Práctica # 4

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PRÁCTICA Nº 4

SIEMBRA DE MICROORGANISMOS

I.-OBJETIVO:
Conocer técnicas de siembra y manipulación de microorganismos

II.- REVISIÓN BIBLIOGRAFICA


La siembra o inoculación es la operación que consiste en depositar un germen
asépticamente en un medio de cultivo. Es decir, la introducción de células
microbianas en un medio nutriente estéril, Si el microorganismo de este primer, medio
sembrado se pasa a sucesivos medios de cultivo, la operación se llama resiembra o
repique
Los microorganismos se pueden cultivar en medio industriales y en laboratorio. En
laboratorio los microorganismos se cultivan en medios nutrientes sólidos o líquidos,
que se pueden encontrar en tubos, Erlenmeyer, o Placas Petry.

Tipos de siembra
a) Siembra en tubos con medio sólido en plano inclinado, o recto.- Se usan tubos de
ensayo con medio previamente enfriados en posición inclinada o recta, y se procede a
extender la siembra por toda la superficie del medio. Esto se puede hacer de varias
formas. Siembra por estrías, siembra en línea recta, o siembra a profundidad o,
punción.
b) Siembra en placas.- Cuando se necesita una gran superficie de medio. La siembra
en placas se puede hacer, por estrías, por diseminación o agotamiento.
c) Siembra en caldo o medios líquidos. Se hace cuando se desea transferir
microorganismos a un medio líquido, el microorganismo se puede transferir con asas
o con pipetas estériles.
Cualquiera que sea el tipo de siembra a realizar debe cumplirse los siguientes
requisitos:
 Se debe trabajar en un cuarto de siembra o cámaras.
 Los materiales de trabajo deben estar cerca de la persona y al mechero.
 El mechero debe permanecer encendido, pues, alrededor de la llama se crea una
zona de esterilidad, que es donde debemos efectuar la manipulación.
 No hablar durante la siembra, ya que se puede contaminar el cultivo.
 Esterilizar la mesa de zona de trabajo, con alcohol, hipoclorito de sodio al 0.3%, o por
flameado.

III.-EQUIPOS Y MATERIALES.

 Mechero
 Estufa de cultivo
 Asas de kholle
 Placas de Petry con medio estéril.
 Tubos con caldo nutritivo.
 Alcohol, algodón, lápiz cristalográfico

IV.- METODOLOGIA

Siembra en medios líquidos.


- Se flamea el asa y con la mano izquierda se coge el tubo con medio líquido, se le
quita el tapón y se flamea, la boquilla.
- Se introduce la muestra en el tubo que contiene el medio líquido.
- Se coloca el tubo en posición vertical entre las manos imprimiéndole un ligero
movimiento como de rotación.
- Se incuba.
Siembra en placas con medio sólido (Siembra por estrías)
- Se toma la muestra con el asa de kholle.
- El inóculo se extiende sobre una pequeña zona de la placa
- Se esteriliza el asa, y se repite la operación dos veces mas, procurando no tocar las
anteriores estrías.

V.- RESULTADOS

Dibujar los métodos de siembra en placa de Petri, tubos, e indicar para que casos se
usa cada uno de ellos.

VI.- CUESTIONARIO

1- Cuáles son los métodos de siembra de microorganismos más usados en su


especialidad?
2.- Cuales son los métodos más usados para aislar un microorganismos de un cultivo
axenico ?
3.- En que consiste una cabina de flujo laminar para siembra de microorganismos?
4.- Mencione los métodos rápidos para identificar y cultivar microorganismos en
diferentes plantas industriales (agua, suelo, alimentos,)
5.- Describa el método de siembra de microorganismos por incorporación.

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