“AÑO DEL FORTALECIMIENTO DE LA SOBERANIA NACIONAL”

UNIVERSIDAD NACIONAL INTERCULTURAL DE LA AMAZONÍA

PERUANA
FACULTAD DE INGENIERÍA Y CIENCIAS AMBIENTALES
CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
INFORME DE PRÁCTICA N°04
TEMA
“ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES DE LABORATORIO”
Docente : Ing. Darwin Josué Estacio Albornoz
Presentado por : Reinier Antony Rivera Cuenca
Fecha de entrega : 28/ 12 / 2022

I. INTRODUCCION
Para la bioseguridad en el laboratorio es fundamental disponer de conocimientos
básicos sobre la esterilización. Habida cuenta de que los objetos muy sucios no
pueden desinfectarse o esterilizarse rápidamente, es igualmente importante
comprender los conceptos básicos de la limpieza previa. A este respecto, los
siguientes principios generales se aplican a todas las clases conocidas de
microorganismos patógenos.
Los requisitos particulares de la descontaminación dependerán del tipo de trabajo
experimental y de la naturaleza de los agentes infecciosos que se estén
manipulando. Por ello, es fundamental que todos los recipientes o medio de cultivo
y dispositivo de siembra que se utiliza para el estudio de micro organismos estén
estéril es decir libre de vida microbiana, el material a esterilizarse debe estar
perfectamente limpio para reducir la carga microbiana y de esta manera contribuir
al proceso de esterilización.
Por la cual existen varias formas de realizar la esterilización, la decisión de que
proceso utilizar debe basarse en el tipo de material y el riesgo de contaminación.
Los métodos más utilizados son calor seco, calor húmedo y radiación (ultravioleta).

II. OBJETIVOS
2.1. Objetivo general
• Adquirir los conocimientos básicos necesarios para la esterilización de
materiales de uso microbiológico.

2.2. Objetivo especifico

• aplicar el procedimiento correspondiente para la esterilización de
materiales.
• Reconocer los tres tipos de equipos utilizados para la esterilización de
materiales tanto por calor seco, calor húmedo y rayos uv.
 III. MARCO TEORICO
3.1. Definición de la esterilización
La Organización Mundial de la Salud (OMS), define la esterilización como la
técnica de saneamiento cuyo fin es la destrucción de toda forma de vida.
Eliminando todo microorganismo, tanto patógeno como no patógeno,
incluidas las formas esporuladas, altamente resistentes.
A pesar de las innovaciones tecnológicas en el área de desinfección y
esterilización con equipamientos automatizados, estos equipos requieren
operadores entrenados que deben conocer los procesos de esterilización
que están realizando (APEICH, 2003).
Entre los métodos más comunes está la aplicación de calor (por vía húmeda
o seca), la filtración o la radiación.
3.2. Métodos de esterilización
La elección del método de esterilización viene marcada según la naturaleza
del material a esterilizar o simplemente por los recursos disponibles para el
usuario. En el caso de materiales como el acero inoxidable o el vidrio,
cualquier método valdrá para su esterilización. En el caso de materiales
plásticos, se deberá tener en cuenta su composición para evitar la
degradación del material. A continuación, se detallan los métodos físicos de
esterilización (Labbox L, 2021).
Cuadro 1. Métodos de Esterilización.
Agente esterilizante Equipo
Calor Húmedo Autoclave
Calor Seco Estufa
Radiación (luz Uv) Cámara flujo laminar
• Calor Húmedo (Autoclave)
El calor húmedo por medio de utilización de vapor de agua es el agente
esterilizante más frecuentemente utilizado. Este mecanismo constituye el
método más utilizado en Atención Primaria. La reducción de la carga
microbiana se consigue mediante la inactivación de las células como
consecuencia de la coagulación de proteínas, causada por la transferencia
de calor, a través de vapor a alta presión y temperatura. Las condiciones de
esterilización pueden variar en función de la autoclave. La Organización
Internacional para la Estandarización (ISO) y el Comité Europeo para la
Normalización (CEN), marcan unos estándares de duración del tiempo de
esterilización, según la temperatura alcanzada.
De este modo y de forma orientativa, el vapor como agente esterilizante se
comporta de la siguiente manera:
- Aporta la humedad necesaria para la destrucción de los microorganismos.
- Aporta la temperatura necesaria para que esta destrucción se realice más
rápido.
 • Calor Seco (Estufa)
La estufa de secado es un equipo que se utiliza para secar y esterilizar
recipientes de vidrio y metal en el laboratorio. Se identifica también con el
nombre de Horno de secado. Las estufas operan, por lo general entre la
temperatura ambiente y los 350°C.
La importancia que tiene la estufa de secado, como es conocido
normalmente, se emplea para esterilizar o secar el material de vidrio y metal
utilizado en los exámenes o prueba, que realiza el laboratorio y que proviene
de la sección de lavado, donde se envía luego de ser usado en algún
procedimiento. La esterilización que se efectúa en la estufa se denomina de
calor seco y se realiza a 180°C durante 2 horas. (Equipos y Laboratorio de
C S.A.S. 2011).
• Radiación luz Uve (Cámara flujo-laminar)
La radiación puede ser utilizada como agente para la eliminación de
microorganismos. Las radiaciones ionizantes se pueden utilizar para la
esterilización de materiales termolábiles, como por ejemplo materiales
plásticos, y las radiaciones no ionizantes, como la luz ultravioleta, puede ser
empleada en el control de áreas cerradas. La energía resultante de los
procesos de radiación se transforma en energía que provoca la muerte de
los microorganismos mediante la ruptura del ADN, impidiendo así la división
celular y la vida biológica de los mismos ((Labbox L, 2021).
3.3. Esterilización de materiales
Los microorganismos pueden producir enfermedades cuando infectan
personas, animales y plantas y cuya gravedad oscila entre una infección
débil, intoxicación e incluso la muerte. Pueden contaminar los alimentos y
producir cambios físicos y químicos en ellos, haciéndolos en algunos casos
incomibles e incluso venenosos. Los microorganismos son responsables
también de la alteración de muchos otros materiales, generando graves
pérdidas económicas. Por ello es indispensable disponer de procedimientos
para controlar la contaminación y el crecimiento microbiano. Las principales
razones para controlar la contaminación y el crecimiento microbiano pueden
resumirse de la siguiente forma:
• Para evitar la transmisión de las enfermedades y las infecciones.
• Para eliminar los microorganismos de un hospedador que está infectado.
• Para eliminar microorganismos de diferentes materiales y así evitar su
deterioro y alteración.
La temperatura, la presión, radiación y los filtros. Un agente químico es una
sustancia que causa una reacción específica y que se caracterizan por una
estructura molecular típica, por ejemplo, tenemos los compuestos fenólicos,
los alcoholes, alógenos (cloro y yodo), aldehídos, oxido de etilo, fenoles. Un
proceso físico es un procedimiento que causa un cambio, por ejemplo, la
filtración la esterilización, incineración, higienización.
3.4. Materiales utilizados en el laboratorio
 Generalmente se utilizan para contener, verter y medir soluciones líquidas.
Algunos son de elevada precisión en sus medidas y otros son menos
precisos, la elección dependerá del uso que se requiera. Materiales
utilizados son:
• Matraz Erlen Meyer: Material de vidrio que se emplea en el laboratorio para
calentar líquidos o preparar soluciones.
• Tubos de ensayo: de vidrio, de distintos tamaños 1, 4, 5, 10, 15, etc. ml y
se utilizan para realizar reacciones químicas. También existen con tapa, al
vacío y con distintas sustancias anticoagulantes para extracciones de
muestras sanguíneas.
• Placas de Petri: Son utilizadas en bioquímica para llevar a cabo cultivos
de microorganismos.
• luna reloj: Sirve como accesorio para el calentamiento de compuestos
químicos o sustancias para obtener sólidos, es decir para evaporar los
líquidos.
• Vaso precipitado: tiene forma cilíndrica y posee un fondo plano, con una
pequeña boca en la parte de arriba para poder transferir el líquido que
contiene con mayor facilidad. Pueden ser de vidrio pírex, vidrio normal o de
plástico. Poseen componentes de teflón y otros materiales resistentes a la
corrosión. Suelen estar graduados, de acuerdo al volumen que poseen: 10
ml, 25 ml, 50 ml, 100 ml, 250 ml, 500 ml, 1 L, 2 L.
• Probeta: La probeta es un instrumento volumétrico que consiste en un
cilindro graduado, es decir, lleva grabada una escala por la parte exterior
que permite medir un determinado volumen.
• Motero-pilón: El mortero de laboratorio es un utensilio que consta de una
vasija de paredes gruesas y un pequeño pilón, con la que se tritura el
ingrediente. Se encuentra en diferentes tamaños ajustables a las
necesidades de su uso. Las medidas más comunes varían en una
capacidad que va desde 80 ml a 500 ml (
• Espátula: Aparato de laboratorio que sirve para sacar las sustancias
sólidas de los recipientes que las contienen. (Cecilia López R. 2014).

IV. MATERIALES Y METODOS

4.1. Materiales y equipos
4.1.1. Materiales
- tubo de ensayo
- placa Petri
- Probeta
- Luna de reloj
- Mortero-Pilón
- Vaso Precipitado
- Matraz Erlenmeyer
- Espátula
4.1.2. Equipos
- Estufa
- Autoclave
- Cámara flujo laminar
4.1.3. Otros materiales
 - Papel Kraft
- Hilo Pabilo
- Tijera
- Papel Aluminio
- Algodón
4.2. Métodos
Procedimiento
4.2.1. Paso 1: Preparación y envoltura de los materiales
- Se prepara los materiales de vidrio para la envoltura con papel
Kraft o Papel aluminio.
- Luego se recorta el papel Kraft en forma de rectángulo midiendo
según el tamaño que se requiera para cada material.
- Una vez recortado el papel Kraft, se pasa a la elaboración de
tapones hecho de algodón ya que es de gran importancia, aquí
varia los tamaños a utilizarse porque algunos materiales tienden a
tener la boquilla más ancha como es el caso de la probeta o el
matraz.
- Una vez terminado de hacer el recorte de papel Kraft, tapón de
algodón e hilo pabilo se pasa a envolver los materiales. De
acuerdo al diseño como en este caso la forma de envolver la Placa
Petri es en forma de tamal y su amarrado en cruz.
- Para la envoltura del matraz Erlenmeyer es poner el tapón, el
papel Kraft en forma de gorro y el amarrado con hilo pabilo.
- Seguido de ello, los materiales que cuenten con boquillas se
envuelven igual que el matraz Erlenmeyer.
4.2.2. Paso 2: Preparación de estufa
- Se enchufa y enciende, luego se pasa a programar el equipo a
121°C x 45 minutos con la trampilla al 40%
- Se acomoda en las rejillas sin amontonar los materiales.
- Al finalizar después de unos minutos abra la estufa y retire el
material.
4.2.3. Paso 3: Preparación de cámara de flujo laminar
- Se enciende la maquina con una llave, para seguidamente
programar con luz ultravioleta. Luego apagar
- Una vez programado se acomoda los materiales, se vuelve a
encender la máquina, tan rápido ya que si estas expuesto por mas
de 5 minutos a la cabina sufres una esterilización.
4.2.4. Paso 4: Preparación de autoclave
- Primero calentamos el agua a la temperatura de ebullición para
generar el vapor que entra en la cámara de la autoclave. A medida
que el vapor entra en la cámara, el aire se retira de la cámara y
continúa siendo expulsado a medida que el vapor se expande.
- Ahora que no hay aire en la autoclave, aumentamos la
temperatura y la presión cerrando la válvula de escape de la
cámara mientras se continúa agregando vapor a la cámara. La
temperatura y la presión de presión hasta el nivel requerido para
 la esterilización. La temperatura requerida se fija generalmente de
121°C x 45 minutos.
- Esta fase se denomina tiempo de esterilización, o tiempo de
retención, ya que ahora es el momento en que se produce la
esterilización real. Esto puede tardar alrededor de 20 a 45 minutos,
dependiendo del tamaño y el contenido de la carga. ¡Adiós
microorganismos!

V. DISCUSIONES
- Claudia Clavijo. K (2020) Dice que la esterilización tiene varias aplicaciones
en diferentes campos. En investigación de laboratorios científicos es
empleado principalmente para eliminar microorganismos de los elementos
de trabajo para evitar la contaminación de la muestra, recipientes y material
de trabajo. En la industria alimentaria se emplea la esterilización para
aumentar la vida útil de los alimentos.
➢ Gracias a estas técnicas de esterilización y desinfección, tanto
biólogos, como químicos y científicos en general han podido identificar,
clasificar, para luego estudiar detalladamente, a la inmensa variedad de
microorganismos existentes en todos los lugares inimaginables que se
puedan encontrar (desiertos, salares, casquetes polares, profundidades
marinas, medios muy ácidos, aguas termales, etc.
- Según Yaneth Castillo B. (2016). Nos cuenta que es curioso observar que
a lo largo de la historia de la ciencia y las diferentes clasificaciones que se
han propuesto para los seres vivos, las bacterias siempre han estado
presentes manteniendo su lugar y una clasificación exclusiva para ellas. Aun
en la actualidad y a pesar de los adelantos científicos, falta mucho por
descubrir sobre estos microorganismos.
➢ Gracias a los estudios realizados podemos comprender cuan
importantes son los microorganismos y cómo influyen directamente en
nuestras vidas. Los grandes hombres de ciencia que se aventuraron a
descubrir este mundo oculto, nos proporcionaron todos sus
descubrimientos, por los cuales dedicaron prácticamente toda su vida y
que hoy con instrumentos y técnicas modernas podemos observar,
practicar y realizar en los laboratorios.
- Según Nancy Moya R. (2017). Nos indica que la esterilización se define
como la destrucción completa de toda forma de vida microbiana incluyendo
las esporas bacterianas, y los priones siendo estas últimas las formas de
vida con más alta resistencia a los métodos de esterilización.
➢ Mas que todo, la esterilización sirve para eliminar o destruir cualquier
tipo de microorganismos que se encuentra en los alimento u objetos
y así poder prevenir cualquier tipo de enfermedad y contaminación
cruzada de alimentos.

VI. CONCLUSIONES
La conclusión, para esta práctica dio un resultado satisfactorio porque se cumplió
con el objetivo general que fue adquirir conocimientos básicos acerca de la
esterilización de materiales, importancia de los equipos cuyo fin es el de esterilizar.
Como también los procesos que se dio en el laboratorio, esto al analizarlo
detalladamente vimos que para la esterilización de los materiales debíamos cubrir
con papel Kraft si iba a ser esterilizados en una estufa, por otra parte, si el material
iba a ser utilizado por la autoclave estoy seria cubierto por papel aluminio. La
esterilización es un proceso a través del que se logra la destrucción total de los
microorganismos viables presentes en un material. Este procedimiento es de gran
utilidad dentro de muchos campos, ya que existen muchos procesos que requieren
la utilización de materiales estériles. Entre éstos podemos destacar:
• La esterilización de equipos quirúrgicos y otros materiales de uso médico
con el propósito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes.
• El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas,
etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiología.

VII. BIBLIOGRAFIA
❖ Farm. Dra. Silvia, R. Farm. Dra. Andrea, C. 2017. Curso a Distancia Métodos
de esterilización a Bajas Temperaturas Controles de Esterilización.
❖ Guevara, Y. y Cuello, N. 2008. Métodos De Esterilización. Montería –
Córdoba.
❖ Prof. Sofia, G. 2008. 10 esterilización por calor húmedo - ucv.ve
❖ Labbox, L. 2021. Métodos Físicos De Esterilización De Material De
Laboratorio
❖ 2016. Métodos para la esterilización del material de laboratorio. Quercus
blog
❖ 2005. Tercera edición. Manual de Bioseguridad OMS – Facultad de
Medicina. Ginebra ISBN 92 4 354650 3
❖ Blanca, P. y Isabel de S. 2010. Metodología de esterilización en el laboratorio
microbiológico. Madrid.
❖ Cabinas de seguridad biológica: uso, desinfección y mantenimiento.
Washington, D.C.: OPS, 2002. ISBN 92 75 32416 6
❖ Claudia, C. K 2020. Esterilización de materiales – Warning. TT. 32 años de
la universalización de la – Studocu
❖ Nancy M. R. 2017. Proceso Esterilización. Afam.org.ar
❖ Yaneth C. B. 2016. Art38.pdf. unam.mx

VIII. ANEXO

Imagen de materiales