ÍNDICE

INTRODUCCIÓN...........................................................................................................................3
I. TRANSICIONES ELECTRÓNICAS Y ABSORCIÓN DE LA ENERGÍA UV.......................................4
II. ESPECTRÓMETROS Y ESPECTROS UV....................................................................................6
III. CROMÓFOROS y AUXOCROMOS:.........................................................................................7
IV. LEY DEBOUGUER-LAMBERT-BEER:......................................................................................9
V. COMPUESTOS AROMÁTICOS.............................................................................................14
VI. INTERPRETACIÓN Y USOS DE ESPECTROS UV...................................................................15
VII. APLICACIONES:..................................................................................................................15
VIII. EJERCICIOS APLICATIVOS:.................................................................................................15
IX. BIBLIOGRAFÍA...................................................................................................................16
INTRODUCCIÓN

La espectrometría atómica uv – visible se basa en la medición de propiedades ópticas

como la absorción, y emisión de luz, (así como la Fluorescencia), por los átomos libres
en fase gaseosa, en las regiones ultravioleta y visible del espectro. Esta metodología
comprende una serie de técnicas analíticas ampliamente utilizadas en el análisis
elemental, las cuales han protagonizado un desarrollo técnico, científico y comercial
impresionante desde la segunda mitad del siglo XX.

El espectro Ultravioleta y Visible de las moléculas está asociado a transiciones

electrónicas entre los diferentes niveles energéticos en ciertos grupos o átomos de la
molécula y no caracterizan a la molécula como entidad.

La espectroscopia visible es una de las técnicas más ampliamente y más

frecuentemente empleadas en el análisis químico. Para que una substancia sea activa
en el visible debe ser colorida: el que una substancia tenga color, es debido a que
absorbe ciertas frecuencias o longitudes de onda del espectro visible y transmite otras
más. La absorción y transmisión de las longitudes de onda de la región visible de esta
parte del espectro no es la misma en substancias que den diferentes tonalidades de
amarillo, por lo que podemos tener una gama diferente de tonalidades como: amarillo
canario, amarillo limón, amarillo pálido, etc.
 I. TRANSICIONES ELECTRÓNICAS Y ABSORCIÓN DE LA ENERGÍA UV
Las bandas de absorción en las regiones Ultravioleta y Visible, que presentan
los compuestos orgánicos, se asocian con transiciones electrónicas en la capa
de valencia. Los electrones involucrados en dichas transiciones corresponden a
aquellos mas débilmente atraídos por el conjunto de núcleos atómicos que
componen la molécula y cuyos estados pueden ser descritos a través de
orbitales moleculares que se expresan como combinaciones lineales de
orbitales atómicos de la capa de valencia. Las transiciones electrónicas a
orbitales moleculares más externos dan lugar a las denominadas transiciones
Rydberg presentes en el Ultravioleta de Vacío. Por otra parte las transiciones
electrónicas que involucran a los electrones de las capas internas son muy
energéticas y se presentan en la región de los rayos X del espectro
electromagnético.

Ilustración 1: Tipos de transiciones electrónicas.

La transición electrónica más importante suele ser del HOMO (último orbital
ocupado) al LUMO (primero orbital vacío) que corresponde al menor salto
energético y le corresponde una longitud de onda grande.
La conjugación acerca al HOMO y al LUMO del sistema disminuyendo la
variación de energía (∆ E ) de la transición, esto ocurre a 𝞴 menor.

Ilustración 2: acercamiento de del HOMO y LUMO a causa de la

conjugación.

1. Transiciones σ → σ∗: Se presentan en todos los compuestos orgánicos

simples. Son en general de gran energía (UV de vacío) e intensidad.
λ< 200 nm.
2. Transiciones σ → π∗:Son posibles solo en compuestos insaturados. Son
transiciones de baja intensidad (regiones de definición de los orbitales
involucrados diferentes) en el UV lejano. Carecen de interés práctico.
3. Transiciones π → π∗: Presentes solo en compuestos insaturados. En
ausencia de conjugación estas transiciones se presentan en UV de vacío.
Dan lugar a bandas intensas que pueden aparecer en UV cercano si está
presente insaturación conjugada. λ 200−350 nm.
La banda de energía HOMO-LUMO es afectada por los sustituyentes del
doble enlace. Cuando la ΔE HOMO-LUMO se hace menor, la λ max se
corre a valores mayores. La inserción de un grupo alquílico causa un
corrimiento a mayores λ max .
Ilustración 3: Incremento de la longitud de onda máxima, por la inserción del grupo alquílico.

4. Transiciones n → π∗: Presentes en compuestos insaturados con

heteroátomos (grupos carbonilo, nitro, azo, tiocarbonilo). Dan lugar a
bandas débiles usualmente en la región UV cercana (baja energía de
transición). λ 350−700 n m
5. Transiciones n → σ∗: Se presentan en compuestos con heteroátomos
(O, N, S, Hal.), generalmente en la región cercana a los 200 nm. La
intensidad es variable dependiendo de la naturaleza del orbital n.

II. ESPECTRÓMETROS Y ESPECTROS UV

Los espectrofotómetros son aquellos instrumentos en los que se mide

fundamentalmente la distribución espectral de energía radiante en las regiones
espectrales: UV, VIS e IR (cercano hasta el medio).
Estos instrumentos utilizan un complejo sistema óptico de selección de longitud
de onda (monocromador). Pueden seleccionar longitud de onda en forma
continua y en algunos casos con precisión de décimas de nanómetros. Por lo
tanto, es posible obtener en forma continua el espectro de absorción de una
molécula.
Se clasifican en:
 Espectrómetro de un solo haz: Se basa en la absorción de la luz al pasar
un solo haz por la muestra a una longitud de onda específica. Produce
luz monocromática y la detecta después de atravesar la muestra de
estudio.
 Espectrómetro de doble haz: En este tipo de instrumento la radiación se
divide en dos, uno pasa por la muestra y el otro a la muestra en blanco.
  Espectrómetro multicanal: Obtención de espectros con barrido
electrónico y reproducibilidad de longitud de onda (
200 – 800 nm ,UV /VIS /IR ).
 Espectrómetro de doble dispersión: Estos instrumentos mejoran la
resolución espectral y reducen la radiación parásita, trabajan en el
rango de 185 a 3125 nm.
 Espectrómetro de longitud de onda dual.

Ilustración 4: Componentes básicos de un espectrómetro.

III. CROMÓFOROS y AUXOCROMOS:

 Cromóforos:
Son Grupos funcionales que absorben radiación visible o del UV próximo
(λ> 200 nm) cuando se hallan enlazados a una cadena orgánica saturada no
absorbente.

 Auxócromos:
Son Grupos funcionales que poseen electrones de valencia
No enlazantes, n, que no absorben a λ>220 nm, pero muestran absorción
intensa de radiación en el UV lejano (180−200 nm), debido a transiciones
n∗¿.
Ilustración 5: Características de absorción de algunos cromóforos.

Efecto Batocrómico e Hipsocrómico

 Si un grupo auxócromo se asocia a la cadena de un cromóforo, la banda

de absorción del cromóforo se desplaza a longitudes de onda más largas
(Efecto Batocrómico o desplazamiento hacia el Rojo) a la vez que
aumenta su intensidad (Efecto Hipercrómico).
 Efecto Hipocrómico: Cuando disminuye la intensidad de una banda.
 Si se desplaza la longitud de onda del máximo de absorción de un
cromóforo a longitudes de onda más cortas (ej. al cambiar a un
disolvente más polar) se ha producido un Efecto Hipsocrómico o
Desviación hacia el Azul.
Ilustración 6: causo del efecto batocrómico y hipsocrómico.

IV. LEY DEBOUGUER-LAMBERT-BEER:

Es la relación empírica que relaciona la intensidad de luz entrante en un medio
con la intensidad saliente después de que en dicho medio se produzca
absorción
En forma independiente, Wilhel Beer y Johann Lambert propusieron que la
absorbancia de una muestra a determinada longitud de onda depende de la
cantidad de especie absorbente con la que se encuentra la luz al pasar por la
muestra.
La relación entre ambas intensidades puede expresarse a través de las
siguientes relaciones:
 Para líquidos:
I1 −αl −ε lc −A
=10 =10 =10
I0

 Para gases:
I 1 −α ' l − A '
=e =e
I0
 Donde:

 I 1 , I 0 :son las saliente y entrante respectivamente .

 A , αl , εlc : Es la , que puede calcularsetambién como:
I
A=−log 1 =−log T =¿ εlc ¿
I0
I 1 : Intensidad de la luz emitidauna vez atravesada la muestra .

I 0 : Intensidad de la luz incidente .

l : Es la longitud atravesada por laluz en el medio

c :es la del absorbente en el medio .
ε :coeficiente de extinción (característico de cada sustancia)
α : es el coeficiente de absorción .
T :Transmitancia ,cociente de intensidad emitida entre intensidad incidente .
4 πk λ
 α '= , es el coeficiente de absorción .
λ
 λ , es lalungitud de onda de luz absorbida.
 k λ , es el coeficiente de extinción.

La ley explica que hay una relación exponencial entre la transmisión de luz a
través de una sustancia y la concentración de la sustancia, así como también
entre la transmisión y la longitud del cuerpo que la luz atraviesa. Si conocemos l  
y α, la concentración de la sustancia puede ser deducida a partir de la cantidad
de luz transmitida.

Ilustración 7: ley de Beer-Lambert esquematizado.

Ilustración 1: Graficas de absorbancia vs longitud de onda y absorbancia vs concentración.

Limitaciones a la aplicabilidad de la Ley de Beer-Lambert:

Se observan frecuentemente desviaciones de la proporcionalidad entre A y c
(cuando b es constante). Algunas de estas desviaciones son importantes y
representan limitaciones reales de la ley.
a) Desviaciones reales:
La Ley de Beer es sólo aplicable a soluciones en las que las interacciones
dependientes de la concentración de las moléculas o iones son mínimas.
Concentraciones “altas” alteran las absortividades molares y por lo
tanto conducen a una relación no lineal entre A y c.
b) Desviaciones químicas:
Cuando las especies absorbentes experimentan asociación, disociación
o reacción con el solvente originan productos con características
absorbentes distintas de las del analito.
Un ejemplo típico se observa con soluciones de dicromato potásico no
amortiguadas, en las que existen los siguientes equilibrios:
−2
+¿+2 Cr O ¿
Cr 2 O7 + H 2 O↔ 2 HCr O 4 ↔ 2 H 4

A casi todas las longitudes de onda los valores de ε del ion dicromato y
las dos especies de cromatos son muy diferentes.
 c) Desviaciones instrumentales:

 Radiación policromática: El requisito básico para el cumplimiento

de la Ley de Beer es que la radiación incidente sea
monocromática. Dependiendo de las características tecnológicas
del Radiación policromática: p g sistema óptico del instrumento
será más o menos accesible poder utilizar en forma práctica una
radiación limitada a una sola longitud de onda.

 Radiación dispersa: La radiación dispersa suele diferir

considerablemente en longitud de onda con respecto a la
radiación principal; además puede alcanzar el detector sin haber
pasado a través de la muestra.

Ilustración 9: Diagrama de bloques de diferentes tipos de instrumentos de medición de la

absorción molecular.
REQUISITOS DE LAS MUESTRAS:

 Las muestras deben entregarse adecuadamente etiquetadas,

envasadas y acondicionadas para asegurar su identificación,
integridad y conservación durante el transporte y garantizar la
seguridad del personal que lo realiza.

 El equipo dispone de una esfera integradora, por lo que se pueden

analizar muestras tanto líquidas como sólidas o en suspensión.

 El volumen mínimo de líquido a analizar es de 3 ml. Las muestras

sólidas deben ser placas con dimensiones comprendidas entre 20
(altura) x 20 (anchura) x 0.5 (grosor) mm y 65 (altura) x 50 (anchura) x
25 (grosor) mm. Las muestras sólidas en polvo deben estar molidas y
no ser abrasivas.

 La muestra deberá presentarse en disolución siendo la concentración

la adecuada para el análisis. Si no se cumple este requisito, la unidad
podrá actuar sobre la muestra (preparando la disolución y/o
obteniendo la concentración adecuada de analito) en cuyo caso,
previa aceptación del usuario, se procederá a facturar un importe en
concepto de preparación de la muestra.

 La disolución del analito debe ser estable en las condiciones de

almacenamiento y análisis.

 Los disolventes y los tampones utilizados no deben interferir en la

zona de medida del analito (ver documentación de la unidad)
 V. COMPUESTOS AROMÁTICOS
El espectro de absorción del benceno consta de tres bandas a 184 , 204 y 256 nm
, que suelen denominarse α , ρ y β . Las bandas α , ρ también se conocen como
primarias y la β banda secundaria. La banda secundaria es amplia debido a su
estructura vibracional.

Ilustración 10: Espectro de absorción del benceno.

La conjugación con otros anillos aromáticos y con sustituyentes que poseen

enlaces dobles o pares solitarios produce un desplazamiento batocrómico en la
bandas

Ilustración 11: Conjugación de anillos aromáticos.

 VI. INTERPRETACIÓN Y USOS DE ESPECTROS UV
El espectro Ultravioleta de una molécula se obtiene generalmente en forma
adicional al espectro infrarrojo de la misma especie. Este espectro IR
frecuentemente sirve como dato confirmativo de la ausencia o presencia de
ciertos grupos funcionales. En algunos casos la espectroscopia UV puede ser
fundamental para el estudio de ciertos problemas específicos. Por ejemplo en
la industria de los cosméticos, tintes, colorantes y pinturas. Existe un gran
número de técnicas para determinar substancias que no tienen un número
suficiente de grupos cromóforos para que la banda de absorción esté dentro
del espectro Visible; por ejemplo ácidos orgánicos, alcoholes, fenoles,
aldehídos, cetonas, etc. Muchos de este tipo de compuestos muestran al
menos una banda de absorción en el UV cercano y tomando como dato su
longitud de onda de máxima absorbancia se pueden cuantificar en la misma
forma en que se determina compuestos en espectroscopia Visible. Es posible
determinar un gran número de sustancias como son: ácido ascórbico,
fructuosa, glicerol, ácido 1-glutámico, lactosa, galactosa, maltosa, glucosa,
rafinosa, dsorbitol, etanol, ácido acético, etc. Estas técnicas analíticas son de
múltiples aplicaciones en bioquímica general y bioquímica de alimentos, y esta
es la razón de su importancia.

VII. APLICACIONES:
 Determinación de grupos funcionales en moléculas orgánicas
 Análisis de muestras bioquímicas
 Determinación de metales en compuestos de coordinación
 Análisis de semiconductores
 Medidas de color
 Determinación cuantitativa
 Seguimiento de la cinética de procesos químicos y bioquímicos

VIII. EJERCICIOS APLICATIVOS:

1. Una disolución 100 µM de un determinado cromóforo tuvo una

transmitancia a 525 nm de 0.5 cuando se midió en una celda 1.5 cmde
longitud.
Calcular:
b) La absorbancia de la disolución.
  A=−log T =−log 0.5=0.301
c) La absorptividad molar del cromóforo.
 A=c∗¿ l → Reordenando la ecuación obtendremos:
−4 3 −1 −1
ε = A/(c∗l)=0.301/(10 M∗1.5 cm)=2 x 10 M c m

2. Una disolución patrón de níquel 5.00 x 10−5 M se coloca en una cubeta de

longitud de paso 1 cm. La absorbancia a 592 nm es0.446 .

a) ¿Cuánto vale ε   a 592 nm?

Dado que A=c∗ε∗l , entonces:

−5
0.446=5 x 10 M∗1 cm∗ε  , y deducimos:

  ε =8920 M −1 cm−1

b) Si una disolución problema de níquel tiene una absorbancia de

0.125 a lamisma λ  ¿cuál es la concentración de níquel en la
muestra?

Aplicando que A=c∗ε∗l , entonces:

0.125¿ 8920 M −1 c m−1∗1 cm∗c , y por lo tanto c=14 µM

IX. BIBLIOGRAFÍA

 http://www.quimicaorganica.org/espectroscopia-visible-ultraviolata/732-
niveles-y-transiciones-electronicas.html
 http://www.yolanda-rios.net/materiales/UVTeoria.pdf
 https://es.slideshare.net/adfghdsd/transiciones-electronicas
 http://www.qo.fcen.uba.ar
 https://es.wikipedia.org/wiki/Ley_de_Beer-Lambert

 http://repositorio.innovacionumh.es/Proyectos/P_22CursoMateriales/
Miguel_Angel_Sogorb/Wimba/Espectroscopia_05.htm