RUBRICA PARA LA EVALUACIÓN DE REPORTE DE PRÁCTICA DE LABORATORIO.

NOMBRE DEL ESTUDIANTE: Jorge Emmanuel Ruiz Reyes GRADO Y GRUPO: 2° “C”
ASIGNATURA: Bases de la ecología FECHA: 27 de Marzo de 2022
PROFESOR QUE EVALUA: QFB. ABRAHAM FLORES SÁNCHEZ.

Criterios de Descripción de la puntuación. Puntuación. Calificación.

evaluación
1. Hoja de -Nombre de la institución, plantel, carrera, logotipos
presentación. institucionales, título de la práctica, nombre completo, grado y 5
grupo, asignatura, nombre completo del docente, fecha de
entrega.
2. Introducción. -Describe el alcance del documento y da una breve explicación
del mismo. 5
-Además de explicar algunos antecedentes que son importantes
para el posterior desarrollo del tema central.
3. Materiales y -Enlista de manera completa los materiales, equipos y
Métodos. sustancias utilizadas acorde al manual.
-Describe el procedimiento experimental.
20
-Presenta los datos obtenidos en forma ordenada a modo de
tablas, figuras, diagramas, etc. Todos los datos obtenidos tienen
alguna indicación y observación, y ésta es pertinente.
-Redacta los verbos en pasado y en tercera persona.
4. Resultados. -Presenta todos los resultados organizados en tablas o gráficos
cuando corresponde, los cuales poseen variables y unidades en 20
todos los casos.
5. Discusión. -Redacta con sus propias palabras si se cumplen o no los
objetivos con base al análisis de los resultados.
-Presenta variadas conclusiones (confirma o cuestiona, ratifica, 20
evalúa, según indicaciones dadas), considerando tanto el
objetivo general como los específicos planteados y a partir de
los resultados obtenidos.
6. Cuestionario. -Todas las preguntas y respuestas están enunciadas de forma
muy clara y concisa.
-Todas las preguntas y respuestas están relacionadas con los
10
contenidos estudiados.
-Respondió todas las preguntas.
7. Bibliografía. -Presenta por lo menos 5 bibliografías consultadas, en orden
alfabético, siguiendo el formato APA o CHICAGO. 10
8. Legibilidad y -El trabajo está bien organizado y presenta un diseño creativo,
Ortografía. cuidando detalles que permiten su revisión. 10
-Sin errores ortográficos o gramaticales; ideas claras, lógicas y
secuenciadas en todos los párrafos.
 Instituto de Estudios Superiores de Chiapas
Plantel Tapachula.
Escuela de Medicina.
Licenciatura en Medicina.

Bases de la ecología.
Q. F.B. Abraham Flores Sánchez.

“Práctica de laboratorio 2: Técnicas de siembra y aislamiento de bacterias y

levaduras”

2° Semestre “C”.

Nombre del alumno: No. De lista:

Jorge Emmanuel Ruiz Reyes 23

Tapachula, Chiapas, 27 de Marzo de 2022

 Introducción
Las bacterias son organismos procariotas unicelulares, que se encuentran en casi todas las partes
de la Tierra. Son vitales para los ecosistemas del planeta. Algunas especies pueden vivir en
condiciones realmente extremas de temperatura y presión. El cuerpo humano está lleno de bacterias,
de hecho se estima que contiene más bacterias que células humanas. La mayoría de bacterias que
se encuentran en el organismo no producen ningún daño, al contrario, algunas son beneficiosas. Una
cantidad relativamente pequeña de especies son las que causan enfermedades.
El término levadura se refiere básicamente a un grupo de hongos unicelulares, donde las hifas y/o
pseudohifas pueden o no estar presentes y tienen una fase sexual perfecta o teleomorfa.
El motivo de esta práctica de laboratorio es aplicar las diferentes técnicas de siembra y aislamiento
de cultivos de bacterias y levaduras en medios sólidos, así mismo, comprobar la utilidad que tienen
los medios de cultivos de uso general, diferenciales y selectivos.
El cultivo de microorganismos es una actividad que requiere del conocimiento de técnicas de siembra
o inoculación y de aislamiento para transferirlos de un medio a otro, o mantener su crecimiento y
actividad. Es indispensable para realizar diversos estudios morfológicos, de identificación,
bioquímicos, de patogenicidad y ecológicos, entre otros.
Existen diferentes técnicas de siembra: por suspensión de la muestra en medios líquidos; extensión
de diluciones de un cultivo en superficie de medios en caja de Petri; por estría en caja de Petri y tubos
con medios solidificados en forma inclinada; por piquete o picadura en tubos con medios sólidos o
semisólidos. Con la aplicación de cada técnica se obtiene información de importancia para el estudio
básico o aplicado de los microorganismos de interés.
En la naturaleza, los microorganismos generalmente se encuentran en poblaciones, formando parte
de comunidades de gran complejidad, por lo que uno de los objetivos de estudio más importantes en
microbiología es aislarlos. El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza, en la
mayoría de los casos, mediante la técnica de estría cruzada para producir colonias aisladas en
cultivos sólidos y así, obtener un cultivo puro o axénico, también conocido como cepa, que contiene
un solo tipo de microorganismo con la misma composición genética.
Cuando la técnica por estría se aplica para aislar un microorganismo de interés a partir de mezclas
donde se encuentra en pequeñas cantidades, generalmente se obtendrán las bacterias dominantes.
En este caso, se utilizan medios selectivos o de enriquecimiento, los que contienen nutrientes
especiales, antibióticos, altas concentraciones de sales y/o condiciones de pH, luz o temperatura que
incrementarán la población del microorganismo de interés y se facilitará su aislamiento.
Si se agregan a los medios de cultivo otros componentes como: sangre, colorantes, indicadores, es
posible distinguir entre especies bacterianas por la forma en que metabolizan los sustratos y que se
manifiesta por cambios en la apariencia del pH del medio de cultivo. Estos medios se conocen como
medios diferenciales y son de gran utilidad para la caracterización e identificación de especies
bacterianas.
 Materiales y métodos
Materiales
 4 cajas Petri con agar nutritivo (AN)
 4 cajas Petri con agar eosina azul de metileno (EMB)
 4 cajas Petri con agar papa dextrosa (PDA)
 4 tubos con caldo nutritivo (CN)
 4 tubos inclinados con AN
 4 tubos inclinados con PDA
 2 mecheros Fischer
 2 asas de inoculación
 1 piceta con agua destilada
Procedimiento
El profesor proporcionará cultivos puros (cepas) de bacterias Gram (+): Staphylococcus sp.,
Streptococcus sp., Gram (-): Escherichia coli y un cultivo de la levadura Candida sp., así como una
muestra problema (con al menos dos microorganismos diferentes). Cada equipo de trabajo inoculará
E. coli, una bacteria Gram +, la levadura y un cultivo problema en una caja de cada medio.
Técnica de estría cruzada:
a) Dividir cada una de las cajas Petri por la parte de atrás en cuatro cuadrantes. Esterilizar el
asa con calor en el mechero.
b) Dejar enfriar el asa y tomar la muestra de una colonia.
c) Inocular la muestra haciendo 4 o 5 estrías simples muy juntas de lado a lado sobre el primer
cuadrante de la caja, cerrar la caja. Flamear el asa de inoculación y hacer girar la caja Petri
un cuarto de vuelta.
d) Abrir nuevamente la caja y con el asa de siembra esterilizada y fría, tocar la superficie del de
estrías recién hechas en un punto alejado del inicio. Hacer un segundo grupo de estrías como
en el caso anterior. Realizar el mismo procedimiento en el tercer cuadrante y en el último
cuadrante, sin flamear el asa de siembra hará una estría más abierta (simple).
e) Las cajas con la base hacia arriba se incuban a 35°C durante 24-48 horas.
Siembra en tubos y condiciones de incubación:
a) Después de la incubación de los cultivos, seleccionar, de las cajas Petri con AN, la colonia
más aislada de cada cepa.
 b) Transferir con el asa, previamente esterilizada y fría, una pequeña muestra de la colonia a un
tubo de CN.
c) Transferir de la misma forma una muestra de la misma colonia inoculando por estría los tubos
inclinados con AN y PDA.
d) Incubar los tubos a 35°C durante 24-48 hrs. Observar la aparición de colonias y reportar la
forma de crecimiento de los microorganismos.
Datos obtenidos
Teniendo en cuenta que la práctica fue virtual y que el único material de trabajo fue un video, se
obtuvo que el procedimiento es complejo y delicado, se tomó en cuenta que la constante herramienta
de trabajo es el mechero, ya que se usó en repetidas ocasiones.

Resultados
Se obtuvo una buena obtención de información acerca del procedimiento sobre la técnica de siembra
y el aislamiento de las bacterias y de levaduras.
 Discusión
Los resultados obtenidos fueron los correctos en correlación al video observado en clase, al ser una
práctica virtual, la apreciación del procedimiento en la forma que se presentó, ayudó a retener
información correcta de forma facilitada.
En esta práctica se puede conocer el manejo y el uso de esterilizantes, a lo largo de ella adquirimos
conocimientos de suma importancia como lo son el uso de la autoclave, de igual manera aprendimos
a esterilizar material requerido, algo que es indispensable en el área de salud. Ahora conocemos las
técnicas de siembra y aislamiento de cultivo, también como se realiza y la función que cumple, es
decir, la importancia de estas. Gracias a esta práctica tendremos los conocimientos necesarios para
desempeñarnos en el área que se nos requiera, realizando de forma buena y correcta lo que se tenga
que desempeñar.
Cuestionario
 ¿Por qué se considera que un cultivo puro supone condiciones no naturales?
En los ambientes naturales los microorganismos se encuentran usualmente como poblaciones mixtas,
pero si queremos estudiarlos, caracterizarlos e identificarlos, necesitamos tenerlos como cultivos
puros. La muestra debe diseminarse de manera tal que los diferentes microorganismos queden lo
suficientemente separados sobre la superficie de un medio de cultivo sólido, de manera que luego de
la incubación ellos formen colonias visibles aisladas.
 ¿Qué reflexiones haría sobre los resultados obtenidos en laboratorio con este tipo de
cultivo?
Pues que son muy importantes para ir descartando varios tipos de bacterias, al ser más específico,
podemos detectar más fácilmente y posteriormente otorgar un tratamiento oportuno para el paciente.
 ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de la técnica de estría cruzada? Proponga otras
técnicas de aislamiento en medios sólidos que se aplican en microbiología.
El mejor aprovechamiento de nutrientes por difícil visualización de colonias parte de los
microorganismos. Ciertos microorganismos siembran por superficie ventajas y desventajas, menor
cantidad de muestra a procesar, mayor error en el recuento, en aerobiosis pueden crecer aerobios
facilidad para subcultivar colonias. Estrictos y facultativos bajo aprovechamiento de nutrientes por
parte, fácil visualización de los microorganismos. Se corre el riesgo que otros microorganismos no se
afectan las células termosensibles entren en el medio de cultivo y contaminen la muestra.
 ¿Para qué se inocularon tubos con medios líquidos y tubos con medios sólidos por
estría?
En la naturaleza los microorganismos crecen en poblaciones mixtas, formadas por muchas especies
que interactúan entre sí, por lo que para poder aislar microorganismos es necesario obtener cultivos
puros a partir de resiembras consecutivas en un medio sólido conteniendo agar, un polisacárido
obtenido de algas marinas, como agente gelificante. En el laboratorio, los microorganismos como
bacterias, hongos y algas se cultivan en medios de cultivo para caracterizar su crecimiento,
identificarlos y determinar sus actividades metabólicas. Los componentes indispensables de un medio
de cultivo son agua, nutrientes agente gelificante, tampones, colorantes, indicadores de pH, etc.
Existen diferentes tipos de medios de cultivo, que pueden clasificarse según sus componentes
químicos, naturaleza física y función.
 Investigue la composición química de los medios AN, EMB y PDA. Explique qué tipo
de medios son con base en composición y uso.
1. NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o vegetal
como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce
exactamente.
2. SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química definida cual y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
3. SEMISINTÉTICOS son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo
una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.
Según su consistencia:
a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa.
b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón de 15g/litro. El
agar es una sustancia inerte polisacárido (hidrato de carbono) que se extrae de las algas.
Como esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo.
Este conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos
de ensayo y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos que antes no
eran posibles en medio líquido".
c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para determinar la
motilidad de las especies en estudio.
Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar. Según su
composición:
A causa de los requerimientos químicos del mundo microbiano, a veces es necesario agregar o
eliminar componentes químicos del medio.
a. COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los
microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para mantener
colonias microbianas. Por ejemplo: agar común o caldo común.
b. ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual
se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos, por ejemplo:
sangre, suero, líquido ascítico, etc. Se utiliza para microorganismos que tienen grandes
exigencias nutricionales.
 c. SELECTIVOS: son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones
físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con el fin de
inhibir el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio
sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibiendo el de otros. Se
utiliza para seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas. Por ejemplo,
Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos estafilococos).
Bibliografía
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Brooks, G., Carroll, K., Butel, J., Morse, S., Mietzner, T. (2011). Jawetz, Melnick, Adelberg.
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25562005000100004#:~:text=El%20t%C3%A9rmino%20levadura%20se%20refiere,fase%20sexual
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