Deber 2 Biologia

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Escuela Superior Politécnica del Litoral

Facultad Ciencias de la Vida (FCV)


Hoja de Trabajo Práctica de Laboratorio
LADY DIANA MURILLO ROJAS

Protocolos
2.1.- Hidratos de carbono
Pasos a seguir antes de la práctica:
Observar los videos:
“Introducción a los carbohidratos”
https://www.youtube.com/watch?v=1JctcBjPLZ8
“Carbohidratos simples y complejos ¿Energía o Grasa?”
https://www.youtube.com/watch?v=S2b_lV8xDQk
Objetivo. - Identificar la presencia de carbohidratos no reductores en los alimentos a
través de pruebas químicas.
PROCEDIMIENTO:
Materiales:
• Papa
• Jugo de frutas
• Leche
• Glucosa
• Maltosa
• Sacarosa
• Tubos de ensayo
• Muestra proteica (huevo) como control
• Vasos de precipitación
• Reactivos de Fehling
• Reactivo de Benedict
• Lugol
• Gotero
• Mechero

Durante la práctica: Observar los pasos realizados por el instructor:


Reacción de Lugol para detección de almidones
1. Se etiquetan 4 Erlenmeyer, a los cuales se añade 10 ml de; agua (control), jugo
comercial, extracto de papa (almidón) y clara de huevo (albumina), sacarosa (sin
diluir).
2. Luego a cada Erlenmeyer se le añaden 1 ml de disolución de yodo-yoduro.
3. Los polisacáridos dan color azul.
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Reacción de Benedict
1. Se numeran 6 tubos de ensayo. Se añade a cada tubo 1 ml de: agua (control),
glucosa, maltosa, almidón, jugo comercial y clara de huevo.
2. Se añaden 2 ml de reactivo de Benedict a cada tubo y se mezcla bien, mediante
agitación manual.
3. Se calientan en un baño María durante 5 minutos.
4. Si la reacción es positiva aparece un precipitado rojizo, verde o amarillo.

Reacción de Fehling
Mezclar en un tubo de ensayo:
1. Se numeran 6 tubos de ensayo, luego se añaden a cada tubo 1 ml de:
glucosa, maltosa, sacarosa, almidón, clara de huevo y jugo comercial.
2. Se agrega la solución de Fehling A (CuSO4) 0,5 ml
3. Se agrega la solución de Fehling B (Tartrato/NaOH) 0,5 ml
4. Agitar manualmente y calentar en baño María a
70C (aproximadamente por 1 min).
5. Si se reduce el cobre se forma un precipitado de Cu2O de color rojizo.

“Fehling positivo: color rojizo”


RESULTADOS DE LA PRÁTICA A REPORTAR:

Gráficos (Dibujar los procesos observados)


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2.2. - Desnaturalización de Proteínas


Objetivo. - Observar la desnaturalización de proteínas debido a cambios de pH y
aplicación de calor.

Antes de la práctica:
Acceder al siguiente link y navegar en las secciones de Proteínas, leer el contenido y
realizar el test al final
https://www.um.es/molecula/prot01.htm

Los siguientes pasos deben completarse antes de la práctica:


• Conseguir un huevo de gallina
• Abrir el huevo y observar la consistencia de la clara.
• Tomar foto de la clara de huevo
• Calentar el huevo en una sartén o en ebullición con agua
• Tomar foto de la clara de huevo después de someterla al calor (adjuntarlas en la
sección de gráficos.
• Explicar en un breve párrafo qué ocurrió con la clara de huevo.

Materiales:
• Huevos
• Etanol
• Leche
• Ácido clorhídrico
• Reactivo de Biuret
• Pipeta graduada
• Tubos de ensayo

Procedimiento:

Observar los pasos realizados por el instructor con distintos agentes desnaturalizantes:
1. Marcar seis tubos de ensayo con los números del 1 al 6
2. Colocar en los tubos de ensayo 1, 3 y 5 un poco de clara de huevo
3. Colocar en los tubos de ensayo 2, 4 y 6 un poco de leche
4. Dejar un tubo con leche y otro con clara de huevo como testigos, los señalaremos
como 5 y 6 respectivamente.
5. Adicionar 25 mL de etanol en un tubo con clara de huevo y en uno con leche
(tubos 1 y 3)
6. Adicionar 2 mL de ácido clorhídrico al 10% en un tubo con clara de huevo y en
uno con leche (tubos 2 y 4)
7. Observar si existen cambios en las proteínas albúmina (huevo) y caseína (leche)
luego de cada adición de reactivo. Comparar con los tubos testigo.
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Observar el siguiente video de la reacción de Biuret:


https://www.youtube.com/watch?v=1p0xrmyKGxs

En el siguiente link, observaremos modelos de los diferentes niveles de estructura


proteica:
http://biomodel.uah.es/model1j/prot/contents.htm

RESULTADOS DE LA PRÁTICA A REPORTAR:


Llenar la siguiente tabla con las observaciones (describir los cambios si hubiese):

Agente Albúmina Caseína


Calor (experimento casero) la clara de huevo: color No realizada.
amarillento y su consistencia
liquida y una vez que se
somete al calor, se torna
blanca.
Etanol Tubo 1 Tubo 3
la clara de huevo al añadirle En la leche se observó con
el etanol se tomó un tiempo pequeños grumos al reaccionar
hasta que se mezclen las dos con el etanol.
consistencias, el cual se
observo el cambio de textura
y de color este se tornó
blanco, como cuando la clara
de huevo esta cocida.

Ácido clorhídrico Tubo 2 Tubo4


Al agregarle ácido clorhídrico La leche se cortó
la albúmina tuvo una reacción completamente al ser
inmediata, este al ser una mezclada con el ácido
sustancia muy fuerte hizo que clorhídrico.
se cocinara la clara de huevo.

Tubos testigos (sin Tubo 5 Tubo 6


adicionar agente Clara de huevo: color Leche: color blanco
desnaturalizante) amarillento
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Gráficos:
1. Desnaturalización de la albúmina del huevo por calor (actividad en casa, previo a
la práctica):

Antes de la cocción: Después de la cocción:

Descripción:

Observamos que la albumina es de color amarillenta con un poco de transparencia


luego que se la somete a altas temperaturas este se torna de color blanco luego de
su cocción.
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2. Desnaturalización de la albúmina y caseína por solvente orgánico (etanol):

Antes de añadir etanol Después de añadir etanol

Albúmina

Caseína

Descripción:
• Observamos que la albumina o como comúnmente se la llama clara de
huevo al reaccionar con el Etanol esta se cocina un poco no del todo,
pero se empieza a poner un poquito sólida y dura.
• En cambio, en la leche al momento que se mezcla con el Etanol se
comenzó a cortar y se observo como en la parte superior se coloco lo
que se corto dejando en la parte superior liquido me transparentosa casi
agua.
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3. Desnaturalización de la albúmina y caseína por cambio de pH

Antes de añadir ácido clorhídrico Después de añadir ácido clorhídrico

Albúmina

Caseína

Descripción:

Observamos en la primera imagen que la albumina al reaccionar con el ácido


clorhídrico se pudo ver como se cocino nuestra clara de huevo en unos
segundos debido a que es un ácido super fuerte.
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En cambio, en la segunda imagen que es la leche reaccionando con el acido


clorhídrico esta se formó muchos grumos y se cortó, color blanco totalmente.

4. Reacción de Biuret (video)

Albúmina Al reaccionar con el sulfato de cobre e hidróxido


de sodio

Descripción:
• Observábamos a la albumina reaccionando con sulfato de cobre al 2%
y este se mezcló y se tornó de color celeste, después se le agrego el
hidróxido de sodio al 20% entonces este se volvió de color morado
dando, así como resultado positivo a nuestra prueba de Beirut la
cual indica la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros
compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de
composición desconocida.
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Hoja de Trabajo
2.1.- Hidratos de carbono
Responda las siguientes preguntas:
1. ¿Cuál es el mecanismo por el cual el Lugol indica la presencia de un
polisacárido?
Por medio de la colorimetría ya que si al alimento que es seleccionado se
le aplica Lugol y este contiene almidón se tornara un color azul-violeta.

2. ¿Cuáles son las moléculas que estamos detectando cuando hicimos la


prueba de Lugol?
Almidón= amilasa y amilo pectina

3. ¿Por qué la clara de huevo reacciona de manera diferente en todas las


pruebas realizadas?
Porque la clara de huevo contiene proteína y al momento de ser sometida
a altas temperaturas de desnaturalización es irreversible. Además, no
tiene efecto con el Lugol ni con los demás elementos, en el caso de la
clara de huevo al reaccionar con el Lugol no tiene ninguna reacción ya
que no posee almidón.

4. ¿Qué función principal tienen los carbohidratos en los organismos vivos?


⎯ Tiene la función de proporcionar energía a nuestro cuerpo.

5. De acuerdo con lo que usted conoce de carbohidratos, ¿qué pruebas


realizaría para reconocer las siguientes moléculas?

Respuesta: Prueba de Lugol

Amilopectina

Práctica Nº 2: Macromoléculas Página |1


Material elaborado por: Coordinación de Biología General
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Respuesta: Prueba Fehling

Sacarosa

2.2.- Desnaturalización de Proteínas


Responda las siguientes preguntas:
1. Los enlaces peptídicos permiten la unión de los aminoácidos para
conformar las proteínas.
2. ¿Qué estructura se altera cuando se desnaturaliza una proteína?
⎯ La estructura proteica se ve alterada si la concentración de sales, pH,
temperatura cambian.
3. Detalle una función biológica que cumplen las proteínas en las células.
➢ Función de defensa: esta quiere decir que nos mantienen a salvo de
virus, bacterias y otros microorganismos nocivos dejándolos inactivos.
4. Dé un ejemplo de desnaturalización reversible de las proteínas.
⎯ El cabello del ser humano, cuando pasa a procesos de calor, como lo es
el cabello ondulado se lo plancha se vuelve liso y al momento de lavarlo
vuelve a su forma original (ondulado).

Práctica Nº 2: Macromoléculas Página |2


Material elaborado por: Coordinación de Biología General

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