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    Guia Trabajo N°6 Sem 2021-2 GRUPAL

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    Ayrton Azañero Pérez
    Este documento presenta 6 problemas relacionados con la cinética enzimática. El primer problema solicita determinar los parámetros cinéticos Vm y Km para la enzima glucosa-6P hidrolasa a través de gráficos de Michaelis-Menten y Lineweaver-Burk. El segundo problema pide representar los mismos datos usando un gráfico de Woolf-Augustinsson para determinar Vm y Km. El tercer problema identifica tipos de inhibición enzimática a partir de datos de velocidad de reacción. El cuarto problema

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    Este documento presenta 6 problemas relacionados con la cinética enzimática. El primer problema solicita determinar los parámetros cinéticos Vm y Km para la enzima glucosa-6P hidrolasa a través de gráficos de Michaelis-Menten y Lineweaver-Burk. El segundo problema pide representar los mismos datos usando un gráfico de Woolf-Augustinsson para determinar Vm y Km. El tercer problema identifica tipos de inhibición enzimática a partir de datos de velocidad de reacción. El cuarto problema

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    Guia Trabajo N°6 sem 2021-2 GRUPAL

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    Este documento presenta 6 problemas relacionados con la cinética enzimática. El primer problema solicita determinar los parámetros cinéticos Vm y Km para la enzima glucosa-6P hidrolasa a través de gráficos de Michaelis-Menten y Lineweaver-Burk. El segundo problema pide representar los mismos datos usando un gráfico de Woolf-Augustinsson para determinar Vm y Km. El tercer problema identifica tipos de inhibición enzimática a partir de datos de velocidad de reacción. El cuarto problema

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    GUIA DE TRABAJO

    Tema 6 Semestre 2021- 2

    1. Se hizo un seguimiento de la actividad de glucosa-6P hidrolasa, en extracto de


    tejido cerebral de cobayo, obteniéndose los siguientes resultados :

    [S] nM v nM/lt
    1 x 10-5 150

    2 x 10-5 256

    1 x 10-4 600

    3 x 10-4 770

    5 x 10-4 818

    A) Determine los parámetros cinéticos, Vm y Km de manera directa con un


    gráfico Michaelis Menten y compare los resultados obtenidos con un gráfico L-
    B
    B) Observe el gráfico L-B construido, qué influiría más en la línea obtenida, una
    desviación en la velocidad observada a una concentración de 1 x 10 -5 nM o a
    una concentración 3 x 10-4nM

    2. Con los mismos datos represente un gráfico de WAH Determine Vm y Km . Saque


    al menos dos conclusiones

    3. En la siguiente tabla se indican las velocidades de una reacción enzimática a


    distintas concentraciones de sustrato a) en ausencia de inhibidor y (b) y (c) en
    presencia de una cantidad constante de dos tipos de inhibidor . Se solicita:

    a) Representar directamente y de forma gráfica los datos de V respecto a [S] en la


    cuadrícula adjunta
    b) Identifique cada tipo de inhibidor presente y sus contantes cinéticas.

    [S] mM Vel (a) Vel (b) Vel (c)


    nM/lt nM/lt nM/lt
    1 2,5 1,17 0,77
    2 4,0 2,10 1,25

    5 6,3 4,0 2,0

    10 7,6 5,7 2,5

    20 9,0 7,2 2,86


    c) Aplique un gráfico adicional . a su criterio para determinar constantes cinéticas
    y reafirme su conclusión al identificar cada tipo de inhibidor

    4. Determine la Constante de disociación Ki para la reacción obtenida como producto


    de la acción de concentraciones ascendentes de un nuevo plaguicida que inhibe a
    la acetil colinesterasa , si los datos de su experiencia son los siguientes

    [INH] [S] 1mM [S] 3mM


    mM v 1/v v 1/v

    1 1.82 0.55 4 0.25


    2 1.43 0.70 3.33 0.3

    5 0.87 1.15 2.22 0.45

    10 0.53 1.89 1.43 0.70

    5. En el siguiente experimento con la enzima fosfatasa ácida de semillas de trigo


    germinadas se varió la concentración de la enzima en cubeta a dos concentraciones
    de sustrato y se obtuvieron los resultados siguientes:

    Construya un gráfico que evidencie el comportamiento de la reacción en función a la cantidad de


    enzima añadida
    a) Que pasa si se divide la velocidad registrada entre la cantidad de enzima añadida al
    ensayo…. Conoce algún concepto relacionado a ello ?

    6. Proponga la data de seguimiento de reacción de una inhibición linear mixta y


    presente el correspondiente gráfico L-B

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