1230 Es 1
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Medio selectivo para la confirmación y detección de enterococos y como detector de contaminación fecal en el agua
Información práctica
Aplicaciones Categorias
Detección Enterococos
Principios y usos
El Caldo EVA (Etil, Violeta, Azida, Litsky) es un medio selectivo específico para la detección y confirmación de enterococos en agua, otros especímenes
y alimentos. Es una indicación de contaminación fecal. El Caldo EVA, junto con el caldo Rothe (Caldo Glucosa con Azida - Cat. 1238) como medio
presuntivo, se usa para enumerar enterococos fecales en agua, suelo y productos alimenticios mediante la técnica MPN.
La presencia de enterococos intestinales es un indicador de contaminación fecal, especialmente cuando la contaminación ocurrió hace mucho tiempo y
las bacterias coliformes menos resistentes, incluida Escherichia coli, ya están muertas cuando se lleva a cabo el análisis.
La azida sódica y el violeta de etilo inhiben todos los bacilos Gram positivos y los cocos Gram positivos, excepto los enterococos y las bacterias Gram
negativas. La mezcla de peptona proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. La dextrosa es el
carbohidrato fermentable que proporciona carbono y energía. Los fosfatos de potasio actúan como un sistema de amortiguación, y el cloruro de sodio
suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico.
Fórmula en g/L
Dextrosa 5 Fosfato dipotásico 2,7
Fosfato monopotásico 2,7 Mezcla de peptona 20
Azida de sodio 0,4 Cloruro sódico 5
Violeta de etilo 0,0008
Preparación
Suspender 35,8 gramos del medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver calentando con agitación frecuente. Hervir durante un minuto
hasta disolver por completo. Dispensar cantidades de 10 ml en tubos de ensayo y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Se recomienda
utilizar un inóculo grande ya que el medio es muy selectivo y se usa en la segunda fase de confirmación.
Instrucciones de uso
Los tubos se inoculan con las diluciones apropiadas en series de 3 tubos para cada dilución y se incuban a 35±2 ºC durante 24-48 horas.
La aparición de turbidez y, eventualmente, la formación de un botón de crecimiento violeta (púrpura) en el fondo del tubo son características del
crecimiento de los enterococos.
Control de calidad
Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
Sin restos Polvo fino Beige claro Grisáceo 7,0±0,2
Test microbiológico
Condiciones de incubación: (35±2 ºC / 24-48 h).
Almacenamiento
Temp. Min.:2 ºC
Temp. Max.:25 ºC
Bibliografía
Litsky W. Mallmann W.L Fifield C.W. A.J.P.H 1953. 43. 873-879.
Mallman and Seligman. 195 A.J.P.H 40:286.