Práctica No. 2 Titulación de Un Aminoácido

Manual de Prácticas de Laboratorio de Bioquímica
Plan IBQA-2010-207
Práctica No. 2
Titulación de un Aminoácido.
Competencia(s) Específica(s)
Comprender el comportamiento de un aminoácido mediante el cambio de su pH.
Introducción
La representación gráfica de la variación del pH de una solución por la adición de diferentes

volúmenes de solución valorante, se conoce como curva de titulación. La titulación ácido fuerte-
base fuerte, en solución acuosa, los ácidos y la base fuertes se encuentran totalmente
disociados, por lo tanto, el pH a lo largo de la titulación, se puede calcular directamente de las
cantidades estequiometrias de ácido y base que reaccionan, que tiene un efecto distinto en
comparación con la titulación de un ácido o base débil.
Los aminoácidos tienen un grupo amino y un grupo carboxilo unido al mismo carbono.
Según la característica del grupo-R. los aminoácidos pueden agruparse en no polares, polares
sin carga, polares positivos. Los compuestos que son capaces de aceptar o ceder protones, se
denominan anfóteros o anfolitos, cuando se agrega una solución de aminoácidos a un ácido o
a una base, el pH no varía bruscamente ya que estas son amortiguadores de dicho cambio.
El pKa es la fuerza que tienen las moléculas de disociarse. Éste nos permite ver de una manera
sencilla los cambios asociados a variaciones grandes de Ka. Valores pequeños de pKa equivalen
a valores grandes de Ka (constante de disociación) y, a medida que el pKa decrece, la fortaleza
del ácido aumenta (Peña Antonio, 2004).
Los aminoácidos son moléculas orgánicas que contienen un grupo amino (NH2) en uno de los
extremos de la molécula y un grupo ácido carboxílico (COOH) en el otro extremo. En general los
aminoácidos están constituidos por un carbono alfa al cual se unen un grupo funcional amino,
uno carboxilo, un hidrógeno y un grupo R o lateral. La diferencia entre los aminoácidos se debe
a la estructura de sus grupos laterales o R (residuo o resto de la molécula)(Aminoácidos:
MedlinePlus Enciclopedia Médica, n.d.)
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TecNM/I.T. Zacatepec, Ingeniería Química y Bioquímica
Plan IBQA-2010-207
Los aminoácidos son las unidades que forman a las proteínas, sin embargo, tanto estos
como sus derivados participan en funciones celulares tan diversas como la transmisión
nerviosa y la biosíntesis de porfirinas, purinas, pirimidinas y urea.
La glicina es un aminoácido, concretamente el más pequeño y uno de los

denominados “no esenciales”. Su papel es el de contribuir a formar las proteínas de
nuestro organismo. Además, actúa como neurotransmisor inhibidor en el sistema
nervioso central, especialmente en la retina, el tallo cerebral y la médula espinal.
También es importante en la síntesis de ADN, fosfolípidos, elastina y colágeno. Por
último, destacamos que nuestro cuerpo lo utiliza para sintetizar diversas sustancias
como son las purinas, la creatina o el glutatión.
Por último, debemos recordar que la valoración o titulación es una técnica analítica
cuantitativa muy usada en el laboratorio, esta consiste en la determinación de la
cantidad de una sustancia específica contenida en una muestra mediante la adición
controlada de un reactivo llamado valorante, con una concentración conocida. Esta
técnica se basa en la reacción química completa entre la sustancia y el reactivo. El
reactivo se añade hasta que la reacción haya finalizado conocido como el punto de
equivalencia. (Gutiérrez, 2013)
Desarrollo de la Práctica.
1. Lavar el material.
2. Calibrar el potenciómetro utilizando las disoluciones buffer de pH4 y pH 7 (cada equipo debe
calibrar el potenciómetro antes de empezar a utilizarlo).
3. Preparar 50 mL de una disolución de glicina 0.1 M, al pesar tome en cuenta que el reactivo
se encuentra al 98.5%, agregar agua destilada hasta aproximadamente la mitad del vaso de
precipitados de 50 mL y disolver en ella la glicina previamente pesada (realice previamente el
cálculo de la cantidad a pesar) utilizando la espátula para agitar, agregar esta mezcla al matraz
aforado de 50 mL y aforar. Medir el pH de esta disolución.
4. Preparar 100 mL de disolución de ácido clorhídrico 1M, para ello, tome en cuenta que el
reactivo está al 37 % p/v, haga sus cálculos antes de llegar a la práctica, utilice protector facial.
De esta disolución utilizará sólo 25 mL para agregarlos a la solución de la glicina y el resto para
neutralizar al finalizar la práctica.
5. Preparar 50 mL una disolución de NaOH 2 M, para ello considere que el reactivo se encuentra
al 97%. Llegue al laboratorio con los cálculos hechos para la preparación de las disoluciones.
6. Colocar los 50 mL de disolución de aminoácido en un vaso de precipitados de 150 mL y
agregar 25 mL de disolución de HCl y mezclar. Medir el pH inicial de la mezcla de Glicina con
disolución de HCl.
7. Colocar la bureta en el soporte universal agregando 25 mL de NaOH 2 M en ella, mientras
alguien más debe calibrar el potenciómetro.
8. Llevar a cabo la titulación agregando disolución de NaOH en fracciones de 1 mL y agitando
antes de tomar la lectura del pH, no es necesario retirar la muestra del electrodo (procure no
tardarse más de 30 segundos entre lecturas.
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Plan IBQA-2010-207
9. Cuando se hayan agregado 25 mL de disolución de NaOH, agregar disolución de NaOH

adicional a la bureta para continuar titulando.
10. Anotar en una tabla el pH y volumen de NaOH correspondiente, continuar agregando
disolución de NaOH hasta llegar a pH por arriba de 13.
11. Vierta los residuos en la garrafa correspondiente (asignada por el laboratorio para esa
función) o neutralícelos.
12. En el reporte debe presentar la gráfica correspondiente, teniendo los valores de pH en el eje
vertical y el volumen agregado de disolución de NaOH en el eje horizontal.
Puede basarse en el siguiente link: https://www.youtube.com/watch?v=7r2MbtnCOb4
Características del Reporte.
El objetivo de una práctica de laboratorio es comprobar, reafirmar o comprender de forma

experimental los conocimientos o información que se tienen de forma teórica, o bien obtener
nuevos conocimientos o modelos a partir de esta experimentación.
El reporte escrito de la práctica debe contener básicamente los siguientes elementos o

secciones, a menos que el profesor indique lo contrario o el tipo de práctica así lo requiera:
• Portada
• Objetivo(s). (Objetivo General y específicos de la Práctica)
• Marco Teórico. (Fundamento Teórico)
• Cálculos (si hay)
• Simulaciones, Gráficos, etc. (si hay)
• Desarrollo Experimental.
• Resultados.
• Conclusiones.
• Referencias Bibliográficas.
Referencias Bibliográficas
Aminoácidos: MedlinePlus enciclopedia médica. (n.d.). Retrieved March 26, 2023, from
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/002222.htm
Gutiérrez, C. (2013). Aminoácidos y Proteínas. Journal of Chemical Information and Modeling,
53(9), 1689–1699.
https://fmvz.unam.mx/fmvz/p_estudios/apuntes_bioquimica/Unidad_5.pdf
Peña Antonio, Et. Al., “BIOQUÍMICA”, 2ª Edición, Editorial Limusa, México D.F. 2004. Pp. 84-86
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La representación gráfica de la variación del pH de una solución por la adición de diferentes

La glicina es un aminoácido, concretamente el más pequeño y uno de los

9. Cuando se hayan agregado 25 mL de disolución de NaOH, agregar disolución de NaOH

Puede basarse en el siguiente link: https://www.youtube.com/watch?v=7r2MbtnCOb4

Características del Reporte.

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