Colocamos 5 gotas de reactivo a cada tubo de ensayo y observar la coloración de la muestra. Mediante el uso de sustancias como es el reactivo Biuret se pueden identificar proteínas, que al ponerse en contacto con ellas producen una coloración específica. La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre iones Cu2 + y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forman parte de los enlaces peptídicos. Refractometria Materiales Tubos de ensayo Vaso precipitado Algodón Probeta Gradilla Alcohol Azúcar Agua Se prepara la solución de azúcar-agua para concentraciones de porcentaje en peso: 5, 10, 15, 20, 25, 30, Para todas concentraciones seguir el siguiente procedimiento para determinar el índice de refracción. Calibrar el equipo colocando una gota de agua destilada, una vez calibrado limpiarlo con algodón para secar la muestra, y después algodón con etanol para eliminar cualquier residuo sobrante. Una vez limpio el equipo se comienza a colocar las muestras empezando con la de 5 g y así todas las muestras consecutivamente. Determinación de fibra cruda Materiales 3 bolsas para fibra 1 espátula acanalada 1 piceta 3 vasos de precipitado de 1 ml 1 vaso de precipitado de 200 ml 1 crisol 1 pinzas para crisol 1 guantes de asbesto 1 desecador 1 mortero con pistilo Preparación de la muestra Pesar cada bolsa vacía y marcarlas para identificación, después se tritura la muestra de fibra en el mortero hasta quedar polvo, se agrega la muestra en cada bolsa una bolsa se queda vacía para ser en blanco y ayudar con los cálculos finales, se sellan las bolsas completamente para así evitar que la muestra se salga. Proceso de extracción Lavado de acetona se sumergen las muestras en acetona y agitarlas constantemente durante 10 minutos, se tienen que hacer 3 lavados de acetona diferentes es decir una vez cumplidos los 10 minutos se saca la muestra del primer lavado y se sumerge en el segundo, y así consecutivamente, al finalizar los lavados se sacaran las muestras y se colocaran en papel absorbente, presionando con las manos para así poder quitar la mayor cantidad de acetona posible. Proceso de digestión Se colocan las bolsas en el soporte del aparatado como máximo 3 bolsas por cada nivel y un máximo de 24 bolsas por corrida, colocar un último plato vacío para finalizar el sistema. La palanca de drenado debe estar en posición horizontal y agregue de 1900 a 2000 ml de solución de ácido sulfúrico en el analizador de fibras, presione los botones agitación y git, el nivel del líquido deberá de llegar hasta la altura del empaque que se encuentra en la parte exterior de la boca del aparato, cierre el aparato y tenga cuidado de cierra perfectamente la llave, digerir por 45 minutos y después se apaga el aparato y con la ayuda de guantes de asbesto vamos a drenar todo el líquido, se cierra la llave de drenado y se abre la llave del aparato agregando 2 litros de agua caliente, enjuaga con el agua presionando el botón de agitación de 3 a 5 minutos, drene el agua y repita el procedimiento 2 veces más. *Repetir procedimiento 2 veces más. Remover las bolsas de soporte y presionarlas en el papel absorbente para eliminar el exceso de agua después colocar las bolsas en un vaso de precipitado con acetona agitar de 2 a 3 minutos, secarlas nuevamente. Se meten las muestras a la mufla a 60 C 2 horas mínimo, se sacan las y se ponen en un desecador con la finalidad de que no absorban humedad hasta que estén a temperatura ambiente. Se pesa cada bolsa y se registra, mientras se pesa cada bolsa se coloca un crisol en la mufla 135 C por mínimo de 2 horas, se sacan, se pesan y se registra su peso, se taran los crisol y se pone una muestra de cada uno de ellos. Por último se meten los crisoles con las muestras en la mufla a 600 C. y se dejan por 2 horas, se sacan las muestras calcinadas y se pesan nuevamente. Determinación de azucares MATERIALES Y REACTIVOS Papel para limpieza (papel seda o higiénico) Agua destilada Refractómetro de mesa o manual GOTEROS DE PLÁSTICO PROCEDIMIENTO: Colocar el refractómetro en una posición tal que difunda la luz natural o cualquier otra Forma de luz artificial, que pueda utilizarse para iluminación. CUANDO SE UTILICE UN RFRACTOMETRO DE MESA (Hacer circular agua a 293 K) o (20ºC) a través de los prismas. REFRACTOMETRO MANUAL En los refractómetros manuales se levanta el cristal se coloca la muestra y se observa a contraluz lo más nítido posible, se toma la lectura directamente Determinación de acidez total MATERIAL Matraz Erlemeyer Matraz volumétrico Pipeta papel filtro Bureta Agitador REACTIVOS Fenolftaleína al 1% Hidróxido de sodio 0.1N PROCEDIMIENTO: A) Determinar previamente el pH de las muestras a las que se les realice determinación de acidez B) Preparación de las muestras 1. Se llena la bureta con una solución de hidróxido de sodio 0.1 N valorada 2. Se coloca la cantidad de muestra (indicada en el inciso A) en un matraz Erlenmeyer 3. Se adicionan 5 gotas de fenoftaleína al 1% 4. Se realiza la Titulación: Se adiciona gota por gota la solución de hidróxido de sodio, y se agita el matraz Erlenmeyer con la muestra vigorosamente el matraz Erlenmeyer, hasta aparición de un color rosado que permanezca por más de 20 segundos 5. Se toma la lectura del volumen de hidróxido de sodio gastados .. 6. Calcular la acidez presente en cada muestra. Cálculo de la acidez. La acidez del producto se expresa como el porcentaje del ácido predominante en la muestra, ya sea como % de ácido cítrico, málico, láctico, etc.