FM - P8 - Gutiérrez Jaime

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Universidad Autónoma de Nuevo León

Facultad de Ciencias Biológicas

U.A. Fisiología Microbiana


Practica 8: Formación de biopelículas por bacterias.
Dra. Yaraymi Ortiz Reyes
Químico Bacteriólogo Parasitólogo
Grupo 262
Sofia Monserrat Gutierrez Jaime 1870372

Agosto-Diciembre 2022
Resultados
Calcule el índice de formación de biopelículas (BFI, por sus siglas en inglés)
mediante la siguiente formula.

BFI=(AB-CW)/G

Primera lectura
Columna 2 Columna10
Control A 0.407 0.110
Control B 0.354 0.116
e. coli C 1.504 1.351
e. coli D 1.331 1.217
e. coli E 1.175 1.235
b. cereus F 1.074 1.386
b. cereus G 0.814 1.604
b. cereus H 1.374 1.339

Segunda lectura
Columna 2 Columna10
Control A 0.593 0.458
Control B 0.510 0.311
e. coli C 0.742 1.913
e. coli D 0.423 1.628
e. coli E 0.558 2.071
b. cereus F 0.520 1.401
b. cereus G 0.417 1.391
b. cereus H 1.365 1.075

El resultado se deberá interpretar de la siguiente manera:


a) Biopelícula fuerte (> 1.10)
b) biopelícula moderada (0.70-1.09)
c) biopelícula débil (0.35-0.69)
d) No formadora de biopelícula (< 0.35)
E. coli
AB CW G
0.742 0.593 1.504
0.423 0.510 1.331
0.558 0.548 1.175
1.913 0.311 1.351
1.628 1.217
2.071 1.235
Promedio 1.2225 0.4905 1.3021

AB−CW
BFI=
G
1.2225−0.4905
BFI=
1.3021
0.732
BFI=
1.3021
BFI=0.5622
biopelícula débil (0.5622)
B. cereus
AB CW G
0.520 0.593 1.074
0.417 0.510 0.814
1.365 0.548 1.374
1.401 0.311 1.386
1.391 1.604
1.075 1.339
Promedio 1.0281 0.4905 1.2651

AB−CW
BFI=
G
1.0281−0.4905
BFI=
1.2651
0.5376
BFI=
1.2651
BFI=0.425
biopelícula débil (0.5622)

Discusión
Los biofilms son comunidades de microorganismos protegidos por una matriz
extracelular que viven adheridos a una superficie. Al formarse los biofilms permiten
a las bacterias crecer en un entorno protegido, y así, poder sobrevivir ante
ambientes hostiles para después dispersarse hacia nichos más favorables. Esta
forma de vida bacteriana abunda en la naturaleza afectando directamente a
nuestra sociedad en los ámbitos ambientales, industriales y biomédicos.
(CUEVAS, 2019)

Se observo y calculo la formación de biopelículas en cepas de e. coli y b. cereus,


se utilizaron dos pocillos como control y tres para cada cepa. Se realizo la primera
lectura de absorbancia a 630 nm, posterior se elimino el caldo para realizar
lavado, tinción y de nuevo lavados, así mismo se agregó en cada pocillo etanol a
96° para suspender el cristal violeta; se tomo una segunda lectura a 570 nm,
posteriormente se calculó la formación de biopelículas. Esto es similar con la
metodología empleada en el articulo Evaluación in vitro de la formación de
biopelículas de bacterias marinas del Caribe colombiano, en donde emplean cristal
violeta para la cuantificación de la formación de biopelículas. (López, Zea, &
Gómez-León, 2019)

Los resultados descritos en la práctica mostraron que la formación de biopelículas


en e. coli fue débil (0.5622), esto es similar a lo que se reporta en el artículo
Relación genética, formación de biopelículas, movilidad y virulencia
de Escherichia coli aislada de mastitis bovina; donde reporta que el 20.6 % de los
aislados pueden formar biopelículas de forma fuerte y moderada, mientras que
35.3 % lo hace de forma débil; de manera que un mayor porcentaje es de
biopelícula débil. Así mismo, en el artículo se mencionan resultados de otros
autores donde el 18.5 % lo hace de forma fuerte, 40.7 % moderada y débil. ( Cruz-
Soto, 2020)
Por consiguiente, los resultados descritos para b. cereus son muy similares con
los reportados en e. coli, por lo que se describe como un formador de biopelículas
débil; esto concuerdo con los resultados reportados en el artículo Resistencia a
antibióticos de bacterias aisladas de biopelículas en una planta de alimentos,
donde se calculó la formación de biopelículas de B.cereus resultando débil de
0.373 a 0.434. (María Vanegas L, 2009)

Conclusión
Se evaluó la formación de biopelículas de cepas de e. coli y b. cereus; se observó
que ambas cepas dependen de las condiciones ambientales (temperatura, pH,
etc.) y el medio en donde estén cultivadas; así mismo se observó que los
resultados fueron muy similares para ambas cepas, la formación de biopelículas
fue débil.
Preguntas
1. Compuestos que son utilizados en ensayos de biopelículas
Para evaluar la capacidad de formar biopelículas de las cepas aisladas del
sedimento marino, se realizaron los ensayos de inducción y cuantificación usando
diferentes métodos. El primero, cristal violeta, permitió medir de forma indirecta a
cada una de las cepas y así clasificarlas según la capacidad de adherencia,
partiendo de la comparación de cada cepa con el control negativo S. aureus. El
segundo método, cuantificación por reducción del XTT, proporcionó información
sobre la actividad metabólica de las células en la biopelícula. Posteriormente las
cepas evaluadas fueron identificadas usando el marcador 16S ARN. Los
resultados mostraron que los aislados pertenecen al género Bacillus todos en
diferentes rangos fueron capaces de formar películas y se seleccionaron las cepas
B. safensis 64181 y Bacillus sp 64186 las cuales indicaron mayor producción de
esta. (López, Zea, & Gómez-León, 2019)

Referencias
CUEVAS, C. A. (2019). Universidad de Sevilla. Obtenido de Universidad de Sevilla:
https://idus.us.es/bitstream/handle/11441/88065/TFG%20CRISTINA%20ANDREA
%20ARAUJO%20CUEVAS.pdf?sequence=1&isAllowed=y
Cruz-Soto, Alejandro Sergio, Toro-Castillo, Valentín, Munguía-Magdaleno, Cristián Omar,
Torres-Flores, José Emmanuel, Flores-Pantoja, Luis Enrique, Loeza-Lara, Pedro
Damián, & Jiménez-Mejía, Rafael. (2020). Relación genética, formación de
biopelículas, movilidad y virulencia de Escherichia coli aislada de mastitis
bovina. Revista mexicana de ciencias pecuarias, 11(1), 167-182. Epub 11 de junio
de 2020.https://doi.org/10.22319/rmcp.v11i1.4998
López, S., Zea, S., & Gómez-León, J. (2019). Scielo. Obtenido de Scielo:
http://www.scielo.org.co/pdf/mar/v48n2/0122-9761-mar-48-02-71.pdf
María Vanegas L, M. N. (2009). RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS DE BACTERIAS
AISLADAS DE BIOPELÍCULAS EN UNA PLANTA DE ALIMENTOS.
RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS DE BACTERIAS AISLADAS DE
BIOPELÍCULAS EN UNAPLANTA DE ALIMENTOS, 1677-1683.

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