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    Reporte - CLAR. Quimica Analitica 3

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    Atzin Ledesma
    1) El documento describe un experimento de cromatografía líquida de alta resolución para determinar la concentración de cafeína en muestras diversas. 2) Se preparó una curva de calibración usando diferentes concentraciones de un estándar de cafeína. 3) Usando la curva de calibración, se determinó que la concentración de cafeína en una muestra de Pepsi era de 590.10259 ppm, lo que equivale a 5.9 mg de cafeína por cada 100 mL de Pepsi.

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    1) El documento describe un experimento de cromatografía líquida de alta resolución para determinar la concentración de cafeína en muestras diversas. 2) Se preparó una curva de calibración usando diferentes concentraciones de un estándar de cafeína. 3) Usando la curva de calibración, se determinó que la concentración de cafeína en una muestra de Pepsi era de 590.10259 ppm, lo que equivale a 5.9 mg de cafeína por cada 100 mL de Pepsi.

    Descripción original:

    ingeniería química fes Cuautitlán

    Título original

    Reporte.CLAR. quimica analitica 3

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    1) El documento describe un experimento de cromatografía líquida de alta resolución para determinar la concentración de cafeína en muestras diversas. 2) Se preparó una curva de calibración usando diferentes concentraciones de un estándar de cafeína. 3) Usando la curva de calibración, se determinó que la concentración de cafeína en una muestra de Pepsi era de 590.10259 ppm, lo que equivale a 5.9 mg de cafeína por cada 100 mL de Pepsi.

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    Reporte - CLAR. Quimica Analitica 3

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    1) El documento describe un experimento de cromatografía líquida de alta resolución para determinar la concentración de cafeína en muestras diversas. 2) Se preparó una curva de calibración usando diferentes concentraciones de un estándar de cafeína. 3) Usando la curva de calibración, se determinó que la concentración de cafeína en una muestra de Pepsi era de 590.10259 ppm, lo que equivale a 5.9 mg de cafeína por cada 100 mL de Pepsi.

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    de 3

    ASIGNATURA: QUÍMICA ANALÍTICA 3

    DEPARTAMENTO DE CIENCIAS
    QUÍMICAS SECCIÓN DE QUÍMICA
    ANALÍTICA
    INFORME DE LABORATORIO
    PRÁCTICA No. 8.
    CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN
    (C.L.A.R.) DETERMINACIÓN DE CAFEÍNA EN MUESTRAS
    DIVERSAS
    GRUPO: 1651 A/C FECHA DE ENTREGA: 17/11/2021 CARRERA: Ingeniería Química.
    NOMBRE: Centeno Palma Erick Sebastián.

    R E S U L T A D O S

    Considere que se pesaron 25 mg del estándar de Cafeína (pureza 99 %) y se llevaron a un aforo de 50


    mL y posteriormente se realizó una dilución de 1 mL en 25 mL (stock).

    Tabla 1. Resultados de la curva de calibración. Considere que en todos los sistemas se aforan en 10 mL.
    mL de mL
    sistema stock problema tr w1/2 Concentración (ppm) Área Altura

    1 1 0 2.13 4.9 1980.04 41063 7705

    2 2 0 2.12 4.9 3960.08 110915 20575

    3 3 0 2.11 5 5940.12 192892 35910

    4 4 0 2.11 4.9 7920.16 234407 43626

    5 5 0 2.12 4.9 9900.20 290053 54221

    Problema

    Pepsi 0.4 2.12 4.9 70283 13188

    Puntos que debe incluir el reporte.


    1. Indique la diferencia entre CLAR normal y fase reversa.
    En CLAR la muestra se disuelve en un solvente líquido, este solvente va a acarrear la muestra a
    través de un material fijo, por lo tanto, la muestra se va a distribuir entre el disolvente y el material
    fijo. Tanto esta fase como en fase reversa el tiempo de retención y la polaridad se pueden alterar
    modificando la polaridad de la columna o del eluyente.
    Cuando el HPLC se encuentra en su fase normal, la parte estacionaria será más polar que el
    eluyente, por lo tanto, los componentes se van a eluir acorde a su polaridad.
    En la fase reversa la fase estacionaria es menos polar que la fase movil, entonces los
    componentes se van a eluir empezando desde el más polar, en esta fase el poder de elución va a
    incrementarse con la polaridad.
    2. Determina la concentración del estándar stock de cafeína.
    Considere que se pesaron 25 mg del estándar de Cafeína (pureza 99 %) y se llevaron a un aforo
    de 50 mL. (PM= 194.19 g/mol).
    (0.025 g)(10)(99 % ) 1mL
    CM=
    (50 mL)(194.19
    g
    )
    =( 2.5491 x 10−3 M )
    25 mL ( )
    =1.01964 x 10−4 M
    mol

    3. Determina la concentración de cada sistema.


    Para determinar la concentración de cada sistema se debe tomar en cuenta el volumen de stock
    en cada sistema.
    Sistema 1.

    1.01964 x 10−4 M ( 101mLmL )=(1.01964 x 10 −5 mol


    mL )(
    194.19
    g
    mol )( 10001 gmg )( 10001 LmL )=1980.04 ppm
    Sistema 2.

    1.01964 x 10−4 M ( 102mLmL )=(2.03928 x 10 −5 mol


    mL )(
    194.19
    g
    mol )( 10001 gmg )( 10001 LmL )=3960.08 ppm
    Sistema 3.

    1.01964 x 10−4 M ( 103 mLmL )=(3.05892 x 10 −5 mol


    mL )(
    194.19
    g
    mol
    1000 mg
    )(
    1g )( 10001 LmL )=5940.12 ppm
    Sistema 4.

    1.01964 x 10−4 M ( 104 mLmL )=( 4.07856 x 10 −5 mol


    mL )(
    194.19
    g
    mol )( 10001 gmg )( 10001 LmL )=7920.16 ppm
    Sistema 5.

    1.01964 x 10−4 M ( 105 mLmL )=(5.0982 x 10 −5 mol


    mL )(
    194.19
    g 1000 mg
    mol )(
    1g )( 10001 LmL )=9900.20 ppm

    4. Presente el gráfico de concentración contra Área y determine pendiente, ordenada


    al origen y R2.
    Tabla 2. Concentración en ppm y área.
    Concentracio
    n [ppm] Área
    1980.04 41063
    3960.08 110915
    5940.12 192892
    7920.16 234407
    9900.2 290053
    Concentracion vs Area
    350000

    300000
    f(x) = 31.39 x − 12575.6
    250000 R² = 0.99

    200000
    Area
    150000

    100000

    50000

    0
    1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 10000 11000
    Concentracion

    m=31.387
    b=−12576
    R2=0.9871

    5. Determine la concentración con la curva de calibración y determine el contenido de


    cafeína en mg por 100 mL de muestra.
    [ A x] [A ]
    =F s
    [X] [S]
    [ Ax ] [X]
    De la ecuación y=mx donde → =F
    [ As] [S]
    F=31.387 S=1.01964 X 1 0−4 [ A S ]=70283 y=173866
    Por lo tanto [ X ] =590.10259

    Para los 100 ml se consideran los mismos 25mg de cafeína


    (0.025 g)(10)(99 % )
    CM= =( 1.27452 x 10−3 M )
    g
    (10 0 mL)(194.19 )
    mol

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