Ruta Endocítica

Asociación entre mecanismos de

La endocitosis internalización y degradación lisosomal
consiste en la
La endocitosis comienza con el
formación de
reconocimiento del cargo ubicado en el
vesículas en la
extracelular por la membrana plasmática.
membrana
Empieza entonces las formación de la
plasmática para
vesícula en donde se requiere una gran
que elementos
cantidad de proteínas ya que la
puedan entrar
modificación de la membrana no es un
a en la célula. El
proceso fácil, posteriormente la vesícula
contenido de
se yema con ayuda de GTPasas.
las vesículas no
entra directamente al citoplasma si no La vesícula adentro pierde su cubierta de
que a un compartimiento membranoso. clatrinas y empieza a reunir con otras
vesículas formando endosomas
Funciones endocitosis:
tempranos, en los cuales al haber un pH
 Incorporación de nutrientes: más ácido se separa el ligando del cargo.
lipoproteínas, algunas vitaminas,
complejos macromoleculares,
transferrina, etc.
 Limpieza del medio extracelular: ej.
en casos de infecciones, los restos
son incorporados y degradados
dentro de la célula.
 Regulación de respuestas activadas
por ligandos/señalización: Se tienen
ciertas vías de señalización que están
reguladas por la ruta de endocitosis.
 Inmunidad: Las células
presentadoras de antígeno requieren
de la endocitosis.
 Infección viral: los virus se apropian
de algunas rutas endocíticas para su
incorporación y replicación.
 forma inactivada (activando). Y las
proteínas que inactivan son las que
ayudan a hidrolizar el GTP a GFP: las
GAP (GTP Activating Protein).

Dentro de las GTPasas están las Rho,

con 3 principales miembros: RhoA,
Rac1 y Cdc42. Estas regulan
principalmente la dinámica del
citoesqueleto de actina.

Existen diversas vías de entrada a la Particularmente en el caso de la

célula por eventos de internalización de fagocitosis, son muy importantes las
membrana. GTPasas de la familia Rho que regulan el
citoesqueleto de actina. La unión de la
Fagocitosis bacteria con el seudópodo inicia una vía
de señalización, la cual genera que
empiecen a haber cambios en el
citoesqueleto de actina; los fosfatidil-
inositol (PIP) son importantes en este
proceso, ya que al ser fosforilados por la
PI 3-kinasa, forman el PI(3,4,5)P3. Este
cambio genera un cambio de la
distribución de la actina.

Es un proceso gatillado por la interaccion

de la partícula a fagocitar y receptores en
la célula. En esta se puede observar una
movilización de la membrana plasmática
que empieza a rodear al material a
fagocitar. Es un proceso que posee 3
etapas: Atrapamiento, Internalización y
Degradación.

Se usan GTPasas pequeñas, las cuales son

interruptores moleculares, que poseen un
bolsillo de unión a GTP, al cargarse este
con GTP se activan, y al ser este
hidrolizado a GDP son desactivadas. Las
GEF (GTP Exchange Proteins) ayudan a la
entrada de GTP, expulsando el GFP de la
Endocitosis mediada
por cavéolas

Cabe mencionar que las caveolinas

siempre están asociadas a balsas lipídicas,
pero no viceversa. Además, que la
endocitosis mediada por caveolas es un
ejemplo de que no siempre son
requeridas las GTPasas para endocitar.

Las caveolas son estructuras ricas en

proteínas, así como en lípidos como el
colesterol y los glucoesfingolípidos;
tienen varias funciones en la transducción
de señales. Corresponden a una fuente de
endocitosis independiente de clatrina.

La formación de estas se debe

principalmente a las caveolinas , que son
proteínas de membrana que se asocian y
estabilizan a dominios de membrana ricos
en colesterol y glucoesfingolípidos, o sea
balsas lipídicas. El citoesqueleto además
ayuda como fuerza motriz para la
formación de caveolas.

Como ejemplo. El virus SV40 puede ser Endocitosis mediada

internalizado vía cavéolas: este interactúa
con la membrana plasmática, lo que
por clatrinas
Se necesitan receptores que expongan en
induce a la fosforilación en las caveolinas
el lado citoplasmático de la membrana
y cambios en los PIPs que inducen
secuencias que reconozcan proteínas
cambios en el citoesqueleto de actina
adaptadoras las cuales tengan sitios para
reclutar a la clatrina.

La endocitosis mediada por receptor es

un método eficiente debido a que los
receptores se concentran en un dominio
de membrana, por lo tanto, concentran
una gran cantidad de cargo para entrar
simultáneamente; esta concentración
depende de la capacidad de los
adaptadores. Las proteínas no
citoplasmático único, con un motivo de
reconocidas por los adaptadores no son
internalización de 4 aminoácidos llamado
incluidas en la formación de la vesícula.
NPXY (ubicado en el dominio
citoplasmático, la cola pequeña en la
imagen) el cual es reconocido por
proteínas adaptadoras (Dab2 y ARH), que
son a su vez capaces de reconocer a
clatrinas.

La estructura y ensamblaje de la clatrina

se da mediante el ensamblaje poliédrico
de los triskelions (esta organización de
las cadenas es la forma en que se
encuentran al estar solubles en la célula)

Receptores endocitados en la
ruta mediada por clatrina
Existen varios tipos de familias que son
receptores del proceso, un ejemplo es la
familia del receptor LDL. Este receptor se
une a lipoproteínas de baja densidad, las
Entonces, los receptores se unen a la
cuales se encargan del transporte de
lipoproteína (aunque no requieren los
colesterol. Estos receptores se encargan
receptores estar unidos a esta para ser
de unir apolipoproteínas y de unir
endocitados), se forma la vesícula
múltiples ligandos; todos estos receptores
cubierta de clatrina, la cual
poseen la particularidad de poseer un
posteriormente pierde la cubierta, y
dominio transmembrana y UN dominio
cuando se llega al endosoma -producto Se encontró que en estas familias existían
del pH más acídico- se genera la defectos en el receptor que impide la
disociación del receptor de la unión con la lipoproteína. A veces había
lipoproteína. posibilidad de que las lipoproteínas se
unían a la superficie celular (si hay
(la interaccion lipoproteína receptor es
receptor) pero estas no eran
óptima a pH 7)
internalizables. Así se encontraron
La lipoproteína se mantiene en este múltiples mutaciones. En las células que
endosoma que madura a un endosoma no internalizaban había cambios de
tardío y termina fusionándose con el aminoácidos/mutaciones que afectaban al
lisosoma, en donde la lipoproteína libera dominio de internalización NPxY, que
todo su contenido. Por el otro lado, el impedían la internalización de las
receptor entra en dominios tubulares, en lipoproteínas.
donde se genera un reciclaje de estos
Se han ido descubriendo segmentos de
devolviéndolos a la mb plasmática;
internalización para distintas familias de
proceso que es mediado por también
receptores.
reconocimiento de señal.

La fisión de membrana posteriormente es Proteínas adaptadoras

catalizada por la GTPasa dinamina. Son aquellas que tienen la capacidad de
reconocer los motivos de internalización.
Receptor de LDL e Entre los más reconocidos en la célula se
hipercolesterolemia familiar encuentran los heterotetrámeros de la
familia de los AP. (Ej. AP2). En los
adaptadores en general es la subunidad
mu es la que reconoce el motivo del
receptor, tiene la capacidad de reconocer
el triskelio de la clatrina y además tiene a
capacidad de unir PIP 4,5-bfosfato (lípido
de membrana)

Liberación de la cubierta
La cubierta es muy estable por lo que,
para eliminar la clatrina y adaptadores, se
ha visto que existen 2 proteínas: la Hse70,
una ATPasa que permite por hidrolisis la
En el estudio de las LDL se encontró que liberación de los triskelios de clatrina de
en familias con hipercolesterolemia sus los adaptadores y la sinaptojanen, la cual
fibroblastos son mucho menos eficientes es una PIPl fosfatasa la cual modifica la
en internalizar las lipoproteínas, así se composición de la membrana PIP 4-5
llegó y descubrió al receptor de LDL. bifosfato sacando el fostato-5 y con eso
se pierde la afinidad/interaccion de los
adaptadores.

temprano es la Rab5 la cual tiene

muchos efectores, entre los cuales esta
EEA1.

Los endosomas tempranos se

caracterizan por tener Rab5.

Reciclaje vs
degradación en la ruta
Los receptores y ligandos al llegar al
endosoma pueden tomar 2 vías: reciclaje
o degradación. En el endosoma temprano
es donde se toma esta decisión de sorting,
para esto son necesarias señales en las
proteínas. Así existen dominios en los
sistemas endosomales, los cuales son
funcionales y estructurales.

En el endosoma temprano se tienen 2

dominios fácilmente diferenciables: uno
Luego de que la vesícula pierde la tubular donde están generalmente las
cubierta necesitamos que llegue al proteínas que siguen la ruta de reciclaje
endosoma, aquí se necesitan las proteínas (ej. receptor de transferrina) y pueden
de tethering, una de las proteínas más tomar la vía rápida de reciclaje mediada
importantes en la vía endocítica es el por Rab4 o la ruta lenta, donde se lleva la
complejo EEA1 (Early Endosome proteína al endosoma juxtanuclear que
Antigen) el cual caracteriza a los está marcado con la Rab11 y desde este se
endosomas tempranos y junto con otras tienen vesículas que van hacia la
proteínas forman el complejo docking. La membrana. El otro dominio globular del
GTPasa que domina al endosoma endosoma temprano se relaciona con la
vía de degradación hacia los lisosomas.
Reciclaje de proteínas
Funciones: Existen muchas mutaciones asociadas a
los transportadores que se manifiestan en
 Recuperación de receptores y
fallas en el sistema de reciclajes de
membrana previamente
proteínas, por ejemplo: se produce daño
internalizados
renal al tener fallos en el transportador
 Adición de membrana en
de Cl-5 en el riñón.
condiciones de expansión: como
migración celular, crecimiento de Existe una gran importancia del pH en los
neuritas y conos de crecimiento, compartimientos, ya que el pH influye en
aumento del tamaño celular con la asociación/disociación de ligando-
espinas dendríticas, división receptor
celular, adhesión celular, etc.
En el caso de la LDL, se tiene la
 Transcitosis: reciclaje a dominio
separación de esta con el receptor en el
opuesto de la membrana, ocurre en
endosoma de sorting, donde el receptor
células polarizadas.
es reciclado para ser devuelto a la mb;
Es importante tener en cuenta el mientras que el ligando se queda en el
gradiente de pH que existen en los dominio que va adquiriendo cada vez más
organelos de la ruta: a medida que se características de un endosoma tardío (ej.
avanza en la ruta con el ligando, el pH se cambio de Rab5 por Rab7) y este
va acidificando, lo que va activando las endosoma tardío es el que tiene las
hidrolasas lisosomales (pH optimo vesículas intraluminales que terminan
4,5~5). Estos distintos pH intraluminales fusionándose con el lisosoma para
son logrados por la existencia de degradar la LDL
proteínas de membrana en endosomas y
También es
lisosomas: Bomba de H+ (V-ATPasa);
importante el
NHE3; el sistema de co-transporte de
caso de la
Na+/H+ ; transportador de Cl_ que
transferrina,
permiten neutralizar las cargas de los H +
en donde se
funcionando
disocia el Fe+2
como
pero no la
contraiones.
apotransferrina
de su receptor
(por efecto del
pH), con lo que
ambos son
transportados hacia la membrana También existe tráfico retrogrado de
plasmática. proteínas, por ejemplo, el receptor de
manosa-6-fosfato el cual va al endosoma
llevando enzimas lisosomales y después

SORTING se devuelve en un tráfico retrogrado a

trans-golgi.

Con respecto a los complejos celulares

encargados del reconocimiento de
distintas señales provenientes de los
receptores: Muchas proteínas que llegan a
la mb del endosoma poseen secuencias
Dentro del endosoma temprano ocurre la para no solo ser internalizadas, si no
definición de la ruta que tomaran las también recicladas, funcionando en este
proteínas. Cuando las proteínas llegan al caso como secuencias de reconocimiento
endosoma temprano, este es para complejos de proteínas [Retromero,
caracterizado por tener a la Rab5, ya Comander] que se ubican en la membrana
llevan es su estructura algún tipo de del endosoma y que les permite entrar a
información que les permite ya sea entrar los dominios tubulares para seguir la ruta
a los dominios tubulares marcados por de reciclaje. Pero, si estas proteínas
Rab4 y entrar a la ruta de reciclaje, ya poseen modificaciones postraduccionales
sea yendo directamente a la mb de ubiquitinación, la marca de ubiquitina
plasmática o pasando por los endosomas es reconocida por el complejo ESCRT que
de reciclaje lento caracterizados por
Rab11 ; y si traen otro tipo de
información las proteínas pueden entrar
en el sistema formación de vesículas
interluminales, las cuales van a generar el
endosoma tardío marcado por Rab7 el
cual llegara al lisosoma.
las llevara a las vesículas intraluminales
para ser degradadas.
Posee sitios de unión para los PIP
Así el endosoma temprano posee presentes en el endosoma temprano. Con
microdominios que participan en la el dominio PX (sitio unión PIP 3-fosfato)
segregación de cargos en la mb se puede unir al endosoma temprano. El
endosomal dominio.

Las clatrinas que se observan tienen la Si un receptor esta mutado en la

función de estabilizar la membrana en la secuencia NPXY o sea el motivo de
zona que al madurar pierde la Rab5 por la endocitosis, no hay interaccion entre
Rab7 y se forman las vesículas SNX17 y el receptor, por lo que se afecta
intraluminales, haciéndola más rígida, el reciclaje del receptor disminuyendo la
evitando así la formación de túbulos. localización de este en la membrana al no
estar reciclándose. Si hay una
Sorting Nexinas sobrexpresión de SNX17 aumenta el
Proteínas que poseen dominios número de proteínas favoreciéndose la
estructurales/funcionales. Pueden tener ruta de reciclaje.
la capacidad de unir lípidos, algunos de
deformar mb al tener el dominio BAR ApoER2 es otro receptor de la familia del
(importantes en la formación de túbulos), receptor LDL y LRP, e igualmente
tubularla, formar complejos con otras interactúa y se colocaliza con SNX17 en
proteínas, y reconocer motivos en los endosomas tempranos.
receptores.
Retrómero y Retriever
Sorting Nexin 17
El retromero lleva proteínas de vuelta a
La SNX17 forma parte del complejo
Golgi, como el receptor manosa-6-fosfato,
Commander como un adaptador, tiene un
y también lleva proteínas hacia la mb
dominio de unión a la membrana que le
plasmática dependiendo del cargo. Esta
permite asociarse al endosoma temprano,
diferencia depende principalmente de
y un dominio fERM (B41) que le permite
proteínas Sorting Nexinas.
reconocer motivos en los receptores que
van a entrar a los dominios tubulares. El complejo Retriever forma parte del
complejo Comander, donde actúa la
SNX17.

Transcitosis
Es un caso particular de endocitosis
y reciclaje que ocurre en células
polarizadas, epiteliales,
endoteliales y neuronas. O sea,
células que poseen dominios de Receptores involucrados en señalización
membrana funcionalmente distintos, celular
como el dominio apical y basal en una
Tienen 2 funciones: la función de unir
célula de endotelio. Así se tienen
ligando a través de sus dominios
endosomas basolaterales y apicales. La
extracelulares, y la de activar vías de
transcitosis corresponde a cuando las
señalización. Muchos de estos receptores
proteínas internalizadas por un dominio
poseen actividad kinasa, es decir son
de origen son devueltas a otro dominio.
capaces de fosforilar a otras proteínas, la
Esto depende principalmente del
cual se activa muchas veces al receptor
receptor, el ligando y el proceso.
unirse a su ligando, produciendo además
En las células del epitelio intestinal ocurre la dimerización del receptor. Como pasa
transcitosis en la internalización de las con el EGF que al dimerizarse se produce
inmunoglobulinas para la inmunización una trans fosforilación, donde una cola
pasiva. citoplasmática fosforila a la otra, ahora el
receptor fosforilado es capaz de unir
distintas proteínas, que le permiten

Ruta Degradativa de activar vías de señalización, activar su

entrada a la ruta de endocitosis, y
proteínas ubiquitininarlo para activar su entrada a
Funciones: la vía de degradación.

 Obtención de nutrientes Una vez que el receptor esta ubiquitinado

 Control de vías de señalización va a entrar a los dominios donde se van a
empezar a formar las vesículas
Las vías de señalización tienen que ser
intraluminales. En el endosoma las
acotadas en el tiempo, no pueden estar
proteínas ESCRT reconocen al receptor
siempre activas por lo tanto una de las
ubiquitinado y produce la unión
formas de regular esto, es que el ligando y
secuencial de otras proteínas del
el receptor sean degradados. Proteínas
complejo, así se produce una invaginación
así que en la vía de internalización se ven
que requiere de actividad ATPasa, la
fosforiladas o ubiquitinadas van a ser
ubiquitina sale antes de este proceso ya
reconocidas por la maquinaria ESCRT, y
que es reusada. El receptor así entra en
serán degradadas.
las vesículas sin la ubiquitina.
Endosomas de señalización
En estos los receptores pueden seguir
señalizando desde dentro de la celula, y
teniendo la capacidad de reclutar a
multiples proteínas. Así hay receptores
que pueden recibir señalización de una
manera en la mb plasmática, y de otra en
los endosomas.

Un ejemplo de la utilidad de esto es que

en las neuronas la señalización es mas
rápida encontrarse adentro de la celula y
poder viajar via microtubulos hacia el
nucleo para generar cambios, lo cual es
mucho mas rapido que una senalizacion
por segundos mensajeros desde la
membrana