Practica N03 Organica III

UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
Curso : Química orgánica III
Docente : López Parra Ronal Rosendo
Estudiante : Pérez Vega Williams Jesús
Lima, Perú
2022- II
Práctica N° 03 de Química Orgánica III
Identificación de carbohidratos por CCF.
PROCEDIMIENTO
Para realizar esta actividad se debe encontrar en un laboratorio con todas las condiciones de
seguridad e implementos necesarios.
 El primer paso es someter a hidrolisis en este caso en medio acido.

 Disponer de 2 matraces preparados.
 Colocar las muestras en un matraz previamente filtrado.
 En un matraz se colocar 1 g de sacarosa.
 En otro matraz se coloca 1 g de almidón.
 Se añade a ambos matraces 10 ml de ácido Sulfúrico al 5 %.
 Se coloca el matraz cuando ya esta hirviendo por un tiempo de 20 minutos.
 Mover constantemente la sacarosa para evitar que se queme.
 Luego enfriar los hidrolizados con agua corriente y neutralizarlos con suficiente
cantidad de carbonato de calcio.
Disponer de cubetas cromatografías en capa fina:
 Preparar las placas cromatográficas utilizando como soporte silicagel G.

 Se calienta el silicagel G activándolo para el sembrado.
Se tienen estas formas de revelación, caracterización.
 Sembrar las placas con patrón de glucosa 10 gotas versus los hidrolizados 20 gotas en
la cubeta cromatografía.
 Preparar los siguientes sistemas de solventes: n-butanol, agua, ácido acético.
 El reactivo revelador Antrona, caracteriza los glúcidos.

 Pulverizar los cromatogramas con una solución (0,150 g) en 20 mL de etanol, ácido
acético, ácido sulfúrico concentrado y calentando las placas de 5 a 7 minutos en la
estufa a 110 ºC.
 Todos los glúcidos dan manchas de color verde de diferente tonalidad.
 El reactivo revelador Difenilamina, caracteriza a las aldohexosas y aldopentosas.

 Pulverizar los cromatogramas con una solución de 0,400 g de difenilamina y 1 g de
ácido tricloroacético disueltos en n butanol metanol (1:1).
 Calentar los cromatogramas en la estufa a 110 ºC
 Difenilamina: Caracteriza a las aldohexosas de color marrón y aldopentosas de color
violeta.
 El reactivo revelador acido 3,5 dinitrosalisilico (DNS). Caracteriza a los azúcares

reductores.
 Pulverizar los cromatogramas con 0,100 g de ácido 3-5-dinitrosalicílico y 0,800 g de
hidróxido de sodio disueltos en 20 mL de agua.
 Calentar las placas a 110 ºC por 5 minutos en la estufa.
 Los azúcares reductores dan manchas de color marrón sobre un fondo amarillo paja.
CONCLUCION
Se llega a la conclusión que sacarosa es disacárido, compuesto por fructosa y glucosa a través
de un enlace O -glucosídico α1, β2 con liberación de una molécula de agua. En la hidrólisis de
la sacarosa, por lo tanto, se forman una molécula de glucosa y otra de fructosa.
La glucosa no tiene trayectoria y solo se observa la coloración en su marca.
Es almidón es polisacárido, compuesto por amilopectina y amilosa, si sigue azul no reacciono y

si cambia a ámbar si hubo hidrolisis.
AMILOSA, constituye de un 15-20% del almidón soluble en agua, da color azul con el yodo,
Cadena no ramificada de unidades de D glucosa unidas por enlaces (α 1→4), Un extremo
reductor y uno no Reductor.
AMILOPECTINA, constituye un 80-85% del almidón insoluble en agua da color rojo a púrpura
con el yodo, Cadena ramificada de unidades de D-glucosa unidas por enlaces (α 1→6) en cada
ramificación, insoluble en agua da color rojo a púrpura con el yodo.
CUESTIONARIO
1. Realice las ecuaciones químicas y el fundamento de las reacciones de identificación

de la glucosa por CCF.
El ácido sulfúrico forma un ion hidronio, el cual ataca al oxígeno del enlace glucosídico. Al
protonarse, el oxígeno adquiereuna carga positiva, es decir deficiencia de electrones, para
estabilizarseatrae los electrones del enlace CO de la glucosa. esenlace CO se rompe y se forma
fructosa. El carbono 1 de la glucosa es deficiente en electrones por lo que el oxígeno
delcarbono 5 forma un doble enlace estabilizando al carbono 1. Luego una molécula de agua
ataca al carbono 1 y los electronesdel doble enlace regresan al atomo de oxigeno del carbono
5. El oxigeno unido al carbono 1 tiene carga positiva y paraestabilizarse libera un protón el cual
se une a una molécula de agua formando el ion hidronio inicialmente usado (elcatalizador se
regenera).
La prueba Antrona es para determinar la naturaleza del azúcar problema, por su polaridad la
glucosa no tiene trayectoria y solo se observa la coloración en su marca.
La prueba de difenilamina identifica aldosas y cetosas, Las aldopentosas dan manchas

violáceas y las aldohexosas manchas marrones, reduce a la glucosa.
La prueba de ácido 3-5-dinitrosalicilico identifica azúcares reductores, oxida a la glucosa
obteniéndose acido D-glucónico.
En la CCF determina en cuanto en el proceso exista una interacción de la fase móvil, fase
estacionaria y la estructura del compuesto.
2. ¿Por qué el uso del tipo de solvente y revelador en la CCF de los carbohidratos?
Hidrólisis de carbohidratos: Es la separación de un disacárido o polisacárido en unidades mas

sencillas conocidas como monosacáridos, ocurre en medio ácido o en medio enzimático.
Reacción del Lugol: Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto
con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma un color
azul-violeta característico.
Cromatografía
Entre los métodos cualitativos y cuantitativos para determinación de carbohidratos, se

encuentra la cromatografía. Esta técnica es de considerable importancia ya que su efectividad
radica en hacer separaciones de sustancias mucho muy semejantes entre sí estructuralmente
como son los isómeros y los estereoisómeros, así como separar sustancias diferentes.
3. Indique otros reveladores para identificar azúcares por cromatografía en capa Fina.
Generalmente se utiliza como reactivo revelador yodo, el cual forma complejos coloreados,
con los componentes orgánicos (con tonos amarillo-marrón). Asimismo, existe otro reactivo
revelador bastante utilizado, es el ácido sulfúrico, que reacciona con los componentes
orgánicos, produciendo manchas negras.
4. ¿Qué otros métodos cromatográficos se aplican para identificar carbohidratos? De

ejemplos (Adjunte cromatogramas, gráficos o figuras)
Se han informado diferentes métodos analíticos para la determinación de carbohidratos:
 Determinación de carbohidrato totales por espectrofotometría UV (método de fenol-

sulfúrico).
 Determinación de azucares reductores totales por espectrometría UV (método acido
dinitrosalicílico).
 Determinación de azucares por el método óptico de polarimetría.
 Determinación de azucares (glucosa, sacarosa, fructosa) por HPLC (cromatografía
liquida de alta resolución).
 Determinación de azucares por espectroscopia por infrarrojo cercano.
Bibliografía
 Obiols RM, Oncins G, Sanz F, Tadros TF, Solans C, Levecke B, Esquena J. 2017.
Investigation of the elastic and adhesión properties of adsorbed hydrophobically

modified inulin films on latex particles using Atomic Force Microscopy (AFM). Colloids
and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects.
 Ozkan AD, Topal AE, Dikecoglu FB, Guler MO, Dana A, Tekinay AB. 2017. Probe
microscopy methods and applications in imaging of biological materials. Seminars in
cell & developmental biology. Academic Press.

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Docente : López Parra Ronal Rosendo

Estudiante : Pérez Vega Williams Jesús

Identificación de carbohidratos por CCF.

 El primer paso es someter a hidrolisis en este caso en medio acido.

Disponer de cubetas cromatografías en capa fina:

 Preparar las placas cromatográficas utilizando como soporte silicagel G.

Se tienen estas formas de revelación, caracterización.

 El reactivo revelador Antrona, caracteriza los glúcidos.

 El reactivo revelador Difenilamina, caracteriza a las aldohexosas y aldopentosas.

 El reactivo revelador acido 3,5 dinitrosalisilico (DNS). Caracteriza a los azúcares

La glucosa no tiene trayectoria y solo se observa la coloración en su marca.

Es almidón es polisacárido, compuesto por amilopectina y amilosa, si sigue azul no reacciono y

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La prueba de difenilamina identifica aldosas y cetosas, Las aldopentosas dan manchas

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