FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

NADH + ½ O2 + H+ → H2O + NAD+

Exergónico ΔGo’= - 220.1 kJ/mol
¿Cómo se acoplan
estos procesos ?

la búsqueda duró
Endergónico
varias décadas
ADP + Pi + H+ ↔ ATP + H2O

ΔGo’= + 30.5 kJ/mol

 ΔGo’

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Variation_de_l%27%C3%A9nergie_libre_pend
ant_le_transport_d%27%C3%A9lectrons.jpg
 1961-Peter Mitchell
Propuso la Teoría Quimiosmótica

 El transporte electrónico y la síntesis de ATP se acoplan mediante un

gradiente de protones a través de la membrana interna mitocondrial

Constituye con el descubrimiento de la estructura del ADN el segundo

avance principal en la Biología del siglo XX

En 1961 Mitchell fue considerado por colegas con ideas de bufón de la corte….
En 1978 recibió el premio Nobel.

Un gradiente de protones impulsa la síntesis de ATP

 Recordemos en que etapas se establece el gradiente de H+

4 4 2

Espacio
Intermebrana

Membrana
interna
mitocondrial

MATRIZ
mitocondrial

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chaine_de_transport_d%27electrons2.png
 Espacio
intermembrana Matriz

[H+]matriz disminuye
se genera un campo
eléctrico negativo en la
matriz
Bomba de
protones

El pH externo es 1.4 unidades menor que el interno

y el potencial de membrana en de 0.14 v, positivo en el exterior.

Este potencial de membrana se corresponde con una

ΔG’o de 21.8 kj/mol de protones.
Los H+ bombeados fuera de la matriz fluyen de vuelta a la matriz para igualar la
distribución delos mismos

flujo de H+ que
regresa a la matriz e Gradiente Gradiente
químico de carga
impulsa la síntesis
de ATP = ΔpH + Δψ
Fuerza protón- (dentro (dentro
motriz (Δp) alcalino) negativo)

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http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chaine_de_transport_d%27electrons2.png
 La ATP-sintasa o complejo V

 Antes la llamaban F1Fo-ATPasa mitocondrial ¿porqué?

¿Cómo se convierte la fuerza

Membrana
protón-motriz en el potencial
Fo Interna
de transferencia de fosforilo
mitocondrial
de alta energía del ATP?
Matriz

Fo: contiene el canal de H+

Subunidades c10-14 insertas en la
membrana y una subunidad a
F1
Fo y F1 se conectan por las subunidades ge
y mediante una columna externa (a, b2, d)

F1 : contiene la actividad catalítica

(a3, b3, g, d , e)
http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Atp_synthase.PNG
 Fo: contiene el canal de H+
permite el regreso de H+ a la
Espacio matriz mitocondrial y este flujo
intermembrana de H + permite la liberación del
c12 ATP de Fo
a

Membrana interna
mitocondrial

Matriz g

ADP + Pi b2
F1 : actividad catalítica
sitio de síntesis del ATP
ATP (necesita del flujo de
a protones para liberar el ATP
b b sintetizado)
d
a a
b

Adaptada de Lehninger 4ta. Edición 2005

 Las subunidades F1 aisladas
exhiben actividad ATPasa

La liberación del ATP desde la ATP sintasa es la mayor

barrera energética que hay que sobrepasar

Subunidad g rompe la simetría del

hexámero a3 b 3 pues cada una de las
subunidades b es distinta en virtud de sus
g interacciones con diferentes caras de g
(interacciones con aminoácidos diferentes
de cada cara de la subunidad g)

a Las subunidades a y b son NTPasas de bucle P

b b
 Las dos unen nucléotidos
a a  Sólo la subunidades b participarían directamente en la
b catálisis
Adaptada de Lehninger 4ta. Edición 2005
 Unidad móvil o rotor:
Espacio formada por el
intermembrana anillo c y el tallo e, g
c12

Matriz g

b2 Unidad estacionaria
ADP + Pi
NO móvil: formada por
ATP el resto de la molécula
a
b b
d
a a
b

Adaptada de Lehninger 4ta. Edición 2005

EL flujo de H+ a través de la ATP sintasa provoca la liberación del ATP
fuertemente unido: el mecanismo de cambio de unión

Poder distinguir entre El papel de gradiente de

las tres subunidades b 3 centros H+ no es la formación
resulta crucial para activos (b) del ATP sino su
entender el mecanismo liberación de la sintasa
de síntesis de ATP

una subunidad b puede llevar a cabo

cada uno de los tres pasos del proceso de
síntesis de ATP cambiando de conformación

1) Unión del ADP + Pi

2) Síntesis de ATP
3) Liberación de ATP

Por más información ver el siguiente link

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:ATPsyn.gif
 Los sitios de unión a nucléotidos de la ATP sintasa
no son equivalentes

g Las subunidades b son las que participa

directamente en la catálisis

 las interacciones con la subunidad g

hacen que las tres subunidades b
no sean equivalentes

a
b b

a a
b
Adaptada de Lehninger 4ta. Edición 2005

L= floja, el ADP + Pi se pueden unir Lubert Stryer 7ma. Edición 2012

T= tensa, el ADP + Pi pasa a ATP
O= abierta el ATP o el ADP y el Pi se liberan fácilmente
 Mecanismo de cambio de Unión de la ATP sintasa

Lubert Stryer 7ma. Edición 2012

La rotación de la subunidad g promueve la

interconversión entre las tres conformaciones de b

L= floja, el ADP + Pi se pueden unir

T= tensa, el ADP + Pi pasa a ATP
O= abierta el ATP o el ADP y el Pi se liberan fácilmente
 H+

H+
Lubert Stryer 7ma. Edición 2012

Se requiere que 3 H+ sean translocados para liberar 1 ATP

¿Cómo el flujo de H+ alrededor del anillo c
impulsa la liberación de ATP ?

Lubert Stryer 7ma. Edición 2012

 H+

H+

Se requiere que 3 H+ sean translocados para liberar 1 ATP

 Un protón adicional se consume en el transporte del ATP de la matriz al citoplasma

Espacio
intermembrana Matriz mitocondrial

Translocasa
ATP/ADP

ATP
sintasa 3H+
3 3H+

Translocasa
de Fosfato OH-

Adaptada de Lehninger 4ta. Edición 2005

Entonces 4H+ son necesarios que regresen a la matriz para la liberación de 1 ATP
 4 4 2

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Chaine_de_transport_d%27electrons2.png

 El transporte de electrones del NADH se acoplaba al bombeo de 10 H+

10/4=2.5 ATP

 El transporte de electrones del FADH2 se acoplaba al bombeo de 6 H+

6/4= 1.5. ATP

 Por cada NADH oxidado 2.5 ATP
Por cada FADH2 oxidado 1.5 ATP

Vía metabólica Productos ATP producido por

molécula de glucosa
Glicólisis 2 NADH (citosólico) 3o5
2 ATP (dependiendo de la
lanzadera que hace
entrar los e del NADH
a la matriz)
Oxidación del Piruvato 2 NADH (matriz) 5
(dos por glucosa)

Oxidación del acetil-CoA 6 NADH (matriz) 15

en el Ciclo de Krebs 2 FADH2 (matriz) 3
(dos por glucosa) y 2 ATP o GTP 2
Fosforilación Oxidativa.

Rendimiento neto por molécula de glucosa 30

 Lanzadera aspartato malato

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Malate-aspartate_shuttle.png

 Lanzadera del malato-aspartato en corazón, hígado y riñones

 Lanzadera de glicerol 3-fosfato

Dihidroxiacetona Glicerol
fosfato 3-fosfato
Glicerol-3-fosfato
Deshidrogenasa
citoplasmática

Glicerol-3-fosfato
Deshidrogenasa
Mitocondrial
unida a la membrana

Citoplasma

Matriz

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:GPDH_shuttle.png

 Lanzadera del glicerol 3- fosfato en cerebro y músculo esquelético

 La velocidad de la fosforilación oxidativa está determinada
por la necesidad de ATP

En condiciones normales los e- no suelen desplazarse a lo largo de la cadena de

transporte de electrones hasta el O2 a menos que al mismo tiempo
el ADP se fosforile por ATP

Que puede incrementar la velocidad de la fosforilación oxidativa

Que la [ADP] ↑ como puede ocurrir en el músculo activo

(control respiratorio o control por aceptor).

A su vez la disponibilidad de NAD+ y FAD controlan la velocidad del ciclo de Krebs

 Desacoplamiento regulado
provoca la generación de calor

En algunos organismos

Desacople de la fosforilación oxidativa

de la síntesis de ATP

Objetivo mantener el calor corporal

En animales que hibernan,

en tejido adiposo pardo
Rico en mitocondrias
Rico en hemoglobina

Termogenina (activada por ácidos grasos)

http://commons.wikimedia.org/wiki/File:ThermogeneseAdipozyten-en.svg
 Inhibidores de la cadena respiratoria
También inhiben la síntesis de ATP

Rotenona y amital

Antimicina A

Cianuro (CN-)
azida (N3-)
monóxido de carbono (CO)
 Inhibidores y agentes desacoplantes

Inhibidores de
la ATP sintasa

Agentes
desacoplantes

Lehninger 4ta. Edición 2005

Transportan H+ a través
de la membrana interna
mitocondrial