UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RÍA

Facultad de Ingeniería Ambiental

Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

LABORATORIO N° 04
RECONOCIMIENTO DE MOLECULAS ORGANICAS- COMPUESTOS
ORGANICOS DE LA MATERIA VIVA-PROTEINAS, CARBOHIDRATOS y
LIPIDOS. PROPIEDADES

OBJETIVO GENERAL
Estudiar las características o propiedades de algunas moléculas orgánicas de la materia
viva de manera experimental, utilizando reacciones colorimétricas.

FUNDAMENTO TEORICO
Aunque los seres vivos y en menor grado las células que los conforman son de
apariencia bastante diversa, su organización química es muy similar. La organización
química de la materia viva es muy compleja, se basa sobre los mismos materiales y
principios que rigen el mundo de los seres vivos.
Si una célula o tejido es removido del cuerpo y analizado en un tubo de ensayo se
encontrara que contiene una mezcla de sustancias “inerte” que forman a los seres vivos
en forma de moléculas convencionales, en átomos o combinaciones de los elementos
más abundantes son: C, O, N e H
El medio intracelular de una celula animal o vegetal contiene aproximadamente: 75 a
85% de agua, 10 a 20% proteínas, 02-03% lípidos, 01% carbohidratos y 0.1% sales.
El termino carbohidratos se refiere a los azucares y almidones de origen vegetal. La
fuente más abundante de estas moléculas en la tierra son las plantas verdes que los
producen mediante la fotosíntesis. Los carbohidratos cumplen las funciones como
fuente de energía de los seres vivos que lo almacenan en forma de almidón y glucógeno
en las plantas y animales.
Aproximadamente el 50% del peso seco de la materia viva es proteína y esta no es un
simple material estructural o de almacenamiento como son los polisacáridos. Los tipos
y funciones de las proteínas son tan variados como de la vida misma.
Las proteínas están compuestas de uno o más polímeros de aminoácidos que en la
naturaleza se presentan aproximadamente 20 clases de aminoácidos. Las proteínas por
lo general son cadenas superiores hasta más de 300 aminoácidos.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

MATERIALES: REACTIVOS:
- Tubos de ensayo - Solución de lactosa al 20%
- Papel de filtro - Solución de Maltosa al 20%
- Trípode de metal - Solución de glucosa 20%
- Gradillas - Solución de almidón 20%
- Vasos de 200 y 250 ml - Solución de almidón 40%
- Embudos - Solución de sacarosa 20%
- Pipetas - Acetona, éter, cloroformo, xilol,
- Pinzas de madera benceno

MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL 1

 UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RÍA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

- Mechero de alcohol o Bunsen - Bicarbonato de sodio

- Agua destilada - Acido nítrico concentrado
- Hidróxido de sodio 40%
- Hidróxido de sodio 20%
- Sulfato cúprico 1%
- Solucion alcohólica de Sudan III
- Acido clorhídrico 10%
- Huevo crudo
- Aceite (50 a 100 ml)
- Reactivo de Biuret
- Reactivo Felhing ( A y B)
- Reactivo Lugol
- Reactivo Sudan III
- Acetato de Plomo al 5%
- Acido Acético

PROCEDIMIENTO

1. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS O GLUCIDOS.

a) Reacción de Lugol. Se utiliza para reconocer el almidón dando un color azul-
violeta característico.
- Poner en un tubo de ensayo unos 3 ml de una suspensión de almidón al 40%
- Añadir unas gotas de lugol
- Observar y anotar lo que ocurre.
- Explica porque se observa el color azul violeta.
- El tubo de ensayo que tiene el color azul - violeta, lo calientas a la llama y déjalo
enfriar. Explica que sucede. Vuelve a calentar y enfriar cuantas veces quieras
¿En qué momento aparece el color?

2. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS REDUCTORES Y NO REDUCTORES.

Reacción de Felhing. Se utiliza para reconocer carbohidratos reductores
- Colocar en un tubo la muestra más o menos 3 ml. del glúcido que se quiere
analizar (son tres a cuatro carbohidratos que se tienen que analizar).
- Luego añadir 1 ml del reactivo de Felhing A y 1 ml del reactivo Felhing B agitar
fuertemente y el líquido del tubo de ensayo adquirirá un color azul.
- Luego calentar el tubo al Baño María 60ºC (más o menos 10 a 15 minutos), o
suavemente, directamente a un mechero de laboratorio.
- Al final la reacción se vuelve de un color rojo ladrillo ES REDUCTOR.
- Si la reacción tiene un color azul o tono azul verdoso ES NO REDUCTOR
- Explica cual es el fundamento de la reacción de Felhing

3. INVESTIGACION DE AZUCARES NO REDUCTORES

- Colocar en un tubo 3ml del carbohidrato no reductor. Separar en volumen
iguales en dos tubos (tubo 1 y tubo 2)
- En el tubo 1 añadir 10 gotas de acido clorhídrico al 10%
- En el tubo 2 calentar en un mechero durante 5 minutos

MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL 2

 UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RÍA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

- Dejar los tubos en enfriar y realizar la prueba de Felhing. Que se observa?

Explicalo?
Nota: se recomienda antes de añadir el reactivo de Felhing neutralizar con bicarbonato
de sodio ( 0.5 gr). La prueba de Felhing sale mejor en un medio que no sea acido.
4. RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS
a) Reacción de Biuret. Se utiliza para determinar proteinas
- Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de solución de la muestra (clara de huevo
en suspensión con agua*)
- Añadir 2 ml de solución de hidróxido de sodio al 20% (solución A) y a
continuación 4 a 5 gotas de solución de sulfato cúprico al 1% (solución B)
- En qué momento la reacción es positiva? - ( color violeta)

Nota: (*) Solución proteica de clara de huevo

Vierte la clara de un huevo en un beaker de 250 mL. Agrega unos 100 mL de agua destilada,
y mezcla bien con la ayuda de una varilla agitadora.

b) Reacción de xantoproteica.
- Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de la muestra ( solución de clara de huevo)
- Añadir 1 ml de HNO3 concentrado
- Calentar en Baño María a 60º C por 5 minutos
Enfriar en agua - (Coloración amarilla)
- Añadir gota a gota una solución de hidróxido de sodio al 40%
(Coloración NARANJA)
c) Desnaturalización de las Proteínas (Coagulación de Proteínas)
- Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de la muestra (solución de clara de huevo)
- Añadir 5 gotas de acido acético.
- Repetir en otro tubo la prueba utilizando alcohol
- Repetir en otro tubo la prueba utilizando temperatura
- Observar y explicar lo que ocurre

d) RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS AZUFRADOS

- Colocar en el tubo de ensayo 3 ml de la muestra ( solución de clara de huevo)
- Añadir 3 ml de solución de hidróxido de sodio al 20%
- Añadir 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%
- Calentar el tubo hasta ebullición.
- Colocar en la boca del tubo un papel de filtro. Que le sucede o se observa en el
papel de filtro?
.
5. RECONOCIMIENTO DE LIPIDOS
a) Reactivo de SUDAN III. Se utiliza para determinar aceite.
- En dos tubos de ensayo colocar en ambos 3 ml de la muestra (aceite)
- Añadir al primer tubo 4 a 5 gotas de solución alcohólica de SUDAN III
- Al segundo tubo añadir 4 a 5 gotas de tinta roja. Agitar ambos tubos y dejar
reposar en una gradilla por 15 a 20 minutos. Que se observa?
- Utilizar un tercer tubo con 3ml de agua destilada y colocar 4 a 5 gotas de SUDAN
III. Que se observa?

MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL 3

 UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RÍA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

Como se observa una prueba positiva con el SUDAN III?

(Color anaranjado)
b) Solubilidad de los aceites
- Colocar en una gradilla 5 tubos de ensayo conteniendo en cada uno 3 ml de
muestras de aceite y agregar
- Al primer tubo: 3 ml de cloroformo
- Al segundo tubo: 3 ml de acetona
- Al tercer tubo: 3 ml de benceno
- Al cuarto tubo: 3 ml de xilol
- Al quinto tubo: 3 ml de agua
- Agitar fuertemente los tubos y dejar en reposo
Nota: agregar una gota de cada tubo en una hoja de papel bond y esperar a que se
seque.

c) Proceso de Saponificación
- Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de aceite vegetal y 3 ml de una solución de
hidróxido sódico al 20%
- Agitar energéticamente y colocar al tubo en Baño María por 30 minutos

TABLA DE DATOS Y RESULTADOS

a) Observación: Reacción de Lugol. Dibuja y explica

b) Observación: Reacción de Felhing. Dibuja y explica

MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL 4

 UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RÍA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

c) Observación: reacción de Biuret. Dibuja y explica

d) Observación: reacción de xantoproteica. Dibuja y explica

e) Observación: reacción de Sudan III. Dibuja y explica

CUESTIONARIO.

1. Cuáles son las principales funciones biológicas de los glúcidos?:

_____________________________________________________________
_____________________________________________________________

2. Explica cuando es un cuerpo reductor y un carbón asimétrico?

3. ¿Qué proteínas son los que dan reacción xantoproteica positiva?.

_____________________________________________________________
____________________________________________________________
4. En que sustancia es mas soluble el aceite porque?
_____________________________________________________________
____________________________________________________________
5. ¿A que se denomina desnaturalización y como se produce?
_____________________________________________________________
_____________________________________________________________
6. Una prueba negativa a Felhing es indicativo que la muestra no es
carbohidrato?

MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL 5

 UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RÍA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental

BIBLIOGRAFIA

 Timberlake, K. (2013). Química General, Orgánica y Biológica. Estructuras de la Vida.

(4ª Edición). México: Pearson Educación.
 Morrison, R. y Boyd, R. (1998). Química Orgánica (5ª Edición). México: Pearson /
Addison Wesley.
 www.fao.org. Macronutrientes: carbohidratos, grasas y proteínas. Enero de 2014, de
http://goo.gl/2sqkE3

Blgo. Alvaro Martín Martínez Vila

Profesor del curso de Biología

MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL 6