Evaluación Laboratorial de Heces

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INFORME DE PRÁCTICA No.

EVALUACIÓN LABORATORIAL DE LAS HECES – PROCEDIMIENTOS 2

Karem Alejandra Varón Ruiz 010100102019

Presentado a:
Luz Clemencia Fandiño de Rubio

Universidad del Tolima


Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
01 de junio
2022
Temas para el desarrollo del paso a paso de la evaluación laboratorial de las heces:
Elaborar los procedimientos teniendo en cuenta entre otros los siguientes parámetros:
• Fundamento.
• Equipos, Materiales, Reactivos y material biológico.
• Procedimiento.
• Observación microscópica.
• Reporte resultados.

1. EXAMEN MICROSCÓPICO
• Objetivo general
Efectuar un posterior diagnóstico etiológico de diversas infestaciones parasitarias,
observando así las formas evolutivas móviles que componen todo el ciclo biológico de
aquellos parásitos de tamaños microscópicos (trofozoítos, quistes de protozoos, así como
larvas o huevos de helmintos).

• Métodos
 Extensión directa: Se recomienda su utilización exclusivamente cuando las
alteraciones en las heces son importantes, es indispensable si su consistencia es
diarreica, mucosa o líquida. Es de poca utilidad ya que suele arrojar falsos negativos
en muestras duras.
 Concentración o enriquecimiento: Incluyen los métodos de flotación, sedimentación
y migración. Estos hacen uso de procedimientos y sustancias específicas, para
mejorar las posibilidades de la identificación cualitativa de las estructuras o formas
de los parásitos.

1.1. MÉTODO EXTENSIÓN DIRECTA


Fundamento
Esta técnica se basa en un extendido de las heces para observación de posibles formas
parasitarias en el microscopio. Este método como se mencionaba anteriormente se
recomienda para muestras procedentes de animales muy pequeños, neonatos y muestras con
alteraciones visibles y trascendentales como diarreicas, mucosas y sanguinolentas.
Equipos y materiales
 Microscopio.
 Láminas portaobjetos.
 Láminas cubreobjetos.
 Palillos.
 Pipetas Pasteur.
Reactivos
Solución salina al 0.9% y Lugol parasitológico.
Material biológico
Heces o materia fecal, especies animales.
Procedimiento
1. A un lado del portaobjetos debe colocarse una gota de Lugol usando la pipeta.
2. Al otro lado una gota de la solución salina con otra pipeta.
3. Con la punta del palillo se toma una porción de heces en varios puntos de esta.
4. Luego con el palillo hacer el extendido 2mm en el Lugol homogenizando.
5. Hacer extendido de 2mm en la solución con otro palillo con heces homogenizando.
6. Luego colocar cubreobjetos en cada uno de los frotis.
7. Se lleva al microscopio y se observa en 4x 10x y 40x para describir las
características y estructuras presentes en cada lado de la muestra.

1.2. MÉTODO CONCENTRACIÓN TÉCNICA SLOSS MODIFICADA


Fundamento
El fundamento de esta técnica es la utilización de soluciones saturadas o de alta densidad
(hipertónicas) para hacer uso del método de flotación; por tanto, a través de las diferencias
de densidades se podrán aislar las estructuras parasitarias para su posterior observación.
Equipos
 Microscopio.
 Balanza.
 Centrífuga.
Materiales
 Láminas portaobjetos.
 Laminillas cubreobjetos.
 Bajalenguas o espátula.
 Pipetas Pasteur.
 Vasos desechables.
 Aplicadores o palillos largos.
 Gradillas.
 Probeta de 50 a 100 ml.
 Coladores o cedazos de malla fina.
 Tubos graduados x 15 ml.
Reactivos
Jarabe coprológico (solución azucarada de Sheater).
Material biológico
Heces o materia fecal, especies animales.
Procedimiento
1. Pesar 2g de materia fecal en un vaso desechable.
2. Añadir 28 ml (relación 1g : 14ml) y mezclar hasta tener una suspensión homogénea
con ayuda del bajalenguas.
3. Pasar la suspensión a través de un colador y con ayuda del bajalenguas exprimir el
contenido de este, hasta extraer la máxima cantidad de agua.
4. Depositar el líquido en un tubo, una cantidad aproximada de 12 ml y tapar.
5. Centrifugar a 1500 r.p.m por 5 minutos.
6. Desechar el sobrenadante, dejando el sedimento.
7. Añadir jarabe coprológico hasta la marca 12 ml, tapar y homogenizar la mezcla.
8. Centrifugar a 1500 r.p.m por 5 minutos.
9. Retirar el tubo de la centrífuga y posicionarlo verticalmente en la gradilla.
10. Formar el menisco convexo completando con más jarabe coprológico y cubrirlo con
una laminilla cubreobjetos.
11. Esperar 30 minutos.
12. Colocar la laminilla sobre un portaobjetos a una distancia mínima.
13. Observar al microscopio en objetivo 4x, 10x y 40x.

1.3. MÉTODO CONCENTRACIÓN FLOTACIÓN TÉCNICA SOLUCIÓN SALINA


SATURADA
Fundamento
Aprovechamiento de la diferencia de densidades que pueden darse entre estructuras
parasitarias y una solución hipertónica (salina saturada) para su posterior observación de
una manera aislada y más específica.
Equipos
 Microscopio.
 Balanza.
Materiales
 Láminas portaobjetos.
 Laminillas cubreobjetos.
 Bajalenguas o espátula.
 Pipetas Pasteur.
 Vasos desechables.
 Aplicadores o palillos largos.
 Gradillas.
 Probeta de 50 a 100 ml.
 Coladores o cedazos de malla fina.
 Tubos graduados x 15 ml.
Reactivos
Solución salina saturada.
Material biológico
Heces o materia fecal, especies animales.
Procedimiento
1. Pesar 2g de materia fecal.
2. Añadir 28 ml de solución salina saturada y mezclar hasta obtener una suspensión
homogénea.
3. Pasar la suspensión a través de un colador y con ayuda del bajalenguas exprimir el
contenido de este, hasta extraer la máxima cantidad de agua.
4. Depositar el líquido en un tubo, una cantidad aproximada de 12 ml y tapar.
5. Completar con solución salina saturada hasta crear el menisco convexo y cubrirlo
con una laminilla cubreobjetos.
6. Esperar 15 minutos.
7. Colocar la laminilla sobre un portaobjetos a una distancia mínima.
8. Observar al microscopio en objetivo 4x, 10x y 40x.

1.4. MÉTODO CONCENTRACIÓN FLOTACIÓN TÉCNICA FAUST


Fundamento
Aprovechamiento de la diferencia de densidades que pueden darse entre estructuras
parasitarias y una solución hipertónica (Sulfato de Zinc) para su posterior observación de
una manera aislada y más específica. Se recomienda especialmente para la observación de
protozoos y oocistos de Coccidias y Eimerias.
Equipos
 Microscopio.
 Balanza.
 Centrífuga.
Materiales
 Láminas portaobjetos.
 Laminillas cubreobjetos.
 Bajalenguas o espátula.
 Pipetas Pasteur.
 Vasos desechables.
 Aplicadores o palillos largos.
 Gradillas.
 Probeta de 50 a 100 ml.
 Coladores o cedazos de malla fina.
 Tubos graduados x 15 ml.
Reactivos
Solución Sulfato de zinc.
Material biológico
Heces o materia fecal, especies animales.
Procedimiento
1. Pesar 2g de materia fecal.
2. Añadir 28 ml de agua y mezclar hasta obtener una suspensión homogénea.
3. Colar la suspensión al menos 3 veces.
4. Depositar el líquido obtenido en un tubo, aproximadamente 12 ml y tapar.
5. Centrifugar a 1500 r.p.m por 5 minutos.
6. Desechar el sobrenadante, dejando el sedimento.
7. Adicionar agua destilada hasta la marca 12 ml y homogenizar.
8. Centrifugar a 1500 r.p.m por 5 minutos.
9. Repetir los pasos 6-7-8 hasta que el líquido sobrenadante sea transparente,
aproximadamente 4 veces.
10. Añadir solución de Sulfato de zinc hasta la marca 12 ml y homogenizar.
11. Centrifugar a 1500 r.p.m por 5 minutos.
12. Retirar el tubo y colocarlo verticalmente en una gradilla.
13. Formar el menisco convexo completando el tubo con solución de Sulfato de zinc y
cubrirlo con una laminilla cubreobjetos.
14. Esperar 30 minutos.
15. Retirar cuidadosamente la laminilla y colocarla en un portaobjetos con una distancia
mínima.
16. Observar al microscopio en objetivo 4x, 10x y 40x.

Observación a nivel GENERAL para TODOS los métodos cualitativos


La observación para realizar el análisis se hace con el objetivo 10x de la siguiente manera:
1. Iniciar la revisión partiendo del extremo superior izquierdo de la laminilla.
2. Hacer el recorrido hasta la parte inferior.
3. Mover hacia la derecha y subir al borde superior.
4. Repetir hasta llegar al extremo derecho de la lámina.
Como aclaración la observación no necesariamente tiene que iniciar desde la izquierda de
la placa, puede iniciar des cualquier extremo y también se puede observar tanto en 10x,
como en 4x y 40x que es lo ideal.

Reporte resultados a nivel GENERAL para TODOS los métodos cualitativos


Los resultados se reportan de manera cualitativa del siguiente modo:
Negativo = Sin estructuras parasitarias en los campos. Se reporta: En la muestra examinada
no se observan estructuras parasitarias.
(+) = 1-3 formas parasitarias por campo microscópico
(++) = 4-7 formas parasitarias por campo microscópico
(+++) 8-10 formas parasitarias por campo microscópico
(++++) >10 formas parasitarias por campo microscópico
Se debe especificar:
1. Estructura o forma parasitaria: Huevos, Oocistos u Ooquistes, Trofozooitos o larvas.
2. Género y especie.
3. 1+, 2+, 3+ o 4+.

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