ADENOSINE DEAMINASE

COD 12754 4 x 10 mL
(ADA)
CONSERVAR A 2-8ºC
Reactivos para medir la concentración de ADA ADENOSINA DESAMINASA (ADA)
Sólo para uso in vitro en el laboratorio clínico Adenosina-Glutamato deshidrogenasa

FUNDAMENTO DEL MÉTODO 3. Mezclar e insertar la cubeta en el fotómetro. Poner el cronómetro en marcha.
4. Pasados 4 minutos, anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante 3 minutos.
La adenosina desaminasa (ADA) cataliza la desaminación de la adenosina, formando inosina y ión amonio. La
concentración catalítica se determina, empleando la reacción acoplada de la glutamato deshidrogenasa (GlDH), 5. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio (∆A/min).
a partir de la velocidad de desaparición del NADH, medido a 340 nm1-3. 6. Calcular la concentración de adenosin desaminasa en la muestra utilizando las fórmulas siguientes:
ADA
Adenosina + H2O Inosina + NH4 + ∆A/min Muestra
x C Patrón = U/L
GlDH ∆A/min Patrón
2-Oxoglutarato + NH4 + + NADH + H+ Glutamato + NAD+

CONTENIDO Y COMPOSICIÓN VALORES DE REFERENCIA

A. Reactivo. 4 x 8 mL. Tris 125 mmol/L, 2-oxoglutarato 1,1 mmol/L, adenosina 6,5 mmol/L, glutamato Líquido pleural3: 33 U/L = 0,55 µkat/L.
deshidrogenasa > 100 U/L, sodio azida 0,95 g/L, pH 6,8. Suero4: Hasta 18 U/L = 0,30 µkat/L.
B. Reactivo. 1 x 10 mL. NADH 1,5 mmol/L, sodio azida 9,5 g/L. Estos valores se dan únicamente a título orientativo; es recomendable que cada laboratorio establezca sus
Nocivo (Xn): R22: Nocivo por ingestión. R31: En contacto con ácidos libera gases tóxicos. S28.1: En caso propios intervalos de referencia.
de contacto con la piel, lávese inmediata y abundantemente con agua. S45: En caso de accidente o
malestar, acuda inmediatamente al médico. CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda el uso de los Controles de ADA niveles I y II (cod. 18048) para verificar la funcionalidad del
CONSERVACIÓN procedimiento de medida. Reconstituir con 1,0 mL de agua destilada. Agitar suavemente, evitando la formación
Conservar a 2-8ºC. de espuma, hasta disolver todo el liofilizado. Utilizar los Controles en el procedimiento analítico de forma
idéntica a las muestras de los pacientes.
Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien
cerrados y se evite la contaminación durante su uso. Estables 7 días a 2-8ºC o bien 2 meses a -18ºC congelado en alicuotas.
Indicaciones de deterioro: Las concentraciones de ADA vienen indicadas en las etiquetas de los viales. El valor de ADA es trazable al
material de referència BCR-647 (IRMM). La trazabilidad solo se asegura empleando los reactivos y
− Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco inferior al límite indicado en procedimientos de medida recomendados por BioSystems.
"Parámetros del ensayo". Los intervalos de valores aceptables que se sugieren han sido elaborados en base a la experiencia previa en
variabilidad interlaboratorio y se indican únicamente a título orientativo, ya que cada laboratorio debe establecer
REACTIVOS AUXILIARES sus propios parámetros de precisión.
S. Patrón de ADA (BioSystems Cod. 18052). ADA bovina, Tris 50 mmol/L. La concentración de ADA viene
indicada en la etiqueta del vial. El valor de ADA es trazable al material de referència BCR-647 (IRMM). CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
Reconstituir con 1,0 mL de agua destilada. Estable 7 días a 2-8ºC o bien 2 meses a -18ºC congelado en Los datos siguientes se obtuvieron usando un analizador A25. Los resultados son similares a los del A15. Los
alicuotas. detalles sobre los datos de evaluación están disponibles bajo solicitud.

PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS − Límite de detección: 5,10 U/L = 0,085 µkat/L.

− Límite de linealidad: 150 U/L = 2,50 µkat/L. Cuando se obtengan valores superiores, diluir la muestra 1/10
Reactivo de Trabajo: Añadir 2 mL de Reactivo B en una botella de Reactivo A. Agitar suavemente. Si se desea con agua destilada y repetir la medición.
preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de Reactivo A + 1 mL de Reactivo B. Estable 30 días
a 2-8ºC. − Repetibilidad (intraserie):
El reactivo abierto y conservado en el compartimento refrigerado del analizador es estable 12 días. Concentración media CV n

EQUIPO ADICIONAL 29 U/L = 0,48 µkat/L 3,1 % 20

71 U/L = 1,18 µkat/L 0,8 % 20
− Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 37ºC para lecturas a 340 nm.
− Reproducibilidad (interserie):
MUESTRAS
Concentración media CV n
Líquido pleural o suero sanguíneo recogido mediante procedimientos estándar.
La adenosina desaminasa en las muestras es estable 7 días a 2-8ºC. 29 U/L = 0,48 µkat/L 6,4 % 40

CALIBRACIÓN 71 U/L = 1,18 µkat/L 3,6 % 40

Se recomienda utilizar el Patrón de ADA. − Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias sistemáticas significativas
Se recomienda calibrar al menos cada 12 days, después de un cambio de lote de reactivo o cuando lo al ser comparados con reactivos de referencia. Los detalles del estudio comparativo están disponibles bajo
requieran los procedimientos de control de calidad. solicitud.
− Interferencias: La hemólisis o la tardía separación del suero ocasionan resultados elevados debido a la
PROCEDIMIENTO elevada concentración de adenosina desaminasa en los eritrocitos. La lipemia (triglicéridos < 5 g/L) y la
bilirrubina ( < 20 mg/dL) no interfieren. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir5.
Procedimiento automatizado (Nota 1)
A25 A15 Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los resultados pueden variar al cambiar de
instrumento o realizar el procedimiento manualmente.
GENERAL Técnica ADA ADA
Modo de análisis
Tipo de muestra
cinética mono.
LIQ/SER
cinética mono.
LIQ/SER
CARACTERÍSTICAS DIAGNÓSTICAS
Unidades U/L U/L La adenosina desaminasa es una enzima ubícua. Las concentraciones más elevadas se encuentran en los
Tipo de reacción decreciente decreciente linfocitos T, especialmente cuando son estimulados. La concentración de adenosina desaminasa en líquido
Decimales 1 1 pleural se encuentra elevada en pacientes con tuberculosis y resulta útil para diferenciar derrames pleurales
Nº Replicados 1 1 tuberculosos, con una sensibilidad diagnóstica del 90% y una especificidad diagnóstica del 85% 4. La
Nombre de la técnica en el - - concentración sérica de adenosina desaminasa se encuentra elevada en pacientes con enfermedades
informe de paciente hepáticas6.
PROCEDIMIENTO Lectura monocromática monocromática El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe
Volúmenes Muestra 15 15 integrar los datos clínicos y de laboratorio.
Reactivo 1 300 300
Reactivo 2 - - NOTAS
Lavado 1,2 1,2 1. Estos reactivos pueden utilizarse en la mayoría de analizadores automáticos. Solicite información a su
Factor predilución - - distribuidor.
Factor postdilución 2 2
Filtros Principal 340 340
Referencia - -
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CALIBRACIÓN Tipo de calibración específico específico adenosine deaminase catalytic concentration in pleural effusions with a Hitachi 705 discrete analyser. J Clin
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2. Pipetear en una cubeta:

Reactivo de Trabajo 1,0 mL

Muestra / Patrón 50 µL

M12754c-03 BioSystems S.A. Costa Brava, 30. 08030 Barcelona (Spain) 10/2012
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