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Universidad Nacional de Barranca

Facultad de Ingeniería
Dpto. Acad. Ciencias Básicas y Afines

UNIVERSIDAD NACIONAL
DE BARRANCA

PRÁCTICA N° 11

2022
1
Dr. Julio César Chávez Galarza
M. Sc. Carlos Enrique Condemarin
Montealegre
Universidad Nacional de Barranca
Facultad de Ingeniería
Dpto. Acad. Ciencias Básicas y Afines

NÚCLEOS CELULARES

INTEGRANTES:

Gonzales Pajuelo, Alvaro

Salazar Carreño, Jhon Toledo

Curi, Soledad Vega Parada,

Mirella Vega Principe, Lia

ESTUDIOS GENERALES

PROFESOR: Valdez Báez, Juan

SECCIÓN: “9”

CICLO: II

Barranca, Perú

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Dr. Julio César Chávez Galarza
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Montealegre
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OBSERVACIÓN DE NÚCLEOS CELULARES


I. INTRODUCCIÓN
Al preparar sangre para microscopia se extiende primero una gota pequeña sobre una
laminilla de vidrio y se deja que seque. Se requiere mucha práctica y cuidado para
obtener un buen frotis. Después del secado, se fijan las células y se tiñen. Se emplea
metanol como fijador seguido de tinción con uno de los colorantes de Romanowsky.
Estas tinciones se preparan a partir de mezclas de azul de metileno y eosina por
métodosque involucran la producción de colorantes púrpura (azur), que son productos
de la oxidación del azul de metileno. El colorante Leishman se emplea comúnmente en
Inglaterra y el colorante de Wright en E.U.A. Una vez diferenciados los linfoblastos en
linfocitos, los monoblastos en monocitos, y los mieloblastos en polimorfonucleares o
granulocitos (basófilos, neutrófilos y eosinófilos), la concentración de leucocitos totales
en sangre se encuentra entre los 4500 y 11000 unidades por milímetro cúbico. En la
médula ósea hay una gran reserva, de modo que puede triplicar este número. Esta
reserva se moviliza (y se multiplica) en situaciones de estrés o en una infección. La
división principal, los deja de la siguiente manera:

Hay cinco tipos de glóbulos blancos: Los neutrófilos son el tipo más común de glóbulo
blanco. Estas células van al lugar de una infección y liberan sustancias llamadas
enzimas para combatir las bacterias o los virus invasores Linfocitos. Hay dos tipos
principales de linfocitos: Linfocitos B y T. Los linfocitos B combaten las bacterias, las
toxinas o los virus invasores. Los linfocitos T atacan y destruyen las células propias que
han sido infectadas por virus o por células cancerosas.
Los monocitos eliminan las sustancias extrañas y las células muertas y estimulan la
respuesta inmunitaria del cuerpo Los eosinófilos combaten las infecciones, la
inflamación y las reacciones alérgicas. También defienden al cuerpo contra los
parásitosy las bacterias Los basófilos liberan enzimas para ayudar a controlar las
reacciones alérgicas y los ataques de asma. La fórmula leucocitaria normal en el ser
humano es: Neutrófilos: 50-70
%, Linfocitos: 20-40 %, Monocitos: 2-8 %, Eosinófilos: 1-4 % y Basófilos: 0-1 %

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Los colorantes policromos de azul de metileno y eosina derivados del método original
de Romanowsky sirven para la tinción diferencial de la mayoría de las estructuras
normales y anormales de la sangre. La mayor parte se disuelven en alcohol metílico y
combinan la fijación y la tinción. Se han ideado numerosos métodos para la preparación
y aplicación de estos colorantes siendo los más conocidos los de Giemsa y Wright. El
colorante de Wright, es policromático porque produce varios colores. Es una solución de
alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). Los
núcleos y algunas otras estructuras de las células se tiñen con el colorante básico, por lo
que se denominan basófilas; ciertas estructuras solo toman el colorante ácido y se
llaman acidófilas, oxífilas o eosinófilas. Algunas otras estructuras se tiñen por una
combinación de ambos y se denominan neutrófilas. El colorante de Wright es uno de
losmejores y más empleados, permitiendo la identificación de los diferentes tipos de
células sanguíneas.

II. OBJETIVOS
 Reconocer las diferentes formas nucleares en tejido sanguíneo.
 Ubicar e identificar los palillos de tambor en los leucocitos neutrófilos.

III. MATERIAL Y MÉTODOS

3.1. Proporcionado por el laboratorio:


 Colorante Wright
 Buffer 6.8- 7.2.
 Placas Petri
 Laminas portaobjetos.
 Laminas cubreobjetos.
 Microscopio compuesto
 Aceite de inmersión
3.2. Proporcionado por el alumno:
 Lancetas
 Algodón
 Alcohol al 70%
 Guantes
 Gorro quirúrgico descartable

3.3. Procedimiento:
3.3.1. Obtención y frotis de la muestra de sangre.
1. Desinfectar el dedo cordial (medio) con el algodón embebido con la solución
de alcohol, esperar que se volatilice.

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2. En el lado externo del dedo, hacer una punción con firmeza y rapidez
utilizando la lanceta estéril.

3. Colocar una gota de sangre en una lámina portaobjetos y hacer la extensión de la


sangre con un movimiento suave y firme con otra lamina portaobjetos.

Limpiar la primera gota de sangre Sangre en el porta objeto

4. Dejar secar al medio ambiente durante 1 a 5 minutos.

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3.3.2. Coloración y observación de la muestra.
5. Cubrir el frotis completamente con el colorante de WRIGHT durante 5 minutos.

6. Sin tirar el colorante agregar el buffer de fosfatos ph 7.2 durante 5 minutos.

7. Desechar el colorante y lavar con la sol. Buffer o con agua corriente.

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8. Secar al calor moderado.


9. Observar al microscopio con el objetivo de inmersión, previamente colocar una
gota de aceite de inmersión.

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Resultados:
1. En la primera imagen como se observa podemos ver los glóbulos pero no se
pueden identificar ya que están muy agrupados y también porque con el objetivo
10x (10) es su máxima capacidad de zoom.
2. En la segunda imagen se observa los glóbulos más dispersos, pero aún no se
pueden identificar, en la imagen 3 podremos observar mejor y hasta identificar
qué tipo de leucocitos es.
3. Bueno en la tercera imagen ya podemos ver claramente que leucocito es,
identificamos que pertenece a los neutrófilos Segmentados ya que se
caracterizan por tener núcleo violeta oscuro y citoplasma rosado, son células
comunes en la sangre ya que se encargan del sistema inmunitario y nos protegen
contra agentes extraños.

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Resultados:
1. En la primera imagen como se observa podemos ver los glóbulos, pero no se
pueden identificar ya que están muy agrupados y también porque con el objetivo
10x (10) es su máxima capacidad de zoom.
2. En la segunda imagen se observa los glóbulos más dispersos, pero aún no se
pueden identificar, en la imagen 3 podremos observar mejor y hasta identificar
qué tipo de leucocitos es.
3. La tercera imagen ya podemos ver claramente que leucocito es, identificamos
que pertenece a los linfocitos ya que tienen como característica el núcleo purpura
y el citoplasma azul celeste, es un tipo de célula inmunitaria, se encuentra en la
sangre y el tejido linfático.

Conclusión Grupal:
Mi grupo llego a la conclusión que en la sangre existen muchas clases de leucocitos que
nos ayudan a combatir infecciones y otras enfermedades, como podemos observar en las
dos muestras anteriores donde solo pudimos identificar dos clases de leucocitos: Los
neutrófilos Segmentados y Linfocitos, no pudimos identificar más por el motivo de falta
de tiempo y algunos factores secundarios.

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Cuestionario:
 ¿Cuál es la composición del colorante WRIGHT?
Segun (Biopack® Productos Químicos - WRIGHT (Solución Para Microscopía),
s. f.) nos dice que clásicamente es una mezcla de tintes de eosina (rojo) y azul de
metileno. Lleva el nombre de James Homer Wright, quien desarrollo el método
basado en una modificación de la tinción de Romanowsky.

 ¿Qué función cumple el Buffer 7?0 en la coloración de Wright?


La página web (SOLUCIÓN BUFFER PH 7 X 500 ML - LOVIBOND | Matraz.Pe, 2021)
nos dice que la Solución Buffer se utiliza para mantener constante el PHen
mezclas a las que se le han añadido ácidos o bases fuertes y así amortiguar los
cambios producidos por estas adiciones, para asegurar el éxito de la reacción.

 Elaborar maquetas sobre replicación, transcripción y traducción y explicar en


clase la próxima sesión.

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