Quim. Salomón Chacha P.

MSc
 Es posible clasificar los métodos ópticos en
espectroscópicos y no espectroscópicos.

Son aquellos en los que existen intercambio de

energía entre la radiación electromagnética y la
materia. En estos métodos se miden espectros,
generados por transiciones entre distintos niveles
energéticos.

Se caracterizan por no tener intercambio de energía

como consecuencia de la interacción materia-radiación
electromagnética
* En estos métodos, los principales mecanismos de
interacción implicados son la dispersión, refracción y
polarización.
REFRACTOMETRIA

4
REFRACTOMETRÍA

5
Velocidad de la luz
• La luz se propaga a una
velocidad tan grande, que se
pensó se propagaba
instantáneamente.
• La velocidad de la luz es la
mayor que se conocía, su
valor en el vacío es
2.997925x108 m/s,
prácticamente 3.0x108 m/s o
3.0x1010 cm/s.
• Con esta velocidad un rayo de
luz luminoso puede recorrer
el ecuador terrestre 8 veces
en un segundo. 6
Velocidad de la luz
La longitud de onda y la frecuencia
se relaciona con la velocidad de la
luz mediante la expresión:
𝐜
𝛌𝛖 = 𝐧
c= velocidad de la luz en el vacío
n= índice de refracción del medio
𝛌 = 𝐥𝐨𝐧𝐠𝐢𝐭𝐮𝐝 𝐝𝐞 𝐨𝐧𝐝𝐚
𝛖= frecuencia
ഥ= número de onda
𝛖
nvacío=1.000
nH2O= 1.333
𝟏 𝛖𝒏
ഥ = = [unidades, cm-1 ]
𝒗 𝝀 𝐜
E=h𝛖
7
 FUNDAMENTO

Indice de Refracción

Cuando un haz de luz que se propaga por un

medio ingresa a otro distinto, una parte del haz se
refleja mientras que la otra sufre una refracción,
que consiste en el cambio de dirección del haz.
Para esto se utiliza el llamado índice de refracción
del material, que nos servirá para calcular la
diferencia entre el ángulo de incidencia y el de
refracción del haz (antes y después de ingresar al
nuevo material). 9
El efecto de la refracción se puede observar fácilmente
introduciendo una varilla en agua. Se puede ver que
parece quebrarse bajo la superficie.

En realidad lo que sucede es que la luz reflejada por la

varilla (su imagen) cambia de dirección al salir del agua,
debido a la diferencia de índices de refracción entre el
agua y el aire.

L
 Índice de refracción

Aire i

n1Sen r =n2 Sen i

Medio del índice n

r
La medición de n se realiza con la
línea espectral de la luz amarilla
Sen i del sodio(línea D, 589 nm) y a T=
n = ------------ 20, 25 ó 40 ºC y se denota:
𝑇
𝐼𝑛𝑑𝑖𝑐𝑒 𝑑𝑒 𝑟𝑒𝑓𝑟𝑎𝑐𝑐𝑖ó𝑛 = 𝒏𝐷
Sen r
1
1
REFRACTOMETRÍA

14
 Es una técnica analítica que consiste en la medida del índice
de refracción de un líquido con objeto de investigar su
composición si se trata de una disolución o de su pureza si es un
compuesto único.

¿Que es la refracción?
Cuando se pone un lápiz en el agua, la punta del lápiz
aparece inclinada. Luego, si se hace lo mismo pero colocando el
lápiz en una solución de agua azucarada, la punta del mismo
aparecerá más inclinada. Este es el fenómeno de la refracción de
la luz.
 Origen de las señales
Un rayo de luz que pasa oblicuamente desde un medio hacia
otro de diferente densidad, cambia su dirección cuando traspasa
la superficie. Este cambio en la dirección se denomina refracción.
Cuando el segundo medio es más denso que el primero, el rayo
se aproxima a la perpendicular trazada sobre la superficie
divisoria en el punto de incidencia. La causa fundamental de este
cambio en la dirección se debe al cambio en la velocidad de la
luz que se hace más lenta cuanto más denso sea el medio por el
que pasa el haz.
 Información Cuantitativa y Cualitativa
✓ Los sólidos solubles
La concentración de sólidos solubles define el efecto de
la temperatura, la medición de estos representa uno de
los principales análisis a realizar durante la refractometría.
Este proceso constituye la piedra angular de diversos
procesos industriales como la elaboración de jugos.
✓ Grados Brix
Los grados Brix (símbolo °Bx) miden el cociente total
de sacarosa disuelta en un líquido. Por ejemplo, una
solución de 25 °Bx tiene 25 g de sacarosa por 100 g de
líquido.
✓ Grados Baumé
Un grado Baumé equivale a 17 gramos por litro de
azúcar o peso potencial de la muestra.
 Instrumentación
✓ Refractómetros
Los refractómetros son instrumentos de medición, en los
que éste fenómeno de la refracción de la luz se pone en
práctica. Ellos se basan en el principio por el cual, cuando
aumenta la densidad de una sustancia, el índice de
refracción aumenta proporcionalmente con la concentración
de la sustancia.

Figura 12:
Partes de un
refractómetro
 Calibración del Refractómetro

Antes de calibrar el instrumento, se debe asegurar de que en

el refractómetro, el agua y la muestra del fluido estén a
temperatura ambiente, ya que una calibración adecuada depende
de la temperatura. El procedimiento es el siguiente:
Colocar una gota de agua entre la cubierta de plástico (6) y el
prisma (7). Mantener el refractómetro horizontalmente y apuntar
a una fuente de luz. Observar en el ocular (1) y ajustar la perilla
de calibración de la escala (4) hasta que la línea límite, que
separa las áreas claras y oscuras de la escala, se encuentre
colocado en el cero sobre la escala.
 Refractómetros
Los aparatos más importantes se basan en dos
principios: refractómetros de ángulo límite o crítico y los
refractómetros de desplazamiento de imagen.

✓ Refractómetros de ángulo límite

En estos aparatos se observa el campo del ocular
dividido en una zona obscura y otra clara. La separación
entre ambas corresponde al rayo límite.

Figura 13:
Esquema de un
refractómetro de ángulo limite.
 ✓ Refractómetros Abbe
Los refractómetros Abbe se caracterizan por su sencillo
manejo y por unas cantidades de muestra reducidas. La
medición de las muestras sólidas o pastosas es igualmente
sencilla que la de las muestras líquidas.

Figura 14: Refractómetro Abbe.

✓ Refractómetros de
desplazamiento de
imagen
En estos aparatos se
mide el desplazamiento
del rayo refractado en
relación al rayo incidente,
en vez de medir el
desplazamiento de la línea
de separación entre la
zona clara y oscura debido
al ángulo límite.
 Ejemplo

✓ Determinación de la concentración de acetona.

Se miden en el refractómetro los índices n1 y n2 de

refracción de la acetona y del tetracloruro de carbono.
A continuación se preparan cinco disoluciones patrón.
Se miden los índices de refracción n de cada una de las
disoluciones y se representan en un diagrama cartesiano
en función de las concentraciones. Una vez obtenida la
recta representativa, se mide el índice de refracción de la
muestra desconocida, al cual corresponderá en la grafica
construida anteriormente, un valor c1 que será la
concentración de la acetona expresada en mol/Litro.
 Aplicaciones

✓ Para monitorizar la pureza del butadieno y estireno para

la fabricación del caucho.

✓ En la industria alimentaria para la semilla de soja o del

aceite de semilla de algodón

✓ El índice de refracción tiene muchas aplicaciones en el

campo de la Química, como la identificación de productos,
análisis cuantitativo de soluciones, determinación de la
pureza de muestras, y son útiles para determinar
momentos dipolares, estructuras moleculares y pesos
moleculares aproximados.
 Aplicaciones

✓ Esta técnica es usada con fines de identificación y

caracterización de aceites y grasas, en el control de la
pureza de los alimentos, en la medición de jugos
azucarados, determinación aproximada del contenido de
alcohol en licores, concentraciones de azúcar ,entre otros.

Es por todas estas razones, además de otras como

la facilidad de uso del refractómetro, el uso de poca
muestra, la obtención de resultados al momento,
etc. que el conocimiento de la refractometría es de
suma importancia al momento de analizar alimentos
y fármacos como jarabes.
 Es una técnica de análisis que consiste en medir la
actividad óptica de compuestos tanto orgánicos como
inorgánicos. Un compuesto es considerado ópticamente
activo si la luz linealmente polarizada sufre una rotación
cuando pasa a través de una muestra de dicho compuesto.

La Polarización
Es un fenómeno que puede producirse en las ondas
electromagnéticas, por el cual el campo eléctrico oscila
solo en un plano determinado, denominado plano de
polarización.

Figura 9: Polarización
de la luz.
 Rotación óptica o actividad óptica
Es la rotación de la polarización lineal de la luz cuando
viaja a través de ciertos materiales. Suele ser un
fenómeno que ocurre en soluciones que presentan
moléculas quirales tales como la sacarosa (azúcar).

Quilaridad
Es la propiedad que tienen ciertas moléculas de poder
existir bajo dos formas que son imágenes especulares la
una de la otra, es decir, una es la imagen reflejada en un
espejo de la otra.

Figura 10: Quilaridad.

 Rotación específica
La rotación específica de una sustancia química es
simplemente una rotación angular obtenida en condiciones
de medición estándar: concentración, longitud del tubo,
temperatura y longitud de onda. La mayoría de las
rotaciones específicas tiene como referencia la longitud de
onda del sodio, de 589 nm.
Cada sustancia ópticamente activa tiene su propia
Cada sustancia ópticamente activa tiene su propia rotación específica
rotación específica, determinada por la siguiente
determinada por la siguiente ecuación de Biots:
ecuación de Biots:
Instrumentación

Figura 11: Partes de un polarímetro.

Instrumentación

Partes de un polarímetro
 Origen de las señales
La luz polarizada es aquella que ha pasado a través de
un “polarizador”, que fuerza ondas electromagnéticas
aleatorizadas hacia un plano. Cuando esta luz polarizada
en un plano pasa a través de una sustancia ópticamente
activa, el PLANO de polarización se gira en una cantidad
que es característica de la sustancia examinada.

Figura 11 : Polarímetro.
 Información Cualitativa y Cuantitativa

La polarimetría es una técnica de alto rendimiento para

el análisis de líquidos ópticamente activos, como, por
ejemplo, las soluciones azucaradas, el ácido láctico o el
ácido tartárico. La medición del ángulo de giro de la luz
con polarización lineal al atravesar una sustancia
ópticamente activa pertenece al repertorio estándar de las
prácticas de laboratorio químicas, bioquímicas y
farmacéuticas. Estas ofrecen información valiosa acerca de
la estructura química, la quilaridad y la concentración de
una prueba.
 Fuentes de error

El ángulo de rotación de una sustancia ópticamente

activa puede ser afectada por:

✓Concentración de la muestra
✓Longitud de onda de la luz que pasa a través de la
muestra
✓Temperatura de la muestra
✓Longitud de la celda de muestra
Polarímetros más modernos tienen métodos para
compensar o controlar estos errores
 Ejemplo
✓ Determinación de la cantidad de sacarosa contenida
en una muestra.
Se preparan varias soluciones patrón de sacarosa en agua
en cantidades suficientes para poder llenar el tubo del
polarímetro. Es aconsejable preparar primero la disolución
mas concentrada y obtener a partir de ella, por dilución, las
restantes.
Se llena con cada una de ellas el tubo del polarímetro y se
mide el correspondiente ángulo de la luz polarizada. Las
lecturas deberán hacerse con el tubo completamente lleno de
disolución.
En un gráfico, se representará la variación lineal del ángulo
de giro (en ordenadas) con la concentración en las abscisas.
Una vez obtenido este grafico, se efectúa la medida del
correspondiente ángulo de giro de la luz polarizada que
ocasiona la muestra problema.
Aplicaciones
✓ La polarimetría puede ser usada para identificar
sustancias cualitativamente, así como caracterizar y
distinguir enantiómeros, medir la pureza o para llevar el
control de calidad en las industrias químicas y
farmacéuticas.
✓ El polarímetro es usado en la industria química,
farmacéutica, hospitales, institutos, universidades y
laboratorios de investigación ya que, midiendo la
rotación óptica de las sustancias orgánicas con la ayuda
del polarímetro, podemos conocer el grado de pureza,
concentración y contenido de cientos de materiales
activos ópticamente, como soluciones de azúcar,
trementina, aceites industriales, alcanfor, etc.
 *
La dispersión de la radiación es un fenómeno físico
mediante el cual, la radiación electromagnética, al incidir
sobre una suspensión de partículas, es desviada en su dirección
de propagación, de forma aparentemente caótica, en cada uno
de los núcleos de dispersión, dando como resultado radiación
dispersada en todas las direcciones del espacio.
Esta radiación dispersada, si es de la misma longitud de
onda que la fuente primaria se denomina dispersión elástica.
También es posible que los fotones incidentes interactúen
con las moléculas de tal manera que ganen o pierdan energía,
de modo que los fotones dispersados son desplazados en
frecuencia, y por tanto varíe su longitud de onda. Tal
dispersión se denomina inelástica o Raman.
 Mide la disminución de la potencia de la radiación
transmitida a través de una suspensión de partículas
utilizando para ello un espectrofotómetro.
Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que
haya una buena disminución de la luz transmitida). La
radiación transmitida se mide en la dirección del haz
incidente.

Figura 1: Situación del detector respecto a la dirección

del haz incidente.
 La dispersión elástica puede ser de varias formas,
según el tamaño de la partícula dispersante.
• Dispersión de Rayleigh: ocurre cuando las partículas
son muy pequeñas en relación con la longitud de onda de la
radiación (la dimensión máxima de las partículas inferior al
5% de la longitud de onda de la radiación).
Dispersión de Mie: se produce cuando la longitud de onda
es del mismo orden de magnitud que las partículas
dispersantes. Afecta a todas las longitudes de onda del
visible. La luz casi blanca que se aprecia alrededor del sol se
puede atribuir a la dispersión de Mie.
La dispersión de la luz depende de la longitud de onda de
la radiación incidente, del número de partículas, de su
tamaño y forma, y del índice de refracción de la partícula en
relación con el medio que la rodea.
 Los cálculos utilizados para conocer la potencia radiante de la
radiación son:
Pt = P0 * ℮-k * l * ρ
Donde:
Pt = potencia radiante de la radiación transmitida;
P0 = potencia radiante de la radiación incidente;
℮ = base de los logaritmos neperianos;
k = constante que depende del tamaño de la partícula y de la
longitud de onda;
l = longitud de la cubeta de reacción;
ρ = concentración de masa de las partículas de la solución o
suspensión.

Al aplicar el logaritmo, se tiene:

2,303 log (Pt /P0) =-k *l *ρ
 Reorganizando la ecuación, se tiene que:
-log (Pt /P0) = (k/2,303)*l*ρ

El coeficiente (k/2,303) se denomina coeficiente de

turbidez y se representa por la letra T.

Al sustituir T en la ecuación anterior se obtiene:

-log (Pt /P0) = T*l*ρ

−𝒍𝒐𝒈𝑻 = 𝝉 ∗ 𝜾 ∗ 𝝆
T la transmitancia es proporcional a la C de las
partículas dispersantes.
 Origen de las señales
Cuando un haz de luz monocromática, de longitud de onda
no absorbible choca contra las partículas de una sustancia
que está en suspensión, cambia la dirección de propagación
del haz de luz (en realidad sólo cambian de dirección algunos
fotones del haz).

Figura 2: Haz incidente sobre la muestra.

 Instrumentación
A) Fuente de radiación
Como fuente de radiación se utilizan lámparas de filamento de
wolframio, diodos fotoemisores e incluso, en nefelometría, donde es
importante que la fuente sea de gran potencia radiante, se emplean
tubos láser, con mezcla de helio-neón o helio-cadmio.
B) Selector de la longitud de onda
La longitud de onda debe seleccionarse adecuadamente para que la
absorción del medio se reduzca al mínimo. Como selectores de longitud
de onda se utilizan filtros o monocromadores
C) Celdas para la muestra
Las celdas para la muestra pueden tener diferentes formas y
tamaños. Generalmente son prismáticas o cilíndricas y suelen ser de
vidrio, con tapón roscado. Habitualmente llevan una línea indicando
hasta dónde deben llenarse.
D) Detector
Muchos aparatos pueden usarse indistintamente para medidas
turbidimétricas y nefelométricas, por lo que viene equipados con dos
detectores, una en línea con la fuente de radiación para medir la luz
transmitida y otro situado en un ángulo determinado, para captar la
radiación dispersada. Los detectores suelen ser tubos
fotomultiplicadores.
 Tratamiento de muestras
La turbidimetría puede realizarse en espectrofotómetros
de visible-Ultravioleta. Cuando la concentración de
partículas en suspensión se mide por turbidimetría, la
suspensión se pone en una cubeta similar a un tubo de
ensayo, que permite realizar las medidas de las energía
incidentes y transmitidas.

Figura 3: Esquema de un espectrofotómetro.

 Turbidímetros

Figura 4: Diagrama esquemático de un turbidímetro Du

Pont Modelo 430.
 Ejemplo

Tienen un interés especial las valoraciones

turbidimétricas, en las que se mide la turbidez de la
solución problema después de añadir incrementos
sucesivos de reactivos.
En el punto de equivalencia de la valoración, la turbidez
llega a su valor máximo, se afirma que este método de
detección del punto final permite alcanzar una exactitud de
2%.
El procedimiento tiene varias ventajas, entre ellas, la de
permitir el análisis de bajas concentraciones y la de
resolver la dificultad de hallar un indicador adecuado para
las valoraciones de precipitación.
 Aplicaciones
✓ La determinación de la turbiedad es de gran
importancia en aguas para consumo humano y en una
gran cantidad de industrias procesadoras de alimentos
y bebidas.

✓ Los valores de turbiedad sirven para determinar el

grado de tratamiento requerido por una fuente de agua
cruda, su filtrabilidad, la efectividad de los procesos
de coagulación, sedimentación y filtración, así como para
determinar la potabilidad del agua.
 Aplicaciones
✓ La turbidimetría como la nefelometría se utiliza para
medir concentraciones 10-4 y 10-9 mol/L. Unidades de
medida (NTU) Unidad nefelométrica de turbidez y la
(FTU) unidad de turbidez de la formazina.
✓ Tambien se aplican a la medida de la concentración de
determinadas especies químicas.
 Mide la luz dispersada en dirección distinta a la
luz emitida (generalmente con ángulos que oscilan entre
15 y 90º). Utiliza como instrumento el nefelómetro.
Se suele utilizar para concentraciones más
diluidas. Permite mayor sensibilidad con concentraciones
menores de partículas suspendidas. Constituye un método
más exacto para la medida de la opacidad.

Figura 5: Situación del detector en un ángulo de 90º

respecto a la dirección del haz incidente.
 Origen de las señales
La nefelometría se basa en la dispersión de la radiación
que atraviesan las partículas de materia. Cuando la luz
atraviesa un medio transparente en el que existe una
suspensión de partículas sólidas, se dispersa en todas
direcciones y como consecuencia se observa turbia.

Figura 6: Haz incidente sobre la muestra.

 Instrumentación

Figura 7 : Esquema de un nefelómetro.

La turbiedad es la resultante de la luz captada por la

fotocélula de situada a 90º, debido a la luz dispersa
producida por los sólidos en suspensión.
 Nefelómetro
Es un instrumento para medir partículas suspendidas en
un líquido. Esto lo hace empleando una fotocelda colocada
en un ángulo de 90° con respecto a una fuente luminosa.
La densidad de partículas es entonces una función de la luz
reflejada por las partículas a la fotocelda.

Figura 8 : Nefelómetros.
 Aplicaciones
✓ Se suele utilizar para medir concentraciones
específicas de colonias de bacterias en algún medio de
cultivo, o de muchas proteínas utilizando el principio de
dispersión luminosa molecular.

✓ Se utiliza en el análisis de la calidad química del agua

para determinar la claridad y para el control de los
procesos de tratamiento.
 Tamaño de las partículas dispersante

Para nefelometría, la intensidad de la radicación

dispersada a 90° será mayor cuanto menos sea el tamaño
de las partículas. Para partículas mayores, la intensidad de
la dispersión a 90°disminuye.
Para turbidimetría, fenómeno menos dependiente de la
λ, en cambio el tamaño de las partículas es menos
importante; en este caso la señal es la disminución
relativa de la radiación trasmitida.

Selección de la longitud de onda

Con esta selección se minimiza las posibles
interferencias
 Factores para la elección entre turbidimetría y
nefelometría

✓ Intensidad de la radiación
✓ Tamaño de las partículas dispersante.

¿Cómo diferenciar la turbidimetría y la

nefelometría?

En la turbidimetría se compara la intensidad del rayo de

luz que emerge con la del que llega a la disolución. En
cambio, en la nefelometría la medida de la intensidad de
luz se hace con un ángulo de 90º con respecto a la
radiación incidente.
¿Preguntas?