Practica de Enzimas

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PRACTICA DE ENZIMAS

INTRODUCCION
Las reacciones químicas que se dan en los seres vivos no podrían tener lugar sin la presencia de
los enzimas. Estas macromoléculas, que generalmente son proteínas, catalizan las reacciones
bioquímicas, permitiendo que los sustratos se conviertan en los productos que necesita la célula.
Como todo catalizador, los enzimas no se consumen en las reacciones que catalizan, pero a
diferencia de otros catalizadores de naturaleza inorgánica, las reacciones que catalizan son muy
específicas: sólo interaccionan con determinados sustratos, y sólo facilitan el curso de
determinadas reacciones.
Un enzima que podemos encontrar en todos los seres vivos es la catalasa, necesaria para
descomponer el peróxido de hidrógeno, un compuesto tóxico, que se produce durante el
metabolismo celular.
OBJETIVOS

 Poner de manifiesto la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales.


 Comprobar la acción de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.
 Comprobar la acción hidrolítica de la amilasa .
MATERIALES

 Gradilla Tubos de ensayo Mechero


 Pipetas Agua oxigenada Solución de lugol
 Reactivo de Benedict Baño María Agua oxigenada
 Trocitos de hígado Trocitos de tomate Almidón

PROCEDIMIENTO
1. Reconocimiento de la actividad de la catalasa
La catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y
vegetales.
La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolimo celular,
se forma una molécula tóxica que es el peróxido de hidrógeno, H2O2 (agua oxigenada).

Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxígeno, por lo que se soluciona el


problema.
La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente:

Técnica:
 Colocar en un tubo de ensayo diferente unos trocitos de hígado de pollo, zanahoria,
apio
 Añadir 5 mililitros de agua oxigenada a cada uno de los tubos.
 Se observará un intenso burbujeo debido al desprendimiento de oxígeno.
 Observar la mayor o menor actividad, según el tejido con el que se realice la
experiencia.
2. Actividad de la amilasa salival
Mediante esta experiencia, vamos a ver la actividad de otra enzima, la amilasa o ptialina,
presente en la saliva. Esta enzima actúa sobre el polisacárido almidón, hidrolizando el
enlace O-glicosídico, por lo que el almidón se terminará por transformar en unidades de
glucosa. Es importante que recuerdes las reacciones características de glúcidos para
comprender esta experiencia.
Tecnica:
 Poner en una gradilla cuatro tubos de ensayo, numerados del 1 al 4.
 Añadir en cada tubo 5 mililitros de una solución diluida de almidón.
 A los tubos 3 y 4 añadir una pequeña cantidad de saliva.
 En el tubo 1, hacer la Reacción de Fehling.
 En el tubo 2, realiza la Reacción de Lugol.
 Los resultados son los esperados para un polisacárido como el almidón.
 Los tubos 3 y 4 que contienen el almidón, al que le hemos echado la saliva, ponerlos
en un vaso de precipitados al baño María, controlando la temperatura del agua para
que no hierva, ya que lo que intentamos, es que la enzima de la saliva trabaje a
unos 37: C. Dejarlo unos 15 minutos
 A continuación realizar las siguientes reacciones:
 En el tubo número 3, realizar la Reacción de Fehling.
 En el tubo número 4, realizar la Prueba del Lugol.

3. Hidrólisis de la sacarosa por la glucosidasa de la levadura.


Técnica
 Preparación del extracto de levadura
Disolver 2,5 gr de levadura en 20 ml de agua destilada.
Dejar reposar durante 15 minutos.
Filtra el contenido del tubo. El líquido contenido es un extracto de levadura.
 Prepara los siguientes tubos
o Tubo A:
 Una cucharadita de sacarosa
 2ml de agua
 Agitar
o Tubo B:
 Una cucharadita de sacarosa
 2ml de agua
 2ml de extracto de levadura
 Agitar
 Realiza una reacción de Fehling en cada uno de los tubos A y B.
 Observa la reacción y anota los resultados:

Actividad complementaria
Imagina que preparamos un tubo C que contenga: sacarosa, agua, extracto de
levadura y calientas manteniendo la ebullición 10 minutos. Formula una hipótesis de
lo que crees que ocurrirá en ese tubo. ¿Cómo comprobarías tu hipóteisis?

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