Espectrometría IR con Transformada de Fourier (FT-IR) Aplicada

al Análisis cualitativo de Cálculos Urinarios

Torres Granados Jhon Helibert Andrey
Laboratorio Química instrumental II, Grupo A, Departamento de Ciencias Básicas, Universidad de Pamplona

RESUMEN: Los cálculos urinarios son comunes en todo el mundo. El análisis de cálculos es de gran importancia para el
tratamiento de cálculos residuales y recurrentes, se sabe qué los cálculos están constituidos por compuestos como oxalato de
calcio, fosfato de calcio, carbonato de apatito y ácido úrico. Se determino la composición química de los cálculos urinarios
aplicando espectroscopia infrarroja, identificando las bandas de absorción de cada uno de los posibles compuestos del cálculo
y la posterior identificación de estas bandas en el espectro de la muestra de cálculo.

Palabras Claves: FT-IR, Cálculo urinario, Ácido úrico, Oxalato de calcio, Análisis cuantitativo.

ABSTRACT: Urinary calculi are common throughout the world. Stone analysis is of great importance for the treatment of
residual and recurrent stones. It is known that stones are constituted by compounds such as calcium oxalate, calcium phosphate,
apatite carbonate and uric acid. The chemical composition of urinary calculi was determined by applying infrared spectroscopy,
identifying the absorption bands of each of the possible stone compounds and the subsequent identification of these bands in
the spectrum of the stone sample.

Key Words: FT-IR, Urinary calculi, Uric acid, Calcium oxalate, Quantitative analysis.

1. Introducción
El desarrollo de cálculos en el tracto urinario es un
problema urológico frecuente, con una tasa de
prevalencia del 8 al 15%.1 La formación de cálculos venados; estos están formados de un mineral llamado
urinarios es un proceso complejo que está influenciado estruvita, que consta de amonio, magnesio y fosfato.
tanto por la genética como por factores ambientales. Los cálculos de estruvita casi siempre se deben a una
Los cálculos urinarios pueden estar compuestos de infección en los riñones o en el tracto urinario. Son
oxalato de calcio monohidratado, oxalato de calcio más comunes en mujeres y pueden adquirir un tamaño
dihidratado hidroxiapatita, fosfato amónico magnésico considerable y causar más daño en los riñones que los
(estruvita), ácido úrico o cistina.2 demás cálculos. [2]

Se pueden formar cálculos de diferente composición

como lo son los cálculos de calcio los cuales son los
cálculos renales más comunes y se desarrollan cuando
el calcio en la orina se combina con otras sustancias y
forma cristales. Cálculos de cistina que son poco
comunes y se forman cuando hay una presencia
excesiva de este aminoácido en la orina. Los cálculos
de ácido úrico los cuales se forman cuando hay mucho Figura 1. Cálculo urinario a analizar.
ácido úrico en la orina. El ácido úrico puede El análisis de espectroscopia infrarroja (IR) ha
cristalizarse por sí solo o combinarse con calcio para evolucionado con el desarrollo de nuevas técnicas de
formar cálculos y los cálculos de estruvita: Estos procesamiento de muestras y herramientas
cálculos, también llamados cálculos coraliformes o en informáticas e instrumentos más avanzados. Los
astas de venado, porque se parecen a los cuernos de los gránulos formados por una mezcla molida de la
1
muestra y KBr, tras la aplicación de alta presión, han máximos característicos de algunos grupos
sido sustituidos por la tecnología ATR (Reflexión funcionales.4
Total Atenuada), donde la muestra se muele en un
mortero de ágata y se coloca directamente sobre un Tabla 1.Picos de absorción característicos de infrarrojos
Diamante de Reflexión Simple. en el instrumento IR.[3]

En la FT-IR existen dos categorías de vibraciones

fundamentales: tensión (cambios producidos en la
distancia interatómica a lo largo del eje del enlace
entre dos átomos) y flexión (las vibraciones de flexión
son causadas por cambios en el ángulo entre dos
eslabones).

Dentro del FT-IR, existen variantes como lo es el IR

donde una muestra sólida se muele con bromuro de
potasio (KBr) transparente al IR y se compacta en una
pastilla, o bien se corta en rodajas finas y se coloca en
una ventana de KBr, mientras que los líquidos se
miden o diluyen directamente con un disolvente
transparente IR y el ATR (reflexión total atenuada),
que se ha convertido en la técnica estándar para la
medición de espectros FT-IR. La luz infrarroja pasa a
través de un cristal de un determinado material
(diamante, ZnSe o germanio) e interactúa con la
muestra, que se presiona sobre el cristal.[3]

2. Materiales y reactivos
Materiales:
Figura 2. Tipos de vibraciones moleculares. Espectrómetro FT-IR de Shimadzu, Espectrómetro
El espectro de absorción de infrarrojos de un FTIR, Balanza Analítica, Película de Poliestireno, para
compuesto, incluso relativamente sencillo, con calibración, Espátula Pequeña, Mortero de Ágata.
frecuencia contiene una serie intrincada de picos y Reactivos: KBr (Bromuro de Potasio), Oxalato de
mínimos acusados. Los picos útiles para la calcio, Fosfato de calcio, Ácido úrico, Fosfato
identificación de grupos funcionales están localizados amónico-magnésico, Carbonato de calcio, Cistina,
en la región de longitudes de onda más cortas del Cálculo Urinario.
infrarrojo (desde aproximadamente 2,5 a 8,5 μ m), 3. Metodología
donde las posiciones de los máximos están poco
afectadas por el esqueleto carbonado al que están Inicialmente se encendió y se calentó el
unidos los grupos, en la tabla 1 se muestran los espectrofotómetro IR antes de iniciar la práctica.
Luego se obtuvieron todos los espectros utilizando los
siguientes parámetros: Resolution: 2.0 cm-1;
Apodization: Strong; Range: 4400 cm-1 to 450 cm-1;
2
Mode: Ratio; Number of Scans: 4. Inicialmente se 9 para la corrección de línea base, un suavizado de 10
obtuvo el espectro del background del IR sin muestra puntos para eliminar la interferencia señal-ruido y una
en el equipo siguiendo las instrucciones del manual del normalización. Como algunos estándares no se tenían
usuario. Luego se realizó un calibrado de frecuencias a disposición, se obtuvieron los espectros IR de estos
del espectrofotómetro, mediante la medida del desde la página del NIST.
espectro de una película de poliestireno de espesor
conocido; primero se colocó la película de poliestireno
en el soporte de la muestra del espectrofotómetro y se 4. Resultados y Análisis
registró el espectro a la máxima resolución posible y a
la resolución de16cm-1 y 2cm-1; se identificaron las 4.1 Identificación de bandas características de los
bandas principales del espectro. estándares.

Luego se tomó el espectro de cada uno de los Una vez que se le realizo el tratamiento de los
estándares (ácido úrico, fosfato de calcio y carbonato espectros IR, se identificaron las bandas
de calcio) por ATR, finalmente se tomó el espectro de representativas de cada uno de los estándares, donde
la muestra del cálculo urinario, pulverizando una se lograron observar con facilidad cada uno de los
muestra de este. Para todos los espectros se les realizo picos representativo, como se observa en la tabla 2.
un tratamiento de datos con el programa ORIGINPro

Tabla 2. Identificación de bandas características de cada uno de los estandares

Compuesto Banda Asignación Rango (cm-1) Espectro FT-IR

1 Flexión C=O 1319

Oxalato de
calcio

2 Tensión C=O 1641

1 Tensión S-S 541

2 Flexión NH2 679

3 Flexión C=O 849

4 Tensión N-C 1199

5 Flexión O-H 1340
Cistina
6 Tensión C=O 1595

7 Tensión O-H 2869

8 Tensión NH2 2929
3
 1 Flexión O-H 673

2 Flexión P-OH 950

Fosfato de 3 Tensión (P=O) 1082

calcio

4 Flexión O-H 1234

5 Tensión P-O 2333

6 Tensión OH 3455

1 Tensión 710
O=C=O

Carbonato
de calcio
2 Flexión C=O 861

3 Tensión C=O 1385

Flexión N-H 730

1

2 Flexión C=C 995

3 Flexión C=O 1106

Ácido
Úrico Tensión C-N 1293
4

5 Tensión C=C 1581

Tensión C=O 1635

6
7 Tensión N-H 2812

4
4.2. Identificación de compuestos en la muestra de Se observo que la muestra de calculo tenia mayor
cálculo. mente picos que se observaron en el estándar de ácido
úrico en 3051 cm-1 (Tensión C-H), 1616 cm-1 (C=O),
Una vez identificadas las bandas características de
1315 cm-1 (Tensión C-N), 879 cm-1 (N-H), 777 cm-1
cada uno los estándares, se compararon los espectros
(N-H2). Así mismo también se identificaron picos del
del cálculo urinario con los estándares y se
fosfato y oxalato de calcio y de la cistina, como se
identificaron los picos que eran semejantes con las
observa en la tabla 7.
bandas obtenidas de los estándares.
Como se mencionó antes existen diferentes tipos de
cálculos urinarios dependiendo de su composición, se
Tabla 3. Identificación de las vibraciones del cálculo podría decir que el cálculo a analizar podría ser un
urinario. calculo de ácido úrico, pero algo a destacar es que el
cálculo puede variar su composición dependiendo del
Banda Vibración - Rango Compuesto
Enlace cm-1 sitio que se tome la muestra bien sea del centro, del
medio o de la parte exterior del cálculo.
1 Flexión O-H 663 Fosfato de
calcio
2 Flexión NH2 777 Cistina
5. Conclusiones
3 Flexión NH 879 Acido úrico
4 Tensión P-O 962 Fosfato de Se determinaron las bandas caracteristicas para cada
calcio uno de los estándares (ácido úrico, fosfato de calcio y
5 Tensión P=O 1026 Fosfato de carbonato de calcio) y con base a esto se identificaron
calcio las bandas caracteristicas de la muestra del cálculo
6 Tensión C-N 1315 Acido úrico urinario. Donde se encontró que el cálculo urinario
está constituido principalmente por ácido úrico y en
7 Tensión 1616 Acido úrico,
C=O cistina segundo lugar por fosfato y oxalato de calcio y cistina.
Por lo que se consideró que el cálculo urinario es un
8 Tensión C-H 3051 Acido úrico cálculo de ácido úrico.
Tensión C- Fosfato y
9 H, O-H 3419 oxalato de 6. Referencias Bibliográficas
calcio
(1) Shaltout, A. A.; Dabi, M. M.; Said, D. A.;
Allam, M. A.; Ahmed, S. I. EDXRF, FTIR, and
XRD Characterization of Low Calcium Oxalate
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Ray Spectrometry 2022, 51 (3), 214–229.
https://doi.org/10.1002/xrs.3244.
(2) Piedras en los riñones (para Padres) - Nemours
KidsHealth. (2022). KidsHealth.
https://kidshealth.org/es/parents/kidney-
stones.html
(3) Lin, M. H.; Song, Y. L.; Lo, P. A.; Hsu, C. Y.; Lin,
A. T. L.; Huang, E. Y. H.; Chiang, H. K.
Quantitative Analysis of Calcium Oxalate
Hydrate Urinary Stones Using FTIR and
Figura 3. Bandas caracteristicas del espectro IR del Calculo 950/912 Cm−1 Peak Ratio. Vib Spectrosc 2019,
urinario. 102, 85–90.

5
 https://doi.org/10.1016/J.VIBSPEC.2019.03.00
6.
(4) Volmer, M.; de Vries, J. C. M.; Goldschmidt,
H. M. J. Infrared Analysis of Urinary Calculi by
a Single Reflection Accessory and a Neural
Network Interpretation Algorithm; 2001.
(5) Skoog Donald M.; Holler James; Berenguer
Navarro Vicente, D. A. ; W. Fundamentos de
química analítica. Volumen 2; Editorial
Reverte: Barcelona, 2018.
(6) NIST Chemistry WebBook. (2021, 12 agosto).
NIST. https://webbook.nist.gov/chemistry/