Reporte 4

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LABORATORIO DE INMUNOLOGÍA GENERAL

DOCENTE: MAC. MARIA LUDIVINA DE LOS REYES MARTINEZ

REPORTE DE RESULTADOS (SESIÓN 4)


NOMBRE DE EL REPORTE: DETERMINACIÓN DE ANTIESTREPTOLISINAS
NOMBRE DEL ALUMNO: MARIEL MONTOYA PADRÓN
GRADO Y GRUPO: 4-H
CARRERA: QUÍMICO FARMACÉUTICO BIÓLOGO
FECHA DE ENTREGA DE REPORTE: 09-03-2023
REPORTE DE RESULTADOS (SESIÓN 4)

DETERMINACIÓN DE ANTIESTREPTOLISINAS

OBJETIVO
• Conocer las técnicas para la obtención y extracción de muestras sanguíneas.
• Identificar los puntos críticos que deben controlarse para obtener resultados
confiables y oportunos.
• Determinar cuantitativamente la cantidad de anticuerpos contra la
antiestreptolisina O producida por Estreptococos del grupo A en una muestra de
suero de un paciente
• Discutir la importancia de la determinación de antiestreptolisina como factor
diagnóstico de las enfermedades causadas por estreptococos.

FUNDAMENTO
La antiestreptolisina O es un examen de sangre para medir los anticuerpos contra
estreptolisina O (ASO, por sus siglas en inglés), una sustancia producida por la bacteria
estreptococo del grupo A. Los anticuerpos son proteínas que nuestros cuerpos
producen cuando detectan sustancias nocivas, tales como las bacterias.

La mayoría de los estreptococos del grupo “A” produce dos factores hemolíticos, la
estreptolisina “O” y “S”, capaces de producir ruptura de hematíes y por tanto hemólisis.
En individuos infectados con estreptococos del gpo “A” la estreptolisina “O” estimula la
producción de anticuerpos (Ac) específicos, la antiestreptolisina “O”, mientras la
estreptolisina “S” no genera anticuerpos.

La estreptolisina “O” se encuentra en ordinario en el suero en escasas concentraciones


y su presencia se debe a la frecuencia de infecciones estreptocócicas. Se descubrió
que pacientes que padecieron una infección aguda a estreptococos y poseen un
marcado aumento de antiestreptolisinas durante un período latente posterior a la
enfermedad, desarrollaron fiebre reumática.

La determinación del título de Antiestreptolisina es valiosa, en el diagnostico diferencial


de la fiebre reumática inicial y la artritis reumatoidea, donde el titulo no resulta elevado.

Si se agrega estreptolisina “O” a glóbulos rojos se producirá hemólisis. Cuando el suero


del paciente que contiene anticuerpos antiestreptolisina “O” se ponen en presencia de
la estreptolisina se producirá una reacción Antigeno-Anticuerpo (Ag-Ac), en parte o por
completo, según la cantidad de anticuerpo presente.

Si una cantidad constante del antígenoestreptolisina se agrega a diluciones


progresivas de suero, mientras la cantidad de anticuerpo presente sea suficiente, se
producirá la neutralización del antígeno y no aparecerá hemólisis cuando se adicionan
hematíes al sistema. Cuando la cantidad de antígeno excede la del anticuerpo, el
exceso de estreptolisina producirá hemólisis.

DIAGRAMA DE FLUJO
Prueba cualitativa

2. Colocar una gota de 3. Mezclar con un


1. Realizar la toma de aplicador y agitar x 2
muestra por los controles en la
placa y una gota de min. Los controles
extracción sanguínea. deben dar + y -
reactivo.

6. Observar
5. Mezclar con un 4. Centrifugar la
Aglutinación=Positivo
aplicador y agitar muestra y colocar
No aglutinación=Negativo
x 2 min. 1 gota de suero +
Prueba cuantitativa 1 gota de reactivo.

1. Si es Positivo 2. Colocar 100ml del 3. A la dilución 1:2


realizar prueba Buffer a las 3 agregar 100 ml de la
cuantitativa. Rotular diluciones de los tubos. muestra problema,
3 tubos como 1:2, mezclar.
1:4 y 1:8.
6. Colocar en una placa 5. Mezclar y tirar 100
una gota de cada ml para que todas las
dilución y agregar 1 muestras tengan la 4. Pasar 100 ml de la
gota de reactivo. misma cantidad. dilución 1:2 a la dilución
1:4 mezclar y pasar
100 ml a la dilución 1:8.

7. Mezclar con un
aplicador, agitar x 2 min y
observar la aglutinación.

OBSERVACIONES
Es necesario observar que nuestro kit venga completo, una vez corroborado y
antes de correr una muestra de paciente se deben checar los controles, los cuales
deben dar + y -. En dado caso que los controles no den, no se puede correr la muestra
por lo que deben checarse otros reactivos que tengan diferentes fechas de caducidad
y diferente # de lote ya que puede ser un error de fabricación.

Es indispensable colocar la misma cantidad de muestra y reactivo, mezclar lo suficiente


con un solo aplicador para cada reacción y posteriormente agitar durante un tiempo
prolongado de reacción de 2 minutos con la finalidad de apreciar la aglutinación y evitar
un falso positivo. Uno de los principales errores que pude apreciar fue que muchos
compañeros no sabían observar la aglutinación y reportaban resultados negativos
cuando estos tenían aglutinación, considero que se puede deber a que la reacción es
blanca por lo que se utiliza placa negra pera que sea más visible la aglutinación, aun
así, puede dificultarse por lo que considero necesario correr varias veces la muestra
en placa, la cual es muy rápida y seria lo ideal para asignar un buen resultado.
RESULTADOS:
Nombre del paciente: Mariel Montoya Padrón
Edad: 20 años

Sexo: Femenino

Examen Resultados Valores de referencia


Antiestreptolisinas Negativo 0-200 uI/ml

Nombre del paciente: Ulises Domínguez Jiménez


Edad: 22 años
Sexo: Masculino
Examen Resultados Valores de referencia
Antiestreptolisinas Positivo 0-200 uI/ml
1:2=400 uI/ml

La muestra de nuestro equipo en la prueba cualitativa dio NEGATIVO ya que no se


encontró aglutinación, por lo cual no se procedió a la prueba cuantitativa. En cambio,
la muestra proporcionada por la profesora era POSITIVA ya que, si presento
aglutinación, por lo que fue la única muestra a la que se le realizo prueba cuantitativa.
En placa aglutino únicamente en 1:2 por lo cual se reporta como POSITIVO 1:2=400
uI/ml.

Dependiendo la aglutinación en placa, los resultados en la prueba cuantitativa se


reportan como:

Positivo 1:2=400 uI/ml


Positivo 1:4=800 uI/ml
Positivo 1:8=1600 uI/ml
CONCLUSIONES:
Conozco las técnicas para la obtención y extracción de muestras sanguíneas. Identifico
los puntos críticos que deben controlarse para obtener resultados confiables y
oportunos, como lo es checar los controles antes de correr una muestra y que en caso
de que estos no den, no se puede correr la muestra, por lo que deben checarse otros
reactivos que tengan diferentes fechas de caducidad y diferente # de lote ya que puede
ser un error de fabricación.

Conozco el procedimiento para determinar cualitativa y cuantitativamente la cantidad


de anticuerpos contra la antiestreptolisina O producida por Estreptococos del grupo A
en una muestra de suero de un paciente. Conozco la importancia de la determinación
de antiestreptolisina como factor diagnóstico de las enfermedades causadas por
estreptococos.

Identifico las vías por las cuales las bacterias pueden entrar las cuales son piel,
mucosas y medio ambiente, provocando contagio al hablar, estornudar y toser. Ataca
primordialmente a niños, pero también a jóvenes y adultos. Conozco sus principales
síntomas como fiebre, dolor, fatiga, dificultad al respirar, nódulos bajo la piel, erupción
cutánea, inflamación del corazón, palpitaciones y dolor articular.

CUESTONARIO:
Menciona la importancia de la prueba de antiestreptolisina
Tiene importancia para conocer si una persona ha presentado recientemente una
infección por el estreptococo del grupo A o para detectar secuelas de este tipo de
infección, como la fiebre reumática.

Con que otro nombre se le conoce a la prueba de antiestreptolisina


Como ASO;ASLO

Que enfermedades están relacionadas con las antiestreptolisinas


• Infeccion en garganta
• Escarlatina
• Fiebre reumática
• Glomerulonefritis
BIBLIOGRAFIA
• Regueiro Glz J.R. and Lopez Larrea C, Gonzalez Rdz S. “Inmunología, Biología
y Patología del Sistema Inmune” Editorial Panamericana 3° Edicion
• 2. Janeway Charles A and Travels P.“Inmunobiología. El sistema inmune en la
salud y la enfermedad”. Editorial Current Biology Limited Garland Publishing Inc.
New York and London.
• Allen CT, Nussenbaum B, Merati AL. Acute and chronic laryngopharyngitis. In:
Flint PW, Francis HW, Haughey BH, et al, eds. Cummings Otolaryngology: Head
& Neck Surgery. 7th ed. Philadelphia, PA: Elsevier; 2021:chap 61.
• Bryant AE, Stevens DL. Streptococcus pyogenes. In: Bennett JE, Dolin R, Blaser
MJ, eds. Mandell, Douglas, and Bennett's Principles and Practice of Infectious
Diseases. 9th ed. Philadelphia, PA: Elsevier; 2020:chap 197.

Firma del docente : Fecha: 09-03-2023 Calificación:

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