35 Espectrofotometria de Cafeina

Prácticas de laboratorio
Laboratorio de química analítica

Determinación Espectrofotométrica del contenido de alcaloides totales de tabaco,
expresados como nicotina en una muestra en solución.
Objetivos:
Al finalizar la práctica el alumno será capaz de:
1. Aplicar conceptos de espectrofotometría en la cuantificación de una muestra preparada.
2. Determinar experimentalmente el contenido de nicotina en una muestra asignada.
Marco Teórico:
Si bien resulta difícil dar una definición exacta de un alcaloide, dado que se pueden confundir con aminas
complejas, podemos decir que los alcaloides son compuestos nitrogenados típicamente de origen vegetal,
básicos y contienen uno o más nitrógenos generalmente en anillos heterocíclicos. Los alcaloides se clasifican
en tres o cuatro categorías, según la referencia bibliográfica revisada. Actualmente se han descubierto no
menos de 3,000 alcaloides en plantas y animales. (Evans, 2009)
Entre los alcaloides más disponibles en la actualidad podemos mencionar: la cafeína (en café, entre otros), la
teobromina (en el cacao), la capsicina o capsaicina (en el chile picante) y la nicotina (en el tabaco).
La cafeína es un alcaloide del grupo de las xantinas a la que además pertenecen la teofilina y la teobromina.
La cafeína tiene una un peso molecular de 194.2 g/mol; es poco soluble en agua (fría o caliente), en etanol (1
en 130) y mas soluble en acido diluidos. Su solución alcohólica presenta un máximo de absorción de E 1%1cm =
519 a 273 nm (Anthony C Moffat, 2005); es decir que tiene una absorción de A= 0.519 con un paso óptico de
b= 1cm y c= 0.001%
Resumen del método

El método se basa en la absortividad de la cafeína en etanol que presenta un máximo característico de
absorción de 0.519 en una solución al 0.001% a una longitud de onda de 273 nm.
Ordinariamente se debería generar una curva de calibración que represente la absorción leída a la longitud de
onda del máximo de absorción (teóricamente a 273 nm) para soluciones patrón en el rango de
concentraciones en el que se espera encontrar la solución muestra.
En este caso tomaremos el dato teórico ya mencionado.
Reactivos:
1. Cafeína en polvo.
2. Etanol puro.
3. Agua destilada
Materiales:
● Balanza analítica.
● Pipeta volumétrica de 5 mL
● Pipeta graduada de 1.5 mL
● Frasco lavador (piseta) con agua destilada.
● Matraz aforado de 250 mL.
● Espectrofotómetro
Este material es una recopilación, revisión y adaptación del Ing. Javier Madrid para el Departamento de Ingeniería Química de la UNAH
Procedimiento:
Para la cuantificación de nicotina en la muestra, que debería tener un contenido de nicotina por el orden de
0.0005%-0.0015% se debe seguir el siguiente procedimiento:
a) Mida precisamente una cantidad aproximada de 100 mg de cafeína.

b) Disuelva y lleve a volumen en matraz aforado de 100 mL con etanol puro. Llamaremos a esta, solución
1.
c) Tome una alícuota de 10 mL de la solución 1 y lleve a volumen en matraz aforado de 100 mL con
etanol puro. Llamaremos a esta, solución 2
d) Tome una alícuota de 10 mL de la solución 2 y lleve a volumen en matraz aforado de 100 mL con
etanol puro. Llamaremos a esta, solución 3.
e) Homogenice con agitación.
f) Tome una alícuota de la solución 3 y colóquela en la celda del espectrofotómetro
g) Utilice etanol puro como blanco en la celda de referencia.
h) Haga un barrido al menos entre 250 nm y 300 nm e identifique el máximo de absorción (que debería
ser a 273 nm).
i) Anote la absorción máxima obtenida.
Cálculos:
● Realice los cálculos de la pureza de la cafeína de acuerdo a la siguiente ecuación:
𝐴𝑚 100
∗ ∗ 100% = %𝐶𝑎𝑓
𝐴𝑟 𝑀𝑝
En donde:
Am es la absorción máxima de la muestra.
Ar es la absorción máxima teórica de referencia (0.519)
Mp es la muestra pesada (cercana a 100 mg y expresada en mg)
% Caf es el porcentaje de cafeína en la muestra
Reporte:
En el reporte colocar la pureza de cafeína.
Referencias
Anthony C Moffat, M. D. (2005). Clarke's Analysis of Drugs and Poisons. Londres: Pharmaceutical Press.
Evans, W. C. (2009). Farmacognosia Trease and Evans. Londres: Saunders Elsevier Health Science.
Este material es una recopilación, revisión y adaptación del Ing. Javier Madrid para el Departamento de Ingeniería Química de la UNAH

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a) Mida precisamente una cantidad aproximada de 100 mg de cafeína.

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