A.1.

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Fisiología del desarrollo de semillas: capacidad de germinación y tolerancia a la
desecación.
Aunque gran parte del interés humano por las semillas se asocia con su composición a
partir de un punto de vista nutricional, el propósito biológico de una semilla es
eventualmente germinar y establecer una nueva planta. Así, el desarrollo de la capacidad
de germinación, y en la mayoría de los casos, de la capacidad de mantener esta capacidad
después de la deshidratación y dispersión, son aspectos importantes de la maduración de
la semilla. En general, la capacidad del embrión para germinar si se quita prematuramente
de la fruta se desarrolla relativamente temprano, antes de la acumulación de peso seco
máximo. Sin embargo, en esta etapa las semillas pueden no sobrevivir a la deshidratación.
Posteriormente se desarrolla tolerancia a la desecación y el vigor de la semilla (es decir,
tasa de germinación) sigue aumentando. La deshidratación prematura en esta etapa
puede realmente mejorar la germinación en comparación con las semillas tomadas
directamente de la fruta sin el secado. La deshidratación (o incluso una pérdida de agua
relativamente leve) cambia la semilla de un modo de desarrollo de la expresión génica en
un modo germinativo (Kermode, 1995). Por lo tanto, incluso si las semillas se cosechan
prematuramente, después de secarlas y rehidratarlas, las semillas iniciarán la germinación
en lugar de continuar expresando el programa de maduración. El último componente de la
calidad de la semilla que se desarrolló es la capacidad de prolongar la supervivencia en el
campo seco estado, o longevidad en almacenamiento (Sanhewe y Ellis, 1996b).

Maduración y latencia
Dado que las semillas tienen la capacidad de germinar relativamente temprano en el
desarrollo si son retiradas de la fruta, ¿qué les impide germinar prematuramente? Muchas
semillas se vuelven latentes durante la fase de maduración media, lo que evita su
germinación hasta después de que se desprenden de la planta madre. En muchos casos,
esta latencia persiste después de la dispersión y requiere que se cumplan condiciones
específicas antes de que la germinación ocurra (ver Capítulo 14). Estudios con plantas que
tienen mutaciones en genes relacionados con La biosíntesis o percepción de hormonas
han demostrado que el ácido abscísico (ABA) es un importante regulador del desarrollo y
la latencia de las semillas (Koornneef et al., 2002). En varias especies, mutaciones que
bloquean la síntesis de ABA (o aplicaciones de la síntesis de ABA inhibidores durante el
desarrollo) dan como resultado semillas que exhiben menos latencia (germinación en el
fruto). En casos extremos donde tanto la síntesis de ABA como la percepción se ha
bloqueado, las semillas no acumulan cantidades normales de almacenamiento reservas,
no desarrollan tolerancia a la desecación, retienen la clorofila y son altamente no dormido
y propenso a la viviparia (Koornneef et al., 1989; DeBruijn et al., 1997). Los estudios
genéticos mostraron que el ABA sintetizado por el embrión es esencial para la inducción
de la latencia, aunque ABA suministrado a través de la planta madre o aplicado
externamente podría revertir parcialmente otros síntomas de deficiencia de ABA.

A nivel molecular, ABA estimula la expresión de muchos genes asociados con desarrollo de
semillas (Bewley y Black, 1994). Semillas extraídas de la fruta y incubado en medios
artificiales continuará sintetizando proteínas de almacenamiento si ABA es regalo.
Además, la expresión de genes relacionados con la movilización de reservas suele ser
inhibido por ABA (por ejemplo, α-amilasa). En el algodón, ABA induce un subconjunto
particular de genes durante el desarrollo de la semilla, y su expresión sigue de cerca los
cambios en el contenido de ABA (ver Figura 3.5A; Hughes y Galau, 1989). En la mayoría de
los casos, el contenido de ABA alcanza un máximo aproximadamente en el momento de la
tasa máxima de crecimiento de la semilla, luego disminuye más tarde en desarrollo a
niveles bajos en la madurez (Kermode, 1995). Sensibilidad de la germinación a ABA
muestra un patrón similar, con mayor sensibilidad en el desarrollo de semillas y
sensibilidad disminuyendo a medida que las semillas se acercan a la madurez (Welbaum y
Bradford, 1990; Still y Bradford, 1998). En el momento en que el contenido de ABA y la
sensibilidad están disminuyendo, la deshidratación de las semillas también ha comenzado,
y el potencial hídrico reducido también previene la germinación. En algunos cereales
como el trigo, la latencia disminuye hasta el punto que la lluvia tardía en la semilla el
desarrollo puede desencadenar una germinación prematura (brotación antes de la
cosecha), reduciendo la calidad del grano.
En semillas que maduran dentro de una fruta húmeda (como tomate o melón), la
humedad de la semilla el contenido no disminuye en la madurez, aunque las semillas son
tolerantes a la desecación y germinable. Se evita que tales semillas germinen
precozmente en la fruta por tanto los controles hormonales temprano en el desarrollo
(ABA) como por el potencial osmótico de la fruta tardía en desarrollo (Welbaum y
Bradford, 1990; Berry y Bewley, 1991, 1992). La calidad máxima de la semilla coincide
estrechamente con el inicio de la maduración del fruto y la semilla declinaciones de
calidad en frutos demasiado maduros (Welbaum, 1999). Semillas de tomate deficientes en
ABA han reducido la latencia y pueden germinar vivíparos en frutos demasiado maduros
debido a su disminución de la sensibilidad a la inhibición osmótica (Groot y Karssen, 1992;
Ni y Bradford, 1993).
Tolerancia a la desecación
Además de las principales reservas de almacenamiento, se utilizan proteínas y azúcares
específicos sintetizado tardíamente en el desarrollo de la semilla que puede estar
asociado con el desarrollo de tolerancia a la desecación o longevidad de la semilla.
Algunas de estas proteínas se han denominado tardíamente proteínas abundantes en
embriogénesis (LEA) porque se acumulan en las últimas etapas del desarrollo de semillas
(ver Figura 3.5B). Estas proteínas se conservan ampliamente en especies y pueden
agruparse en varias familias homólogas. Se caracterizan por una composición de
aminoácidos hidrófilos, haciéndolos altamente solubles en agua y resistente a la
desnaturalización a altas temperaturas. Curiosamente, estas mismas proteínas (p. Ej.,
deshidrinas) también se acumulan en otras partes de la planta cuando se somete a
pérdida de agua o otros tipos de estrés ambiental y en respuesta a ABA. Mientras que el
preciso el mecanismo sigue siendo desconocido, las proteínas LEA pueden actuar para
mantener las proteínas y / o conformación de la membrana durante la deshidratación.
Existe considerable evidencia correlativa que estas proteínas desempeñan un papel en la
adaptación o protección de la deshidratación y otras condiciones estresantes. Por
ejemplo, se ha vinculado un alelo de deshidrina específico en el caupí con una capacidad
mejorada de las semillas para germinar y emerger a bajas temperaturas (Ismail et al.,
1999).
Los azúcares y oligosacáridos específicos también se acumulan tarde en el desarrollo de la
semilla que puede estar asociado con la tolerancia al estrés. La sacarosa es generalmente
la más abundante azúcar soluble en semillas maduras, mientras que los azúcares
reductores como la glucosa y la fructosa son prácticamente ausente. Muchas semillas
también acumulan rafinosa, estaquiosa, verbascosa y oligosacáridos relacionados
formados por la adición de sucesivas unidades de galactosa a sacarosa (Obendorf, 1997;
Peterbauer y Richter, 2001). Trabajar con levadura y otros organismos ha demostrado de
manera convincente que el disacárido trehalosa desempeña un papel crítico en la
tolerancia a la desecación (Crowe et al., 1992). La molécula de trehalosa tiene
exactamente la estructura correcta para interpolar entre los grupos de cabezas polares del
fosfolípidos de membrana a medida que se pierde agua (Figura 6.2). El reemplazo del agua
por la trehalosa mantiene la estructura bicapa de la membrana en estado seco. Similar La
trehalosa puede mantener la estructura terciaria de las proteínas durante la
deshidratación, previniendo su despliegue y desnaturalización. Las semillas no contienen
trehalosa, pero sacarosa, posiblemente junto con los oligosacáridos, puede realizar la
misma función en la conservación estructura de membrana y proteína. Además, estos
azúcares pueden promover la formación de un estado vidrioso en tejidos secos. Un vidrio
es un estado sólido amorfo que tiene un muy alto viscosidad. La presencia de un vidrio
ralentiza enormemente las reacciones químicas que pueden conducir a degradación de los
componentes de la semilla, y también previene la fusión de la membrana que interrumpir
la compartimentación celular (Buitink et al., 2002). Dado que las semillas deben estar
bastante secas antes de que se pueda formar un vidrio, es poco probable que el estado
vidrioso contribuya a la desecación tolerancia per se. Sin embargo, el estado vítreo
probablemente contribuya a la longevidad de la sequedad semillas (Leopold et al., 1994;
Buitink et al., 2000b). En cuanto a las proteínas LEA, las específicas Contribuciones de los
oligosacáridos a la tolerancia a la desecación de las semillas y la longevidad en condiciones
secas. El estado sigue sin estar claro (Bentsink et al., 2000; Buitink et al., 2000a;
Gurusinghe y Bradford, 2001).
La última etapa del desarrollo de la semilla es generalmente la deshidratación hasta el
equilibrio con el medio ambiente (algunas excepciones se señalarán posteriormente). Al
hacerlo, las semillas pasarán a través de varios niveles críticos de humedad que afectan la
actividad metabólica y pueden causar daño a los tejidos intolerantes (Figuras 6.3, 6.4). En
algunas semillas, se produce la deshidratación. rápidamente en sólo unos pocos días,
mientras que en otros, particularmente aquellos dentro de frutas carnosas, la
deshidratación ocurrirá durante un período más prolongado. La tolerancia a la desecación
contribuye para la dispersión de semillas y permite que una especie sobreviva durante
períodos desfavorables para la planta crecimiento. Muchas semillas también exhiben
mecanismos de dispersión relacionados con la desecación del tejido, tales como
mecanismos que expulsan las semillas de la fruta al secarse o permiten que se
transportados por el viento o los animales.

Semillas recalcitrantes
Si bien la mayoría de las semillas son tolerantes a la desecación en la madurez, las semillas
de muchas especies no lo son. Por lo general, tienen una vida útil muy limitada en
almacenamiento y mueren el secado. Estas semillas, denominadas recalcitrantes debido a
la dificultad de almacenarlas, incluyen muchos cultivos perennes de importancia
económica, como té, café, cacao, cítricos, mango, caucho, palma aceitera y coco (Chin y
Roberts, 1980). Mientras más recalcitrante las semillas se adaptan a los climas tropicales,
muchas especies de árboles templados de semillas grandes también producir semillas
recalcitrantes. La corta vida de las semillas recalcitrantes plantea graves problemas para la
conservación a largo plazo del germoplasma de estas especies.
El término "recalcitrante" en realidad abarca una amplia gama de desecación de semillas
tolerancia y comportamiento de almacenamiento. En las formas más extremas, como
manglares, semillas el desarrollo procede directamente de la maduración a la
germinación, saltándose la fase de deshidratación completa y realmente germinando
mientras aún está unido a la madre planta. En otros casos, la semilla puede tolerar un
grado limitado de deshidratación y puede ser almacenado durante semanas o meses, pero
no se puede secar hasta el equilibrio con el ambiente relativo humedades o congelados.
Algunas semillas tienen un tipo de comportamiento intermedio en el que pueden estar
deshidratados a contenidos de agua relativamente bajos, pero son muy sensibles al daño
durante la imbibición o en temperaturas frías. Parece haber una amplia gama de
tolerancia a la desecación y comportamientos de almacenamiento entre las diversas
especies clasificadas como recalcitrante (Kermode y Finch-Savage, 2002).
Semillas recalcitrantes para identificar las causas del daño durante deshidratación y, por lo
tanto, proporcionar información sobre los mecanismos por los cuales la desecación la
tolerancia se logra en semillas ortodoxas (es decir, semillas tolerantes a la deshidratación).
Reciente revisiones (Pammenter y Berjak, 1999; Buitink et al., 2002) han identificado
varios factores que contribuyen a la tolerancia a la desecación de los tejidos vegetales: (1)
características fisicas de las células, como volumen vacuolar reducido; (2) regulación del
metabolismo vías para prevenir la generación de agentes dañinos durante la
deshidratación; (3) antioxidante sistemas para prevenir daños por radicales de oxígeno;
(4) acumulación de protección proteínas y solutos, como proteínas LEA, azúcares y
moléculas anfipáticas; (5) mecanismos para prevenir la fusión de membranas; y (6) el
funcionamiento de los sistemas de reparación durante la rehidratación (Figura 6.5). Por el
contrario, las semillas recalcitrantes a menudo son deficientes en una o más de estos
mecanismos. Por ejemplo, muchas semillas recalcitrantes tienen un alto contenido de
agua. contenido en la madurez con grandes vacuolas presentes en las células. Durante la
deshidratación, la pérdida de volumen en sí misma puede resultar en daños estructurales
mecánicos que no se pueden corregido tras la rehidratación.
Las semillas recalcitrantes también aparentemente no pueden regular sus procesos
metabólicos durante la deshidratación para prevenir desequilibrios metabólicos que
pueden dar lugar a la generación de compuestos dañinos, como los radicales reactivos de
oxígeno (Hendry et al., 1992). Alternativamente, pueden carecer de sistemas
antioxidantes eficientes para prevenir el daño de tales oxidantes. Mientras que algunas
semillas recalcitrantes no se acumulan Proteínas de tipo LEA, otras lo hacen (Finch-Savage
et al., 1994; Farrant et al., 1996). Similar, hay una gama de acumulación de azúcares y
oligosacáridos en semillas recalcitrantes (Lin y Huang, 1994). Por lo tanto, es difícil
identificar las causas específicas de la falta de tolerancia a la desecación en semillas
recalcitrantes, y puede ser el resultado de una combinación de factores. Parece que al
menos dos componentes clave están involucrados en la desecación. tolerancia: la
capacidad de atravesar contenidos intermedios de agua sin incurrir disfunción metabólica
y daño oxidativo, y la capacidad de prevenir o mejorar la efecto de la eliminación de agua
sobre la estructura de membranas y macromoléculas.