Práctica

Calificada
LABORATORIO
LABORATOTIO CLÍNICO
CLÍNICO
FRANKLIN JHOAMIR
CHIZA VÁSQUEZ
 ESTUDIANTE:
FRANKLIN JHOAMIR CHIZA
VASQUEZ

DOCENTE:
DRA. ISEL ELIDE HUERTA
CORONEL

CURSO:
LABORATOTIO CLÍNICO
B1P2
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA

PRÁCTICA N° 1
Nombres y apellidos: Franklin Jhoamir Chiza Vásquez

I. OBJETIVOS
Práctica I. Toma de Muestra de Sangre Venosa, Frotis y Coloración Wright.

II. MATERIALES
Para extracción de sangre capilar: Sangre capilar, Obtener 5 capilares heparinizados.
MATERIALES: -
● Torunda de algodón
● Alcohol etílico (70%)
● Marcador de vidrio
● Capilares heparinizados
● Plastilina (para sellar capilares con su respectiva base numerada)
● Lancetas desechables
● Láminas esmeriladas
● Guantes descartables.

Para extracción de sangre venosa: 2 a 3 mL de sangre venosa con anticoagulante (se

emplean de 1 mg ± de EDTA por mL de sangre).
MATERIALES:
● Tubos al vacío para extracción de sangre,
● Agujas descartables
● Sistema de extracción al vacío
● Torundas de algodón,
● Alcohol etílico (70%)
● Marcador de vidrio.
● Láminas esmeriladas.
● Torniquete o ligadura
● Guantes descartables.
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Para frotis: Sangre capilar o venosa recién extraída o sangre con anticoagulante EDTA.
MATERIALES Y REACTIVOS:
● Portaobjeto de vidrio con extremo esmerilado.
● Alcohol etílico al 70%.
● Torunda de algodón.
● Marcador de vidrio.
● Bandeja o soporte para la coloración
● Aceite de inmersión.
● Reloj marcador.
● Perilla de hule.
● Papel toalla.
● Guantes descartables.
● Solution de Wright. - Buffer pH 6.8

I. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
PARA SANGRE CAPILAR:

⮚ Lavar, secar las manos y colocar los guantes.

⮚ Explicarle al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.

⮚ Seleccionar el dedo anular de la mano a puncionar y dar masaje para mejorar la

irrigación sanguínea.

⮚ Realizar asepsia con torunda de algodón humedecida con alcohol etílico al 70%.

⮚ Con lanceta desechable efectuar la punción limpia y rápida de 2 a 3mm. de

profundidad.

⮚ Eliminar la primera gota de sangre con un trozo de algodón seco. –

⮚ Colocar el capilar de modo que penetre la sangre libremente.

⮚ Cuando se ha obtenido la cantidad de sangre adecuada se presiona el lugar de la

punción con un trozo de algodón humedecido con alcohol etílico al 70% hasta que
cese el sangrado.

⮚ Colocar los capilares verticalmente en la plastilina

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PARA SANGRE VENOSA:

⮚ Lavar, secar las manos y colocarse los guantes.

⮚ Identificar el tubo y la lámina adecuadamente.

⮚ Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.

⮚ Sentar cómodamente al paciente para la extracción tomando en cuenta que el área

de extracción debe contar con suficiente iluminación

⮚ Seleccionar la vena apropiada para la punción.

⮚ Realizar asepsia con torunda de algodón humedecida con alcohol etílico al 70% de
adentro hacia fuera.

⮚ Colocar el torniquete firmemente alrededor del brazo, y pedir al paciente que abra y
cierre la mano varias veces para favorecer la dilatación de las venas.

⮚ Proceder a puncionar la vena seleccionada.

⮚ Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.

⮚ Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la vena de 1 a 1.5

cm.

⮚ Introducir el tubo en el dispositivo (holder) de manera que al ejercer presión se

atraviese el extremo inferior de la aguja, para que la sangre fluya hacia el tubo por
efecto del vacío.

⮚ Mezclar la sangre de cada tubo invirtiendo los tubos suavemente varias veces

⮚ Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda de algodón
sobre la piel donde se encuentra oculta la punta de la aguja.

⮚ Extraer la aguja con un movimiento rápido por debajo de la pieza de algodón, pedir
al paciente que presione firmemente la torunda durante 3 minutos con el brazo
extendido.

⮚ Separar la aguja del holder cuidadosamente y eliminarla.

⮚ Verificar nuevamente la identificación del paciente

PARA FROTIS:

⮚ Antes de utilizar los portaobjetos de vidrio, limpiarlos con alcohol

⮚ Identificar la lámina adecuadamente en el extremo del portaobjeto (parte

esmerilada).

⮚ Colocar en el portaobjeto una pequeña gota de sangre de 2 mm de diámetro a una

distancia de 2 a 3 mm del extremo del portaobjeto y hacer rápidamente el extendido
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⮚ Para evitar la coagulación; se puede utilizar sangre con EDTA. (Siempre conviene
realizar cuando menos dos frotis)

⮚ Poner la lámina extensora a un ángulo de 45° del portaobjeto y moverla hacia atrás
para que haga contacto con la gota, que debe extenderse rápidamente.

⮚ El extendido debe tener unos 30 mm. de largo. (Anexo 6).

⮚ Dejar secar a temperatura ambiente.

⮚ Colocar la lámina completamente seca, sobre un soporte. (no necesita fijación previa
pues el metanol del Wright fija la preparación).

⮚ Cubrir todo el frotis con coloración de Wright y dejarlo en reposo 3 minutos (o el

tiempo necesario según la maduración del colorante).

⮚ Agregar una cantidad igual de agua con buffer (pH 6.8) evitando derramar el Wright,
mezclar con una perilla de hule con suavidad para asegurar una mezcla uniforme,
aparecerá una película verde metálica, dejarlo en reposo por 5 minutos o el tiempo
necesario según la maduración del Wright.

⮚ Lavar la lámina con agua de chorro hasta quitar el exceso de la mezcla.

⮚ Limpiar la parte posterior del portaobjeto con una torunda de algodón impregnada
con alcohol, para eliminar todos los restos de colorante.

⮚ Dejar secar la preparación al aire colocando la lámina en posición vertical en una

rejilla para portaobjeto

I. CONCLUSIONES
El alumno sabe extraer adecuadamente sangre capilar y sangre venosa para
hemograma completo
El alumno realiza adecuadamente el proceso de coloración de lámina para lectura de
hemograma
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II. EVALUACIÓN
El alumno desarrollará y efectuará adecuadamente los procedimientos según la guía
y responderá a las preguntas del profesor
1. ¿Cuáles son los tipos de tubos de extracción con anticoagulante utilizados,
mencione las pruebas de laboratorio que se tomen en ellos?

TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
CELESTE
Los tubos de PT se utiliza para las
pruebas de coagulación de la
sangre y se aplica al sistema de
coagulación (PT, TT, APTT y
Citrato de sodio al fibrinógeno). - Prueba de Coagulación.
3,2%: “Tiempo de
El tubo contiene un citrato de
determinación Protrombina (TP)” y
sodio que actúa como un
para la velocidad “Tiempo Parcial de
anticoagulante reversible al
de la Tromboplastina (TTPA)”
unirse a los iones de calcio en la
diseminación y - Agregación
sangre y, posteriormente,
prueba de plaquetaria.
interrumpir la cascada de
coagulación. - Dímero D.
coagulación. Como el citrato de
sodio tiene muy poca toxicidad,
también se utiliza para el
almacenamiento de sangre.

TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
LILA

Los tubos EDTA son los tubos

- Hemoglobina
estándar utilizado en
glicosilada.
EDTA K2 o K3: hematología clínica, pruebas
- Troponina I.
Ácidoetilendiamino cruzadas, grupos sanguíneos y
- Diagnostico
tetraacético. Actúa diversos instrumentos de
molecular/carga viral en
como un análisis de células sanguíneas.
el plasma.
anticoagulante
El aditivo EDTA actúa como un - Biometría hemática.
usado para
potente anticoagulante al - Hematología Clínica.
conservar la
unirse al calcio en la sangre. El - Grupo Sanguíneo.
morfología
sanguínea. tubo ofrece una protección
integral para las células
sanguíneas.
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TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
VERDE

El tubo de heparina se utiliza en

la extracción de sangre para
pruebas de plasma clínico,
Heparina de litio bioquímica de emergencia y - Pruebas de
o sódica: Se reología sanguínea. bioquímica.
presenta de forma
- Agregación
líquida o seca y es Es similar en uso a los tubos
plaquetaria.
un anticoagulante activadores de coágulos en
suero, pero adecuado para - Carboxihemoglobina.
fisiológico,
- Química Sanguínea.
aplicado para pruebas en plasma en lugar de
exámenes suero. La heparina
especializados. anticoagulante actúa inhibiendo
la tromboplastina, logrando un
equilibrio dinámico entre
fibrinógeno y fibrina, libre de
hilo de fibrina en el proceso de
inspección.

TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
NEGRA

El citrato de socio al 3,2% - Pruebas de

(1:4). Impide la coagulación velocidad de
sanguínea, por quelación de Eritrosedimentación
Citrato de sodio al los iones de calcio. Mide la (VES) o velocidad de
3,2% rapidez con la que los sedimentación
eritrocitos se depositan en el globular (VSG).
fondo de tubo de ensayo que - Prueba de Glicemia
contiene una muestra de Sanguínea.
sangre, una tasa rápida de lo - Obtención de
normal indica inflamación en plasma.
el cuerpo.
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TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
GRIS

Los tubos BD Vacutainer con

Fluoruro de sodio fluoruro de sodio/oxalato de - Pruebas de bioquímica
7,5 mg - Oxalato potasio y EDTA Na2 inhiben la clínica y rutinaria.
de potasio 6 mg o degradación de la glucosa - Reología de la sangre.
EDTA: Inhibidor (Impide la glucolisis), hasta por - Pruebas de
de glicolisis, evita 24 horas a temperatura funcionamiento
la coagulación he ambiente, lo cual lo convierte en hepático.
estoicidad del un tubo ideal para el transporte
medio. de muestras en las que se harán
análisis de glucosa.

2. ¿Cuáles son los tipos de tubos de extracción sin anticoagulante utilizados,

mencione las pruebas de laboratorio que se tomen en ellos?

TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
ROJA

Los tubos al vacío sin aditivos se

utilizan en la recolección y
almacenamiento de sangre para - Prueba bioquímica.
Sin aditivo y sin - Serología.
bioquímica, inmunología,
anticoagulante, - Inmunología.
serología y pruebas de varios
con activador de - Hormonas.
tipos de virus.
coagulo, que - Endocrinología.
permite la La superficie interna del tubo es - Banco de sangre.
separación del extremadamente lisa para la - Reinspección sérica
suero. actividad normal de los con buena
trombocitos y la coagulación sin repetibilidad.
impedimentos, lo que evita la -
hemólisis o la adhesión del
corpúsculo sanguíneo o la fibrina
a la superficie interna.
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TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
AMARILLA

- Química sanguínea.
Sin - Inmunología.
anticoagulante, Acelera la coagulación de la - Serología.
con activador del sangre, el gel (centrifugador) - Perfil ginecológico,
coagulo y gel forma una barrera entre el tiroideo, lípidos.
separador. coagulo y el suero. - Marcadores
tumorales, etc.

TUBO DE EXTRACCIÓN
DE SANGRE – TAPA ADITIVO DESCRIPCIÓN UTILIZACIÓN
NARANJA

Los tubos al vacío con activador - Pruebas que podría

de coágulo se utilizan en la verse afectado
Sin recolección de sangre para negativamente por el
anticoagulante, bioquímica e inmunología en la gel separador del tubo
trombina inspección médica que requiere amarillo.
coagulante rápido suero que podría verse afectado - Recolección de sangre
en análisis de negativamente por el gel para bioquímica.
urgencia en el separador utilizado en el tubo - Inmunología en la
suero. amarillo. inspección médica.
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3. Explique las principales características de la coloración Wright

COLORACIÓN DE WRIGHT
Principales características:
- La coloración de Wright es un tipo de tinción de Romanowsky, asimismo, es conocida
como tinción policromática, ya que produce diferentes colores en base a las partes ácida
o básica que tiene y dependiendo de la estructura que absorba este colorante.

- Produce el efecto Romanowsky, esto quiere decir que los núcleos de los leucocitos y a los
gránulos neutrofílicos se tiñen de púrpura y los glóbulos rojos se tornan de
un color rosado.

- Presenta una coloración ácida y una coloración básica, la parte ácida es la eosina y se une
a los componentes básicos como hemoglobina y gránulos de los segmentados eosinófilos,
por otro lado, la parte básica es el azul de metileno y se une a los componentes ácidos
como los ácidos nucleicos, proteínas nucleares y el citoplasma inmaduro reactivo de
algunos tipos de células; estas coloraciones son sensibles a las diferentes variaciones de
pH de las estructuras.

- En cuanto a sus usos se puede utilizar para la

coloración de diferentes sustancias, por
ejemplo, células en frotis de sangre periférico,
medula ósea o también se puede utilizar para el
estudio citológico de elementos celulares que
han sido obtenidos por punción o raspaje.

- Para su preparación primero se debe agregar la

cantidad pesada del colorante de Wright en un
mortero y se debe ir incorporando poco a poco el glicerol hasta que el polvo quede
disuelto. Luego se agrega el metanol, se mezcla y se almacena en un frasco ámbar.

- Materiales para la realización de la tinción de wright:

Portaobjetos Colorante de Wright Microscopio Lancetas

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Torundas con alcohol Aceite de inmersión

Sangre periférica

- En cuanto a la interpretación de resultados, hay ciertas características que indican una

buena coloración:

✓ A nivel macroscópico: Un frotis satisfactorio debe presentar un color rosa

mate que sea uniforme. En caso de que haya un frotis de color rojo, puede ser
debido a que el colorante ha actuado por poco tiempo; por otro lado, los frotis
que resultan de color gris o gris azulado se producen porque han tenido
actuación del colorante por mucho tiempo.

✓ A nivel microscópico: Se puede realizar una apreciación de la coloración por

la apariencia de las plaquetas. Por ejemplo, en una coloración correcta, las
plaquetas se observan azuladas con pequeñas granulaciones azurófilas; sin
embargo, cuando hay una coloración insuficiente, se tornan coloradas de azul
pálido; por otro lado, si la coloración fue excesiva, se observarán de color
púrpura oscuro.

Es utilizada para obtener y diferenciar diferentes tipos de células sanguíneas como lo son:
1. Plaquetas.
2. Leucocitos (Glóbulos blancos – “Leucocitos, Monocitos, Eosinófilos, Basófilos, Neutrófilos,
Linfocitos”).
3. Eritrocitos (Glóbulos rojos).
Tambien se utiliza en frotis de moco nasal en búsqueda de eosinófilos en procesos alérgicos.

METODO DE APLICACIÓN:
Sobre uno de los extremos del portaobjetos se le colocara una gota de sangre.
Seguido con ayuda de un segundo portaobjeto y formando un ángulo de 30° a 45° con el
primero, se procede a haber la extensión en un solo movimiento. Ya realizado esto se va a dejar
secar la muestra por unos cortos minutos, posterior a ello sumergir el frotis en la solución
fijadora, alcohol (metanol) sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. Asi mismo,
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se deberá sumergir el frotis en el hemocolorante (eosina; que tendrá afinidad por teñir las partes
básicas de las células sanguíneas y azul de metileno; tendrá la capacidad de hacer teñir a las
partes acidas), complementando a ello se tiene que expandir toda la sustancia hemocolorante
con una ligera corriente de aire, ya sea proporcionada por un aparato o por pequeños soplos de
viento. Por consiguiente, a todo este proceso se recomienda dejar reposar el hemocolorante
por unos 10 minutos, para que luego de transcurrido dicho tiempo se pueda pasar a escurrir el
exceso. Para dar por finiquitado el proceso, se realizará la rehidratación con una solución de
agua destilada y poner a enjuagar con agua corriente.

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4. GRAFICAR LOS DIFERENTES MATERIALES UTILIZADOS EN LA TOMA DE MUESTRA DE

SANGRE.

ALGODÓN

LIGADURA O TORNIQUETE

CAPUCHON PARA EL TUBO

AL VACIO
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REJILLA

AGUJA
TUBO PARA
RECOLECCION
DE MUESTRA
ALCOHOL

CAPILARES

CONTENEDOR DE MATERIAL
PUNZOCORTANTE

CONTENEDOR DE RESIDUOS
CONTENEDOR DE RESIDUOS
BIOCONTAMINADOS
GENERALES

CONTENEDOR DE RESIDUOS ESPECIALES

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CONCLUSIONES:
1. Se concluye que los tubos de recolección mostrados en la bibliografía no se utilizan
con frecuencia en los establecimientos de salud, esto debido a que en la mayoría de
casos muchos de estos pueden ser utilizados para los mismos análisis.

2. Se logró aprender que, gracias a una correcta toma de muestras, llega a ser un paso
clave para la obtención de óptimos datos de laboratorio. Con ello, el número de
muestras rechazadas serán mínimas, de tal forma que se evitará el riesgo de malas
interpretaciones.

3. Se hizo énfasis al momento de utilizar los ángulos en la toma de muestra y frotis, por
ejemplo al momento de extraer sangre, ser debe tener un ángulo de 15° con el bisel
hacia arriba y en el frotis de sangre periférica de 30 a 45°.

4. Es indispensable mantener todos los materiales de bioseguridad

correctamente equipados al momento de tomar la muestra de sangre, esto debido al
elevado riesgo de contagio de enfermedades.
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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. López L, Hernández M, Colín C, Ortega S, Cerón G, Franco R. Las tincionesbásicas en el
laboratorio de microbiología. Medigraphic. 2018.
2. Química Clínica Aplicada S.A.. Colorante Wright. QCA. 2015.
3. Terrés Speziale AM. Clínica y laboratorio: ciencia y tecnología [Internet]. 2. ª ed. México:
Graphimedic SA; 2000 [citado 5 diciembre 2020]. Disponible en:
https://issuu.com/laboratorio_hu/docs/patologia-clinica...terr_s_speziale.
4. Prieto V JM Yuste AJR. Balcells La clínica y el laboratorio. 22ª ed Madrid:Masson; 2015.
5. Retamales E. Manzo V. RECOMENDACIONES PARA LA TINCIÓN DE FROTIS SANGUÍNEOS PARA
LA LECTURA DEL HEMOGRAMA [en línea]. Ispch.cl. [citado el 5 de abril de 2023]. Disponible
en:
https://www.ispch.cl/sites/default/files/RECOMENDACIONES%20PARA%20LA%20TINCI%C3
%93N%20DEL%20FROTIS%20SANGU%C3%8DNEO.pdf
6. Muñoz M. Moron C. Manual de procedimientos de laboratorio en técnicasbásicas de
hematología [en línea]. Gob.pe. [citado el 5 de abril de 2023]. Disponible en:
http://bvs.minsa.gob.pe/local/INS/845_MS-INS-NT40.pdf
7. Técnicos, D., El, P., & Clínico, L. (n.d.). Recomendaciones para la interpretación del Frotis
Sanguíneo del Subprograma de Morfología Sanguínea. Ispch. Cl. Retrieved April 6, 2023, from:
https://www.ispch.cl/sites/default/files/interpretacion%20frotis%20sanguineo%20-
%2014052013A.pdf
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ANEXOS:

- ENLACE DE REFERENCIA
https://www.youtube.com/watch?v=_Ai4umWwiqo
https://www.youtube.com/watch?v=cdo2mgoUD4Y
https://www.youtube.com/watch?v=-j7KQNtTJEk

- COLORACIÓN WRIGHT
https://www.youtube.com/watch?v=r_0a7AU62HQ
https://www.youtube.com/watch?v=RWCQhyiatnQ
https://www.youtube.com/watch?v=nK3sOpy2XkQ