BIOQUÍMICA II

PRESENTACIÓN DE LA
MATERIA

Blgo. Enoy Leiva Pantoja, MSc.

Fac. Ciencias Médicas
Universidad de Guayaquil
 HELLO!
Blgo. Enoy Leiva Pantoja, MSc.
Biólogo Molecular
(Universidad de La Habana, Cuba)
Máster en Microbiología Aplicada
(Universidad Autónoma de Barcelona, España)
Profesor Titular Auxiliar

Hasta que viva en Marte puedes

contactarme por aquí:
[email protected]

2
 INSTRUCCIONES SOBRE LA ASIGNATURA
UNIDADES
Comprende 4 unidades: EVALUACIÓN DE LOS APRENDIZAJES
1. Proteínas plasmáticas Basado en:
2. Metabolismo de carbohidratos ▪ Gestión formativa, práctica y autónoma (60%)
3. Metabolismo de lípidos ▪ Exámenes parciales (40%)
4. Macromoléculas informáticas, Ácidos
nucleicos y Biotecnología. FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
1. Bioquímica Ilustrada. Harper. 30ª Edición.
EXÁMENES PARCIALES Y RECUPERACIÓN
19-24 de julio de 2021 1er Parcial
15-21 de septiembre de 2021 2do Parcial
23-29 de septiembre de 2021 Exámenes de
recuperacióny mejoramiento.

3
 BIBLIOTECAS VIRTUALES

4
5
 “
La verdadera ignorancia no es la
ausencia de conocimientos, sino
el hecho de negarse a adquirirlos.

Karl Popper
Filósofo y profesor austriaco
(1902-1994)

6
UNIDAD #1:
PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
CAPÍTULO #52
HARPER

Fuente:
https://www.goconqr.com/es/p/6817230?canonical=true&frame=true&no_cache=true
 PROTEÍNAS

▪ Macromoléculas complejas orgánicas nitrogenadas y tienen un

papel fundamental en la estructura y función de las células tanto
animales como vegetales.

▪ Cada especie tiene proteínas características, lo que le confiere su

carácter específico, tanto genético como inmunológico.

▪ La palabra proteína viene del griego “proteos” que quiere decir el

primero, ya que forma parte básica de la estructura corporal. Este
término fue sugerido por Mulder, químico Holandés, en el siglo
XIX para designar el componente universal de todos los tejidos
vegetales y animales.

▪ Sin proteínas no hay vida posible en nuestro planeta”. A través de ellas se producen los principales fenómenos de la
vida.

▪ El principal papel de las proteínas de la dieta es servir como fuente principal de aminoácidos, los cuales son utilizados
para la síntesis de proteínas nuevas en nuestro organismo.

8
 CLASIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

Proteína Animal

Origen

Clasificación Proteína Vegetal

Simples u
Holoproteínas

Estructura

Complejas o
heteroproteínas

9
 CLASIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

Proteína Animal
Escleroproteínas o proteínas fibrosas: como la elastina del músculo y
colágeno del tejido conjuntivo. Estas proteínas son insolubles debido a su
estructura molecular, y desempeñan funciones de protección y soporte de
tejidos

Esferoproteínas o proteínas globulares: son constituyentes de líquidos

orgánicos, como la caseína de la leche, la albúmina de la clara del huevo y las
globulinas del plasma sanguíneo Este tipo de proteínas en general, son
solubles en agua, se digieren fácilmente y contienen una buena proporción de
aminoácidos esenciales

Protaminas e Histonas: son polipéptidos de pesos moleculares no muy

elevados. Se encuentran en los huevos de pescado

10
 CLASIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

Proteína Vegetal
Glutelinas y Prolaminas: Las contienen los vegetales, especialmente los
cereales, por ej. Glutenina en el trigo, ordeina en la cebada, gliadina en el trigo
y centeno, etc. El compuesto denominado gluten es una mezcla de gliadina
más glutenina.

11
 CLASIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

12
 CLASIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

13
 FUNCIONES DE LAS PROTEÍNAS EN EL ORGANISMO

• Son parte estructural de • Forman parte de los • Proteínas asociadas a

las células. receptores hormonales. sistemas buffer.
• Participan en la • Algunas son segundos • Proteínas
movilidad celular. mensajeros para la acción transportadoras. Ej.:
• Muchas hormonas son hormonal. albúmina, hemoglobina y
de naturaleza proteica. • Forman complejos con transferrina.

• La mayoría de las glúcidos y lípidos. • Proteínas de

enzimas son proteínas. Glucoproteínas y coagulación.
Lipoproteínas. • Proteínas reguladoras.
• Son indispensables para
la acción que realizan las • Participan en la defensa Ej.:citoquinas
vitaminas. inmunológica. Ej.: • Proteínas de sostén. Ej. :
inmunoglobulinas y colágeno.
sistema de complemento.
• Participan en la
contracción muscular.

14
 ORIGEN DE LAS PROTEÍNAS
El hombre puede sintetizar algunos de los
aminoácidos que necesita para formar sus
proteínas a partir de compuestos nitrogenados
más simples o transformando sus aminoácidos
entre sí.

Existe un grupo que los animales superiores no

pueden formar, a estos se les llama esenciales y
deben ser proporcionados por los alimentos, en
forma de proteínas vegetales o animales.

En general, las proteínas animales contienen

aminoácidos esenciales en mayor cantidad y en
las proporciones en que el hombre los necesita.

15
 ORIGEN DE LAS PROTEÍNAS
▪ El hígado es el órgano más importante para regular la
síntesis de proteínas.
▪ Un humano de peso corporal promedio, 16% corresponde a
proteínas, siendo la mitad intracelular, el resto extracelular
y el 2,6% es nitrógeno.
▪ La proteína tiene un estado dinámico, constantemente hay
catabolismo y resíntesis. El objetivo de este recambio es
tener un máximo de utilidad en proteínas con escasa
cantidad de aminoácidos.

“Fats and fatty acids in human nutrition. Report of an expert consultation”. FAO Food and Nutrition paper, 2010, 91
16
 ORIGEN DE LAS PROTEÍNAS
El valor biológico (proporción del nitrógeno retenido/ nitrógeno absorbido) de
las proteínas depende de la cantidad de nitrógeno que se absorbe, siendo 0 el
valor mínimo y 100 el máximo dependiendo del porcentaje que se absorbe.

Aparte del valor biológico es importante también la cantidad de los diferentes

aminoácidos que contienen, de los 9 esenciales, por cada uno que falte se pierde
calidad, siendo el 0 la mínima calidad y e 1 la máxima calidad

La FAO ha propuesto a la proteína del huevo y la proteína de la leche humana

como proteínas de referencia. Se han fijado distintas proteínas de referencia
dependiendo de la edad, ya que las necesidades de aminoácidos esenciales son
distintas en las diferentes etapas del crecimiento y desarrollo humano.

En general, se recomiendan unos 40 a 60 g de proteínas al día para un adulto

sano. La WHO y las RDA (del inglés Recommended Dietary Allowances) de EUA
recomiendan un valor de 0.8 a 1.0 g / kg de peso al día para un adulto sano.
Por supuesto, durante el crecimiento, el embarazo o la lactancia estas
necesidades aumentan.

17
 LA SANGRE
La sangre es un tejido que circula dentro de un sistema
virtualmente cerrado, el de los vasos sanguíneos. La
sangre está compuesta por elementos sólidos,
eritrocitos, leucocitos y plaquetas, suspendidos en un
medio líquido, el plasma.

18
FUNCIONES DE LA SANGRE

Respiración: Transporte de oxigeno de los pulmones a los tejidos y el C02 de los tejidos a los pulmones.

Nutrición: Transporte de materiales alimentarios absorbidos.

Excreción: Transporte de desechos metabólicos a los riñones, los pulmones, la piel y los intestinos para
eliminación.

Mantenimiento del equilibrio ácido-básico normal del organismo.

Regulación del equilibrio de agua.

Regulación de la temperatura corporal por medio de la distribución del calor corporal.

Defensa contra infección mediante los leucocitos y los anticuerpos circulantes

Transporte de hormonas y regulación del metabolismo

Transporte de metabolitos

Coagulación

19
20
 PLASMA
El plasma consiste en agua, electrolitos, metabolitos,
nutrientes, proteínas y hormonas.

Se puede definir como el líquido claro y ligeramente

amarillento que se obtiene después de sedimentar, mediante
centrifugación generalmente, los elementos formes de la
sangre no coagulada.

El plasma sanguíneo contiene un 10% de solutos, de los cuales

una gran parte son proteínas (7 g/dL), también contiene
aproximadamente un 0,9 % de sales inorgánicas y el 2 %
restante lo constituyen diversos compuestos orgánicos no
proteicos.

21
 SUERO

Una vez que la sangre se ha coagulado, la fase líquida

remanente se denomina suero, este carece de factores de la
coagulación, que normalmente están presentes en el plasma,
pero que ha sido consumido durante el proceso de coagulación.

22
 ¿PARA QUÉ ESTUDIAR
LAS PROTEÍNAS?

23
 ESTUDIO DE PROTEÍNAS

▪ Se utiliza para el seguimiento de las enfermedades y no para diagnóstico o muy rara vez. Es
importante tener el valor normal del paciente y ver que pasa cuando entra en estado de
enfermedad.

▪ En la actualidad se han aislado y caracterizado cientos de proteínas, sin embargo, las funciones
de una gran parte de ella permanecen aún desconocidas

▪ Las proteínas purificadas difieren en su movilidad electroforética y peso molecular, también son
muy diferentes por su composición química; algunas contienen lípidos (lipoproteínas), otras
metales (transferrina, ceruloplasmina). La mayoría son glicoproteínas, presentando en algunos
casos variaciones genéticas. .

24
 CLASIFICACIÓN DE PROTEÍNAS PLASMÁTICAS DE ACUERDO A SUS
FUNCIONES
CLASIFICACIÓN

Proteínas con función de transporte y asociados a sistemas buffer.

Proteínas reactantes de fase aguda (aumentan su concentración en

situaciones de stress, procesos inflamatorios o traumatismos para
compensar esos estados).

Proteínas sintetizadas por el sistema inmunocompetente

25
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

https://www.uaz.edu.mx/histo/Biologia/FaiUnneAr/Pdf/proteinas.pdf

26
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS. CARACTERÍSTICAS

▪ El intervalo de concentración de las Las perturbaciones de la

proteínas plasmáticas en los seres
producción de proteínas
humanos adultos está comprendido entre
5,7 y 8 g/dL. plasmáticas pueden tener series
consecuencias para la salud.
▪ Los primeros investigadores separaron
las proteínas plasmáticas en tres grupos:
fibrinógeno, albúmina y globulinas.
▪ Después de la separación electroforética,
Las deficiencias en componentes clave de
reactivos de coloración revelaron cinco
bandas principales: ALBUMINA – ALFA1 – la cascada de coagulación de la sangre
ALFA2 – BETA – GAMMA. pueden dar por resultado equimosis y
sangrado excesivos.

27
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS:
GLOBULINAS α

28
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS:
GLOBULINAS β

29
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS:
GLOBULINAS ɣ

30
 PROTEÍNAS PLASMÁTICAS. CARACTERÍSTICAS

Alrededor de 70 a 80 % de las Ayudan a determinar la Muchas proteínas plasmáticas

proteínas plasmáticas se distribución de líquido entre muestran polimorfismo.
sintetizan en el hígado. sangre y tejidos. Es un rasgo mendeliano o
La presión osmótica, ejercida monogénico que existe en la
por las proteínas plasmáticas población en al menos dos
Una excepción notoria son las fenotipos:
es de 25 mmHg.
gamma-globulinas, que son
sintetizadas en los linfocitos.
▪ Alfa1-antitripsina
▪ Haptoglobina
▪ Transferrina
La vida media de las proteínas plasmáticas es el tiempo que se ▪ Ceruloplasmina
requiere para que 50% de las moléculas presentes se ha degradado de
la sangre. ▪ Inmunoglobulinas

Las vidas medias de la albumina y de la haptoglobina en el adulto

sanos normales son de alrededor de 5 días.

31
 ALBÚMINA

32
 ALBÚMINA
▪ El hígado sintetiza alrededor de 12 g de albúmina por día, lo cual representa
aproximadamente 25% de la síntesis total de proteína hepática y la mitad de
su proteína secretada.

▪ Alrededor de 40% de la albúmina del organismo circula en el plasma, donde

explica aproximadamente tres quintas partes de la proteína plasmática
total por peso (3.4 a 4.7 g/dL).

▪ Debido a su masa molecular relativamente baja (aproximadamente 69 kDa)

y alta concentración, se cree que del 75 al 80% de la presión osmótica del
plasma humano depende de la albúmina.

▪ Al igual que casi todas las otras proteínas secretadas, la albúmina

inicialmente se sintetiza como una preproteína. Su péptido señal es
removido conforme la molécula pasa al RER y subsecuentemente un
hexapéptido del amino terminal se corta a lo largo de la vía de secreción.
33
 ALBÚMINA
▪ La albúmina humana madura, consta de una cadena polipeptídica única de 585 aminoácidos de
longitud que está organizada hacia tres dominios funcionales.

▪ 17 enlaces disulfuro intracadena

▪ Una de las principales funciones de la albúmina es unirse a muchos ligandos y, así, facilitar el
transporte de los mismos.

▪ La albúmina esta organizada en nueve bucles, que se repiten en una secuencia triple del tipo
bucle grande-bucle pequeño-bucle grande, por lo que se agrupan en tres dominios homólogos (I,
II y III) de tres bucles cada uno (1-3, 4-6, 7-9).

34
35
 ALBÚMINA
▪ Todos excepto el primero son bucles dobles, basados en una secuencia repetida Cys-Cys que
tiene lugar ocho veces en la cadena. La estructura secundaria, determinada por dicroísmo
circular, indica que las albúminas humana y bovina contienen un 55 % y 50 % de α-hélice,
respectivamente, y un 16 % de hoja-β.

▪ La albúmina también tiene un sitio de alta afinidad para la bilirrubina. La unión de los dos
primeros ácidos grasos a la albúmina hace que aumente su afinidad por la bilirrubina.

▪ La mitad del calcio esta unido a la albúmina, también transporta cobre y níquel.
Aproximadamente el 10% del cobre plasmático es transportado unido a la albúmina, que posee
un sitio especifico en el extremo amino terminal.

36
 ALBÚMINA
Diversos fármacos, entre ellos sulfonamidas, penicilina G,
dicumarol y aspirina, están unidos a albúmina; este dato tiene
implicaciones farmacológicas importantes.

Preparaciones de albúmina humana se han usado ampliamente

en el tratamiento de quemaduras y de choque hemorrágico.
Algunas personas sufren mutaciones genéticas que alteran su
capacidad para sintetizar albúmina, lo que se conoce como
analbuminemia congénita.
En pacientes con enfermedades hepáticas a menudo muestran
un decremento de la proporción entre albúmina y globulinas.
La síntesis de la albúmina también disminuye en etapas
relativamente tempranas en estados de malnutrición
proteínica, Ej. Kwashiorkor.

37
 HAPTOGLOBINA (HP)

38
 HAPTOGLOBINA (HP)
1. Las haptoglobinas humanas están formadas por dos pares de cadenas diferentes unidas por puentes
disulfuro; la estructura de la subunidad se designa como a2b2.
2. Hay tres tipos de haptoglobinas determinadas genéticamente: Hp 1-1, Hp 2-1 y Hp 2-2, que difieren en
la estructura de sus cadenas a. La haptoglobina Hp 1-1, de masa molecular 100.000 Da, está formada por
dos cadenas a1 (M = 9.000 Da) y dos cadenas b (M = 42.600 Da), unidas por puentes disulfuro.

3. La haptoglobina Hp 2-2 (M = 400.000 Da) contiene cadenas a2, que resultan de la duplicación y fusión de
los genes para a1 y constan de 143 aminoácidos. Estas cadenas a2 tienen una cisteína más, que les permite
formar puentes disulfuro intercatenarios entre moléculas de Hp 2-2.

4. La haptoglobina Hp 2-1 (M = 200.000 Da) está formada por media molécula de Hp-1 y media de Hp-2 y,
puesto que contiene una cadena de a2, puede formar oligómeros.
5. Una función muy importante de la haptoglobina es que protege a los riñones contra daño por
hemoglobina extracospuscular

39
40
 LA HAPTOGLOBINA RECOLECTA HEMOGLOBINA QUE HA ESCAPADO
AL RECICLADO

▪ Alrededor de 10% de la Hb de un eritrocito es liberado hacia la circulación. Esta Hb

extracorpuscular, libre, es suficientemente pequeña (≈ 65 kDa) para pasar por el glomérulo del
riñón hacia los túbulos, donde tiende a formar precipitados perjudiciales. La haptoglobina (Hp), de
40-180 mg, con un peso molecular de 90 kDa se une a la (Hb) extracorpuscular para formar un
complejo no covalente apretado (Hb-Hp).

▪ Dado que el complejo Hb-Hp es demasiado grande (≥ 155 kDa) como para pasar el glomérulo,
esto protege al riñón de la formación de precipitados perjudiciales, y disminuye la pérdida de
hierro asociada con hemoglobina extracorpuscular.
▪ Vida media de Hp: 5 días
▪ Vida media de complejo Hp-Hb: 90 minutos

41
 HAPTOGLOBINA
▪ Las variaciones más allá de la norma a veces
pueden servir como indicadores diagnósticos
útiles. Por ejemplo, la haptoglobina es una
proteína de fase aguda y su concentración
plasmática está alta en diversos estados
inflamatorios.

Los pacientes que sufren anemias hemolíticas muestran concentración baja de haptoglobina. Esto se debe a
que, mientras que la vida media de la haptoglobina es de alrededor de cinco días, los hepatocitos eliminan con
rapidez el complejo Hb-Hp (vida media de 90 minutos). Así, cuando la haptoglobina está unida a hemoglobina,
es eliminada del plasma con una rapidez alrededor de 80 veces mayor que lo normal.

42
 TRANSFERRINA (Tf)

43
 TRANSFERRINA (Tf)

▪ La transferrina (Tf) es una glicoproteína transportadora de hierro (Fe3+), sintetizada y

metabolizada principalmente en los hepatocitos. La transferrina está formada por una única
cadena polipeptídica de unos 700 aminoácidos (679 la humana) y masa molecular 80.000 Da.

▪ Su estructura secundaria está constituida por hélices α y hojas β, que se disponen formando dos
dominios distintos, N- y C-terminal, unidos por un pequeño péptido. Cada uno de los dominios
de la proteína une un ion férrico (Fe3+), a través de su interacción con dos residuos de tirosina
(Y), uno de aspártico (D) y una histidina (H) en cada dominio.

44
 TRANSFERRINA (Tf)

▪ Esta unión del hierro con la transferrina es de tipo reversible, cuando no lleva iones férricos
unidos se denomina apo-transferrina a diferencia cuando ambos sitios están ocupados se llama
holotransferrina.

▪ El gen que codifica la proteína se localiza en el cromosoma 3 (3q21).

▪ La concentración de Tf en el plasma es de aproximadamente 300 mg/dL, suficiente para

transportar un total de alrededor de 300 μg de hierro por decilitro de plasma. Esta cifra
representa la Capacidad Total de Unión a Hierro (TIBC) del plasma.

45
 CICLO DE LA TRANSFERRINA
Holotransferrina
se une al receptor
de transferrina 1
Complejo TfR1-
Tf-Fe es objeto
El TfR1 se une a de endocitosis
una nueva Tf-Fe

Las vesículas
apoTf es liberada endociticas se unen
de TfR1 para formar
endosomas
tempranos

El complejo TfR1- E. Tempranos

apoTf es reciclado maduran a tardios
de regreso a la que tienen pH interno
superficie celular bajo

Fe++ es
transportado al Condiciones acidas
citosol mediante causan liberación del
DMT1 hierro desde la
transferrina

Hierro pasa de estado La apotransferrina

ferrico a ferroso por la apoTf resultante
ferrirreductasa, steap 3 permanece unida a
TfR1
46
 TRANSFERRINA EN EL RECICLADO DEL HIERRO
Dentro del macrófago, el hem derivado de la
hemoglobina es desintegrado por el hem
oxigenasa, convierte en biliverdina.

Después es transportado Monóxido de carbono y

hacia la circulación por la hierro son liberados como
proteína transmembrana subproductos
ferroportina.

Hierro es exportado desde la vesícula fagocítica en

el macrófago por NRANP1 (proteína de macrófago
asociado con resistencia natural 1), un
transportador homologo a DMT1
47
 ATRANSFERRINEMIA

La atransferrinemia es un desorden
metabólico extremadamente raro,
solamente están documentados unos
pocos casos en todo el mundo, que se
transmite como autosómico recesivo y se
produce por ausencia de transferrina. Se
caracteriza por anemia y hemosiderosis en
corazón e hígado. La hemosiderosis
consiste en la acumulación intracelular de
complejos de almacenamiento hierro,
denominados hemosiderina, que no
permiten la utilización del hierro.

48
 HEPCIDINA

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892004000300003#%20autor

49
 HEPCIDINA

▪ Péptido de 25 aminoácidos, importante en la homeostasis del hierro

▪ Sintetizada por el hígado como precursor de 84 aminoácidos prohepcidina

50
 Juntos dan por resultado la
Hepcidina se une al
reducción de la concentración
exportador de hierro
de hierro circulante
celular (ferroportina)
(hipoferremia)

Produciendo bloqueo
Desencadena
de mucosa (intestino)
internalización y
degradación

Decremento de ferroportina da por

resultado absorción disminuida del
hierro en el intestino y reciclado
51 deprimido de hierro en macrófagos
52
 CERULOPLASMINA

53
 CERULOPLASMINA
▪ La ceruloplasmina (~160 kDa) es una α2 globulina, sintetizada por el hígado.
▪ Es una proteína multifuncional que lleva a cabo al mismo tiempo un papel enzimático, como
oxidasa dependiente de cobre, así como transportadora de cobre.
▪ Transporta el 90% del cobre presente en el plasma. Albúmina -> 10% . Dona cobre a los tejidos
con mayor facilidad que la ceruloplasmina.
▪ Azul (cobre). Uniones más estrechas, cobre difícilmente intercambiable.

54
 PAPEL ENZIMÁTICO DE LA CERULOPLASMINA

Enzima: ferroxidasa (homeostasis del Hierro)

Oxida Fe2+ (ferroso) transformándolo Fe3+ (férrico) antes de la incorporación de Fe3+ a la
transferrina.

Esta actividad ferroxidasa es una de sus principales funciones, lo cual le permite estar
involucrada en la homeostasis del hierro.

Reciclamiento de hierro en macrófagos

Después de la destrucción de eritrocitos fagocitados, el hierro liberado desde los

macrófagos se encuentra en su mayor parte en estado ferroso. No obstante, para ser
recuperado por el ciclo de la transferrina este hierro debe ser oxidado al estado férrico.

55
 PAPEL ENZIMÁTICO DE LA CERULOPLASMINA

56
 TRANSPORTE DE COBRE
Existen receptores específicos para la ceruloplasmina en
numerosas células (tejido cardíaco, aórtico, endotelio,
hepático, eritrocitos, leucocitos) lo que permite la transferencia
de cobre desde la proteína al interior de la célula, por acción de
una ATPasa de cobre.

En el interior celular el cobre es utilizado para biosíntesis de

proteínas, como la de citocromo C oxidasa.

Por lo tanto, la ceruloplasmina es el vehículo de transporte de

cobre en la sangre y participa en su homeostasis.

57
 ENFERMEDAD DE WILSON
Degeneración hepatolenticular
Causas: Defecto en el transporte de cobre. Disminución de síntesis
de Ceruloplasmina.
Es un trastorno genético autosómico recesivo, causado por una
mutación en el gen (ATP7B), localizado en la región q 14.3 del
Anillo de Kayser- cromosoma 13 (13q14.3) que codifica para una ATPasa transportadora
Fleischer de cobre que elimina el exceso de cobre secretándolo en la bilis.
Se han descrito más de 300 mutaciones del gen ATP7B implicadas en
el desarrollo de la enfermedad.
En condiciones normales la mayor parte del cobre ingerido (2-5 mg/día)
se elimina por la bilis y sólo una pequeña cantidad por la orina.
Como consecuencia se acumula cobre en el hígado, cerebro, riñón y
eritrocitos, lo que causa toxicosis por cobre.
Los síntomas neurológicos más habituales de la EW incluye:
Temblor; Ataxia o Astenia; Convulsiones; Anillo de color marrón o
rojizo alrededor del iris (anillo de Kayser-Fleischer)
También puede ser ocasionado por factores ambientales( ingesta diaria
de cobre, concentración de metalotioneina intestinal y otros quelantes
de cobre)
58
 HEFAESTINA

59
 HEFAESTINA
▪ La hefaestina es una proteína de 1135 aminoácidos, formada a
partir de un precursor de 1158 aminoácidos y pesa 130.4 kDa.
Se cree que se fija a 6 iones de cobre por cada monómero.
▪ Análoga a la Ceruloplasmina que se encuentra en la membrana
del enterocito.
▪ Se ha localizado en el brazo largo del cromosoma X (Xq11-12).
▪ El hierro es transportado por el torrente sanguíneo ligado a la
transferrina, pero sólo lo hace en su estado férrico, así que
durante el transporte a través de ferroportina el hierro ferroso
es oxidado por una ferrioxidasa identificada como hefaestina
(proteína dependiente de Cu2+).
▪ El mayor sitio de expresión de la hefaestina es el intestino
delgado. Se limita a los enterocitos que forman las vellosidades
intestinales (donde se absorbe el hierro), es casi ausente en las
células de la cripta intestinal.

http://147.96.70.122/Web/TFG/TFG/Memoria/LAURA%20GARCIA%20ZAFRA.pdf
60
 FERRITINA

61
 FERRITINA
Proteína almacenadora, transportadora y liberadora de
forma controlada de hierro.
En los animales se encuentra principalmente en el
hígado, bazo, mucosa intestinal y médula ósea.
Constituida de una cápside proteica de 450 kDa,
compuesta por 24 subunidades ensambladas en una
simetría cúbica que rodea una cavidad de 8nm de
diámetro, capaz de acomodar miles de átomos de Fe3+
tradicionalmente descrito como ferrihidrita [Fe3+10
O14(OH)2].

La envoltura proteica de la ferritina genera dos tipos diferentes de canales 6 de naturaleza hidrofóbica y 8
de naturaleza hidrofílica que atraviesan la estructura de la proteína hasta el interior de la cavidad
Los 8 canales hidrófilos poseen aproximadamente 4-5 Å de diámetro con simetría C3 y son los
responsables de la entrada de Fe2+ al interior de la cavidad, así como de permitir la entrada y salida de agua,
cationes y moléculas hidrofílicas de un tamaño adecuado.

62 https://www.amyloidosissupport.org/AmyloidAware_Spanish.pdf
 FERRITINA
Las 24 cadenas polipeptídicas de la envoltura proteica
pueden ser clasificadas en dos tipos las subunidades H
(o cadenas pesadas) de 178 aminoácidos y 21 kDa y
las subunidades L (o ligeras) con 171 aminoácidos y 19
kDa de peso.
Ambos tipos de subunidades están estrechamente
relacionadas en términos de estructura primaria (~53%
de identidad en la secuencia proteica) y terciaria. Sin
embargo, estas unidades tienen diferente
funcionalidad, las subunidades H juegan un papel
crucial en la rápida detoxificación del hierro debido que
contienen el centro catalítico ferroxidasa para la rápida
oxidación del Fe2+

En cambio, las subunidades L están asociadas con la nucleación, mineralización y almacén del hierro en la cavidad de
la ferritina. De acuerdo con esto, el ratio H/L en la cápside proteica de la ferritina varía ampliamente en diferentes
tejidos. Así, ferritinas ricas en subunidades L predominan en órganos de almacén de hierro como el hígado y el bazo
mientras que los órganos en los que se requiere una rápida detoxificación del hierro como el corazón y el cerebro, así
como en la leche materna la ferritina rica en subunidades H.

http://147.96.70.122/Web/TFG/TFG/Memoria/LAURA%20GARCIA%20ZAFRA.pdf
63
 PROTEÍNA C REACTIVA

64
 PROTEÍNA C REACTIVA
La proteína C reactiva (PCR) es producida por el
hígado. El nivel de PCR se eleva cuando hay
inflamación en todo el cuerpo. Esta pertenece a un
grupo de proteínas llamadas "reaccionantes de
fase aguda" que aumentan en respuesta a la
inflamación.

El rol fisiológico de esta proteína consiste en

unirse a la fosfocolina expresada en la superficie
de las células moribundas o muertas, y a algunos
tipos de bacterias, con el fin de activar el sistema
del complemento.

Este incremento se debe a un aumento en la concentración plasmática de IL-6, que es producida por
macrófagos, células endoteliales y linfocitos T, como también lo hacen los adipocitos.
Se piensa que colabora con el complemento ligándose a células extrañas y dañadas, y que se realice la
fagocitosis por macrófagos, quienes expresan un receptor para PCR. También se cree que desempeña un
papel importante en la inmunidad innata, como un sistema de defensa temprano contra infecciones.

65 https://www.amyloidosissupport.org/AmyloidAware_Spanish.pdf
 PROTEÍNA C REACTIVA
La PCR aumenta hasta 50.000 veces en estados
inflamatorios agudos. Se eleva sobre su nivel
normal dentro de las 6 horas siguientes y alcanza
el pico máximo en 48 horas.

La PCR se usa como marcador de inflamación. La

medición de los valores de la PCR puede servir
para determinar el progreso de una enfermedad o
la efectividad del tratamiento.
Técnicas: ELISA, la inmunoturbidímetría, la
inmunodifusión rápida, y la aglutinación visual.

La PCR es un marcador general para la inflamación y la infección, por ello, puede ser usada para determinar
el riesgo de estar padeciendo un infarto agudo de miocardio.
Una cifra superior a 2.4 mg/l duplica el riesgo de sufrir un evento coronario que con un nivel inferior a 1 mg/l

66 https://www.amyloidosissupport.org/AmyloidAware_Spanish.pdf
 AMILOIDOSIS

67
 AMILOIDOSIS
Se refiere a un deterioro de la función tisular que
se produce por la acumulación de agregados
insolubles de proteínas entre las células.

Es una enfermedad asociada a diversas

patologías inflamatorias crónicas, infecciosas, e
incluso degenerativas cuya principal característica
bioquímica es un plegamiento incorrecto de
algunas proteínas extracelulares. Éstas adoptan
conformaciones erróneas, asociándose entre ellas
para formar fibrillas insolubles que terminan por
dañar de manera grave la función del órgano.

Puede haber afección de uno o más órganos o tejidos, y el cuadro clínico depende de los sitios y la extensión
del depósito de fibrillas de amiloide.

Las fibrillas por lo general representan fragmentos proteolíticos de diversas proteínas plasmáticas, y
poseen una estructura en hoja plegada β.
.
68 https://www.amyloidosissupport.org/AmyloidAware_Spanish.pdf
 AMILOIDOSIS

69
 INMUNOGLOBULINAS

70
 INMUNOGLOBULINAS
Los tres componentes principales del Sistema Inmunitario del cuerpo son: linfocitos B , linfocitos T y el Sistema
Inmunitario Innato.

Responden de una manera

Se originan adaptativa; desarrollan una
de la médula Se originan del
respuesta dirigida para cada invasor
ósea Timo
encontrado.

Procesos inmunitarios mediados por células, como

Síntesis de anticuerpos humorales
rechazo de injerto, reacciones de hipersensibilidad y
circulantes, también conocidos
defensa contra células malignas y virus.
como inmunoglobulinas.

El sistema inmunitario innato defiende contra la infección de una manera

inespecífica. Contiene diversas células, como fagocitos, neutrófilos, células
asesinas naturales (Natural Killer) y otras

71
 LINFOCITO B LINFOCITO T

72
 Un linfocito rodeado de glóbulos Un linfocito T siendo atacado por
rojos en un frotis de sangre virus del VIH.

73
 INMUNOGLOBULINAS

▪ Las inmunoglobulinas (Ig) son proteínas oligoméricas cuyas subunidades individuales tradicionalmente
se han clasificado como pesadas (H) o ligeras (L). El tipo de cadena H determina la clase de
inmunoglobulina y, así, su función efectora.

▪ Las inmunoglobulinas del humano pueden agruparse en cinco isotipos que se abrevian: IgA->α, IgD-> δ,
IgE-> ε, IgG->ϒ e IgM->µ.

▪ Hay dos tipos generales de cadenas ligeras,

kappa (κ) y lambda (λ), que pueden
distinguirse con base en diferencias
estructurales en sus regiones CL.

▪ Una molécula de inmunoglobulina dada

siempre contiene dos cadenas ligeras κ o
dos cadenas ligeras λ (nunca una mezcla de
κ y λ).

74
 INMUNOGLOBULINAS
La configuración en forma de Y de la unidad central de inmunoglobulina se ilustra por el tetrámero de IgG.
Algunas inmunoglobulinas, como la IgG inmune sólo existen en la estructura tetramérica básica. Otras, como
la IgA y la IgM pueden formar oligómeros superiores compuestos de dos, tres (IgA) o cinco (IgM) copias de la
unidad tetramérica central.

75
 INMUNOGLOBULINAS
Epítopo

Las regiones variables confieren especificidad de unión Antígeno

Las regiones variables de las cadenas ligera y pesada de

inmunoglobulinas forman los sitios de unión al antígeno,
que dictan la especificidad asombrosa de los anticuerpos.

Las regiones variables de las cadenas L y H constan de un

puñado de islas cortas (5 a 10 residuos) llamadas regiones
hipervariables intercaladas.

76
 INMUNOGLOBULINAS
Estas regiones también se denominan regiones determinantes
de complementariedad (CDR).

Un sitio de unión a antígeno se forma cuando las regiones

hipervariables de las cadenas H y L se alinean juntas en espacio
tridimensional (estructura terciaria) como asas que se
proyectan desde la superficie del anticuerpo.

Diversas combinaciones de CDR de cadena H y L pueden dar

lugar a múltiples anticuerpos que poseen diferentes
especificidades, una característica llamada diversidad
combinatoria.

77
 INMUNOGLOBULINAS. LA DIVERSIDAD DE ANTICUERPOS DEPENDE DEL
REORDENAMIENTO DEL GEN.
El genoma humano contiene menos de 150 genes que codifican para inmunoglobulina; sin embargo, cada persona es capaz de sintetizar quizás
un millón de anticuerpos diferentes, cada uno específico para un antígeno único.
La diversidad de inmunoglobulina es generada por mecanismos combinatorios que se basan en la mezcla y el reordenamiento de múltiples
maneras de un fondo común finito de información genética.

-Cada cadena ligera es producto de al menos tres genes estructurales separados que codifican para la región variable (VL), la región de unión (J) y
región constante (CL)

-Cada cadena pesada es el producto de al menos cuatro genes diferentes que codifican para una región variable (VH), una región de diversidad
(D), una región de unión (J) y una región constante (CH).

La diversidad aumenta más mediante la acción de la citidina desaminasa inducida por activación (AID). Al catalizar la conversión de citidina en
uracilo, la AID aumenta de manera masiva la frecuencia de mutación de genes V que codifican para inmunoglobulina

En algunos estados patológicos, la acción mutagénica de AID puede llevar a la generación de autoanticuerpos que se dirigen a componentes
endógenos del organismo, un fenómeno llamado autoinmunidad.

Tercer mecanismo →diversidad de unión.- se refiere a la adición o deleción de números al azar de nucleótidos que tiene lugar cuando ciertos
segmentos de gen son unidos entre sí.
78
 INMUNOGLOBULINAS. ANTICUERPOS MONOCLONALES

Un anticuerpo monoclonal es un anticuerpo producido por un

solo clon de linfocitos B.

Cuando se inyecta un antígeno en un animal, los anticuerpos

resultantes son producidos por una mezcla de células B que
sintetizan anticuerpos dirigidos contra diferentes sitios sobre el
antígeno. De este modo, los anticuerpos producidos en
huéspedes animales son heterogéneos o de naturaleza
policlonal.

Es posible generar en el laboratorio anticuerpos monoclonales homogéneos que se dirigen a un epítopo único y que
están libres de otras inmunoglobulinas contaminantes. Típicamente, se obtienen células B del bazo de un ratón en el cual
previamente se ha inyectado un antígeno o una mezcla de antígenos.

Las células B se mezclan con células de mieloma murinas y se exponen a polietilenglicol, que causa fusión celular. El
producto de esta fusión es una línea celular permanente llamada hibridoma, capaz de proporcionar un aporte continuo
de anticuerpos monoclonales.

79
 INMUNOGLOBULINAS

80
 INMUNOGLOBULINAS. PRINCIPALES FUNCIONES

81
 FIBRINÓGENO

https://es.123rf.com/photo_16647783_estructura-qu%C3%ADmica-de-fibrin%C3%B3geno-humano-factor-i-de-prote%C3%ADnas-el-fibrin%C3%B3geno-
es-una-prote%C3%ADna-plasm%C3%A1tica-soluble-q.html

82
 FIBRINÓGENO

Forman parte de la cascada de coagulación

Es un dímero de 340 kDa, formado por 3 cadenas polipeptídicas conectadas por puentes disulfuro: Alfa-> peso molecular de
67000Da; 610 aminoácidos; Beta -> 461 aminoácidos y Gamma-> 56000-47.000 Da; 411 aminoácidos. Estas cadenas son
sintetizadas en el hígado.
Grupo amino terminal, enfrentados a la zona central.
Entrelazados por puentes disulfuro (13-13) 29
Las tres cadenas se unen por un anillo disulfuro (11 aminoácidos); adopta una conformación de α -hélice.
Las regiones C terminales de las cadenas β Y ϒ, forman zonas compactas y se disponen muy plegadas, a diferencia del extremo C-
terminal de la cadena α, que por su naturaleza polar se encuentra desplegada.

En el extremo N-terminal de las cadenas α y β hay unos pequeños péptidos llamados fibropéptidos A y B, respectivamente. El
fibropéptidos A está formado por 18 aminoácidos y el B por 20.

83
 FIBRINÓGENO

El fibrinógeno es una proteína soluble del plasma sanguíneo precursor de la fibrina, su longitud es de 46 nm. Tiene una vida media
de 100 horas (3 a 6 días) y los niveles plasmáticos de 150 a 450 mg/dL superan las concentraciones mínimas (50 a 100 mg/dL)
requeridas para la hemostasis..

Es responsable de la formación de los coágulos de sangre. Cuando se produce una herida se desencadena la transformación del
fibrinógeno en fibrina gracias a la actividad de la trombina.

El fibrinógeno también es conocido como factor de coagulación I.

Es una molécula fibrilar, que en sus extremos tiene cargas fuertemente negativas. Estos extremos permiten la solubilidad del
compuesto y también repelen a otras moléculas del compuesto, previniendo la agregación.

Es una proteína de fase aguda que como expresión de una respuesta inflamatoria puede incrementar 2 a 20 veces su valor normal.

84
PROTEINOGRAMA
ELECTROFORÉTICO
MÉTODO DE FRACCIONAMIENTO PROTEICO
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO

METODOLOGÍA (ELECTROFORESIS): Técnica de separación consistente en el transporte de iones a través de

una disolución por la acción de un campo eléctrico. Los iones presentes en la disolución se mueven hacia uno u
otro electrodo según su propia carga.

86
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
PROTEINOGRAMA NORMAL DEL SUERO: Fracciones proteicas.

87
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
PROTEINOGRAMA NORMAL DEL SUERO: Fracciones proteicas.

88
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO

FRACCIONES PROTEICAS
Albúmina sérica
Banda mayoritaria (53-66%) del total del proteinograma
Valores normales:
Recién nacidos: 2.9-5.5 g/100ml
Niños: 3.8-5.5
Adultos (V): 3.3-6.1; (H): 2.7-5.6
Pre-albúmina (retinol binding protein)
Mayor movilidad electroforética.
Rápido recambio (18-45 mg/100ml)
Indicador de estado nutricional

89
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO

FRACCIONES PROTEICAS
Fracción α1 globulinas
Aumenta durante los procesos inflamatorios agudos, neoplasias, infartos y necrosis (1.9-4.1% del total del
proteinograma)
α1- glicoproteína ácida
α1- antitripsina
α1- antiquimiotripsina
α1- fetoproteína (<2 mg/100 ml)

90
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
FRACCIONES PROTEICAS
Fracción α2 globulinas
Aumenta en el síndrome nefrótico, ictericia obstructiva, tuberculosis, inflamación crónica (7.7-12.3%)
▪ α2 macroglobulina (150-420 mg/100ml; Síndrome nefrótico)
▪ Ceruloplasmina (20-40 mg/100ml; transporte Cu2+; Enf. Wilson)
▪ Haptoglobina (60-270 mg/100ml), transporte Hb; aumenta en inflamación, neoplasias; disminuye
hemólisis intravascular, anemia perniciosa
▪ Proteína C reactiva (<0.5 mg/100 ml). Inflamaciones e infecciones

91
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
FRACCIONES PROTEICAS
Fracción β globulinas: Aumento moderado en síndrome nefrótico, ictericia obstructiva, cirrosis, tuberculosis,
inflamación crónica (7.6-13.0%)
▪ β-Lipoproteina (colesterol)
▪ Fibronectina (25-40 mg/100ml; aumenta en síndrome nefrótico, colestasis, neoplasias. Disminuye en
politraumatismos, quemaduras extensas, sepsis)
▪ Transferrina (200-400 mg/100ml; transporte Fe; aumenta en anemias)
▪ Transcobalamina (900 pmol/L; transporte de B12). Complemento (C3, C4) (85-190; 12-36 mg/100 ml).
Aumentan en procesos inflamatorios agudos. Disminuyen en reacciones autoinmunes.

92
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
FRACCIONES PROTEICAS
Fracción γ globulinas: La fracción de las gammaglobulinas supone entre 10.3 y 20.8% del total de proteínas del
suero. Se pueden detectar IgG, IgM, IgA, IgD e IgE
▪ IgM Aparece aumentada tras procesos agudos virales
▪ IgA Aumenta en enfermedades intestinales autoinmunes (Crohn)
▪ IgG Aumenta en enfermedades autoinmunes (lupus eritematoso, hepatitis crónica activa, infecciones
bacterianas crónicas)
▪ IgE Está aumentada en enfermedades con un componente alérgico (eczema, asma, infección parasitaria)

93
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
PRINCIPALES ALTERACIONES
Cuantificación de proteínas totales (Siempre deben acompañar al proteinograma)
Método colorimétrico (R-Biuret y Sulfato de cobre alcalino)-> 545 nm
Valores normales: 6-8 mg/dL

PATRONES ELECTROFORÉTICOS
Los patrones electroforéticos surgieron de la asociación que se observó entre las diversas enfermedades y
determinadas alteraciones en el proteinograma.

94
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
PATRÓN ELECTROFORÉTICO NORMAL
.

95
 PROTEINOGRAMA ELECTROFORÉTICO
Patrón asociado a la cirrosis hepática Patrón del síndrome nefrótico

Patrón inflamatorio Patrón de gammapatía monoclonal

96
 THANKS!
TRABAJO AUTÓNOMO:
👉 1- Lectura de artículos sobre proteínas plasmáticas y Proteinograma
electroforético.
2-Preparación para la lección acera de los temas que se impartan esta
semana.

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