Facultad de Educación

Licenciatura en Ciencias Naturales y Educación Ambiental

Microbiología

Pre-Informe de Laboratorio No. 1.

Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica

Presentado por:

Ana María Hernández sierra 20182172011

Laura Daniela Rivera Trujillo 20182

Al Profesor Titular: Doc. Rosa Alcira Carreño Ruiz

Neiva, Huila, Colombia 04 de mayo de 2022

Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

INTRODUCCIÓN
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

CUESTIONES

1. ¿Cuáles son los diferentes tipos de siembra, medios de cultivo de aislamiento primario,
enriquecido y diferencial, que se utilizan en el área de la microbiología?

R/ Tipos de siembra (placa) labdemicrobiologia.wixsite.com,(2015)

 Siembra por inmersión: se coloca el inóculo en una placa o caja de Petri y sobre el
mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este método se utiliza para
microorganismos aerobios

 Siembra en doble capa: se procede de la misma manera que por inmersión. Una vez
solidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria para cubrir la capa
anterior (generalmente 10 ml. aprox.). Este método se utiliza para microorganismos
anaerobios facultativos y microaerofílicos.

 Siembra en superficie: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido,
se deja solidificar y se coloca sobre la superficie el inóculo. Con ayuda de una espátula
de Drigalsky se extiende el inóculo hasta su absorción total por el medio de cultivo.
Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos aerobios estrictos.

 Siembra en estría: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido y se
deja solidificar.

 Siembra volumétrica: Este método de siembra consiste en sembrar una muestra

liquida cuyo volumen no puede ser predeterminado, en medio de cultivo sólidos o
líquidos. Por ejemplo: En las muestras de exudado vaginal tomadas con pipetas de
Pasteur, no puede determinarse el volumen, ya que este tipo de pipeta carece de escala
de graduación, sin embargo, la orina empleadas en el urocultivo o la sangre para el
hemocultivo se puede determinar con pipeta o jeringuilla respectivamente el volumen
que será sembrado.

 Siembra masiva: Cuando se desea realizar una siembra masiva se puede utilizar la
espátula de Driglaski. En este caso la gota de muestra liquida se esparce con la
espátula por toda la superficie del medio de cultivo sólido imprimiéndo un movimiento en
espiral. La siembra masiva también se puede realizar con un hisopo grueso embebido
de un cultivo liquido, procediendo a su deslizamiento sobre toda la superficie de una
placa de agar.

 Siembra por dilución: Se toma el tubo de ensayo con medio líquido, como el caldo
simple. Se toma el material a diluir y se siembra en el tubo con el uso del asa cargada
con el material bacteriológico, se agita, con movimientos moderados.

 Siembra por estrías en superficie: Se siembra el material en la superficie de el agar

inclinado en un tubo de ensayo, allí se extiende por toda la superficie con el asa
bacteriológica, previamente esterilizada y cargada con el material a sembrar, haciendo
estrías no muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la parte más
profunda de la superficie inclinada y se termina la estría en la parte más cerca de la
boca del tubo

.
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

 Siembra por punción :Como es obvio, el instrumento de siembra a emplear será la

aguja de platino y el medio de cultivo sólido, generalmente, en tubo de ensayo. Las
manipulaciones y la observancia de las precauciones de asepsia, son similares que
cuando se utiliza el asa. La particularidad que tiene este método, es que la aguja (con el
inoculo) debe atravesar perpendicularmente el medio de cultivo.

 PARA AISLAR: se utiliza alguno de los siguientes procedimientos: corporacionbiologica., (2020)

A) Métodos generales 1) Por diseminación en superficie (agotamiento de ansa, depósito y

posterior quemado y dilución) 2) Por mezcla.

B) Métodos especiales (calentamiento, agregado de álcali o ácido, por temperatura de

incubación, cambios en el pH y presencia de sales o colorantes). Estos métodos sirven cuando se
desea aislar un microorganismo que posea una característica especial (resistente al calor,
anaerobio, etc)

Se basan en las características del germen que se quiere aislar. Hay que tener en cuenta que puede
haber gérmenes que poseen idénticos comportamientos frente a un mismo agente físico o químico.

i) Calentamiento: se utiliza para el aislamiento de gérmenes esporulados de los no

esporulados. Consiste en calentar la suspensión a 100ºC durante 10 min. y 85ºC durante
15 o 30 min. Luego se siembra en medios sólidos.
ii) Agregado de álcali o ácido: tratamiento de la muestra con algunos de estos agentes ya
que existen microorganismos que los resisten y otros que no.
iii) Variaciones de la temperatura de incubación: incubando a dos temperaturas distintas
iv) i Cambios en el pH: existen unos pocos gérmenes que pueden crecer en medios con pHs
extremos.
v) Presencia de sales o colorantes: debido a la capacidad de distintos microorganismos de
crecer o no en medios con sales, sustratos, colorantes o antibióticos, se utilizan distintos
medios de cultivo con el fin de lograr su aislamiento.

2. Relacionando los temas vistos en teoría, ¿qué tipo de gérmenes Gram positivos y Gram
negativos podemos encontrar en las diferentes secreciones y muestras que regularmente
llegan al laboratorio de Microbiología?

3. Investigar las condiciones del paciente para la toma de las siguientes muestras y la forma
adecuada de realizar la inoculación de cada una de ellas sobre el medio de cultivo
correspondiente.

Urocultivo con recuento de Colonias: vzlaboratorios, (2017)

Instrucciones para pacientes que no controlan esfínteres:
 Lavar los genitales con abundante agua y jabón. En los varones, retraer el
prepucio para su mejor higiene.
 Abrir la tapa del frasco en el momento de comenzar la recolección al acecho.
 Si se demora la micción espontánea, reiterar la higiene cada 30 minutos.
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

 Rotular y enviar al Laboratorio INMEDIATAMENTE

Punción suprapúbica vzlaboratorios, (2017)

 Lavado de manos y colocación de guantes.
 Realizar limpieza de la piel con alcohol 70º, Dejar secar.
 Aplicar antiséptico en forma concéntrica en la zona de punción. Dejar secar.
 Aspirar el contenido de vejiga con aguja y jeringa estéril y colocar la orina
obtenida en recipiente estéril (frasco para urocultivo, tubo cónico con tapa a
rosca).
 Rotular y enviar al Laboratorio INMEDIATAMENTE.

Líquido Céfalo Raquídeo: FUNLARGUIA,( 2014)

o Toma de muestra: lavarse las manos con antiséptico y secarlas con toalla descartable.
 colocarse los guantes estériles
 realizar una adecuada limpieza de la piel con alcohol 70º:dejar secar.
 aplicar el antiséptico en la zona a punzar. dejar actuar 1 a 2 minutos.
 realizar la punción según las pautas establecidas
 separar el volumen obtenido :
- 1 frasco para citoquímico
- 1 tubo estéril con tapa a rosca para el laboratorio de microbiología.
 volumen óptimo: > 1 ml.

Esputo. FUNLARGUIA,( 2014)

Toma de muestra: se necesita una muestra de esputo. Le pedirán que tosa profundamente y
que escupa cualquier flema que provenga de sus pulmones en un recipiente especial. La
muestra se envía a un laboratorio. Allí, se coloca en un plato especial (cultivo). Luego se
observa por dos a tres días o más para ver si hay proliferación de bacterias u otros microbios
que causan enfermedades.

o Muestras genitales
o Ojos y oídos
o Muestras de las vías respiratorias inferiores

4. ¿De qué depende el desarrollo de una infección por microorganismos?

5. Realice un cuadro comparativo relacionando las diferentes infecciones producidas por

microorganismos Grampositivos y Gramnegativos, con sus características, factores de
virulencia. EnciclopediadeEjemplos(2022), FUNLARGUIA, 2014)

Gram positivos
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

características factores de virulencia

Staphylococcus aureus. es anaerobio facultativo, Responsable de abscesos,

coagulasa positivo, catalasa dermatitis, infecciones
positivo y oxidasa negativo, Tiene localizadas y posibles
forma de coco y puede aparecer gastroenteritis.
en parejas, en cadenas o en
racimos. Su tamaño oscila entre
0,8 a 1,5 micras de diámetro, es
inmóvil y algunas cepas producen
una cápsula externa mucoide

Streptococcus pyrogenes. Streptococcus pyogenes Causante de infecciones

pertenece a la familia supurativas en el trayecto
Streptococcaceae. Es una bacteria respiratorio, así como de
Gram positiva, normalmente fiebre reumática.
anaerobia facultativa, catalasa
negativa, inmóvil, de forma
esférica y con un diámetro inferior
a 2 micras (μm). Se suele agrupar
formando cadenas de dos
(diplococus) o más bacterias.

Streptococcus aglactiae. es un coco grampositivo, catalasa Frecuente en casos de

y oxidasa negativo, anaerobio meningitis neonatal,
facultativo, que se presenta endometritis y neumonía.
formando cadenas de longitud
variable.

Streptococcus faecalis. es una bacteria inmóvil, Usual en infecciones en vías

anaerobia facultativa y biliares y urinarias, habita en
fermenta la glucosa sin el colon humano.
producir gas. No presenta una
reacción con la catalasa en
presencia de peróxido de
hidrógeno, puede producir una
reacción pseudocatalasa si se
cultiva en agar sangre, sin
embargo esta es muy débil.

Streptococcus pneumoniae. pertenece a la familia Responsable de neumonías

Streptococcaceae. Es una e infecciones en las vías
bacte- ria Gram positiva, respiratorias, así como otitis,
normalmente anaerobia meningitis y peritonitis.
facultativa, catalasa negativa,
inmóvil, con forma ovalada,
rodeada de una cápsula (no
presenta antígenos de
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

Lancefield) y se sue- le agrupar

formando cadenas de dos (di-
plococus) o más bacterias.

Streptococcus sanguis.. S. sanguinis es una bacteria Causante de endocarditis,

anaerobia facultativa gram cuando ingresa al torrente
positiva, perteneciente al grupo sanguíneo a través de
de S. viridans. lesiones en su hábitat, la
boca y la mucosa dental

Clostridium tetani. su metabolismo, es anaerobio Bacterias responsables de

estricto y catalasa negativo. los tétanos, entran al cuerpo
desde el suelo por
traumatismos en las
extremidades.

Bacillus antracis. es una bacteria que forma Se trata de la conocida

esporas aeróbicas que bacteria del ántrax, tanto en
producen enfermedad en su versión cutánea como en
humanos y animales. Las la pulmonar.
bacterias se encuentran en dos
formas: ántrax cutáneo y ántrax
por inhalación. El ántrax
cutáneo es una infección de la
piel causada por contacto
directo con la bacteria.

Clostridium botullinum.. es un bacilo anaeróbico Causante del botulismo

estricto, grampositivo, del clásico y el infantil, habita en
género Clostridium, familia el suelo y en los alimentos
Clostridiaceae, formador de mal conservados
esporas que produce una
toxina neurotóxica.

Clostridium perfringes. es un bacilo Gram-positivo Esta bacteria segrega

anaeróbico, relativamente toxinas que destruyen la
aerotolerante. Cuando la pared celular, y es
bacteria es expuesta a responsable de las
condiciones adversas, puede gangrenas gaseosas, la
formar esporas que persisten enteritis necrosante y la
en el suelo, agua, sedimentos endometritis.
de áreas sujetas a
contaminación fecal de origen
animal y/o humano.

Gram negativos
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

Neisseria meningitidis. es una bacteria gramnegativa Peligrosa bacteria causante

de pequeño tamaño (0,6-1,5 de meningitis y
µm de diámetro), con una meningocococemias,
morfología característica, coloniza las vías
presentándose en forma de respiratorias humanas y
diplococos con las caras asciende a las meninges por
laterales adyacentes aplanadas vía sanguínea.
(semejante a granos de café),
no forma esporas, inmóvil y
capsulado

Neisseria gonorrhoeae.. es una cocácea gramnegativa Conocidísima por ser la

que se agrupa en pares causante de la gonorrea,
(diplococos) con lados común enfermedad de
adyacentes apla- nados, y transmisión sexual
apariencia de granos de café.
Es un microorganismo
intracelular facultativo, no
móvil, no esporulado, oxidasa y
catalasa positiva.

Escherichia coli. e caracteriza por poseer Habitante usual del colon

bacilos Gram negativos, no humano, está involucrada
esporulante, producción de en las llamadas “diarreas
indol a partir de triptófano, no del viajero”, así como en
utilización de citrato como meningitis neonatal, sepsis
fuente de carbono y no e infecciones urinarias.
producción de acetoína.
Además, fermenta la glucosa y
la lactosa con producción de
gas

Salmonella typhi se ubica dentro del Orden . Bacteria responsable de la

Enterobacteriales y la Familia enfermedad conocida como
Enterobacteriaceae. Sus fiebre tifoidea, suele
miembros son bacilos Gram transmitirse por vía fecal-
negativos, generalmente oral: contaminación de
móviles por flagelos peritricos aguas, mala disposición de
(excepto S. Gallinarum), excretas o higiene
anaerobios facultativos no defectuosa.
encapsulados y no
esporulados.

Salmonella enteritidis es un bacilo Gram negativo Suele ocasionar enterocoitis

que hace parte de la familia y septicemia con abscesos
Enterobacteriaceae, si llega a pasar del intestino
actualmente contempla cerca a la sangre.
de 2700 serovares. Con
excepción de la serovariedad
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

Gallinarum-Pollorum, son
móviles gracias a la presencia
de flagelos perítricos

Brucella abortus. es una bacteria Gram negativa Ocasiona la brucelosis, una

inmóvil que es observada al enfermedad del ganado que
microscopio de luz como se transmite al hombre por
bacilos cortos o cocobacilos contacto con los animales o
por ingesta de lácteos sin
pasteurizar.

Bordetella pertussis. ertenece a la familia Causante de la enfermedad

Alcaligenaceae. Son conocida como Tos ferina,
cocobacilos pleomór- ficos (en de alta mortalidad infantil.
cultivos envejecidos pueden
ad- quirir forma filamentosa),
Gram negativo, que se
disponen aislados o en parejas,
con un tamaño de 0,2-0,5 x
0,5-2 micras, aero- bios
estrictos, inmóviles,
encapsulados y de crecimiento
lento.

Francisella tularensis. Pertenece a la familia Responsable de la llamada

Francisellaceae. Se trata de “fiebre del conejo” o
cocobacilos Gram negativo, tularemia, se transmite al
con un tamaño de 0,2 a 0,5 hombre mediante vectores
micras (µm) de ancho por 0,7 a (ácaros u otro tipo de
1,0 µm de largo, aerobios exoparásitos) de los
estrictos, inmóviles y no conejos, ciervos y animales
formadores de esporas. semejantes.

Pasteurella multocida. la especie tipo del género, es Bacilo anaeróbico

un cocobacilo pleomórfico transmitido por la
gramnegativo. En la tinción de mordedura de animales
Gram puede observarse como domésticos infectados, tales
formas cocoides o como como perros y gatos. Se
bacilos cortos o filamentosos, disemina a través de la piel
con una típica tinción bipolar, e infecta el sistema
que pueden aparecer sueltos o respiratorio, causando
agrupados en parejas o también celulitis.
cadenas cortas.

6. Explique, ¿cuál es el papel que cumplen las bacterias en las enfermedades?

Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

7. Indague sobre la historia de cómo y cuál fue la primera bacteria que descubrieron dentro
del campo de la ciencia.

R/ Cuando la peste negra (peste bubónica) alcanzó al-Ándalus en el siglo XIV, Ibn Khatima e
Ibn al-Jatib escribieron que las enfermedades infecciosas eran causadas por entidades
contagiosas que penetraban en el cuerpo humano; Las primeras bacterias fueron observadas
por el neerlandés Anton van Leeuwenhoek en 1676 usando un microscopio de lente simple
diseñado por él mismo.8 Inicialmente las denominó animálculos y publicó sus observaciones
en una serie de cartas que envió a la Royal Society de Londres Porter JR (1976).

8. ¿Cómo podemos diferenciar los microorganismos Gram positivos de los Gram negativos?
¿qué diferencia presenta su estructura? Indique cuáles son las bacterias Gram positivas y
negativas más conocidas.

9. Explique el fundamento de la coloración de Gram y la de Zielh Neelsen. Establezca

diferencias. ¿Para qué tipo de microorganismos se utiliza? Equipo editorial, (2021)

Tinción de Gram es un examen utilizado para identificar bacterias. Es una de las formas más
comunes de diagnosticar rápidamente una infección bacteriana en el cuerpo.

La tinción de Ziehl-Neelsen en una técnica de coloración para identificar microorganismos

alcohol-ácido resistentes (AAR).

Diferencia

 Algunos géneros de bacterias son muy difíciles de teñir mediante tinción de Gram,
debido al alto contenido de ácidos micólicos de la pared celular.en cambio se tiñe con
Ziehl-Neelsen los ácidos grasos presentan estructuras muy largas, estos pueden retener
los colorantes con mayor facilidad.
 En la tinción de gram se utlilizan otras sustancias menos acidas en cambio en la tinción
de Ziehl-Neelsen además esta tiene unas estructuras y composion diferente

10. ¿Por qué se dice que los organismos aerobios como los Micrococus y Staphylococcus
presentan una morfología similar?
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

11. ¿Qué tipos de organismos del género Streptococcus son patógenas para el hombre y
animales? ¿cómo podemos diferenciar los estreptococos patógenos de humanos de los no
patógenos?

zoonóticas. edu.cooperation,( 2005)

 S. equi subesp. zooepidemicus (beta hemolítico; grupo C de Lancefield): es un
patógeno oportunista que causa una serie de infecciones en muchas especies.
 S. suis (beta no hemolítico; grupos R, S y T de Lancefield): es un
microorganismo patógeno o comensal, en general, asociado con los cerdos. Hay por
lo menos 35 serotipos de S. suis con virulencia variable. Generalmente, el tipo 2 se
aísla con mayor frecuencia a partir de casos clínicos en cerdos, pero esto puede
variar según la región geográfica. El tipo 2 también es la cepa clínica predominante
en humanos.
 S. iniae (beta hemolítico; sin antígenos de los grupos de Lancefield):es una
zoonosis recientemente reconocida del pescado. Se cree que existen cepas
virulentas y comensales de S. iniae.
 S. canis (beta hemolítico; grupo C de Lancefield): es un patógeno oportunista
que se encuentra en perros y otras especies
 S. pyogenes (beta hemolítico; grupo A de Lancefield) es un patógeno humano
que causa faringitis (amigdalitis estreptocócica), enfermedades cutáneas y muchas
otras infecciones. S. pyrogenes de los seres humanos puede infectar las ubres de
los bovinos; como resultado, la leche cruda contaminada puede causar brotes de
enfermedades en la especie humana
 Organismos, incluidos virus, bacterias o quistes, capaces de causar una enfermedad
(tifus, cólera, disentería) en un receptor (por ejemplo, una persona). Hay diversos
tipos de organismos que NO causan enfermedades. Estos se denominan no
patógenos.

Referencias
Elementos Del Laboratorio De Microbiología Y Microscopía Óptica Por L. Rivera, A. Hernández.

corporacionbiologica. (11 de 2020). Obtenido de corporacionbiologica.:

https://corporacionbiologica.info/wp-content/uploads/2020/11/2020-TP2-BIOQ-Y-LCTA77.pdf

editorial, E. (19 de 02 de 2021). lifeder. Obtenido de lifeder: https://www.lifeder.com/tincion-ziehl-neelsen/

edu.cooperation. (05 de 2005). Obtenido de edu.cooperation:

https://www.cfsph.iastate.edu/Factsheets/es/streptcoccosis-es.pdf

Enciclopedia de Ejemplos (2022). "Bacterias Gram positivas y Gram negativas". Recuperado

de: https://www.ejemplos.co/20-ejemplos-de-bacterias-gram-positivas-y-gram-negativas/
FUNLARGUIA. (2014). Obtenido de FUNLARGUIA:
http://www.funlarguia.org.ar/Herramientas/Guia-de-Prevencion-de-Infecciones-Intra-
Hospitalarias/Toma-de-muestras-para-cultivos

labdemicrobiologia.wixsite.com. (2 de 12 de 2015). Obtenido de labdemicrobiologia.wixsite.com:

https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/tipos-y-medios-de-cultivo

vzlaboratorios. (2017). Obtenido de vzlaboratorios: https://vzlaboratorios.com/indicaciones/urocultivo-

recuento-de-colonias-mujeres-y-ninas-recoleccion-en-domicilio/

Porter JR (1976). «Antony van Leeuwenhoek: Tercentenary of his discovery of bacteria». Bacteriological
reviews 40 (2): 260-9. PMID 786250. Consultado el 04 de mayo de 2022.