Proteinas Recombinantes

CIENCIAS GENÓMICAS
PROTEÍNAS RECOMBINANTES1
Las herramientas de la biotecnología bacterias y virus, que fueron de gran ayuda

para la biotecnología. Entre ellas:
Durante la segunda mitad del siglo XX se
lograron importantes avances en la • Endonucleasas de restricción: enzimas
biología, que fueron esenciales para el bacterianas que reconocen secuencias
desarrollo de la biotecnología. Uno de los específicas del ADN, y cortan la cadena cada
más importantes fue la determinación de la vez que esta secuencia aparece. Existen
estructura de doble hélice del ADN. Este endonucleasas de restricción que cortan el
hecho, que les valió a los investigadores ADN en diferentes puntos
James Watson y Francis Crick el premio • ADN ligasas: enzimas que “pegan”
Nobel de medicina en 1962, permitió fragmentos de ADN.
comprender cómo el ADN determina los
caracteres de un individuo y cómo se • Transcriptasas inversas: enzimas virales
transmiten de una generación a la que puede invertir la dirección normal de la
siguiente. A partir de este hecho se pudo transferencia de información. Normalmente,
conocer que todos los organismos, desde la información genética contenida en el ADN
los más simples hasta los más complejos, se transcribe a una molécula de ARN (ácido
tienen un código genético común. Esto ribonucleico) y luego se traduce a una
significa que el ADN de un organismo está proteína. La transcriptasa inversa sintetiza
“escrito” en un código que puede ser ADN a partir del ARN.
interpretado y traducido por las células de
otros organismos. En ingeniería genética o tecnología del ADN
recombinante, se utilizan estas enzimas para
Se conoció que la información genética en cortar y aislar un gen determinado -que tiene
todas las células se traduce a proteínas, información para fabricar una proteína
componentes fundamentales que particular- e introducirlo en las células de un
desempeñan una gran diversidad de organismo distinto del inicial. En
funciones. Entre ellas las enzimas, que son consecuencia, este organismo tendrá ADN
proteínas que catalizan (aceleran) recombinante a partir del cual fabricará una
reacciones químicas en los seres vivos. nueva proteína. A la proteína producida a
partir de ADN recombinante se la denomina
A comienzos de los años 70 se proteína recombinante .
descubrieron diversas enzimas en
1
http://www.porquebiotecnologia.com.ar/educacion/cuaderno/ec_49.asp?cuaderno=49
Producción de proteínas recombinantes sobrepasará al gasto de aislar el compuesto
humanas desde su fuente original (por ejemplo,
obtención de insulina a partir de páncreas de
La recombinación de genes humanos en el porcinos o bovinos) para llegar a cantidades
ADN de bacterias es una de las medicinales.
posibilidades que ofrece la biotecnología, y
que posibilita obtener proteínas humanas
con fines terapéuticos. Por ejemplo,
insulina humana obtenida a partir de la Productos biotecnológicos destinados a la
bacteria Escherichia coli. Esta técnica es salud humana
de gran valor porque las bacterias se
La ingeniería genética permite que
reproducen rápidamente y pueden duplicar
numerosas proteínas potencialmente
su número cada 20 minutos. De esta forma
terapéuticas, que antes se producían solo en
se pueden obtener en poco tiempo muchas
pequeñas cantidades, puedan elaborarse en
copias del gen humano inserto en el ADN
grandes cantidades.
bacteriano, y producir grandes cantidades
de proteínas recombinantes. En la actualidad existen más de 30 proteínas
aprobadas para su uso clínico, y cientos de
A escala industrial, la producción de
genes de proteínas terapéuticas que se han
proteínas recombinantes involucra las
expresado a nivel de laboratorio y que están
siguientes etapas:
intentando demostrar su adecuación clínica.
• Fermentación: las bacterias son En Argentina, la autoridad regulatoria de la
cultivadas en tanques sellados biotecnología aplicada a la salud es la
(fermentadores) que contienen un medio Comisión Nacional de Biotecnología y Salud
de cultivo nutritivo. (CONBYSA), creada por Resolución Nº
• Extracción: las células son centrifugadas 413/93, del Director de la Administración
para recuperar las proteínas de su interior. Nacional de Medicamentos, Alimentos y
Tecnología Médica (ANMAT). Tiene como
• Purificación: se separa la proteína misión asesorar al gobierno nacional en lo
recombinante de las otras proteínas referido al desarrollo y la aplicación de la
bacterianas. biotecnología en el campo de la salud.
Estudia y recomienda las normas vigentes
• Formulación: la proteína recombinante que rigen el desarrollo, elaboración y
es modificada para conseguir una forma aprobación de productos biotecnológicos
estable y estéril que puede administrarse destinados a la salud y consumo humano.
terapéuticamente.
La tabla 1, enumera una diversidad de
Cada una de las fases de la elaboración proteínas recombinantes que hoy se
implica un manejo muy cuidadoso de los comercializan y emplean como fármacos para
materiales y un estricto control de calidad el tratamiento de diversas patologías en
para optimizar la extracción, la pureza, la humanos. También pueden producirse
actividad y la estabilidad del fármaco. antígenos y anticuerpos como proteínas
Dependiendo del producto y del tipo de recombinantes, que se emplean en la
célula utilizada, la producción de proteínas confección de kits o sistemas de diagnóstico
recombinantes puede ser un proceso de diversas enfermedades.
simple o más complejo. Aunque la
complejidad del proceso aumentaría el
costo final del producto, el valor nunca
La insulina: estructura y función tanto a partir de bacterias como de levaduras,
y sin ningún riesgo para la salud.
La insulina es una hormona producida por
el páncreas. Tiene una estructura proteica En la figura 2 se muestra un esquema
y su función consiste en regular la general de la obtención de insulina a partir de
concentración de glucosa en la sangre. Sin páncreas de vacas o cerdos, y en la figura 3
la insulina, la glucosa se acumula en la la obtención mediante ingeniería genética.
sangre hasta que alcanza niveles elevados
y puede causar diferentes complicaciones Si bien estos son los pasos a seguir para la
en el funcionamiento del organismo. Esta obtención de insulina recombinante, si se
es la enfermedad conocida como diabetes inserta en el plásmido bacteriano el gen
mellitus. Cuando la diabetes es causada entero de la insulina, se obtendría como
por una escasa o nula producción de resultado la preproinsulina. Para evitar estas
insulina, se puede regular el nivel de dificultades se sintetizan químicamente la
glucosa en la sangre (glucemia) mediante secuencia de ADN correspondiente a las
la administración exógena de insulina. cadenas polipeptídicas A y B que se insertan
separadamente en un gen bacteriano. Los
En 1921, los fisiólogos canadienses plásmidos recombinantes se introducen en
Frederick G. Banting y Charles H. Best bacterias E. coli, donde se multiplican. Una
extrajeron por primera vez la insulina del vez purificadas las dos cadenas, se unen
tejido pancreático de perros, y en 1923 la mediante una reacción que forma puentes
insulina estaba comercialmente disponible disulfuro (de azufre) y se obtiene insulina
en los Estados Unidos. Luego, la insulina humana pura. El producto final, la insulina
para diabéticos se obtuvo a partir de humana biosintética, es idéntica en todos los
páncreas de cerdos o vacas, que aunque aspectos a la insulina purificada del páncreas
es biológicamente activa en humanos, no humano.
es idéntica a la humana, de modo que se
pueden producir algunos problemas de
reacciones inmunes adversas.( Ver figura
1)
La insulina es una hormona proteica
constituida por 51 aminoácidos. La síntesis
de insulina atraviesa diferentes etapas: se
fabrica como preproinsulina que luego se
transforma en proinsulina al cortarse sus
extremos. La mayoría de la proinsulina se
separa en dos partes: el “péptido C"
(conector) y la insulina, que está
constituida por dos cadenas polipeptídicas,
una de 21 aminoácidos y otra de 30,
unidas por dos puentes disulfuro.
La insulina recombinante
La insulina es el primer caso de proteína
producida por ingeniería genética
aprobada para uso en humanos, desde
1982. En la actualidad, varios laboratorios
farmacéuticos producen insulina humana,

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