Reporte de Practica de Microalgas

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AISLAMIENTO Y CULTIVO DE MICROALGAS

SILVESTRES(NATIVAS).
CENTRO DE ESTUDIOS TECNOLOGICOS DEL MAR No°20

“LIC.MANUEL MAPLES ARCE”

RESUMEN.
Con el fin de realizar un catálogo de especies de microalgas se realizó esta práctica, así
como también realizamos técnicas de esterilización de material para el cultivo y
esterilización del medio de cultivo, en (Abalde, Angeles, Fidalgo, Torres , & Herrero, 2009)
este caso “agar-agar”. Los materiales fueron envueltos en papel estraza para
posteriormente ya empaquetados ser esterilizados por el método de calor húmedo en la
auto clave a 121° a 15 libras de presión por 15 minutos. Para después de la esterilización
ser almacenados sin desempaquetar. Mas adelante se llevó a cabo la elaboración del
medio de cultivo agar-agar para el cual incorporamos 4 gramos por litro para una
consistencia semisólida para posteriormente dentro de un matraz esterilizarlo en la
autoclave. Para posteriormente ser agregado a cajas Petri esterilizadas para su posterior
sembrado de microalgas.

INTRODUCCIÓN. cultivos de microalgas han permitido


obtener un mayor conocimiento sobre la
complejidad de los ciclos de vida de
Las algas son un grupo polifilético de diversas especies, generándose
organismos fotótrofos oxigénicos, información sobre los diferentes
auxotróficos o facultativamente estadios, toxicidad, requerimientos
heterótrofos, restringidos a ambientes nutricionales, fisiología, información
húmedos por la ausencia de mecanismos genética, biodiversidad, sistemática,
de protección contra la desecación. entre otros. Vena (2009) nos detalla el
Moreno, Medina, & Albarracín(2012). La papel de las microalgas en un sistema
importancia de las microalgas radica en hidropónico “En sistemas hidropónicos
su papel como productoras primarias de “cerrados” (en los cuales la solución
la cadena trófica, que las convierte en las nutritiva se recircula), las microalgas son
primeras productoras de materia capaces de obstruir los ductos de riego,
orgánica. La finalidad de aislar los emisores y filtros entre otros,
microalgas es la de obtener cultivos limitando de esta forma el abastecimiento
monoespecíficos a partir de un solo de la solución nutritiva.”. castiglioni,
individuo (célula, filamento o quiste), que Toranzo, Ferraro, & Bagnato(2018) nos
en este caso se definen como cultivos mencionan a la tasa de crecimiento como
clonales, o iniciados con varios un parametros importante y con mucha
individuos de la misma especie. utilidad. Esta depende de determinadas
SCHMIDT (2007) nos menciona que los variables de cultivo, siendo las más

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relevantes para especies fotosintéticas: Como todo inicio de practica iniciamos
la intensidad lumínica y la temperatura. con un buen proceso de esterilizacion del
Por otra parte, en otro orden de material el cual se llevo acabo por el
importancia, se encuentra la metodo de calor humedo “autoclave” a
concentración de dióxido de carbono y la 121°C con 15 libras de presion por 15
de nutrientes como nitrógeno y fósforo. minutos. Para poder aislar el material
Es por esto que parte de la previamente se tuvo que emvolver en
caracterización de una cepa nueva papel estraza con tecnicas de envoltorio
consiste en determinar la tasa de de laboratorio y selladas con ayuda de
crecimiento y el tiempo de duplicación en cinta de papel al igual que fueron
condiciones determinadas y controladas. ordenados anotando su nombre sobre el
(Abalde, Angeles, Fidalgo, Torres , & papel y en algunos casos como el de las
Herrero, 2009) “Si se aislan directamente pipetas de cristal se les puso un filtro de
de agua de mar o dulce, pueden algodón dentro de la contra punta para
utilizarse distintos métodos de evitar la filtracion del agua al usarla.
aislamiento. Se consigue más fácilmente Posteriormente a la esterilizacion se
durante un "bloom" algal cuando una almacenaron en cajas de carton sin
especie particular domina en la perder la hermeticidad. Al igual que se
población” nos hablan de los metodos de esterilizo el medio de cultivo el cual fue el
aislamiento de microalgas directamente agar-agar dentro de un matraz sellado
de su habitat natural. con algodón y una copa de papel estraza
fue agregado a la auto clave. A demas se
agregaron los tubos de ensaye con agua
MATERIALES Y METODOS y bayfolan los cuales nos servirian para
el cultivo inicial de la microalga.
Materiales

Cajas petri
Fase de elaboracion de los medios de
Tubos de ensaye cultivo.
Pipetas pasteur Para la elaboracion del medio de cultivo
agar-agar se preparo una mezcla de 300
Vasos precipitados
ml de agua por 4.5 gr de agar. Para el
Matraz medio de cultivo inicial se ocupo 1.5ml de
“bayfolan” por 150ml de agua.
Algodón
Posteriormente agregamos 15ml de
Gasas nuestro agar-agar a 6 cajas petri y en 9
tubos de ensaye agregamos 9ml de agua
Autoclave y 1ml de nuestro medio de cultivo.
Mecheros

Fase de siembra en tubos de ensaye


Fase de esterilizacion.

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Previamente a la siembra en los tubos de cruzada la cual consiste en tomar una
ensaye recolectamos muestras de muestra con ayuda de la asa de platino
microalgas del medio natural. Las cuales previamente esterilizada en el mechero
fueron sembradas de manera para proceder a estriar. Finalizando la
escalonada agregando inicialmente 1ml siembra las cajas petris fueron puestas
de muestra de microalgas para despues en la luz para permitir el crecimiento
del primer tubo de ensaye agregar 1ml al algal.
siguiente y asi sucesivamente.

Fase de siembra final en tubos de ensaye


Fase de siembra en cajas petri.
Finalmente una ves obtenido el
Dejando un margen de 14 dias para el crecimiento algal aislado se
creecimiento algal dentro de los tubos de seleccionaron colonias de especies y se
ensaye se realizo la siembra en las cajas sembraron en tubos de ensaye con
petri la cual realizamos dentro del ayuda de la asa de platino. Todo esto
diametro de esterilizacion de dos dentro del area esteril de los mecheros.
mecheros bunsen con la tecnica de estria

RESULTADOS aunque lo que buscamos fue el


crecimiento alga en el ultimo de los tubos
Durante la primera fase de siembra se esto no se logro debido al poco margen
obtuvieron 3 tubos de ensaye con de tiempo.
crecimiento algal apto para su siembra
en cajas petri, esto debido a que no todos
los tubos de ensaye tenian el mismo
porcentaje de muestra lo que hizo que los
primeros los cuales tenian mas muestra Ilustración 1.2 caja Petri
desarrollaran una mayor crecimiento, con crecimiento algal
aislado

DISCUSIÓN
En nuestra practica pudimos observar
como la intensidad lumínica tiene un
papel muy importante a la hora de
desarrollar una colonia además de las
Ilustración 2 tubos de ensaye
con crecimiento algal condiciones como la temperatura y al
contrastar esto con castiglioni, Toranzo,
En la segunda parte de la siembre solo Ferraro, & Bagnato(2018) podemos
se obtuvieron dos cajas Petri con las observar que ellos tambien mencionan a
colonias bien aisladas lo cual fue crucial la luz y la temperatura como dos
para el cultivo dentro de los tubos de parametros importantes para las curvas
ensaye. de crecimiento, a demas mencionan

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otros parametros importantes como el Moreno, J. R., Medina, C. D., & Albarracín, V. H.
CO2 y los nutrientes. Al igual que (2012). Aspectos ecológicos y
Moreno, Medina, & Albarracín(2012). metodológicos del muestreo,. REDUCA,
Mencionan a las algas como organismos 110-125.
fotótrofos esto quiere decir que obtienen SCHMIDT, C. J. (2007). METODOS Y
su energía por parte de la fotosíntesis HERRAMIENTAS ANALÍTICAS EN LA
con lo cual volvemos a resaltar a la EVALUACION DE LA BIOMASA
intensidad lumínica como un factor MICROALGAL. CENTRO
importante para el desarrollo. INTERDISCIPLINARIO DE CIENCIAS DEL
MAR.
CONCLUSION
VENA, S. O. (2009). AISLAMIENTO Y
En conclusión, esta practica de
CARACTERIZACION DE LAS PRINCIPALES
aislamiento y cultivo de microalgas
MICROALGAS PRESENTES EN EL
requiere un mayor margen de tiempo
SISTEMA HIDROPÓNICO DEL TIPO RAÍZ
para poder obtener colonias aisladas FLOTANTE. UNIVERSIDAD DE CHILE,
perfectamente. No obstante, la práctica Facultad de ciencias agronomicas.
se considera exitosa ya que logramos
aislar una sola especie dentro de los
tubos de ensaye. Al igual que falto tiempo
para poder realizar la identificación y
clasificación de las diferentes especies
de microalgas. Se recomienda realizar
estudios mas a fondo para poder
identificar las microalgas ya que muchas
especies de estas no han sido
clasificadas correctamente y algunas
especies aún se desconocen.

BIBLIOGRAFIA
Abalde, J., Angeles, C., Fidalgo, J. P., Torres , E.,
& Herrero, C. (2009). Microalgas:
cultivos y aplicaciones. Universidad de
Coruña.

Arrendondo Vega, B. O., & Voltolina, D. (s.f.).

castiglioni, D., Toranzo, R., Ferraro, G., &


Bagnato, C. (2018). AISLAMIENTO DE
ESPEECIES DE MICROALGAS CON
INTERES BIOTECNOLOGICO. Instituto de
energia y desarrollo sustentable .

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