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Enseñanza  de  la  espectroscopia  UV­Vis  con  un  espectrofotómetro  de  teléfono  
inteligente  imprimible  en  
3D  Elise  K.  Grasse,  Morgan  H.  Torcasio  y  Adam  W.  Smith*
Departamento  de  Química,  Universidad  de  Akron,  190  Buchtel  Common,  Akron,  Ohio  44325,  Estados  Unidos

*S  Información  de  apoyo

RESUMEN:  La  espectroscopia  de  absorbancia  visible  es  una  herramienta  ampliamente  
utilizada  en  laboratorios  químicos,  bioquímicos  y  médicos.  La  teoría  y  los  métodos  de  la  
espectroscopia  de  absorbancia  generalmente  se  introducen  en  la  división  superior  en  
los  cursos  de  química  de  posgrado,  pero  podrían  introducirse  antes  con  el  plan  de  
estudios  y  la  instrumentación  adecuados.  Un  desafío  importante  en  la  enseñanza  de  la  
espectroscopia  es  obtener  acceso  a  equipos  de  laboratorio,  que  pueden  ser  costosos.  
Incluso  los  espectrofotómetros  educativos  comunes  aún  tienen  un  costo  sustancial  y  
tienen  la  desventaja  de  ser  diseños  inherentemente  cerrados.  Informamos  sobre  un  
espectrofotómetro  de  teléfono  inteligente  imprimible  en  3D  que  es  muy  económico  de  
construir,  pero  que  conserva  la  funcionalidad  y  la  precisión  analítica  necesarias  para  
enseñar  conceptos  como  la  Ley  de  Beer­Lambert.  Los  componentes  ópticos  están  
dispuestos  de  forma  intuitiva  y  accesible  para  que  los  estudiantes  puedan  ver  cada  parte  
relevante  y  experimentar  con  los  parámetros.  Aquí,  describimos  el  dispositivo  y  
proporcionamos  ejercicios  para  enseñar  diferentes  conceptos  en  espectrofotometría  analítica.
PALABRAS  CLAVE:  instrucción  de  laboratorio,  escuela  secundaria/química  introductoria,  pregrado  de  división  superior,  química  analítica,  
aprendizaje  práctico/manipulación,  espectroscopia  UV­Vis,  resolución  de  problemas/toma  de  decisiones,  calibración,  tintes/pigmentos

■  INTRODUCCIÓN a  menudo  durante  su  educación.  Esto  puede  ser  difícil  y  costoso  para  
muchas  instituciones.
La  espectroscopia  de  absorción  es  un  enfoque  experimental  que  se  
Varias  soluciones  de  bricolaje  (hágalo  usted  mismo)  de  bajo  costo  
usa  comúnmente  para  medir  la  concentración  de  compuestos  
para  este  problema  se  han  desarrollado  en  el  pasado.  Muchos  de  ellos  
coloreados  en  una  muestra.  Debido  a  una  relación  simple  entre  la  
son  colorímetros  basados  en  LED,  que  relacionan  la  absorción  con  la  
concentración  y  la  cantidad  de  luz  absorbida,  la  espectroscopia  UV−vis  
concentración  pero  no  generan  directamente  un  espectro.3­10  Esto  
tiene  una  amplia  gama  de  aplicaciones  en  laboratorios  de  química  
está  bien  para  muchas  aplicaciones,  pero  tiene  inconvenientes  para  
básica,  investigación  biomédica  y  diagnóstico  clínico.
enseñar  a  los  estudiantes  a  leer,  comprender  y  cuantificar  espectros  
En  los  laboratorios  de  bioquímica,  por  ejemplo,  los  ensayos  
características.  Otros  dispositivos  están  diseñados  para  mostrar  un  
enzimáticos  a  menudo  se  diseñan  para  rastrear  la  presencia  de  un  
espectro  visible,  pero  no  son  ideales  para  realizar  mediciones  de  
compuesto  coloreado  aguas  abajo  de  la  reacción  para  medir  la  eficacia  
química  analítica.11­13  Se  han  publicado  varios  otros  diseños  de  
de  la  enzima  o  la  presencia  de  un  sustrato  particular.  Esta  es  la  base  
dispositivos  que  emiten  un  espectro  y  tienen  los  componentes  básicos  
del  ensayo  inmunoabsorbente  ligado  a  enzimas  (ELISA),  en  el  que  se  
de  un  espectrómetro  de  grado  de  investigación  para  realizar  
produce  un  compuesto  coloreado  cuando  una  enzima  se  une  a  un  
experimentos  de  química  analítica.  .14−18  Estos  modelos  tienen  
analito  específico.1,2  La  lectura  de  una  placa  ELISA  es  un  valor  de  
absorbancia  del  producto  coloreado.  Las  reacciones  enzimáticas  que   muchas  partes  funcionales,  lo  que  los  hace  más  adecuados  para  
proyectos  especiales  a  largo  plazo  con  grupos  pequeños  y  enfocados  de  estudiantes.
conducen  a  cambios  de  color  de  una  solución  se  han  trasladado  a  
Nuestro  enfoque  fue  diseñar  un  espectrofotómetro  de  bricolaje  
entornos  clínicos  donde  se  utilizan  para  detectar  una  amplia  gama  de  
compacto  que  se  pueda  ensamblar  fácilmente  y,  sin  embargo,  retenga  
objetivos.
Debido  a  la  ubicuidad  de  la  espectroscopia  de  absorbancia  en   la  capacidad  de  realizar  mediciones  de  absorción  precisas.  Manteniendo  
entornos  químicos,  bioquímicos  y  clínicos,  existe  una  clara  necesidad   el  dispositivo  simple,  los  educadores  pueden  diseñar  ejercicios  de  
laboratorio  que  enseñen  conceptos  básicos  como  la  resolución  
de  educar  a  los  estudiantes  que  seguirán  carreras  en  estas  áreas.
Los  métodos  básicos  de  espectroscopia  son  una  parte  central  del  plan   espectral  y  la  Ley  de  Beer­Lambert.  Nuestro  dispositivo  se  basa  en  el  
de  estudios  de  pregrado  en  los  departamentos  de  química  y  en   espectrómetro  de  teléfono  celular  informado  por  Alexander  Scheeline.19  
programas  de  grado  como  ciencia  de  los  materiales,  biología  y  bioingeniería. En  nuestra  experiencia,  el  principal  inconveniente  del  diseño  de  
Sin  embargo,  como  técnica  de  laboratorio,  requiere  entrenamiento   Scheeline  fue  lograr  que  los  estudiantes  colocaran  elementos  como  la  
práctico  y  práctica  para  que  el  estudiante  sea  competente  y  tenga   rejilla,  la  cubeta,  el  LED  y  la  cámara  y  eliminar  la  luz  parásita.
conocimientos  sobre  su  uso.  Esto  es  difícil  de  lograr  en  una  tarde  en   Los  tubos  de  cartón  funcionan  bien,  pero  colocando  repetidamente  el
un  laboratorio  universitario;  por  lo  tanto,  es  valioso  presentar  los  
conceptos  y  prácticas  a  los  estudiantes  de  manera  temprana  y
©  XXXX  Sociedad  Química  Estadounidense  
y  División  de  Educación  Química,  Inc. A DOI:  10.1021/acs.jchemed.5b00654  
J.  Chem.  Educ.  XXXX,  XXX,  XXX−XXX
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Revista  de  educación  química Artículo

cubeta  y  cámara  para  mediciones  precisas  de  absortividad  no  era  práctico. Por  lo  tanto,  si  se  conocen  la  absorbencia  y  la  longitud  del  camino,  se  
puede  medir  la  concentración  a  partir  de  la  absorbancia.  Si  se  desconoce  la  
Para  resolver  este  problema,  diseñamos  una  carcasa  imprimible  en  3D   capacidad  de  absorción,  se  pueden  preparar  varias  concentraciones  
alrededor  del  camino  óptico.  Esto  facilitó  la  colocación  de  las  piezas  y   conocidas  para  medir  ε(λ)  experimentalmente.
proporcionó  estabilidad  y  aislamiento  de  la  luz.  Llamamos  al  dispositivo  
SpecPhone  y  hemos  puesto  a  disposición  del  público  el  archivo  de  impresión   ■  DISEÑO  Y  MONTAJE
3D.20  Los  componentes  ópticos  son  muy  económicos  y  las  impresoras  3D   Un  esquema  del  SpecPhone  se  muestra  a  continuación  en  la  Figura  2.
son  casi  omnipresentes  en  universidades,  escuelas  secundarias  y  bibliotecas   El  centro  del  diseño  es  una  estructura  de  soporte  que  sostendrá  el
públicas.  Los  servicios  en  línea  también  están  disponibles  para  imprimir  
piezas  por  tarifas  muy  modestas.  Esto  hace  que  la  tecnología  UV/vis  esté  
disponible  para  una  gama  más  amplia  de  estudiantes,  especialmente  en  
instituciones  con  fondos  limitados.  El  SpecPhone  también  tiene  varias  
ventajas  educativas  sobre  los  espectrómetros  educativos  más  caros,  que  se  
describen  a  continuación.  Este  artículo  describirá  el  espectrómetro,  las  
piezas  necesarias  y  el  proceso  de  montaje.
También  describiremos  brevemente  la  teoría  detrás  de  la  espectroscopia  de  
absorbancia  y  proporcionaremos  ejercicios  de  laboratorio  que  se  pueden  
realizar  con  el  SpecPhone.

■  TEORÍA
Figura  2.  Esquema  del  SpecPhone.  Una  fuente  de  luz  estable  ingresa  al  aparato  
Un  espectrofotómetro  de  absorbancia  compara  la  intensidad  de  la  luz  a  lo  
SpecPhone  y  se  filtra  espacialmente  mediante  una  rendija  removible  que  controla  la  
largo  del  espectro  visible  en  presencia  y  ausencia  de  una  muestra.  En  una   geometría  y  la  intensidad  de  la  luz  proyectada  a  través  de  la  muestra.  La  luz  transmitida  
configuración  genérica  (Figura  1),  una  luz  blanca a  través  de  la  muestra  se  refleja  en  un  espejo  y  a  través  de  la  rejilla  de  difracción  colocada  
en  un  ángulo  de  45°.  Esta  rejilla  dispersa  la  luz  en  su  espectro  de  color  y  en  la  cámara  
del  teléfono  inteligente,  que  se  puede  ver  en  la  pantalla  y  guardar  como  una  foto.

rendija,  cubeta,  rejilla  y  cámara  en  su  lugar  para  que  las  mediciones  
espectrales  se  puedan  realizar  de  manera  reproducible.  El  dibujo  se  realizó  
con  el  software  SolidWorks  y  se  exportó  como  un  archivo  imprimible  en  3D  
para  la  producción.  Los  elementos  clave  del  diseño  se  enumeran  a  
Figura  1.  Paso  de  luz  y  componentes  básicos  de  un  espectrofotómetro  visible.  La  fuente  
continuación.  La  información  sobre  cómo  obtener  un  archivo  de  impresión,  
de  luz  ingresa  al  espectrofotómetro  a  través  de  una  rendija  que  limita  la  cantidad  de  luz  
más  detalles  de  ensamblaje  y  los  archivos  de  impresión  3D  están  disponibles  
que  incide  sobre  la  muestra  en  la  cubeta.  La  luz  que  no  es  absorbida  por  la  muestra  viaja  
en  el  sitio  web  del  autor.20  El  archivo  de  impresión  también  está  disponible  
a  través  de  una  rejilla  de  difracción  que  divide  la  luz  en  los  colores  que  la  componen,  al  
igual  que  un  prisma  dispersa  la  luz  blanca  en  un  espectro  de  colores.  El  espectro  disperso  
en  el  sitio  web  NIH  3D  Print  
es  luego  registrado  por  una  cámara  de  detección. Exchange.21  

Fuente  de  luz  La  fuente  de  luz  para  el  SpecPhone  es  proporcionada  por  el  
usuario.  Puede  ser  una  lámpara  de  escritorio,  una  linterna  o  un  LED.  El  
único  requisito  es  que  produzca  una  intensidad  de  luz  estable  y  un  espectro  
La  fuente  se  envía  a  través  de  la  muestra  y  luego  se  dispersa  en  un  detector.   relativamente  plano  sobre  las  longitudes  de  onda  visibles.
La  luz  que  pasa  a  través  del  dispositivo  sin  la  muestra  tiene  una  intensidad   Abertura

medida,  I0,  que  depende  de  la  longitud  de  onda,  I0(λ).  Con  la  muestra  en  su  
La  hendidura  fue  diseñada  para  ser  una  parte  removible  del  dispositivo.  Es  
lugar,  parte  de  la  luz  será  absorbida  y  la  intensidad  de  luz  resultante  en  cada  
simplemente  una  losa  rectangular  con  una  abertura  horizontal  (ver  Figura  
longitud  de  onda  está  representada  por  Is(λ).  La  transmisión  en  cada  longitud  
3).  El  ancho  de  la  abertura  está  relacionado  con  la  resolución  del  instrumento:  
de  onda  es  simplemente  la  relación  de  estas  dos  cantidades,  y  la  
los  anchos  de  rendija  más  grandes  mancharán  los  colores  de  los  
absorbancia,  A,  se  define  como  el  logaritmo  negativo  en  base  10  de  la  
componentes  y  reducirán  la  capacidad  de  distinguir  longitudes  de  onda,  
transmisión.
mientras  que  los  anchos  de  rendija  más  estrechos  aumentarán  la  nitidez  de  
las  características  espectrales.  En  nuestro  diseño,  la  rendija  se  puede  quitar  
I s ( )   y  cambiar  para  ilustrar  el  principio  de  resolución  espectral.
Transmisión  =  ≡  T
yo  0 λ  ( )  λ

  
yo  0   λ  
A  ≡−
registro   T =
10 ( )  registro 10 ( )  
  
I s ( )  l   

La  Ley  de  Beer­Lambert  nos  dice  que  la  absorbancia  está  relacionada  
con  un  parámetro  llamado  absortividad,  ε(λ),  multiplicado  por  la  longitud  del  
camino  de  la  luz  a  través  de  la  muestra,  l,  multiplicado  por  la  concentración,  
c.
Figura  3.  Inserto  de  hendidura  removible.  El  inserto  de  hendidura  removible  impreso  en  
A  =  ∙∙  ε  λ( )  lc 3D  es  una  losa  de  44  ×  12  ×  2,0  mm  con  un  ancho  de  hendidura  recomendado  de  1,0  mm.

B DOI:  10.1021/acs.jchemed.5b00654  
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Portacubetas

El  portacubetas  del  SpecPhone  es  simplemente  un  orificio  rectangular  que  
permite  colocar  una  cubeta  de  1  cm.  Las  cubetas  de  1  cm  son  el  estándar  de  
la  industria  y  se  pueden  obtener  a  bajo  costo  de  muchos  proveedores.

Espejo

En  el  SpecPhone,  la  cubeta  de  muestra  descansa  verticalmente  como  se  
muestra  en  la  Figura  2,  lo  que  requiere  que  la  trayectoria  de  la  luz  se  desplace  
horizontalmente  desde  la  ranura  a  través  de  la  cubeta.  Luego,  la  luz  se  refleja  
verticalmente  para  que  un  teléfono  inteligente  pueda  colocarse  en  un  ángulo  
cómodo  de  45  °.  El  espejo  es  un  espejo  de  aluminio  de  1  ×  1  pulg.  2  disponible  
de  muchos  proveedores  de  artesanía.  Se  apoya  en  una  cara  interna  de  45°  
del  soporte  plástico  y  se  sujeta  con  pegamento  o  cinta  adhesiva  de  doble  cara. Figura  4.  Espectros  visibles  de  diferentes  fuentes  de  luz.  Cada  espectrograma  
se  recorta  de  la  imagen  completa  registrada  por  el  SpecPhone.
Teléfono  

inteligente  Para  el  teléfono  inteligente,  primero  elegimos  el  iPhone  5  debido  
recopilación  y  análisis.  También  es  un  ejercicio  útil  para  presentar  a  los  
a  su  popularidad  en  el  mercado,  su  cámara  de  alta  calidad  y  el  potencial  para  
estudiantes  herramientas  básicas  de  análisis  de  datos  en  programas  de  hojas  
el  desarrollo  de  aplicaciones.  La  carcasa  se  puede  modificar  fácilmente  con  
de  cálculo  como  Excel.  Para  extraer  los  valores  de  píxeles  de  la  imagen,  
el  software  CAD  3D  para  adaptarse  a  otros  modelos  de  teléfonos  inteligentes.
sugerimos  usar  ImageJ,  que  es  un  software  gratuito  desarrollado  por  los  
Institutos  Nacionales  de  Salud.22  Fue  creado  para  examinar  datos  de  
Rejilla  de  difracción  Una  
imágenes  médicas  y  ahora  se  usa  para  muchas  aplicaciones  de  imágenes.23  
rejilla  de  difracción  de  transmisión  contiene  una  serie  de  líneas  paralelas  a   El  programa  puede  procesar  una  gama  de  formatos  de  archivo  y  realiza  una  
una  densidad  particular  (#  líneas/mm)  que  refractan  la  luz  en  los  colores   variedad  de  funciones  que  incluyen  el  cálculo  de  la  intensidad,  la  creación  de  
componentes  como  un  prisma.  La  eficiencia  de  transmisión  y  el  espacio  entre   gráficos  de  perfil  de  línea,  transformaciones  de  imágenes  y  más.  Si  bien  
líneas  afectan  la  calidad  y  resolución  del  espectro.  Elegimos  una  rejilla   representa  una  pequeña  curva  de  aprendizaje,  muchos  estudiantes  que  
económica  que  se  puede  cortar  con  tijeras  para  que  se  ajuste  al  espacio  libre   siguen  carreras  en  ciencias  médicas  y  biológicas  se  encontrarán  con  este  
de  la  trayectoria  de  la  luz.  Está  disponible  como  una  hoja  de  película  de  6  ×   software  más  adelante.
12  pulg.2  con  1000  líneas/mm  (Rainbow  Symphony,  Inc.,  Reseda,  CA). Una  vez  que  se  han  tomado  las  imágenes  espectrales  con  el  SpecPhone,  
las  fotos  deben  guardarse  en  la  computadora  en  la  que  se  usará  ImageJ.  Se  
Montaje   pueden  analizar  una  o  más  fotos  a  la  vez,  pero  describiremos  las  operaciones  
con  una  foto.  Después  de  abrirla  en  ImageJ,  la  foto  debe  girarse  
Después  de  imprimir  la  carcasa,  el  espejo  se  instala  con  cinta  adhesiva  de  
aproximadamente  90°  para  que  cada  columna  vertical  de  píxeles  corresponda  
doble  cara.  Luego,  la  rejilla  se  corta  de  una  película  grande  y  se  coloca  en  la  
a  una  región  de  longitud  de  onda.  A  continuación,  se  dibuja  un  cuadro  de  
abertura  cerca  del  puerto  de  la  cámara.  Las  líneas  de  la  rejilla  deben  ser  
selección  alrededor  del  espectro.  En  la  dimensión  vertical,  trate  de  excluir  la  
horizontales  al  dispositivo  para  que  la  luz  difracte  perpendicular  a  la  rendija.  
mayor  cantidad  posible  de  áreas  oscuras  del  cuadro.  En  la  dimensión  
Una  vez  que  la  rejilla  y  el  espejo  están  en  su  lugar,  la  rendija,  la  cubeta  y  la  
horizontal,  deje  un  amplio  espacio  después  de  las  características  azul  y  roja  
cámara  se  pueden  colocar  para  realizar  las  mediciones.
para  que  la  línea  base  pueda  identificarse  claramente.  Una  vez  que  se  coloca  
el  cuadro  de  selección,  trace  un  perfil  de  la  selección.  Esto  suma  los  píxeles  
■  ENFOQUE  DE  ENSEÑANZA en  la  dirección  vertical  y  traza  la  intensidad  frente  al  número  de  píxeles  en  la  
dimensión  horizontal.  El  gráfico  se  puede  guardar  como  una  imagen  o  un  
Luz  y  longitud  de  onda  En  
archivo  de  texto  (columna  de  píxeles,  valores  de  intensidad),  o  los  datos  se  
esta  sección,  describimos  algunos  ejercicios  simples  que  se  pueden  realizar   pueden  copiar  directamente  en  un  programa  de  hoja  de  cálculo  para  su  
con  estudiantes  de  varios  niveles.  El  primer  ejemplo  es  explorar  la  dispersión   posterior  análisis.  La  figura  5  muestra  un  espectrograma  girado  y  recortado  
de  la  luz  blanca  en  sus  colores  componentes. con  el  espectro  correspondiente  a  continuación.  Este  mismo  conjunto  de  
Para  demostrar  esto  con  el  SpecPhone,  retire  la  cubeta  y  coloque  una   operaciones  se  puede  realizar  en  una  pila  de  imágenes  recopiladas  durante  
cubierta  sobre  el  orificio  para  bloquear  la  luz  externa. un  conjunto  de  experimentos  para  que  todos  los  espectros  tengan  el  mismo  
Con  la  aplicación  de  la  cámara  del  iPhone  abierta,  apunte  el  SpecPhone  a   eje.  Más  detalles  están  disponibles  en  el  Protocolo  1  en  la  Información  de  
varias  fuentes  de  luz  en  el  salón  de  clases.  Por  ejemplo,  la  luz  solar  difusa  de   apoyo.  La  conversión  entre  posición  de  píxel  y  longitud  de  onda  se  describirá  
una  ventana  producirá  una  imagen  de  arco  iris.  La  luz  de  un  monitor  de   a  continuación.
computadora  a  menudo  mostrará  tres  bandas:  roja,  verde  y  azul.  La  
iluminación  superior  fluorescente  mostrará  líneas  bien  definidas   Calibración  de  píxeles
correspondientes  a  la  luminiscencia  de  mercurio  y  lantánidos.  En  la  Figura  4  
Para  calibrar  las  posiciones  de  los  píxeles  a  las  longitudes  de  onda  
se  muestran  ejemplos  de  las  imágenes  espectrales .
correspondientes,  se  puede  usar  una  rutina  simple  de  ajuste  de  picos.  El  
primer  paso  es  medir  un  espectro  con  características  nítidas  de  longitudes  de  
Conversión  de  una  imagen  en  un  espectro  El  
onda  conocidas.  Un  enfoque  publicado  previamente  es  el  uso  de  punteros  
SpecPhone  está  diseñado  para  enseñar  los  principios  básicos  de  la   láser,17  que  también  se  ilustra  en  el  Protocolo  1  en  la  Información  de  apoyo.  
espectroscopia  visible  y  conceptos  relacionados,  como  la  Ley  de  Beer­ Aquí,  describimos  un  procedimiento  que  utiliza  el  espectro  de  la  iluminación  
Lambert.  Para  hacer  esto,  los  espectros  deben  ser  analizados   fluorescente  industrial  típica  (Figuras  4  y  5).  Para  el  estudiante  curioso,  una  
cuantitativamente.  En  esta  actividad,  el  objetivo  es  enseñar  a  los  alumnos   asignación  de  estos  picos  está  disponible  en  Wikimedia  Commons.24  Si  un  
cómo  convertir  la  fotografía  de  la  luz  dispersada  en  un  espectro  que  muestre   espectrómetro  calibrado  comercial  está  disponible,  el  espectro  de  una  fuente  
la  intensidad  frente  a  la  longitud  de  onda.  Este  procedimiento  es  una   de  luz  idéntica  debe  medirse  con  el  SpecPhone  y  el
oportunidad  para  que  los  estudiantes  aprendan  sobre  la  conexión  entre  los  datos

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aumenta  la  resolución  espectral  separando  más  finamente  los  colores  
componentes.  Las  propiedades  del  detector  afectan  la  resolución,  principalmente  
por  el  tamaño  y  la  densidad  de  los  píxeles.
Para  un  detector  de  teléfono  inteligente,  la  resolución  también  está  limitada  por  
la  óptica  de  la  lente  que  precede  al  detector.17  La  densidad  espectral  del  
SpecPhone  en  la  configuración  descrita  aquí  es  de  0,33  nm/píxel,  que  está  
cerca  del  límite  inferior  de  la  resolución  espectral  del  instrumento. .

La  rendija  de  entrada  influye  directamente  en  la  resolución  al  restringir  la  
trayectoria  geométrica  de  la  luz  a  través  de  la  rejilla  y  el  detector.  Teóricamente,  
la  rendija  podría  reducirse  a  valores  infinitamente  pequeños  para  que  no  afecte  
la  resolución,  pero  en  ese  punto  no  entraría  luz  en  el  dispositivo.

En  consecuencia,  existe  un  compromiso  directo  entre  la  resolución  espectral  y  
la  relación  señal/ruido  al  elegir  el  ancho  de  la  rendija.  Esta  es  una  propiedad  
Figura  5.  Se  puede  importar  una  foto  de  SpecPhone  (arriba)  de  una  luz  fluorescente  a   fundamental  de  un  espectrómetro  y  es  importante  que  los  estudiantes  
ImageJ  para  trazar  la  intensidad  frente  a  la  posición  del  píxel  (abajo). comprendan  el  principio  de  resolución  y  los  factores  que  influyen  en  la  elección  
Aquí,  los  valores  de  píxeles  se  han  convertido  a  longitud  de  onda  utilizando  el  protocolo   del  ancho  de  la  rendija.
de  calibración  descrito  en  el  texto.
Para  ilustrar  el  papel  del  ancho  de  la  rendija  en  la  determinación  de  la  
resolución  del  instrumento,  diseñamos  el  SpecPhone  para  que  tenga  una  rendija  
espectrómetro  comercial.  De  esta  forma  se  pueden  comparar  directamente  los  
extraíble,  de  modo  que  el  efecto  pueda  observarse  directamente.  Un  ejercicio  
picos  de  cada  espectro.  Un  ejemplo  de  esta  comparación  se  muestra  en  la  Tabla  
de  laboratorio  de  ejemplo  es  medir  el  espectro  de  iluminación  fluorescente  para  
1  a  continuación.  Tenga  en  cuenta  que  el  relativo
varios  anchos  de  rendijas.  Los  archivos  de  impresión  3D  para  varias  rendijas  se  

Tabla  1.  Posiciones  de  los  picos  de  un  espectrómetro  comercial  calibrado   crearon  e  imprimieron  para  este  ejercicio.  En  la  Figura  6,  el  rango  espectral  
correspondiente  al  pico  c  en  la  Figura  5  se  aísla  para  observar  cómo  cambia  el  
y  el  SpecPhone
ancho  del  pico  con  cada  rendija.  Como  se  muestra  en  el  gráfico  inferior,  los  
Picoa Longitud  de  onda  (nm)b SpecPhone  (píxel)c cambios  de  fwhm  son  consistentes  con  los  anchos  de  las  rendijas.  La  Figura  6  
a 434.5 1490 también  muestra  que  esencialmente  no  hay  mejora  en  la  resolución  al  pasar  de  
b 486.0 1316 0,6  a  la  rendija  de  0,3  mm.
C 544.0 1146
d 587.0 1017
mi 611.5 943
a b
Las  etiquetas  corresponden  a  las  de  la  Figura  5. Picos  identificados  en  el  espectro  
medido  por  un  AvaSpec  HS1024x58TEC,  con  una  rejilla  de  500  líneas/mm  y  una  
rendija  de  50  μm  (resolución  de  3,5  a  4  nm).  c  Los  valores  de  píxeles  absolutos  son  
arbitrarios  y  corresponderán  al  área  de  recorte.

las  intensidades  máximas  pueden  no  ser  idénticas  en  el  SpecPhone  y  el  
espectrómetro  comercial  debido  a  las  diferencias  en  las  sensibilidades  del  
detector  y  el  fabricante  de  iluminación.  Para  llevar  a  cabo  la  calibración,  las  
posiciones  máximas  en  longitud  de  onda  se  trazan  frente  a  las  correspondientes  
posiciones  máximas  en  píxeles,  y  los  datos  se  ajustan  a  una  función  de  
calibración.  La  función  de  calibración  puede  ser  un  polinomio  de  orden  superior,  
pero  optamos  por  una  función  lineal,  que  aquí  es  consistente  para  el  rango  de  
longitud  de  onda  y  es  fácil  de  calcular.  Los  estudiantes  deben  usar  Excel  para  
hacer  un  diagrama  de  dispersión  de  los  picos  en  un  gráfico  de  longitud  de  onda  
versus  píxel  y  luego  ajustar  los  datos  a  una  línea  de  tendencia.  Como  alternativa,  
pueden  implementar  un  análisis  de  regresión  lineal  en  la  caja  de  herramientas  
de  análisis  de  datos  de  Excel.  La  función  resultante  se  usa  luego  para  convertir  
cada  posición  de  píxel  en  un  valor  de  longitud  de  onda.  El  eje  x  de  la  figura  5  se  
calculó  utilizando  este  procedimiento.

Ancho  de  rendija  y  resolución Figura  6.  (Arriba)  La  intensidad  de  un  espectro  de  luz  fluorescente  entre  longitudes  de  

La  resolución  es  una  variable  clave  en  cualquier  experimento  de  espectroscopia. onda  de  530  y  560  nm  se  muestra  para  diferentes  anchos  de  rendija  como  se  indica  
en  la  leyenda.  La  línea  discontinua  corresponde  al  espectro  medido  con  un  
La  resolución  de  un  espectrofotómetro  es  la  escala  en  la  que  puede  distinguir  
espectrofotómetro  comercial  (AvaSpec  HS1024x58TEC,  Avantes,  Inc.,  resolución  
entre  diferentes  longitudes  de  onda  de  luz.  También  se  puede  considerar  como  
calibrada  de  3,2−4  nm).
el  ancho  de  un  pico  correspondiente  a  una  fuente  monocromática  pura.  La  
(Abajo)  El  ancho  completo,  la  mitad  del  máximo  (fwhm)  de  los  picos  medidos  con  el  
resolución  de  un  espectrómetro  está  limitada  por  las  propiedades  de  sus   SpecPhone  se  traza  como  una  función  del  ancho  de  la  rendija.
componentes,  incluida  la  rejilla  de  difracción,  el  detector  y  la  rendija  de  entrada.   El  ancho  de  pico  correspondiente  a  la  rendija  de  0,3  mm  (no  se  muestra  el  espectro)  
Por  ejemplo,  aumentar  la  densidad  de  línea  de  una  rejilla  de  difracción es  casi  idéntico  al  de  la  rendija  de  0,6  mm,  lo  que  demuestra  que  las  rendijas  más  
estrechas  no  aumentarán  apreciablemente  la  resolución.

D DOI:  10.1021/acs.jchemed.5b00654  
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Revista  de  educación  química Artículo

La  Ley  de  Beer­Lambert depende  de  la  concentración  de  0,0625  mg/ml  a  2,0  mg/ml.  Esta  
La  Ley  de  Beer­Lambert  describe  la  relación  entre  la  concentración   relación  lineal  es  una  clara  demostración  de  la  ley  de  Beer­Lambert  
de  un  analito  particular  y  su  absorbancia,  A,  y  se  define  mediante  la   y  verifica  que  el  SpecPhone  puede  realizar  mediciones  analíticamente  
ecuación: precisas.  A  modo  de  comparación,  medimos  la  absorbancia  (λ  =  496  
nm)  de  cada  solución  con  dos  espectrómetros  comerciales:  Nanodrop  
A  =  ∙∙  ε  λ( )  lc 2000  (ThermoFisher  Scientific)  y  Spectronic  21  (Bausch  and  Lomb).  
Como  se  describe  en  las  secciones  Introducción  y  Teoría   La  pendiente  medida  por  los  instrumentos  comerciales  fue  constante  
anteriores,  esta  relación  tiene  una  amplia  gama  de  aplicaciones  en   en  0,63,  que  es  mayor  que  la  del  SpecPhone  (0,44).  Este  cambio  
entornos  clínicos  y  de  laboratorio.  Aquí,  adaptamos  un  protocolo  de   en  la  capacidad  de  absorción  fue  reproducible  y  se  debe  a  la  escala  
laboratorio  de  un  estudiante  para  usar  con  el  espectrofotómetro   de  sensibilidad  en  la  cámara  del  iPhone.17  El  cambio  implica  que  la  
SpecPhone.25  El  objetivo  principal  del  ejercicio  es  hacer  una  gráfica   capacidad  de  absorción  de  un  analito  específico  debe  ser  calibrada  
de  calibración  de  absortividad  con  varias  diluciones  de  un  analito   por  el  SpecPhone,  en  lugar  de  tomarse  de  la  literatura  o  un  manual.  
coloreado.  Con  fines  demostrativos,  investigamos  la  absorbancia  de   En  la  Información  de  apoyo  se  incluye  un  protocolo  que  describe  
una  bebida  en  polvo  con  sabor  a  cereza  (es  decir,  Kool­Aid)  porque   este  procedimiento .
es  segura  y  económica.25  Se  han  publicado  otros  protocolos  de  
muestra,  que  son  compatibles  con  el  SpecPhone.26−28 Este  sencillo  ejercicio  demuestra  que  el  SpecPhone  se  puede  
Se  compró  la  bebida  en  polvo  y  se  preparó  una  solución  madre  a   utilizar  en  un  entorno  de  laboratorio  para  medir  la  absorbancia  visible  
4  mg/mL  en  agua  desionizada.  Se  prepararon  diluciones  en  serie   de  una  solución  de  muestra.  Después  de  calibrar  la  capacidad  de  
hasta  0,0625  mg/mL  (consulte  la  Figura  7).  Puro absorción  con  el  diagrama  de  Beer­Lambert,  es  posible  determinar  
con  precisión  la  concentración  de  muestras  desconocidas  del  mismo  analito.
Con  este  enfoque  general,  se  pueden  idear  varios  tipos  de  
experimentos  de  laboratorio  para  enseñar  los  principios  básicos  de  
la  espectrofotometría  analítica.

■  PELIGROS
No  hay  peligros  agudos  involucrados  con  el  montaje  y  uso  del  
SpecPhone.  La  impresión  3D  implica  riesgos  menores  asociados  
con  la  extrusión  por  calor.  Los  peligros  asociados  con  la  medición  de  
la  absorbancia  se  deben  únicamente  al  analito.  En  el  caso  del  
experimento  de  bebida  de  cereza  en  polvo  que  se  muestra  aquí,  no  
hay  riesgos  para  la  salud,  pero  se  deben  seguir  las  pautas  estándar  
de  seguridad  de  laboratorio.  Esto  incluye  equipo  de  protección  
personal  como  gafas  de  seguridad  y  guantes.

■  CONCLUSIONES
En  este  documento,  informamos  sobre  el  SpecPhone,  un  
espectrofotómetro  de  teléfono  inteligente  imprimible  en  3D  para  la  
educación  química.  El  dispositivo  ha  sido  optimizado  para  enseñar  
conceptos  básicos  en  espectroscopia  como  la  Ley  de  Beer­Lambert.  
Figura  7.  (Superior)  Fotografía  de  diluciones  de  muestra.  La   El  diseño  modular  fomenta  la  interacción  de  los  estudiantes  con  los  
concentración  de  stock  fue  de  4,1  mg/mL  (A)  y  cada  muestra  
componentes,  lo  que  ayuda  a  desarrollar  la  intuición  de  la  relación  
subsiguiente  es  una  dilución  1:2  hasta  0,64  mg/mL  (G).  (Abajo)  
entre  los  parámetros  del  dispositivo  y  la  recopilación  de  datos.  
La  absorbancia  a  496  nm  se  midió  con  el  SpecPhone  y  dos  
espectrómetros  comerciales.  La  absorbancia  se  representa  en   También  hemos  incluido  varios  ejercicios  que  enseñan  los  principios  
función  de  la  concentración  y  la  pendiente  ajustada  es  una   básicos  de  la  luz,  la  longitud  de  onda  y  la  espectroscopia,  y  hay  dos  
medida  de  la  absorbencia,  ε.  Los  valores  de  absorción  son  0,64   protocolos  disponibles  en  la  Información  de  apoyo  para  la  instrucción  
±  0,01  para  Nanodrop,  0,629  ±  0,004  para  Spectronic  21  y  0,44  ±  0,02  para   SpecPhone.
de  laboratorio.   Con  la  creciente  ubicuidad  de  la  tecnología  de  
impresión  3D  y  las  piezas  periféricas  económicas,  el  SpecPhone  
tiene  el  potencial  de  ampliar  la  accesibilidad  de  los  estudiantes  a  la  
Se  usó  agua  desionizada  como  blanco.  Se  utilizó  una  lámpara  de   formación  práctica  en  espectrofotometría  analítica.
escritorio  de  60  W  como  fuente  de  luz,  que  se  colocó  a  unos  0,5  m  
del  espectrómetro.  La  intensidad  de  la  lámpara  (o  la  distancia)  debe   ■  CONTENIDO  ASOCIADO
ajustarse  para  que  la  cámara  no  se  sature  en  ninguna  longitud  de  
*S  Información  de  apoyo  La  
onda.  Para  cada  muestra,  el  espectro  se  midió  con  la  cubeta  colocada  
en  el  SpecPhone.  La  foto  espectral  se  convirtió  en  un  espectro  de   información  de  apoyo  está  disponible  en  el  sitio  web  de  publicaciones  
intensidad,  Is(λ),  y  los  espectros  de  absorbancia  se  calcularon  con   de  ACS  en  DOI:  10.1021/acs.jchemed.5b00654.
I0(λ),  el  espectro  del  blanco  (por  ejemplo,  una  cubeta  con  agua  pura). Protocolo  1:  procesamiento  y  calibración  de  imágenes  (PDF,
DOCX)
El  espectro  de  absorción  tiene  un  máximo  claro  cerca  de  496  nm,   Protocolo  2:  La  Ley  de  Beer­Lambert  (PDF,  DOCX)
y  la  intensidad  del  pico  se  representó  frente  a  la  concentración  
(Figura  7).  Esto  se  conoce  como  diagrama  de  Beer­Lambert.  
■  INFORMACIÓN  DEL  AUTOR
Descubrimos  que  para  la  solución  estándar  no  pasa  suficiente  luz  a  
Autor  para  correspondencia  
través  de  la  muestra  para  que  la  cámara  del  iPhone  registre  un  
espectro.  Para  concentraciones  más  bajas,  la  absorbancia  es  linealmente *E­mail:  [email protected].

mi DOI:  10.1021/acs.jchemed.5b00654  
J.  Chem.  Educ.  XXXX,  XXX,  XXX−XXX
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Revista  de  educación  química Artículo

notas (23)  Schneider,  California;  Rasband,  WS;  Eliceiri,  KW  NIH  Image  to  ImageJ:  25  años  
de  análisis  de  imágenes.  Nat.  Métodos  2012,  9  (7),  671­675.
Los  autores  declaran  no  tener  ningún  interés  financiero  en  competencia.

(24)  Wikimedia  Commons.  https://commons.wikimedia.org/wiki/  
■  AGRADECIMIENTOS
Archivo:Fluorescent_lighting_spectrum_peaks_labelled.gif  (consultado  en  octubre  de  
Nos  gustaría  agradecer  a  la  Universidad  de  Akron  por  la  financiación. 2015).
También  nos  gustaría  agradecer  a  Addison  Smith  por  su  ayuda  con   (25)  Stevens,  KE  Uso  de  absorción  visible  para  analizar  soluciones  de  Kool­Aid  y  
los  experimentos  de  calibración  iniciales  ya  Lesli  Smith  por  su   Candy.  J.  Chem.  Educ.  2006,  83  (10),  1544.
(26)  Harmon,  KJ;  Miller,  LM;  Millard,  JT  Investigación  de  la  escena  del  crimen  en  el  
asistencia  en  la  capacitación  en  el  aula  con  el  SpecPhone.
mundo  del  arte:  el  caso  de  la  obra  maestra  desaparecida.
J.  Chem.  Educ.  2009,  86  (7),  817.
■  REFERENCIAS
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F DOI:  10.1021/acs.jchemed.5b00654  
J.  Chem.  Educ.  XXXX,  XXX,  XXX−XXX