Transfusin Sangunea en Perro

MVCA Rafael A. Garca Lpez En la clnica prctica, la transfusin sangunea se encuentra muy a la mano como una alternativa para solucionar a corto plazo problemas de oxigenacin por falta de glbulos rojos, as como elevacin de la presin sangunea y alteraciones en la coagulacin. Trataremos de dar un enfoque muy aplicativo para el Mdico Veterinario que no cuenta con todos los recursos tecnolgicos del primer mundo, pero que si cuenta con las bases tericas y cientficas que el estudio proporciona y que est al alcance de todos. GRUPO SANGUNEO Se han descrito ms de 13 grupos sanguneos DEA (Dog Erythrocyte Antigen) , pero los sueros de tipificacin slo estn disponibles para 6 de ellos: 1,1, 1,2, 3, 4, 5 y 7. La tipificacin de la sangre en el perro suele realizarse en un laboratorio de referencia, pero ahora existe un sistema de tipificacin en tarjeta para determinar el estado DEA 1,1. Los aloanticuerpos naturales contra los grupos sanguneos no participaran en las reacciones transfusionales hemolticas agudas. El grupo DEA 1 tiene mltiples alelos, incluyendo DEA 1,1, 1,2, 1,3 y un tipo nulo; de stos, el DEA 1,1 sera el ms antignico. Si un donador es positivo para DEA 1,1, la transfusin puede sensibilizar al receptor 1,1 negativo, produciendo una reaccin transfusional si se administra una segunda transfusin DEA 1,1 positiva. Los ejemplares DEA 1,1 positivos deberan ser excluidos como donadores. Se sugiri que los perros donadores DEA 1,2 positivos sensibilizaran a los receptores que son negativos para l, pero no se publicaron informes de reacciones transfusionales en perros transfundidos con clulas DEA 1,2 positivas. El DEA 7 se considera estructuralmente relacionado a un antgeno bacteriano comn y un anticuerpo natural contra DEA 7 fue descrito en el 20 y 50% de los perros DEA 7 negativo. Algunos creen que la presencia de este anticuerpo redunda en la remocin prematura despus de la transfusin de las clulas DEA 7 positivas. De ste modo, se ha recomendado seleccionar donadores que sean DEA 7 negativos. Como el 98% de los perros tiene glbulos rojos DEA 4 positivos, los perros positivos para este antgeno y negativos para los restantes se han denominado Donadores Universales. Las reacciones transfusionales son probables si se emplea sangre positiva para DEA 1,1, 1,2 o 7 (los donadores deben ser negativos a stos) DEA Sist. Fac. de a. me. 1,1 A a1 41.3 1,2 a2 9.1 a3 9.1 3 B a 5.5 4 C a 99.8 5 D a 22.4 6 F a 100 7 Tr tr 40.7 o 31.1 J a 34.4 K a 2.0 L a 51.0

M a 19.0 N a 61.6 En los perros las reacciones son raras en la primera ocasin, se recomienda si es posible realizar pruebas cruzadas sobre todo en la segunda ocasin. INDICACIONES GENERALES PARA LA TRANSFUSIN Prdida aguda de sangre Anemia hemoltica aguda Anemia no regenerativa con hematocrito menor al 15% CoagulopatiasTrombocitopenia / Trombocitopata Leucopenia Alteraciones hipoproteinmicas (plasma) INDICACIN URGENTE Reduccin Rpida del volumen circulante (menor al 30%) Hematocrito menor al 20% Hemorragia o hemlisis continua Mala respuesta al tratamiento convencional Membranas mucosas plidas Tiempo de llenado capilar aumentado Taquicardia y/o Taquipnea (?) NOTA:Considerar el grado de anemia y la tasa de prdida de sangre, as como la respuesta de la mdula sea, mediante el recuento de reticulocitos en frotis de sangre erifrica o en aspirados de mdula sea. La causa de la anemia, debe proporcionar indicaciones pronsticas valiosas. Muchas veces se puede tener un perro como donador constante, pero hay que considerar las implicaciones legales y ticas con conlleva. ELECCIN DEL DONADOR Pesar Mas de 25 kg Edad entre 2 y 8 aos Tener un temperamento tranquilo, si no sedar (inmovilizacin qumica) Hematocrito mayor al 40% Macho de preferencia, ya que el % de glbulos rojos suele ser mayor Con el calendario vigente de vacunas (parvo, distemper, hepatitis, leptospira y rabia Libre de parsitos internos y externos. Estar clnicamente sano Hacer prueba de coagulacin con el corte de ua (ver tcnica mas adelante) Hacer prueba de gota gruesa para Microfilaremia y frotis de sangre perifrica para Babesia y Erlichia Pruebas cruzadas SI ES POSIBLE: Hemograma completo y perfil bioqumico Prueba de ELISA para Dirofilaria, Erlichia y Lyme (Test IDEXX)

Ser Negativo al grupo DEA 1,1, 1,2 (A), 7 Pruebas de coagulacin completas (TT y TTP y plaquetas), ya que la sangre recolectada puede servir como fuente de plaquetas y factores de coagulacin. PRUEBAS CRUZADAS Para disminuir las posibilidades de la aparicin de incompatibilidad sangunea se realizan dos procedimientos, la prueba mayor o principal y la menor. En la prueba cruzada mayor se colocan los eritrocitos del donador lavados 3 veces (ver procedimiento en el siguiente cuadro) en contacto con plasma o suero del receptor. En la prueba cruzada menor se colocan los eritrocitos del receptor y suero o plasma del donador. La aglutinacin o hemlisis resultante de la combinacin indica incompatibilidad entre el donante y el receptor. Si el tiempo lo permite, deben hacerse las pruebas cruzadas para perros a tres temperaturas diferentes; 4 C, 25 C y 37 C o al menos 25 C. En la versin en tubo de ensayo. Una centrifugacin ligera (1,000 r.p.m) por dos minutos despus del contacto entre los eritrocitos lavados y el suero, ayudar a demostrar la hemlisis. Procedimiento de compatibilidad 1. Recolectar 2 ml de sangre del donador y receptor en tubos con EDTA 2. Centrifugar las muestras a 1000 rpm por 5 minutos; 3. Con pipetas, conservar el plasma en tubos rotulados 4. Resuspender los eritrocitos en solucin salina hasta llenar el tubo, golpeando el fondo con el dedo 5. Centrifugar los eritrocitos y la sol. Salina por 5 minutos a 1000 rpm. Pipetear la solucin salina y descartar. 6. Repetir dos veces los pasos 4 y 5 7. Despus del tercer lavado, Preparar una suspensin de hemates al 2% con 0.02 ml de eritrocitos lavados y o.98 ml de sol. Salina. 8. Para cada potencial donador, mezclar 2 gotas de plasma receptor y 1 gota de suspensin de eritrocitos donadores en la prueba mayor. Mezclar con delicadeza. 9. Para la prueba menor, mezclar 2 gotas de plasma donador y 1 gota de suspensin de eritrocitos receptores. Mezclar con delicadeza. 10. Para el control del receptor, mezclar 2 gotas de plasma receptor con 1 gota de eritrocitos del receptor. Mezclar con delicadeza 11. Incubar los tubos a temperatura ambiente durante 15 minutos 12. Centrifugar durante 15 segundos a 1000 rpm 13. Observar el plasma por hemlisis 14. Resuspender las clulas centrifugadas sacudiendo con suavidad. 15. Observar acumulo de eritrocitos por aglutinacin. TIEMPOS DE SANGRADO THC (Tiempo de hemorragia de la cutcula)

Se hace una incisin en la pared vascular de una extremidad (se corta una ua). Se deja que la sangre se vierta libremente y se registra el momento en el que la sangre deja de fluir, en perros anestesiados el tiempo norma es de 6 minutos. Esto detecta erros hemoflicos, existen algunos hemoflicos que para el sangrado de 1-3 min., pero a los 5 vuelve a sangrar, despus de 15 min de sangrado se debe hacer hemostasia por medio de cauterio de calor o qumico y abandonar todos los planes quirrgicos, hasta que haya diagnstico. TCST (tiempo de coagulacin de sangre total)

Mide la va intrnseca de la coagulacin. Despus de sangrar al paciente se colocan 1 a 2 ml de sangre en 2 o 3 tubos de vidrio limpios y se pone en marcha un cronmetro. Se invierten los tubos cada 30 seg. Y se registra el tiempo que tarda la retraccin del coagulo. El tiempo normal es de 6.1 +-0.2 min. El vidrio acta como iniciador de la coagulacin y los fosfolpidos intervienen en la cascada de coagulacin; lo proporcionan las plaquetas, por lo tanto, en una Trombocitopenia grave esta prolongado. Indica adems hemofilia A y B , deficiencia de factores de la va intrnseca y comn, antagonistas de la Vit. K, Enf. Heptica y CID PARA ENVIAR AL LABORATORIO: (Tiempos de Coagulacin)

Realizar una buena tcnica de puncin ya que la tromboplastina tisular y la hemlisis pueden inicar la coagulacin, recolectarse en tubos con anticoagulante (citrato de sodio 3.8%) tapn azul en la proporciones correctas (9 a 1) TT (Tiempo de Trombina).- Es un mtodo preciso para cuantificar el fibringeno, tambin se prolonga cuando hay productos de degradacin del fibringeno y para protenas circulantes, que intervienen con la polimerizacin de la fibrina. TP (Tiempo de Protrombina).- Evala la va extrnseca y comn, por lo tanto se ve afectado por las deficiencias de los factores VII, X, V, II y fibringeno. El factor XII tiene la menor vida media y es el primero que se afecta con los raticidas anticoagulantes TTP (Tiempo de Tromboplastina).- Evala la va intrnseca y comn, como la prueba se hace en plasma pobre en plaquetas y durante la prueba se agregan fosfolpidos, no se ve afectada por trombocitopena TCNICA DE RECOLECCION Se recomienda siempre usar la vena yugular para la recoleccin, preparando la zona quirrgicamente (lavado, rasurado, lavado y embrocado), insertar la aguja en direccin craneal (emplear kits comerciales para extraccin, que vienen en bolsas de plstico hechas de cloruro de polivinilo, llenadas previamente con citrato fosfato, dextrosa y adenina a razn de 14 ml por cada 100 ml de sangre). La cantidad recogida no debe ser mayor de 20 ml/kg, con una frecuencia mxima de cada tres semanas. En nuestro consultorio, involucramos al propietario del paciente para conseguir al futuro donador, ya que no contamos con un banco de sangre. La sangre se puede almacenar hasta 3 5 das si se mantiene a 4 6 C o se pueden preparar varios productos de la sangre. La recoleccin de sangre se consigue usualmente llenando espontneamente la bolsa recolectora, procurando que se encuentre por debajo del nivel de la cabeza para

favorecer la gravedad, hay que agitarla constantemente para impedir la formacin de cogulos, mezclando adecuadamente el anticoagulante con la sangre donadora. ELEMENTOS A TRANSFUNDIR SANGRE TOTAL. Es la de mayor uso, se emplea en todos los tipos de anemia, coagulopatas y alteraciones plaquetarias. Se almacena hasta 30-35 das si se recoge con CFDA (CITRATO, FOSFATO, DEXTROSA, ADENINA). CONCENTRADO DE ERITROCITOS.Se emplea para el reemplazo de eritrocitos (Anemia crnica) especialmente si el paciente sufre de sobre carga de lquidos, adems junto con cristaloides en casos de prdida aguda de sangre. Estos se obtiene despus de que se ha transferido el 80% de plasma y CFDA-1 a la bolsa de transferencia, mediante un centrifugado a 5,000 r.p.m./15 min. Y refrigerada entre 3-6C hasta en 30 das. En la prctica, se deja reposar por una hora la sangre entera recolectada en la bolsa (con los eritrocitos sedimentados al fondo y el plasma sobrenadante), y sin agitarla, se coloca entre las paginas de un libro abierto; ste se va cerrando paulatinamente, mientras el plasma va saliendo por la entrada hacia la bolsa de transferencia o al vaco, si no se piensa conservar el plasma; quedando nicamente los eritrocitos aglomerados. PLASMA. Se prepara centrifugando la sangre total como para el concentrado de eritrocitos y separando el sobrenadante, se recomienda que sea durante las primeras 6 horas y se congela a -18C, se denomina plasma fresco congelado. Si se almacena a 40C dura hasta un ao y se emplea en la restauracin de los factores de coagulacin. Plasma congelado se le denomina al que se almacena despus de 6 hrs. de su recoleccin, todava contiene factor IX, pero se emplea como fuente de albmina. El Crioprecipitado, se prepara a partir del PFC tras una descongelacin prolongada seguida por la extraccin del plasma sobrenadante en un bolsa satlite. PLASMA RICO EN PLAQUETAS (PRP). Se prepara dentro de las 6 hrs. De recoleccin centrifugando ligeramente (2,000 r.p.m.) por 3 minutos y transfiriendo el sobrenadante a una bolsa satlite. La vida media es de 3 das si se almacena agitndola constantemente. CANTIDAD A TRANSFUNDIR La cantidad de sangre (ml) a transfundir se puede calcular usando la siguiente frmula: K x PC x ( hto n hto r)=S.T. hto d hto n=Hto Necesario hto r=Hto Receptor hto d=Hto Donador S.T.=Sangre a Transfundir (ml) En donde K es un factor multiplicador relacionado con el volumen de sangre de cada especie (88 para perros, 66 para gatos), PC es el peso corporal del receptor en Kg y el

Hto (Hematocrito) del donante se determina teniendo en cuenta el anticoagulante. EJEMPLO: RECEPTOR: Perro labrador 1 ao HUNTER con 12% Hto 15 kg DONADOR: Criollo 4 aos SOLOVINO con 42% Hto 27 KG 88X15=1320X2512=.30=396ml 42 Al Donador entonces le vamos a sacar 396 ml de sangre, las bolsas recolectoras las encontramos para 500 ml, 250 ml y 100 ml, por lo tanto, tenemos 2 opciones: Recolectar partes de la bolsa de 500 ml (al tanteo)que seran 375 ml o recolectar la bolsa completa de 500 ml y ministrarle al tanteo los 396 ml de sangre entera; Teniendo en cuenta que al donador de 27 kg le podemos obtener hasta 540 ml con la recomendacin de 20 ml/kg como mximo. Recomendamos aplicarle al donador 10 mg/kg de sulfato de hierro. El Hematocrito ideal para el clculo oscila entre el 25 y 30%, no se recomienda llegarlo al rango normal (37-50%), ya que la cantidad de sangre resulta muy alta y es probable que el paciente no est acostumbrado a tanta oxigenacin, hay que tomar en cuenta la patologa. PARA MINISTRAR LA SANGRE DONADORA Emplear va endovenosa, ceflica o yugular Mariposa o catter # 20 o mayor Calentar a temperatura ambiente no mas de 37C No se recomienda bombas peristlticas por la hemlisis Emplear venoclisis con filtros que secuestren cogulos Si el paciente es pequeo o hipotenso, emplear Mdula Osea. A razn de una gota por minuto La velocidad de infusin depende del paciente, pero en los primeros 30 min. 0.25 ml/kg y aumentar a criterio sin exceder 5ml/kg cada hora. Esta cantidad se puede aumentar discrecionalmente en pacientes hipovolmicos, hasta 20 ml/kg/h y reducir a 0.5-1 ml/kg/h cuando hay problemas cardiovasculares. La simplicidad relativa de los sistemas de grupos sanguneos en los perros y la baja incidencia de isoanticuerpos naturales en esta especie, ha permitido a los veterinarios casi ignorar las compatibilidades de grupos sanguneos en sus pacientes, especialmente en la primera transfusin. Se recomienda poner mas nfasis en la eleccin de sangre donante, que debe ser al menos negativa con respecto al DEA 1. Otro problema es la seleccin del donante, especialmente en la consideracin con la transmisin de enfermedades. Se deben dirigir los esfuerzos a la produccin de sangre y productos sanguneos sin riesgo. Otros productos y otras tcnicas estarn cada vez ms a disposicin de los veterinarios en el futuro, como la autotransfusin, el Factor VIII recombinante, la eritropoyetina y otros factores estimuladores de la medula sea y los transportadores sintticos de oxgeno.

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