Género

Enterococcus spp.

uGABRIELA ABDALLA QB. MSc.

u23/03/2023
DATOS IMPORTANTES…

Ha adquirido gran
Indicadores de importancia →
contaminación infecciones
intrahospitalarias
fecal de las aguas

Indicadores de
inocuidad En los últimos años
alimentaria → elevada
(elevada resistencia resistencia
a condiciones antimicrobiana
adversas)
 Habitan en el interior del tracto gastrointestinal de una
variedad de organismos, incluyendo al hombre.

También pueden encontrarse en el tracto genitourinario y

en la saliva.

Características Han sido identificados como patógenos oportunistas para

los humanos
generales:
Pudiendo causar diferentes enfermedades dentro de las que se
encuentran: endocarditis, bacteriemias enterocóccicas, infecciones
del tracto urinario, neonatales, del sistema nervioso central (aunque
son raras), intrabdominal y pélvica.

En la última década, estos organismos han adquirido cada

vez más importancia como patógenos hospitalarios, a
pesar de su baja virulencia.
 u Antiguamente pertenecían al grupo
de Streptococcus grupo D de Lancefield.
u En el año 1970 fueron oficialmente clasificados
como un género independiente.
u La división de los géneros se basó en estudios
taxonómicos y de ácidos nucleicos que
demostraron su relación distante
con Streptococcus y que permitieron considerarlos
Características géneros diferentes.
microbiológicas: u Enterococcus son células esféricas u ovoides, de
tamaño 0.6-2.0 × 0.6-2.5 µm.
u Son cocos Gram positivo
u No formadores de endosporas.
u Se presentan en forma de pares o de cadenas
cortas.
u Son no móviles, con excepción de las especies E.
gallinarum y E. casseliflavus.
 u Son anaerobios facultativos.
u Con metabolismo fermentativo,
Fermentan un amplio rango de
carbohidratos con producción
principalmente de L (+)- ácido láctico,
pero no de gas, y producen un pH final de
4.2-4.6.
u Tienen requerimientos nutricionales
complejos.

Características u Catalasa negativos o comúnmente

débilmente positivos.
microbiológicas: u Crecen usualmente en un caldo de cultivo
a 10 °C y 45 °C, aunque el crecimiento
óptimo es a 37 °C.
u Pueden crecer a pH 9,6, con 6,5 % de
NaCl y con 40 % de bilis.
u Usualmente fermentan la lactosa. Portan
el antígeno D del grupo Lancefield y
poseen el carbohidrato C.
u Sobreviven después del calentamiento a
60 °C durante 30 min.
 Características
microbiológicas:
u Todas las especies de Enterococcus son capaces de
crecer en presencia de 40 % de bilis y de hidrolizar la
esculina, al igual que Streptococcus del grupo D.
u Diferenciación con Streptococcus del grupo D →
resultado positivo en la prueba de PYR.
u Todas las cepas producen leucino-aminopeptidasa
(LAP), por lo que son positivas a esta prueba.
u Las colonias, generalmente, se presentan incoloras a
grises, tienen de 2-3 mm de diámetro a los 2 días de
incubación.
 Características
microbiológicas:
u Enterococcus pueden presentar hemólisis de
tipo α, β o pueden ser no hemolíticos. (el
resultado puede variar según el tipo de
sangre empleada en el medio de cultivo).
u Caracterización y diferenciación
de Enterococcus de Streptococcus: la
capacidad de Enterococcus para crecer en un
caldo que contenga 6.5 % de NaCl, su poder
de sobrevivencia después del calentamiento
a 60 °C durante 30 min y su habilidad para
crecer en un caldo de cultivo a 10 °C y a 45
°C, 10
u Diseminación por vía feco-oral, por contacto
con fluidos de personas infectadas o por
contacto con superficies contaminadas.
Características microbiológicas:
 u Existen 33 especies pertenecientes al
género Enterococcus.
u Algunas de estas especies poseen hospederos
específicos.
u En los humanos, las especies más frecuentes
son E. faecalis y E. faecium pues causan, entre
ambos, aproximadamente el 90 % de los
aislamientos clínicos.
u Otras especies como E. gallinarum, E.
raffinossus, E. casseliflavus y E. avium se aíslan
Características en menor proporción.

microbiológicas: u Varios estudios indican que E. faecalis es más

abundante en el tracto gastrointestinal de los
humanos → mayor prevalencia en los
aislamientos clínicos y virulencia incrementada.
u Las mujeres pueden ser portadoras
de Enterococcus (vagina) de manera
asintomática, y el 60 % de los hombres en el
hospital son portadores de estos
microorganismos en el área perineal y en el
meato urinario.
Patogenicidad y virulencia:
u Enterococcus tienen poco potencial patogénico en el
huésped normal
u Ancianos y pacientes inmunocomprometidos →
patógenos oportunistas.
u Sistema inmunitario del huésped deficiente o débil →
por una enfermedad y por el uso de dispositivos
invasivos.
u Factores de virulencia:
ü Hemolisinas
ü Sustancias de agregación,
ü Bacteriocinas, proteasas y aglutininas.
ü Carbohidratos de la pared celular o los sitios de
unión de la fibronectina, que favorecen la
adherencia a los tejidos del huésped, pueden
incrementar la patogenicidad.
u Constituyen un serio peligro para la salud,
pues se han convertido en un patógeno
hospitalario de primer orden y de importancia
creciente.
u Pueden provocar enfermedades muy graves
como la bacteriemia y la endocarditis. Enfermedades
También son causantes de infecciones de
u
heridas quirúrgicas, septicemia, abscesos provocadas
intraabdominales y pélvicos, infecciones de por
piel, tejidos blandos, neonatales y
pediátricas. Enterococcus
u La mayoría de las infecciones son originadas
de la microbiota endógena, aunque pueden
ser transmitida de persona a persona o por
consumo de agua o alimentos contaminados.
Enfermedades provocadas
por Enterococcus
u Las infecciones urinarias son las más frecuentes
que pueden producir estos microorganismos.
u La naturaleza de su interacción con el tejido
uroepitelial es bastante compleja, involucrando
adhesinas de superficie de naturaleza proteica y
polisacárida.
u La tasa de incidencia de estas infecciones aumenta
drásticamente, pudiendo llegar a ser responsables
del 16 % de estas, y aunque no es habitual, son la
fuente más común de bacteriemia.
Enfermedades provocadas
por Enterococcus
u La bacteriemia ocurre primariamente en
pacientes con hospitalizaciones
prolongadas.
u Factores de riesgo: La cateterización
uretral, los dispositivos intravasculares,
las cirugías recientes, las quemaduras y la
terapia antimicrobiana previa.
u También influyen la hiperalimentación,
colonización previa del tracto
gastrointestinal con Enterococcus
vancomincina resistente (EVR) y el uso de
vancomicina.
u La incidencia anual de bacteriemias
hospitalarias provocadas
por Enterococcus es de 1 o 2 episodios por
cada 1,000 pacientes hospitalizados.
 u Las endocarditis infecciosas son una de
las más desafiantes terapéuticamente.
u Se han convertido en una causa
importante de septicemias en los recién
nacidos y también provocan, de forma
Enfermedades inusual, otitis media.
provocadas u EL mayor número de casos al nivel
mundial se reporta en la unidad de
por cuidados intensivos neonatal, en la
Enterococcus unidad de cuidados intensivos
pediátrica y en la unidad de cirugía,
debido a que estos constituyen servicios
de alto riesgo para la infección por
estos microorganismos.
Diagnóstico de laboratorio
 u Uso: prueba simple y rápida que
contribuye a la identificación y
diferenciación de cocos Gram positivos
catalasa negativa en base a la actividad
leucinoaminopeptidasa.
u Los microorganismos que contienen la
Discos de enzima leucinoaminopeptidasa (LAPasa),
hidrolizan de forma rápida el sustrato
L.A.P. presente en los discos de L.A.P. y liberan
β-naftilamina, que reacciona con el
(Leucino reactivo cinamaldehído formándose un
Amino compuesto de color rosadorojo.

Peptidasa)
 Discos de L.A.P. (Leucino Amino
Peptidasa)
u Procedimiento: siembra a partir de un cultivo puro en agar
sangre del microorganismo en estudio, del cual se ha
identificado que son cocos Gram positivos catalasa
negativa, hacer una suspensión densa en 50 µl de solución
fisiológica estéril, y agregar un disco de L.A.P.
u Incubación: en aerobiosis, a 35-37 ºC durante 30 minutos.
u Interpretación de los resultados: Agregar dos gotas de
reactivo cinamaldehído y dejar a temperatura ambiente
hasta 5 minutos. Observar el color desarrollado:
u - Positivo: presencia de actividad enzimática
leucinoaminopeptidasa: disco color rosado a rojo.
u - Negativo: ausencia de actividad enzimática
leucinoaminopeptidasa: disco y/o solución color amarillo o
incoloro.
Kits comerciales
 u Fundamento: Medio de cultivo nutritivo por
la presencia de extracto de carne y peptona
de carne que aportan nutrientes para el
desarrollo microbiano. Los enterococos
crecen rápidamente en el agar bilis esculina
e hidrolizan la esculina, que en presencia de
iones hierro forman un compuesto de color
verde oliva hasta negro. La bilis de buey
inhibe el desarrollo de la flora
acompañante. El agar es el agente
solidificante.

Bilis Esculina: u Procedimiento:

u Siembra: inoculación directa del
material en estudio, en tubo o placa,
u Incubación: aerobiosis, a 35-37 °C hasta
72 horas.
u Interpretación de los resultados:
u Positivo: se observa un oscurecimiento o
ennegrecimiento del medio de cultivo.
u Negativo: ausencia de oscurecimiento
del medio de cultivo.
 Enterococcus sp. (+)

Bilis Esculina:
Pruebas de diferenciación de las principales
especies de enterococcus:
Resistencia antimicrobiana

u El género Enterococcus representa un desafío

terapéutico debido a su resistencia intrínseca, de
carácter cromosómico y no transferible, a varios
antibióticos, incluyendo cefalosporinas,
meropenem, ertapenem, penicilinas resistentes a
penicilinasa, clotrimoxazol, aminoglucósidos y
clindamicina.
u E. faecium, no así E. faecalis, también
generalmente es resistente a ampicilina,
piperacilina e imipenem. La mayoría de los genes
que codifican resistencia intrínseca residen en los
cromosomas.
 u Además de la resistencia
intrínseca, poseen gran capacidad
para la adquisición de mecanismos
de resistencia y de genes de
virulencia, ya sea a través de
plásmidos, tramposones
conjugativos, intercambio
Resistencia cromosómico o mutaciones.
En la actualidad se observa una
antimicrobiana u
situación de colonización endémica
en la mayor parte de los hospitales,
prevalencia cercana al 28 %, de
bacteriemias enterocócicas
causadas por EVR en las unidades
de cuidados intensivos.
Resistencia antimicrobiana
u Debido a que Enterococcus son más resistentes a los
agentes antimicrobianos, las opciones terapéuticas son
más limitadas.
u Las cepas multirresistentes de Enterococcus se están
convirtiendo en una amenaza, ya que algunas son
resistentes a todos los antimicrobianos disponibles (EVR =
Enterococcus vancomicino resistentes)
u Como la resistencia aumenta, el control de emergencia y
la diseminación de estos microorganismos es
indispensable.
u Una de las medidas para disminuir la tasa de colonización
y diseminación de Enterococcus sensibles y resistentes es
limitar el uso irracional de los antimicrobianos.
u Otra medida es disminuir el uso de dispositivos invasivos,
siempre que sea posible.
 u En Estados Unidos es
considerado como la tercera causa
más frecuente de infecciones
intrahospitalarias, siendo responsable
de más del 10 % de todas las
infecciones adquiridas en los
hospitales.
u Pueden adaptarse a vivir en los
ambientes más hostiles, incluso en
Epidemiología: presencia de niveles letales de sales
biliares y detergentes, tales como el
dodecil sulfato de sodio.
u Numerosos estudios epidemiológicos
han mostrado que estos
microorganismos pueden transmitirse
de una persona a otra en el hospital
por instrumentos clínicos o a través
de las manos de los trabajadores de la
salud.
Epidemiología:
u La reciente alerta sobre Enterococcus no solo se
debe a su incremento en las infecciones
intrahospitalarias, sino también por su resistencia
a penicilinas y cefalosporinas de varias
generaciones y a la adquisición de altos niveles de
resistencia a los aminoglucósidos, especialmente
a la vancomicina.
u Las características intrínsecas
de Enterococcus también les confieren un nivel
inusual de tolerancia a varias clases de
antibióticos. Por ejemplo, la resistencia
de Enterococcus a los aminoglucósidos es el
resultado de su habilidad para bloquear el sitio de
unión de la droga a la pared celular. Como
consecuencia, los aminoglucósidos son solo
efectivos contra Enterococcus cuando se usan en
combinación con antibióticos activos frente a la
pared celular.