TINCION RAPIDA DE PANÓPTICA

OBEJTIVO GENERAL:

Observar y describir una extensión sanguínea teñida con método de tinción panóptico
rápido.

MARCO TEORICO:

El uso de suspensiones celulares de sangre entera permite observar de forma rápida,

fácil, económica y nítida diferentes tipos celulares y sus principales características
morfológicas. La tinción de panóptico rápido es un método de tinción diferencial que
permite la observación de

las células sanguíneas.

Se trata de un procedimiento basado en inmersiones rápidas en tres reactivos:

-Número 1: REACTIVO FIJADOR.

-Número 2: EOSINA; colorante ácido de color rosa (tiñe los citoplasmas; de color rojo
intenso los eritrocitos).

-Número 3: COLORANTE AZUL, para la tinción diferencial de los leucocitos.

También es una tinción diferencial. Se caracteriza por su gran rapidez de ejecución (15
segundos) y por la peculiaridad de ser un método de inmersión. El colorante, en vez de
depositarse sobre la muestra, se encuentra en pequeños depósitos de tinción, donde se
introduce la porta que contiene la muestra. En clase los tenemos en duquesitas,
numerados por orden de inmersión.

Los colorantes que forman el Panóptico Rápido combinan la policromía y calidad de los
métodos clásicos de tinción hematológica (May Grünwald, Giemsa, Wright) con una gran
rapidez de ejecución, tan solo 15 segundos. Se trata de una técnica que se realiza por
inmersión en las soluciones colorantes. Como en el resto de tinciones de tipo
Romanowsky, los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células,
ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y proteínas ácidas que se tiñen de un color rojo
púrpura más o menos intenso, mientras que los colorantes ácidos se une a la
hemoglobina, componentes básicos de las estructuras celulares y los gránulos de los
eosinófilos. Su utilización permite la tinción diferencial de las células sanguíneas. El
resultado de la tinción puede ser influenciado por varios factores como son la fijación, el
tiempo de tinción y el valor del pH del agua de lavado. Si el pH es demasiado básico la
coloración será más azul y si el pH es demasiado ácido, la coloración será más rosada.

PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO: Todos los reactivos están listos para su uso.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD: Los reactivos almacenados a 15-30ºC y protegidos de la luz, son
estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Los envases deben mantenerse
siempre bien cerrados. Con el tiempo, puede aparecer un ligero precipitado en algún reactivo, que
no afecta a la funcionalidad del producto. MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO Material de
uso general de laboratorio. Láminas para la extensión de la sangre. Sistema, manual o automático,
de tinción. Microscopio. PRECAUCIONES Los productos son para uso profesional. Todos los
reactivos deben manipularse con precaución por personal técnico formado. Se aconseja consultar
antes de su uso la ficha de datos de seguridad. El colorante nº 1 es una disolución metanólica y por
tanto es inflamable y tóxico por ingestión e inhalación. La eliminación de los residuos debe hacerse
según la normativa local vigente. MUESTRA Extensiones de sangre secadas al aire. Se recomienda
que sean finas y homogéneas para obtener una mejor fijación del colorante sin sobre coloraciones.
Para obtener buenos resultados se aconseja realizar la tinción durante las dos horas siguientes a la
preparación. Las extensiones viejas, pueden teñirse de forma irregular. La muestra idónea es
sangre capilar, pero si se usa sangre venosa se aconseja utilizar EDTA como anticoagulante. El uso
de la Heparina está desaconsejado. Manipular las muestras con precaución por su capacidad
potencialmente infecciosa.

FROTIS SANGUINEO:

El frotis de sangre es un tipo de análisis de sangre. Se realiza para examinar la

apariencia, la cantidad y la forma de los glóbulos rojos y blancos y de las plaquetas para
determinar si son normales. Esta prueba también puede detectar parásitos en la sangre.

En la actualidad, es más común que se analice la sangre en una computadora. Sin

embargo, es posible que se sigan realizando frotis de sangre rutinarios para examinar
determinadas enfermedades. Un científico de laboratorio o un proveedor de atención
médica que se especialice en enfermedades infecciosas o de la sangre pueden ser
quienes analicen el frotis de sangre. Estos especialistas examinan las células sanguíneas
en un portaobjetos. En ocasiones, el frotis de sangre brinda información que una
computadora no podría descubrir.

Por lo general, los proveedores de atención médica usan un frotis de sangre para
confirmar el diagnóstico de algunas enfermedades. Por ejemplo, si un niño tiene episodios
de dolor intenso en el pecho sin motivo aparente, es posible tenga anemia de células
falciformes. Se trata de una enfermedad hereditaria que se puede identificar mediante un
frotis de sangre.

Además, es posible que le hagan esta prueba para revisar su recuento de células
sanguíneas si le administraron quimioterapia. Esta prueba puede ayudar a su proveedor
de atención médica a saber si su tratamiento está funcionando. 

HEMOGRAMAMA COMPLETO (CBC):

Es un análisis para examinar el tamaño y la cantidad de plaquetas y de glóbulos rojos y

blancos. Otra prueba que suele hacerse con el frotis de sangre es el recuento de
reticulocitos. Se hace con una tinción y un recuento de la cantidad de glóbulos rojos
prematuros. Son glóbulos rojos que salieron de la médula ósea antes de tiempo.

Quizás necesite también un panel químico (grupo de pruebas analíticas), o una prueba de
sustancias químicas en la sangre. Es un análisis para medir la cantidad de sustancias,
como electrolitos, azúcar y proteínas, que tiene en la sangre. 

Es posible que también le hagan una biopsia de la médula ósea. Se trata de una prueba
para examinar las células sanguíneas que hay dentro de la médula ósea, una sustancia
esponjosa que se encuentra en el interior de algunos huesos grandes. La médula ósea
produce las células sanguíneas. Para esta prueba, el proveedor de atención médica
recoge una pequeña cantidad de médula ósea con una aguja.

RESULTADOS DE PRUEVA:

Los resultados de la prueba pueden variar según su edad, género, antecedentes médicos,
el método utilizado para el análisis y otros factores. Es posible que los resultados no
signifiquen que tenga algún problema. Para saber qué significan, hable con su proveedor
de atención médica.
Los resultados de un frotis de sangre pueden incluir la cantidad, el tamaño y la forma de
los glóbulos rojos. Además, en los resultados se puede observar la cantidad y el tipo de
glóbulos blancos, la cantidad de plaquetas o incluso si tiene un parásito.

Los resultados de la prueba pueden ser normales o anormales. El proveedor de atención

médica interpretará los resultados en función de sus síntomas, el diagnóstico que
sospeche o el tratamiento que esté haciendo. Un frotis de sangre puede ayudar a
diagnosticar o revisar muchas afecciones, como las siguientes:

 Anemia

 Ictericia (color amarillento de la piel o los ojos)

 Anemia de células falciformes

 Trombocitopenia

 Malaria

 Insuficiencia renal repentina

 Deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD, por sus siglas en inglés)

 Determinados tipos de cancer

Aunque la estructura física general de las personas es la misma, cada individuo es único.
Cada persona posee identificadores en las células que permiten que el cuerpo reconozca
esas células como suyas. Los identificadores comunes e importantes son a y b, mientras
que el tipo de sangre o designa la ausencia de los marcadores a y b. Existe otro
identificador de superficie o antígeno en la superficie de los glóbulos rojos denominado
factor Rh, cuya presencia o ausencia es lo que identifica a la sangre como Rh+ (positivo)
o Rh- (negativo).

El proceso de tipificación ABO consta de dos pasos: tipificación directa e inversa.

Inicialmente, la sangre se mezcla con suero anti-a (suero que contiene anticuerpos contra
sangre tipo a), luego con suero anti-b (suero que contiene anticuerpos contra sangre tipo
b). Una determinación del tipo de sangre se basa en el hecho de que la sangre se aglutine
o no, ante la presencia de estos sueros. Las células sanguíneas se pueden unir sólo
cuando el anticuerpo anti-a se une al antígeno a o el anticuerpo anti-b se une al antígeno
b. Un técnico de laboratorio puede ver las células uniéndose cuando la sangre y el suero
se mezclan en un tubo de ensayo.

El segundo paso implica mezclar el suero (porción líquida de la sangre sin células) con
sangre del tipo a y del tipo b (ab).

Con los resultados de estos dos pasos, se puede determinar con exactitud el tipo de
sangre de una persona.

La determinación del Rh es similar a la tipificación ABO. Aquí, la sangre de la persona se

mezcla con el suero que contiene anticuerpos anti-Rh y luego se observa para ver si se
aglutina. Si esto ocurre, la sangre de la persona es Rh+, pero si no hay aglutinación,
entonces la persona posee sangre tipo Rh.

La determinación del grupo sanguíneo también es importante antes de recibir cualquier

transfusión de sangre.

INTERPRETACION DE LOS DATOS

TIPIFICACION DIRECTA:

• Si las células sanguíneas se aglutinan al mezclarlas con suero anti-a, la persona posee
sangre tipo A.

• Si las células sanguíneas se aglutinan al mezclarlas con suero anti-b, la persona posee
sangre tipo B.

• Si las células sanguíneas se aglutinan al mezclarlas con sueros anti-a y anti-b, entonces
la persona posee sangre tipo AB.

• Si las células sanguíneas no se aglutinan con ninguno de los dos sueros, el tipo de
sangre es O.

• Si las células sanguíneas se aglutinan al mezclarlas con suero anti-Rh, el tipo de sangre
es Rh positivo.

• Si la sangre no se coagula al mezclarse con suero anti-Rh, el tipo de sangre es Rh

negativo.
TIPIFICACION INVERSA:

• La aglutinación de células sanguíneas que ocurre cuando las células b se mezclan con
el suero indica que la persona posee sangre tipo A.

• La aglutinación de células sanguíneas que ocurre cuando se mezclan las células a con
el suero indica que la persona posee sangre tipo B.

• La aglutinación de células sanguíneas que ocurre cuando el suero de la persona se

mezcla con ambos tipos de células indican que la sangre es tipo O.

• La falta de aglutinación de las células sanguíneas que ocurre cuando el suero de la

persona se mezcla con ambos tipos de sangre indica que la sangre es tipo AB.

TRANSFUCIONES DE SANGRE:

• Si la persona posee sangre tipo a, puede recibir transfusiones de personas con sangre
tipo A y O.

• Si la persona posee sangre tipo b, puede recibir transfusiones de personas con sangre
tipo B y O.

• Si la persona posee sangre tipo ab, puede recibir transfusiones de personas con sangre
tipo A, B, AB y O.

• Si la persona posee sangre tipo o, puede recibir transfusiones sólo de personas con
sangre tipo O.

• Si la persona posee sangre Rh-positivo puede recibir transfusiones de personas con

sangre tipo Rh positivo y Rh negativo.

• Si la persona posee sangre Rh-negativo, sólo puede recibir transfusiones de personas

con sangre tipo Rh negativo.

TIPOS DE EXTRACCION DE SANGRE:

La sangre es el fluido más utilizado. Las venipunciones se deben estandarizar en términos

de la hora de recolección. Se debe definir muy bien el protocolo de preparación de

muestras, el tiempo de aplicación del torniquete, la postura durante la toma de sangre, la

temperatura, de transporte y el almacenamiento. Los datos obtenidos de sangre venosa no

pueden compararse con los obtenidos de sangre de capilares. Los valores hematológicos

también dependen de la edad, sexo hábito de fumar, hora de día, posición erecta o supina
del paciente durante la toma, duración de los éxtasis venosos producida por el torniquete

y la administración de líquidos y drogas.

Los 3 métodos más importantes para obtenerlo son:

1) Punción venosa

2) Punción capilar

3) Punción arterial.

La sangre oxigenada por el pulmón, es bombeada por el corazón hacia todos los órganos

y tejidos para cubrir las necesidades metabólicas. Esta sangre arterial tiene prácticamente
una composición uniforme en todo el cuerpo. La venosa varía según la actividad

metabólica del órgano o tejido por lo que el punto donde se extrae la muestra puede
influir en la composición de la sangre venosa. Esta tiene menos Oxigeno que la arterial

también se diferencia por el pH, por su concentración en Dióxido de Carbono y su

hematocrito.

La sangre obtenida por punción de la piel, que a veces se denomina sangre capilar
incorrectamente, es una mezcla de sangre procedente de arteriolas, vénulas y capilares por

lo tanto es en parte arterial, y en parte venosa. El aumento de presión en las arteriolas hace
que la muestra sea más rica en sangre arterial, pero contiene también líquido intersticial e

intracelular

PUNCION VENOSA:

Las 3 principales venas para la punción son:

 Las venas cubital mediana y cefálica se prefieren para la toma de muestras de sangre,
pero pueden usarse otras venas de los brazos y las manos. La vena cefálica se
encuentra en la cara lateral (radial) del brazo, y la vena basílica está en la cara medial
(cubital).

Los tipos de punción son:

 Punción Intradérmica.
 Punción Subcutánea.
 Punción Intramuscular.
 Punción Endovenos

PUNCION DE CAPILAR:

La muestra capilar de sangre se obtiene al pinchar la superficie de la piel para obtener

una o varias gotas de sangre y realizar un examen de laboratorio. El lugar más frecuente
para obtener esta muestra es la piel de un dedo o del talón.

La punción capilar puede utilizarse como alternativa a la venopunción para obtener una
muestra sanguínea en pacientes pediátricos que precisan analíticas (siempre que no sea
necesaria sangre venosa o arterial); ya que en estos pacientes las extracciones suelen
resultar dificultosas y esta técnica requiere de una menor precisión, además de resultar
menos traumática y ser mejor tolerada.
Durante los primeros meses de vida la zona de elección es la zona lateral interna o
externa del talón, evitando la zona central interna por su menor irrigación y la mayor
proximidad del hueso, lo que dificulta el sangrado y además puede favorecer la
osteomielitis.

A partir del primer año de vida se aconseja la punción sobre las falanges distales de los
dedos de la mano.

INDICACIONES

– Incapacidad para la obtención de sangre arterial y venosa.

– Cuando no es necesaria una muestra de origen central.

– Cuando se requieren pequeñas cantidades de sangre.

CONTRAINDICACIONES

– Extracción de muestras de gran volumen o para la obtención de pruebas específicas

como un cultivo de sangre.

– En recién nacidos de menos de 24h. de vida por tener disminuida la perfusión periférica.

– En tejidos edematosos, vasoconstricción periférica y áreas infectadas.

LEUCOCITOS:

Un leucocito o glóbulo blanco se define como un tipo de glóbulo sanguíneo (célula de la

sangre) que se produce en la medula ósea y se encuentran en la sangre y el tejido
linfático. Estos cuerpos celulares forman el sistema inmune humano junto con otras
muchas barreras (como podrían ser las mucosas o la piel, por ejemplo), y en su conjunto,
buscan la permanencia del individuo en el tiempo por el máximo periodo posible.

TIPOS DE LEUCOCITOS Y SUS CARACTERISTICAS:

1. Granulocitos

Son el tipo de glóbulo blanco más frecuente en la sangre, representando el 70-75% de

este conglomerado celular protector. Según el tipo de tinción que permita su identificación
en la muestra sanguínea del paciente.

1.1 Neutrófilos

Dentro del grupo de los granulocitos, los neutrófilos son las células más comunes, pues
representan del 60-70% de los leucocitos en el ser humano. Como características
morfológicas, podemos reseñar que miden de 9 a 12 micrómetros y que los gránulos de
su citoplasma se tiñen de color púrpura claro con colorantes neutros (de ahí su nombre).

Maduran en la médula ósea y se almacenan en ella antes de ser enviados al torrente

sanguíneo, proceso que dura una totalidad de 10 días. Tras esto, viajan por los vasos
sanguíneos y mediante pequeños poros (diapédesis) son capaces de ingresar en los
tejidos afectados por patógenos. Estos agentes permanecen en sangre durante unas 8-20
horas, pero su vida media se ve aumentada en varias magnitudes cuando entran en
tejidos infectados o inflamados.

Los neutrófilos matan de 3 a 20 bacterias a lo largo de su vida. Atraídos por los

compuestos tóxicos sintetizados por el agente patógeno, estos glóbulos blancos acaban
con la amenaza mediante fagocitosis y liberación de enzimas hidrolíticas. Además de
esto, también promueven el proceso inflamatorio local típico de una infección.

1.2 Basófilos:

En la otra cara de la moneda tenemos a los basófilos, pues son los glóbulos blancos
menos comunes, ya que representan 0,5-1% del total. También son más “etéreos” que
sus compañeros previamente descritos, ya que maduran en la médula ósea en un total de
tres días y su permanencia en sangre es de unas pocas horas. Miden unos 12-15
micrómetros (son los leucocitos más grandes), presentan un núcleo bilobulado y se tiñen
con colorantes básicos.

Estos agentes tienen una respuesta activa a nivel inmune, pues poseen gránulos
específicos que liberan histamina, heparina, bradiquinina, serotonina y otros compuestos
mediadores de las respuestas inflamatorias. Son un cuerpo celular esencial en las
respuestas alérgicas.

1.3 Eosinófilos:

Los últimos dentro del grupo de los granulocitos, pero no por ello menos importantes. Los
eosinófilos se presentan en una proporción del 2-4% de la totalidad de los glóbulos
blancos. Su tamaño es similar al de un neutrófilo, y se tiñen de un color anaranjado
mediante colorantes ácidos (eosina).

A pesar de tener una vida media en sangre de 3 a 4 días, la mayor concentración de

eosinófilos se encuentra dentro de los tejidos, ya que se ha constatado la existencia de
100 eosinófilos tisulares por cada uno circulante. Su principal función es la detección y
fagocitosis de larvas y parásitos, además de la modulación de la respuesta alérgica, pues
evitan la exacerbación de la misma sintetizando sustancias que contrarrestan a los
basófilos.

2. Agranulocitos:

Por otro lado, tenemos a los agranulocitos, que como su propio nombre indica, son
células carentes de gránulos de naturaleza mononuclear. Te mencionamos de forma
somera los dos tipos dentro de este grupo.

2.1 Linfocitos:

Desde luego, ningún párrafo resumido puede hacer justicia a la complejidad y

funcionalidad de estos cuerpos celulares. Los linfocitos son más comunes en el sistema
linfático que en el plasma sanguíneo y se pueden dividir en dos tipos según su
procedencia y funcionalidad: B y T.

Aunque quizá pequemos de reduccionistas, podemos resumir la función general de los

linfocitos en el siguiente concepto: los linfocitos B vendrían a ser el “sistema de
reconocimiento corporal”, pues detectan de forma inequívoca a los patógenos y los
inmovilizan. Por otra parte, los linfocitos T son la “mano de obra”, ya que su actividad lítica
neutraliza la patogenicidad de las células infectadas por microorganismos.

2.2 Monocitos:

En la última parada de este viaje tenemos a los monocitos, los leucocitos de mayor
tamaño (18 micrómetros) que representan un 2-8 % de los glóbulos blancos en sangre.
Su proceso de formación en la médula ósea es de dos a tres días, pero no permanecen
en sangre más de 36 horas, ya que migran rápidamente a los tejidos infectados.

Su función es básica: fagocitan patógenos, es decir, literalmente se los comen. Se calcula

que un monocito puede ingerir hasta 100 bacterias a lo largo de su vida, por lo que son
considerados los glóbulos blancos con mayor capacidad bactericida de toda la lista.

Funciones de los glóbulos blancos:

Sin darnos cuenta, en la clasificación anterior hemos descrito todas las funciones
esenciales de los leucocitos. De todas formas, un repaso general nunca viene mal. Como
ya hemos dicho en líneas anteriores, los glóbulos blancos se encargan de promover
respuestas inflamatorias, fagocitar agentes patógenos y reconocerlos y aislarlos, entre
otras muchas funciones.

Todo esto forma parte de la respuesta inmunitaria tanto innata como adquirida, un
excelente mecanismo de defensa que nos permite desarrollarnos en un entorno repleto de
microorganismos potencialmente perjudiciales.

Como hemos podido observar, los leucocitos se presentan en diversas formas, tamaños y
tinciones. Además de esto, cada uno de ellos realiza una función única e irremplazable en
lo que al sistema inmune se refiere, pues desde la inflamación hasta la fagocitosis, estos
agentes celulares combaten a capa y espada a los agentes patógenos que ingresan a
nuestro cuerpo.

CONCLUCION:

Tras concluir la investigación se tuvo por comprendido que la tinción de panóptico es un

método rápido y eficaz que permite su observación de las células sanguíneas,
colaborando juntos con el estudio de estos tipos.
BIBLIOGRAFIAS:

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