PRACTICA 2 :

Determinación del pk
de un indicador
mediante
espectrofotometría

Bogomila Mladenova Kostova

GR3
04/05/2022

1
Índice
Fundamento…………………………………………………………………………3

Materiales y
reactivos………………………………………………………………………………3

Trabajo
experimental…………………………………………………………………………4

Cálculos………………………………………………………………………………5

Cuestiones……………………………………………………………………………8

Bibliografía…………………………………………………………………………..9

2
 1. FUNDAMENTO

En esta práctica vamos a hacer uso del indicador de pH, azul de bromo fenol. Sabemos que a
valores bajos de pH (menos de 3) da un color amarillento y en cambio, a valores superiores de
4,6 se torna morado. La variación en el color deriva del cambio de pH, es decir, el color cambia
debido a la pérdida o ganancia de protones.

En esta foto se observa el cambio de color del que hemos hablado anteriormente.

Ahora bien, en cuanto al espectro UV-visible del bromofenol, si lo registramos a diferentes pH

y usamos un programa como puede ser Qtiplot para superponer los espectros obtenidos,
observaremos normalmente un claro corte en un punto determinado, ese punto, es el punto
isosbéstico; el punto isosbéstico corresponde a aquella longitud de onda (nm) en la cual los
coeficientes de extinción molar de la forma ácida y básica son iguales.

En conclusión, combinando el uso del pHmetro, un indicador de pH (bromofenol),

disoluciones de diferente pH y un espectrofotómetro, podremos determinar el pK
aparente.
2. MATERIALES Y REACTIVOS
a. MAERIALES
- Espectrofotómetro
- pHmetro
- 10 cubetas de plástico para el espectrofotómetro
- 9 botes de plástico de 50 mL
- 2 vasos de precipitado de 250 mL
- 2 pipetas de 25 mL
- 1 pipeta de 1 mL

3
 - 2 pipetas de 10 mL
- 2 botellas de 250 mL
- Pendrive para grabar los datos del espectrofotómetro

b. REACTIVOS
- Acetato sódico
- Ácido acético
- Ácido clorhídrico
- Azul de bromofenol

3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
o Preparación de disoluciones
- 250 mL de AcOH 50 mM.
𝑚𝑜𝑙 60,05 𝑔 1 𝑚𝐿
50𝑥10−3 𝑥 0,25𝐿 𝑥 𝑥 = 0,714 𝑚𝐿
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 1,05 𝑔

- 250 mL de AcNa 50 mM.

𝑚𝑜𝑙 136,08 𝑔
50𝑥10−3 𝑥 0,25𝐿 𝑥 = 1,70 𝑔
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙

- 25 mL de HCl ≈ 100 mM.

𝑚𝑜𝑙 36,46 𝑔𝑇 100𝑔𝑃 1 𝑚𝐿
100𝑥10−3 𝑥 0,025𝐿 𝑥 𝑥 𝑥 = 0,207 𝑚𝐿
𝐿 1 𝑚𝑜𝑙 37 𝑔𝑇 1,19 𝑔𝑃

Después de preparar las disoluciones, pasaremos a realizar las 9 disoluciones siguientes:

Disolución ml AcOH mL AcNa mL indicador

2 20 - 0,4
3 18 2 0,4
4 16 4 0,4
5 13 7 0,4
6 10 10 0,4
7 7 13 0,4
8 3 17 0,4
9 - 20 0,4
1 20 mL de HCl y 0,4 mL de indicador

Una vez preprarados los 9 tubos, procedemos a medir su pH, para poder hacerlo de
manera más práctica, iremos poniendo unos mL de cada boto en un tubo de ensayo e
introduciremos el electrodo del pHmetro en el mismo tubo de ensayo. Es importante

4
recordar que hay que lavar con agua desatilada y secar, cuidadosamente con papel, el
electrodo, cada vez antes de introducirlo en el tubo de ensayo de la siguiente disolución.
Así tomamos las medidas de pH de los nueve botes. Y con los datos obtenidos del primer
y secundo experimento, podremos construir la siguiente tabla :
Disolución pH(1) pH(2)
1 1,09 0,97
2 3,06 2,70
3 3,89 3,85
4 4,13 4,15
5 4,43 4,44
6 4,69 4,71
7 4,84 4,89
8 5,30 5,33
9 7,44 7,03

4. CÁLCULOS
- Representación conjunta de resultados y gráfica obtenidas de Qtiplot:

P rim er experim ent o

350 400 450 500 550 600 650 700 750
2,5 2,5

8
7
2 6 2
5
4
3
1,5 2 1,5
1
"Abs"

1 1

Ab sorb an ci a
0,5 0,5

0 0

−0,5 −0,5

350 400 450 500 550 600 650 700 750

L on g i t u d d e on d a (n m)

5
 Segundo experim ent o
350 400 450 500 550 600 650 700 750
2,5 2,5

8
7
2 6 2
5
4
3
1,5 2 1,5
1
"Abs"

1 1

Ab sorb an ci a
0,5 0,5

0 0

−0,5 −0,5

350 400 450 500 550 600 650 700 750

L on g i t u d d e on d a (n m)

- Determinación de la longitud de onda correspondiente al máximo de absorción situado

más a la derecha en los espectros.

Con ayuda de la herramienta de “data reader” de Qtiplot determinamos que: en el experimento

1 la longitud de onda correspondiente al máximo de absorción es 590,60 nm y en el experimento
2 es 591,60 nm,

- A partir de la dependencia de la absorbancia con el pH, a esa longitud de onda, se

determina el pK aparente del indicador ajustando los datos no linealmente a la ecuación
siguiente:

𝐴𝑎 + (𝐴𝑏 𝑥 10𝑝𝐻−𝑝𝐾 )
𝐴=
1 + 10𝑝𝐻−𝑝𝐾
Para realizar la representación no lineal introducimos la ecuación anterior de la siguiente forma:
(Absa+Absb*10^(x-pk))/(1+10^(x-pk)) en FitWizard

Disolución pH(1) Abs(1) pH(2) Abs(2)

1 1,09 0,006 0,97 0,008
2 3,06 0,172 2,70 0,14
3 3,89 0,83 3,85 0,846
4 4,13 1,125 4,15 1,184
5 4,43 1,492 4,44 1,404

6
6 4,69 1,662 4,71 1,649
7 4,84 1,702 4,89 1,702
8 5,30 1,867 5,33 1,937
9 7,44 2,142 7,03 2,177

Obtenemos dos gráficas:

Experim ent o 1
1 2 3 4 5 6 7 8
2,5 2,5

2 2

1,5 1,5

1 1

Ab sorb an ci a
0,5 0,5

0 0

−0,5 −0,5

1 2 3 4 5 6 7 8
pH

7
 Experim ent o 2
0 1 2 3 4 5 6 7 8
2,5 2,5

2 2

1,5 1,5

1 1

Ab sorb an ci a
0,5 0,5

0 0

−0,5 −0,5

0 1 2 3 4 5 6 7 8
pH

El pK del primer experimento es 4,056 y del segundo es 4,085, siendo la media = 4,070

5. CUESTIONES

Cuestiones
1. ¿Por qué es necesario preparar el bote 1?

Con la finalidad d epoder calcular su coeficiente de extinción molar.

2. ¿Cuál es la longitud de onda del punto isosbéstico?

El punto isosbéstico es el correspondiente a una determinada longitud de onda (nm) en la cual

los coeficientes de extinción molar de la forma ácida y básica tienen el mismo valor.

La longitud de onda del punto isosbéstico es de 500 nm.

3. ¿Cuánto vale el pK aparente del indicador? ¿Por qué se calcula en está práctica un pK
aparente y no el termodinámico?

El pK aparente vale 4,070. Es el aparente por que utilizamos las concentraciones, en caso de que
quisiéramos calcular el pK termodinámico tendríamos que utilizar los coeficientes de actividad .

4. Deduce la ecuación [3] del guion

𝐴 = (1 − 𝛼)𝐴𝑎 + 𝛼𝐴𝑏 = 𝐴𝑎 − 𝛼𝐴𝑎 + 𝛼𝐴𝑏

𝐴 − 𝐴𝑎 = 𝛼(𝐴𝑏 − 𝐴𝑎 )

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 𝐴 − 𝐴𝑎
𝛼=
𝐴𝑏 − 𝐴𝑎
[𝐼𝑛− ][𝐻 + ] 𝛼
𝐾= = [𝐻 + ]
[𝐼𝑛𝐻] 1−𝛼
𝐴 − 𝐴𝑎 𝐴 − 𝐴𝑎
𝛼 𝐴𝑏 − 𝐴𝑎 𝐴𝑏 − 𝐴𝑎 𝐴 − 𝐴𝑎
= = =
1−𝛼 𝐴 − 𝐴 𝐴 − 𝐴 − 𝐴 + 𝐴 𝐴𝑏 − 𝐴
1 − (𝐴 − 𝐴𝑎 ) 𝑏 𝑎
𝐴 −𝐴
𝑎
𝑏 𝑎 𝑏 𝑎

[𝐼𝑛− ] 𝛼 𝐴 − 𝐴𝑎
= =
[𝐼𝑛𝐻] 1 − 𝛼 𝐴𝑏 − 𝐴
[𝐼𝑛− ] 𝐴 − 𝐴𝑎
𝑝𝐻 = 𝑝𝐾 + log ( ) = 𝑝𝐾 + log ( )
[𝐼𝑛𝐻] 𝐴𝑏 − 𝐴
𝐴 − 𝐴𝑎
10𝑝𝐻−𝑝𝐾 =
𝐴𝑏 − 𝐴
𝐴𝑏 10𝑝𝐻−𝑝𝐾 − 𝐴10𝑝𝐻−𝑝𝐾 = 𝐴 − 𝐴𝑎

𝐴 + 𝐴10𝑝𝐻−𝑝𝐾 = 𝐴𝑎 + 𝐴𝑏 10𝑝𝐻−𝑝𝐾 → 𝐴(1 + 10𝑝𝐻−𝑝𝐾 ) = 𝐴𝑎 + 𝐴𝑏 10𝑝𝐻−𝑝𝐾

𝐴𝑎 + 𝐴𝑏 10𝑝𝐻−𝑝𝐾
𝐴=
1 + 10𝑝𝐻−𝑝𝐾
5. De los dos máximos de absorción, ¿cuál corresponde a la forma ácida y cual a la forma
básica?

El máximo más alto, es decir, el que se encuentra más a la derecha, correspondería a la forma
básica, en tal caso, el máximo más bajo o dicho de otra forma, el situado más a la izquierda,
corresponde a la forma ácida

6. ¿Por qué, para determinar el pK aparente, se utilizan los datos de absorción

correspondientes a la longitud de onda de uno de los máximos y no a la del punto
isobéstico?
Ya que en el punto isosbéstico, la absorción se mantiene constante y esto no nos permitiría
poder calcular el pK. Además, a mayor absorbancia, mayor sensibilidad y mejores resultados.

6. BIBLIOGRAFÍA
- Es.slideshare.net. (2022). Prácticas de Quínica Física - 05 - Determinacion del
pKa de un indica…. [online] Disponible en:
https://es.slideshare.net/Triplenlace/quinica-fisica-practica-02-determinacion-
espectrofotometrica-del-pka-de-un-indicador [Accedido por última vez el : 5
Mayo 2022].