Agr Che Zap 2020
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FACULTAD DE AGRONOMÍA
ESCUELA PROFESIONAL DE AGRONOMÍA
TESIS
PRESENTADA POR:
LÍNEA DE INVESTIGACIÓN:
PIURA, PERÚ
2020
DEDICATORIA
A Dios creador del universo, por ser mi guía espiritual, por darme una
familia hermosa y por darme la dicha de seguir aprendiendo nuevas cosas.
A la Universidad Nacional de Piura que nos abre sus puertas y nos prepara
en nuestra formación profesional.
RESUMEN
ABSTRACT
INTRODUCCION 1
CAPITULO I 2
ASPECTOS DE LA PROBLEMÁTICA 2
1.1 DESCRIPCIÓN DE LA REALIDAD PROBLEMÁTICA 2
1.2 JUSTIFICACIÓN E IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIÓN 2
1.3 OBJETIVOS 3
1.3.1. Objetivo general 3
1.3.2. Objetivos específicos 3
CAPITULO II 4
MARCO TEÓRICO 4
2.1 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIÓN 4
2.2. BASES TEÓRICAS 5
2.2.1. Origen y taxonomía 5
2.2.2. Descripción botánica de la planta de banano 5
2.2.3. Factores ambientales 8
2.2.4. Pudrición de la corona 9
2.2.4.1 Síntomas 10
2.2.4.2 Hongos asociados 10
2.2.4.3. Ciclo de la enfermedad 11
2.2.4.4. Fuentes de inóculo 11
2.2.4.5. Control de la pudrición de la corona en banano 12
2.3 GLOSARIO DE TÉRMINOS BÁSICOS 14
2.4. HIPOTESIS 16
2.4.1 HIPOTESIS GENERAL 16
2.4.2 HIPOTESIS ESPECÍFICAS 16
CAPITULO III 17
MARCO METODOLOGICO 17
3.1. ENFOQUE Y DISEÑO 17
3.2. MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS 17
3.2.1. Detección de fuentes de inóculo 17
3.2.2. Transporte y almacenamiento de las muestras 17
3.2.3. Procesamiento de muestras 18
3.2.4. Aislamiento e identificación de hongos 18
3.2.5. Ensayo de biofungicidas y extractos vegetales a nivel in vitro 18
3.2.5.1. Descripción de los biofungicidas 18
3.2.5.2. Descripción de los extractos vegetales 19
CAPITULO IV 28
4.1. RESULTADOS Y DISCUSION 28
4.1.1. Detección de fuentes de inóculo 35
4.1.2. Características microscópicas de los hongos detectados 38
4.1.3. Biofungicidas y extractos vegetales en condiciones de in-vitro 38
4.1.3.1. Efecto frente al hongo Thielaviopsis paradoxa 38
4.1.2.2. Efecto frente al hongo Colletotrichum musae 42
4.1.2.3. Efecto del biofungicida Bio - Splent in vitro 46
4.1.3. Biofungicidas y extractos vegetales en frutos 47
4.1.4.1. Efecto frente al hongo Thielaviopsis paradoxa 47
4.1.4.2. Efecto frente al hongo Colletotrichum musae 49
CAPITULO V 53
CONCLUSIONES 53
CAPITULO VI 54
RECOMENDACIONES 54
CAPITULO VII 55
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 55
ANEXOS 60
ÍNDICE DE CUADROS
Nº Pág.
Nº Pág.
CUADRO Pág.
Nº
In the department of Piura, the rotting disease of the crown in banana fruits
has been generating economic losses for the producers. The objectives were: To
evaluate the effect of commercial biofungicides and plant extracts at the in vitro
level and on banana fruits for disease control, to detect sources of inoculum of the
associated fungi. It was carried out in the Phytopathology laboratory of the
National University of Piura and in the ASPROSOL Cooperative, District of La
Matanza. For the in vitro test, the technique "poisoned medium" was used,
products were added at different doses in erlenmeyers with PDA medium (50 °C),
homogenized and poured 20 ml into Petri dishes, allowed to solidify and planted.
agar plus mycelium of fungi. The control was seeded without biofungicides. The
plates were incubated at 25 °C±1, mycelial growth was measured and culminated
when the control covered the surface of the medium. For the fruit test, an
inoculum was obtained as a suspension of conidia at a concentration of 1 x 104
CFU/ml of fungi T. paradoxa and C. musae. Biofungicides were prepared at a
commercial dose. Inoculation of fungi and product application was carried out
with sprinklers, the fruits were packed in cardboard boxes, incubated in
refrigeration (T° 13 °C) for 21 days. To detect sources of inoculum, different
infected tissues were collected (leaves, inflorescences, fruits, remains of rachis of
clusters, etc.). Under in vitro conditions, canelys 100% inhibited fungi T.
paradoxa and C. musae, and timorex 100% inhibited the fungus C. musae. In
fruits the lowest severity was obtained with the treatment of the absolute control
(water) followed of the extract of Aloe vera against both fungi T. paradoxa and C.
musae.
Key words: Biofungicides, plant extracts, crown rot, inoculum sources, severity.
INTRODUCCION
1
CAPÍTULO I
ASPECTOS DE LA PROBLEMÁTICA
2
La importancia del presente trabajo radica fundamentalmente en que los
productores continúen en el camino de la agricultura orgánica, se pretende
determinar el mejor biofungicida o extracto vegetal y la mejor dosis de aplicación
para disminuir los daños de la pudrición de la corona en banano, así mismo
detectaremos las fuentes de inoculo de los hongos asociados a dicha enfermedad.
1.3. OBJETIVOS
3
CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
4
síntomas de infección en diferentes proporciones, concluyendo que la pudrición
de la corona es una enfermedad de etiología compleja.
Carchipulla, (2018) en el trabajo de investigación titulado: “Efecto
antifungico del aceite esencial de árbol de té y gel de aloe vera sobre la pudrición
corona en banano”, concluye que con el uso de 5 ml de gel Aloe vera + 0.15 ml de
aceite esencial de árbol de té, se puede sostener la calidad y presentación de la
fruta de banano, además de ser una alternativa ecológica amigable con el medio
ambiente.
El centro de origen del banano silvestre es el sureste de Asia y las islas del
Pacifico, extendiéndose desde la india hasta Papua Nueva Guinea, incluyendo
Malasia e Indonesia (De Langhe, 1996).
a) Planta
Herbácea perenne gigante, con rizoma corto y tallo aparente, que resulta de
la unión de las vainas foliares, cónico y de 3.5 – 7.5 m de altura, terminando en
una corona de hojas.
5
b) Sistema radicular
c) El cormo
6
c) Las hojas
d) Pseudotallo
e) Inflorescencia
f) Fruto
8
vegetativo se alarga y pasa de 8.5 meses en plantaciones bien expuestas a la luz,
hasta 14 meses en plantas que crecen en sombra.
d) Viento: los plátanos toleran vientos hasta de 40 kilómetros por hora,
velocidades de 20 a 30 kilómetros por hora producen un leve desgarre en las hojas
que no afectan el rendimiento, si la plantación no está bien nutrida pueden
provocar doblamiento de la planta. Vientos con una velocidad mayor a 50
kilómetros por hora pueden producir desenraizamiento y doblado de la planta,
causando pérdidas del 60 al 100%. A nivel mundial se puede estimar una pérdida
de cosecha del 20 al 30% por efectos del viento.
e) Suelo: se requieren suelos con profundidad no menor a 1.2 m., sin problemas
internos de drenaje, de textura franco arenosa muy fina, franco limoso o franco
arcillo limoso y un pH de 5.5 a 7.0. (CENTA, 2010).
9
complejo de especies de Fusarium, Cephalosporium, Lasiodiplodia theobromae
entre otros (Ploetz y Correll, 1988).
2.3.4.1 Síntomas
11
2.2.4.7. Control de la pudrición de la corona en banano
b. Biofungicidas
12
El control biológico en la etapa de postcosecha tiene ventajas significativas
en relación al biocontrol bajo condiciones de campo, ya que los dos factores más
importantes que tienen que ver con el éxito del biocontrol son la temperatura, la
humedad relativa constantes y la facilidad de acceso. Estos factores reducen la
variabilidad en el biocontrol, haciendo que el sistema sea más sencillo en cuanto a
su manejo (Janisiewicz, 2000).
c. Extractos vegetales
Estudios presentan que los aceites esenciales, tienen una acción antifúngica
en el hongo Penicillium spp. (Cartaya Díaz et al., 2011).
13
Gel de sábila (Aloe vera)
Control: cualquier método que reduzca o limite el daño causado por una
enfermedad o una población de plagas.
14
Efecto anti fúngico: capacidad que tiene una sustancia de evitar el crecimiento de
algunos tipos de hongos o incluso de provocar su muerte.
15
Raquis: es un residuo de cosecha subutilizado y poco aprovechado, el cual se
distribuye de manera dispersa en los puntos de cosecha del sembrío.
2.4. HIPOTESIS
16
CAPÍTULO III
MARCO METODOLÓGICO
17
3.2.3. Procesamiento de muestras
18
Cuadro 1. Características de los biofungicidas que se emplearon a nivel in vitro y en
frutos para el control de la enfermedad de pudrición de la corona del banano.
Se utiliza preventiva-
Extracto de Atlántica
mente para mantener alta
Canelys canela 70 % Agrícola S.A.
resistencia de la planta del
ataque de patógenos.
Bacillus
Silvestre Perú
subtilis Antagónica a diversos 1 x 109
Bio splent S.A.C.
AP-01 patógenos de plantas. UFC/g
Preparación de extractos
19
Para el tratamiento con el aceite esencial de té, se compró producto
comercial envasado en pequeños pomos.
% de inhibición= (C-T/C)*100
Dónde:
T: Crecimiento del micelio (diámetro) en cada tratamiento
C: crecimiento del micelio en el testigo
21
a. Evaluaciones
Para las evaluaciones, cada placa se dividió en cuatro partes, trazando dos
líneas perpendiculares cruzadas en la base de las placas, estimándose el
crecimiento radial del micelio en cuatro lados (a, b, c, d). La inhibición del
crecimiento micelial por tratamientos se evaluó cada 24 horas, hasta que el
tratamiento testigo cubriera toda la superficie del medio.
Tratamientos 10
Error experimental 33
Total 43
22
3.2.5.4. Ensayo de biofungicidas en frutos
a. Obtención de inóculo
b. Preparación de biofungicidas
Para cada uno de los biofungicidas comerciales se extrajo con una pipeta
estéril la dosis correspondiente de cada tratamiento y se diluyó en vasos
precipitados conteniendo agua estéril de 100 ml, posteriormente se mezcló cada
producto y se depositó en botellas asperjadoras.
23
cajas de cartón de 18.4 kg con bolsas polypak, posteriormente las cajas se
incubaron en cámara de refrigeración (T° 13°C) por un tiempo de 21 días.
e. Evaluación de severidad
24
Cuadro 6. Escala del grado de severidad para evaluar la pudrición de la
corona en frutos de banano (Douglas, 1997).
Grado de
Características
severidad
0 No hay pudrición en la corona del fruto
1 Micelio visible en la corona.
Micelio cubriendo enteramente la corona e
2
iniciando una decoloración.
3 Superficie necrótica de un 40% de la corona.
4 Superficie necrótica de un 80% de la corona
5 Corona necrótica sin infección de pedicelos
Corona totalmente con pudrición, pedicelos y
6
parte de la cascara del fruto necrótica.
Tratamientos 9
Error experimental 80
Total 89
25
3.3. TÉCNICAS E INSTRUMENTOS
Materiales de campo
26
3.4. ASPECTOS ÉTICOS
27
CAPÍTULO IV
Los resultados de nuestro estudio coinciden con los reportes de Ploetz, et.
al., (2003) y Slabaugh y Grove (1982), donde indican que los hongos que causan
pudrición de la corona se encuentran en campos de banano colonizando hojas
muertas, inflorescencias, flores secas, brácteas y en frutos. En el valle del Chira
las zonas de proceso están cercanas a las plantaciones de banano donde se
encuentran los restos de cosecha, además en la frontera de las parcelas los
productores siembran frutales como, mango ciruelo, mango criollo y palmas
cocoteras, los cuales se comportan como fuentes de inoculo de la enfermedad; se
ha podido observar que en cada una de las muestras recolectadas del campo hubo
esporulación de los hongos, es probable que las conidias sean dispersadas por el
viento, por las herramientas de trabajo, por la indumentaria del obrero, y estas
queden en contacto con las heridas en la corona de los frutos en el momento del
28
proceso, o que las conidias sean depositadas en el agua de proceso y esta se
convierta también en una fuente de inóculo de la enfermedad. Según
investigadores (Ploetz et al., 2003) indican que las conidias de los hongos
causantes de pudrición de la corona son dispersadas y acarreadas desde el campo
por el viento, agua de riego, insectos y aves. Sin embargo, no se detectó fuente de
inóculo del hongo Thielaviopsis paradoxa, posiblemente se deba a que las
condiciones de humedad relativa y temperatura no hayan sido favorables para la
infección y esporulación, ya que el estudio se realizó en los meses de junio a
diciembre del 2019 donde no hubo precipitaciones y en la estación de verano la
temperatura fue mayor a 32°C. De acuerdo con los estudios realizados en Brasil
por Silva (2013), demuestran que las condiciones óptimas para el crecimiento y
desarrollo del hongo T. paradoxa oscilan entre 15 a 25°C. Los productores
bananeros por el desconocimiento del tema, no toman medidas preventivas para
evitar que se forme como fuente de inóculo los restos de tejidos vegetales
infectados, por la tanto para reducir la incidencia de la enfermedad se debe tener
en cuenta la asepsia en el área de proceso.
29
Fig. 1. Frutos de deschive en el suelo colonizados con los
hongos Fusarium spp. y Lasiodiplodia theobromae en el
Valle del Chira.
30
Fig. 3. Raquis en plantaciones de banano con L.
theobromae.
31
Fig. 5. Chante del banano colonizado con L. theobromae.
32
Fig. 7. Inflorescencias del banano colonizados con Fusarium
spp.
33
Fig. 9. Raquis del banano colonizados con C. musae.
34
Fig. 11. Resto del peciolo del banano colonizado con los
hongos L. theobromae, Alternaria sp. y Cladosporium sp.
b. Fusarium spp.: las fiálides son pequeñas con forma de botella; simples
monofialídica (que emergen conidias de un poro de la fiálide). Las macroconidias
son de forma curvada, (medialuna), hialinas y septadas. Las microconidias son de
formas variadas (fusiformes, ovales, clavadas, alargadas entre otras), con uno o
dos células.
35
c. Colletotrichum musae: los acérvulos son cuerpos fructíferos de
reproducción asexual en donde se desarrollan conidióforos y conidias. Las
conidias son unidades propagativas y/o germinativas de forma alargada a ovales,
hialinas y unicelulares.
36
Fig. 13. Conidias bicelulares y pigmentadas del hongo
Lasiodiplodia theobromae.
37
4.1.3. Biofungicidas y extractos vegetales en condiciones de in-vitro
39
Cuadro 10. Comparación de medias de Duncan (0.05) del efecto de biofungicidas
y extractos vegetales a nivel de in vitro frente al hongo Thielaviopsis paradoxa
agente causal de la pudrición de la corona en frutos de banano orgánico, Piura-
2019.
Biofungicidas (ml/100
Trats. Media Inhibición (%) Sig. (0.05)
ml de PDA)
T1 Ultra Ca 24 6.575 27.11 d
T2 Ultra Ca 24 9 0.0 g
T3 Canelys 0 100.0 a
T4 Canelys 0 100.0 a
T5 Timorex 0 100.0 a
T6 Timorex 0 100.0 a
T7 Aloe vera* 7.595 15.66 e
T8 Canela* 1.345 85.11 b
T9 Orégano 1.57 82.66 c
T10 Aceite del árbol de te* 8.237 8.55 f
T11 Testigo 9 0.0 g
CV = 3.86 %
40
a b
c d
e f
41
4.1.2.2. Efecto frente al hongo Colletotrichum musae
42
reducción del crecimiento fue significativa para los ácidos cítrico, oxálico y oleico
a las dosis de 1-3%. En este estudio el
producto canelys inhibió al 100% el crecimiento micelial de los hongos L.
theobromae, T. paradoxa, C. musae y F. verticillioides, posiblemente se deba a
sus metabolitos secundarios, aldehído cinámico (cinamaldehido), y eugenol que
poseen propiedades bactericidas y fungicidas, se le atribuye al deterioro de la
membrana celular, afectando con ello la permeabilidad, favoreciendo el flujo de
protones, alterando los sistemas enzimáticos y la producción de energía, por lo
tanto inhibe la germinación de las células fungosas. (Denyer y Hugo, 1991).
43
Cuadro 12. Comparación de medias de Duncan (0.05) del efecto de
biofungicidas y extractos vegetales a nivel de in vitro frente al hongo
Colletotrichum musae agente causal de la pudrición de la corona en frutos de
banano orgánico, Piura-2019.
Biofungicidas (ml/100
Trats. Media Inhibición (%) Sig. (0.05)
ml de PDA)
T1 Ultra Ca 24 5.745 36.22 cd
T2 Ultra Ca 24 9 0.0 f
T3 Canelys 0 100.0 a
T4 Canelys 0 100.0 a
T5 Timorex 1.665 81.55 b
T6 Timorex 5.305 41.11 c
T7 Aloe vera* 8.37 7.00 f
T8 Canela* 6.1 32.22 cde
T9 Orégano 6.9 23.33 e
T10 Aceite del árbol de te* 6.5 27.77 de
T11 Testigo 9 0.0 f
CV = 12.78 %
44
a b
c d
e f
45
4.1.3.3.Efecto del biofungicida Bio - Splent in vitro
a b
46
4.1.4. Biofungicidas y extractos vegetales en frutos
47
Cuadro 13. Análisis de varianza del efecto de los biofungicidas y extractos
vegetales a nivel de frutos en la inhibición del crecimiento micelial del hongo
Thielaviopsis paradoxa.
Biofungicidas (ml/100
Trats. Media Sig. (0.05)
ml de PDA)
T1 Bio splent 4.333 b
T2 Ultra Ca 4.777 b
T3 Canelys 6.0 b
T4 Timorex 4.555 b
T5 Canela* 4.666 b
T6 Orégano* 5.333 b
T7 Aloe vera* 2.333 a
T8 Aceite del árbol de te* 6.0 b
T9 Testigo 6.0 b
CV = 20.70 %
48
4.1.4.2. Efecto frente al hongo Colletotrichum musae
49
Cuadro 15. Análisis de varianza del efecto de los biofungicidas y extractos
vegetales a nivel de frutos en la inhibición del crecimiento micelial del hongo
Colletotrichum musae.
Biofungicidas (ml/100 ml
Trats. Media Sig. (0.05)
de PDA)
T1 Bio splent 1.666 ab
T2 Ultra Ca 1.777 b
T3 Canelys 2.888 c
T4 Timorex 5.555 ef
T5 Canela* 4.666 de
T6 Orégano* 4..444 d
T7 Aloe vera* 0.666 a
T8 Aceite del árbol de te* 2.888 c
T9 Testigo 6.0 f
CV = 13.91 %
50
Fig. 18. Frutos de banano con grado de severidad 6, inoculados
con el hongo T. paradoxa.
51
Fig. 20. Frutos de banano con grado de severidad 6, inoculados
con el hongo C. musae.
Fig. 21. Efecto del extracto vegetal Aloe vera en frutos de banano
con grado de severidad de 0.66 frente al hongo C. musae.
52
CAPÍTULO V
CONCLUSIONES
2. En frutos la menor severidad se obtuvo con el tratamiento Aloe vera con una de
media de 2.33 y 0.66 de severidad frente a los hongos T. paradoxa y C. musae
respectivamente.
53
CAPÍTULO VI
RECOMENDACIONES
54
CAPÍTULO VII
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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combinaciones sobre la enfermedad de la podredumbre de la corona y la calidad de la
fruta de plátano.
59
ANEXOS
60
Cuadro 19: Efecto de los diferentes tratamientos de biofungicidas y extractos
vegetales en la inhibicion del crecimiento del hongo Thielavipsis paradoxa nivel de
campo.
61