Guia 2 Ucmc

UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

INMUNOLOGÍA GENERAL- LABORATORIO
PRÁCTICA N°2
REACCIÓN ANTÍGENO-ANTICUERPO
1. OBJETIVO GENERAL
Definir conceptos fundamentales para comprender e interpretar la interacción entre un antígeno y
un anticuerpo, en las reacciones que se realizan In vitro.
2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
 Diferenciar las partes del anticuerpo para comprender su interacción con Ags y otros Acs.
 Conocer las clases de Inmunoglobulinas y así establecer sus respectivas funciones.
3. GLOSARIO
 ANTICUERPO
Glicoproteína que reacciona con un antígeno (virus, bacterias, parásitos u hongos) en un organismo
de tipo animal. Pueden hallarse en la sangre u otros fluidos del cuerpo.
FIGURA: http://3.bp.blogspot.com/-PXmQ_2zBNok/T95-fTA5viI/AAAAAAAAAPw/XPUwJTCkikQ/s1600/17-05ac_Antibody_1.jpg
Existen cinco isotipos de inmunoglobulinas: IgA, IgM, IgG, IgE, IgD.
FIGURA: http://1.bp.blogspot.com/-EGQKTA93HnM/VkPZ7GoJ1WI/AAAAAAAAAU4/M5jPbHRyPxc/s1600/3.png
MARTHA PATRICIA ISAZA CORTES

 IgG:
Anticuerpo más abundante de la sangre (85 %), brindan respuesta secundaria, activándose
en gran cantidad al entrar en contacto, por segunda vez, con el antígeno.
Se unen a los epítopo de la superficie de los microorganismos favoreciendo su fagocitosis,
además activa tanto al sistema del complemento como a los fagocitos sanguíneos, si los
antígenos son toxinas, las neutralizan.
Por su pequeño tamaño estos anticuerpos atraviesan la placenta inmunizando al feto contra
antígenos para los que la madre es inmune, brindando así protección al recién nacido
durante las primeras semanas de vida, está presente en leche materna y en células
intestinales del recién nacido, proporcionándole inmunidad pasiva.
 IgM
Son los primeros anticuerpos que se producen ante una primera exposición a un antígeno.
Compuesto por cinco monómeros unidos por puentes di sulfuro y una pieza J. Debido a su
elevado peso molecular, no pueden atravesar vasos sanguíneos ni placenta.
 IgA
Presente en secreciones como saliva, lágrimas, leche y mucus que recubre el interior del
aparato respiratorio y el intestino, compuesto por dos dímeros con factor de secreción y
ligados por pieza J.
 IgE
Monómeros presentes en las reacciones alérgicas, parasitismo y dermatitis, inducen la
liberación de histamina.
 IgD
Monómeros, son anticuerpos presentes en la superficie de linfocitos B como receptores de
antígenos específicos.
 ANTÍGENO
Sustancia que tiene la capacidad de inducir una respuesta inmune, generalmente humoral para ser
destruido, suscaracterística inmunogénica del antígeno depende de factores como:
 Composición química: Proteínas, glicoproteína, lipoproteína, polisacáridos,

lipopolisacáridos, lípidos y ácidos nucleicos.
MARTHA PATRICIA ISAZA CORTES.

 Tamaño molecular: > 10.000 DA
 Estructura del determinante antigénico
 Complejidad química de la molécula
 Vía y dosis.
 DETERMINANTE ANTIGÉNICO
Sitio inmunodominante del antígeno, al cual se une el anticuerpo o receptor del linfocito T.
 HAPTENOS
Sustancia de naturaleza química de pequeño peso molecular <100.000 Da, que no induce por sí
misma respuesta inmune o formación de anticuerpos, sólo al ligarse con una proteína
transportadora como la albúmina estimula la respuesta inmunitaria.
 SENSIBILIDAD
Es la probabilidad de clasificar correctamente a un individuo enfermo, es decir, la capacidad del test
para detectar la enfermedad. Es decir, los verdaderos Positivos.
VERDADEROS POSITIVOS
SENSIBILIDASD= ________________________
ENFERMOS
Cuanto más alto es el valor numérico, hay mejor capacidad de detectar a los enfermos.
 ESPECIFICIDAD
Es la probabilidad de clasificar correctamente a un individuo sano, es la capacidad del test para
detectar a los verdaderos sanos. Cuanto más alto el valor numérico hay mejor capacidad de detectar
los sanos.
Especificidad = Verdaderos Negativos
____________________
Sanos
 REPRODUCIBILIDAD
Capacidad del test de ofrecer los mismos resultados cuando se repite en circunstancias similares.
 VERDADERO POSITIVO (VP)

La enfermedad está presente y se diagnostica al paciente como enfermo.
 FALSO POSITIVO (FP)

La enfermedad NO está presente, pero al paciente se diagnostica como enfermo.
 VERDADERO NEGATIVO (VN):

La enfermedad NO está presente y se diagnostica al paciente como sano.

 FALSO NEGATIVO (FN)
La enfermedad está presente pero no se detectó.
 ESPECIFICIDAD A NIVEL DE REACCIÓN AG-AC

Es la complementariedad entre el antígeno y el anticuerpo, el antígeno puede unirse a uno o
varios anticuerpos dependiendo del número de determinantes que posea.
http://www.tideca.net/content/factores-que-afectan-la-sensibilidad-primera-parte
 EXACTITUD
Cuando el valor obtenido es igual al real
4. CARACTERÍSTICAS FÍSICOQUÍMICAS DE LA UNIÓN Ag-Ac

La unión Ag-Ac es una interacción reversible sólo intervienen enlaces no-covalentes entre el epitopo
del Ag y la región VH-VL del Ac.
4.1 FUERZAS IMPLICADAS EN LA UNIÓN AG-AC

Los antígenos y anticuerpos interactúan por complementariedad espacial y no por uniones
covalentes, por lo general solo son efectivas en distancias cortas.
 Puentes de hidrógeno
 Fuerzas electrostáticas (enlaces iónicos)
 Fuerzas de van der Waals
 Enlaces hidrófobos
4.1.1 PUENTES DE HIDROGENO

Tipo específico de interacción polar reversible, se establece entre dos átomos electronegativos,
generalmente O, N, e H, unido covalentemente a uno de los dos átomos ectronegativos. Hay un
átomo DADOR del hidrógeno y un ACEPTOR, que es al átomo de O, N al cual se enlaza el hidrógeno.

FIGURA: http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enlace-por-puente-de-hidrogeno
4.1.2 FUERZAS ELECTROSTATICAS

Fuerza de atracción o repulsión entre dos cargas eléctricas en reposo, atracción entre grupos
iónicos de cargas opuestas en dos lados de las cadenas de proteínas.
El que la fuerza electrostática sea de atracción o de repulsión depende de los signos de las cargas:
 Cargas negativas frente a frente se repelen
 Cargas positivas frente a frente se repelen
 Cargas iguales se repelen y cargas distintas se atraen
La magnitud de esta fuerza es directamente proporcional al producto de ambas cargas e
inversamente proporcional al cuadrado de la distancia que las separa, según la ecuación:
4.1.3 FUERZAS DE VAN DER WALLS

Fuerzas entre moléculas que dependen de la interacción de la capa externa de electrones de
compuestos no polares, generalmente ocurre entre sustancias orgánicas, lo semejante disuelve o
atrae a lo semejante
4.1.4 ENLACES HIDRÓFOBOS

Radical alquilo: -CH 2 – R
Radical etilénico: -CH = R
Radical fenilo: -C 6 H 5
ENLACES HIDROFÍLICOS
https://www.pinterest.com.mx/pin/115123334211314124/
4.2 AFINIDAD
La afinidad de un anticuerpo (Ac) concreto (Anticuerpo monoclonal) por un epítopo (H) es la suma
de todas las fuerzas atractivas y repulsivas entre un sitio de unión de ese anticuerpo y el
correspondiente epítopo. Se define a través de la constante de equilibrio (K), según la ley de acción
de masas:

Siendo [Ac] la concentración de sitios libres de Ac y [Ac-H] la concentración
de sitios ocupados del Ac.
4.3 AVIDEZ
Fuerza con la que el Ac multivalente se une a una Ag multivalente, depende de las afinidades
individuales de cada uno de los determinantes individuales de ese antígeno, su valor es mucho
mayor que la suma de afinidades.
La Ag natural suele tener más de un tipo de determinante antigénico al entrar en un individuo,
produce un antisuero, que presenta varios tipos de anticuerpos, cada uno de ellos dirigidos a un
tipo diferente de determinante antigénico de la Ag original. Se habla de avidez del antisuero, como
la fuerza conjunta de los distintos anticuerpos de ese antisuero que reconocen al antígeno
multivalente complejo.
5. TIPOS DE REACCIONES INMUNOLÓGICAS.

En todas las interacciones in vitro de un Ag-Ac se distinguen dos etapas:
 REACCION PRIMARIA: no visualizable a simple vista, necesita de un conjugado para poder
ver la reacción.
 REACCION SECUNDARIA: se caracteriza por la aparición de un fenómeno visible a simple
vista.
Según su complejidad las reacciones inmunológicas se pueden clasificar como:
5.1 INTERACCIÒN PRIMARIA

Reacciones donde el Antígeno Reacciona directamente con el anticuerpo:
 INMUNOFLUORESCENCIA
 INMUNOENSAYO ENZIMATICO
 INMUNOHISTOQUIMICA
 INMUNOBLOT
 RADIOINMUNOANALISIS
5.2 REACCIONES DE NTERACCION SECUNDARIA

 AGLUTINACION
 PRECIPITACION
 FLOCULACION

6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
• ABBAS, A. Cellular and Molecular Immunology. 5a. ed Philadelphia: Saunders Company,

2014.
• ROJAS, W. Inmunología. 18. ed. CIB Colombia. 2018:
• Journals of Immunology Science, Nature, Investigación y Ciencia.
• Cann, Alan J. (2005). Principles of Molecular Virology (4 edición). Burlington, USA:
Elsevier. ISBN 0-12-088787-8.
• https://es.slideshare.net/ciroenriqueorozcorosado/pruebas-inmunoserologicas-
ciro-e-orozco-rosado-md-y-bact
• Gac Méd Méx Vol. 140, Suplemento No. 3, 2004
• https://es.scribd.com/doc/55914030/Aglutinacion-indirecta
• https://www.sochihem.cl/bases/arch1898.pdf
• https://fytam.blogspot.com/2016/03/pcr-latex.html?view=snapshot
• https://www.lifeder.com/rosa-de-bengala/
• https://www.franrzmn.com/determinacion-cualitativa-de-anticuerpos-febriles/
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MARTHA PATRICIA ISAZA CORTES

 Composición química: Proteínas, glicoproteína, lipoproteína, polisacáridos,

MARTHA PATRICIA ISAZA CORTES.

 VERDADERO POSITIVO (VP)

 FALSO POSITIVO (FP)

 VERDADERO NEGATIVO (VN):

MARTHA PATRICIA ISAZA CORTES

 ESPECIFICIDAD A NIVEL DE REACCIÓN AG-AC

4. CARACTERÍSTICAS FÍSICOQUÍMICAS DE LA UNIÓN Ag-Ac

4.1 FUERZAS IMPLICADAS EN LA UNIÓN AG-AC

4.1.1 PUENTES DE HIDROGENO

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4.1.2 FUERZAS ELECTROSTATICAS

4.1.3 FUERZAS DE VAN DER WALLS

4.1.4 ENLACES HIDRÓFOBOS

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5. TIPOS DE REACCIONES INMUNOLÓGICAS.

5.1 INTERACCIÒN PRIMARIA

5.2 REACCIONES DE NTERACCION SECUNDARIA

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