Tercera Unidad Dogma central, proliferación celular y apoptosis

REUNION DE
PRACTICA N° 12
- METABOLISMO DE LA HEMOGLOBINA - -

INTRODUCCION:

La hemoglobina es una hemoproteína, tetramérica, con dos 2 subunidades alfa y 2 beta, cuya función es el transporte de
oxígeno. Se sintetiza en la médula ósea por una vía común a la síntesis de porfirinas, que termina con la adición del hierro por
la ferroquelatasa.

Los hematíes tienen una vida media de 120 días, al cabo de la cual son destruidos en el sistema retículo endotelial. La
hemoglobina es liberada y se separa la globina del HEM, éste es convertido en biliverdina y luego en bilirrubina. Este pigmento
insoluble en agua es transportado unido a la albúmina. La bilirrubina indirecta o no conjugada llega al hepatocito y se separa
de la albúmina, después de un proceso de captación y conjugación con dos moléculas de ácido glucurónico por la enzima
bilirrubina glucuronil transferasa, se convierte en una forma soluble, denominada bilirrubina directa o conjugada, que es
finalmente excretada con la bilis al intestino por un proceso de transporte activo; da color a las heces y ultrafiltra el glomérulo.

FINALIDAD:
 Realizar la medición sérica de hemoglobina empleando sangre total.
 Realizar la determinación sérica de bilirrubina total y directa.

MATERIAL Y EQUIPOS
 Material de vidrio: tubos de ensayo, pipetas milimétricas.
 Equipo de extracción de muestra: guantes, alcohol, algodón, agujas N° 20, jeringas x 5 cc.
 Equipos: centrífuga, micropipetas x 10 ul, baño maría, espectrofotómetro.

PROCEDIMIENTO 1: Determinación de Hemoglobina.

1) Introducción:
La hemoglobina es la molécula que transporta el oxígeno desde los pulmones a los tejidos y se encuentra en los hematíes,
formados en la médula ósea. Está formada por cuatro subunidades, en el adulto dos alfa y dos beta. Cada subunidad está
formada por una cadena de globina que tiene un núcleo heme con Fe ++.
La disminución de la concentración de hemoglobina constituye la anemia. La OMS ha establecido como criterio de anemia <13
g/dl en varones, <12 g/dl en mujeres, <11 g/dl en gestantes. En niños está en función de la edad.
La anemia tiene diversas causas: menor formación por razones nutricionales (deficiencia de hierro, de vitamina B12, de ácido
fólico) o deficiencia de la médula ósea (aplasia), hemólisis por problemas del glóbulo rojo (hemoglobinopatías, esferocitosis,
etc.) o por presencia de anticuerpos (anemia hemolítica autoinmune, eritroblastosis fetal, etc.) o por hemorragia.

La disminución de la síntesis de hemoglobina, por diferentes causas, produce disminución de su concentración dando lugar a la
anemia por menor producción como en la anemia ferropénica, que también puede deberse a problemas en la maduración de los
glóbulos rojos como la deficiencia de ácido fólico. Pero la hemoglobina puede también disminuir por pérdida de sangre como en
las hemorragias o por hemólisis (anemias hemolíticas).

En este último grupo, una causa pueden ser las hemoglobinopatías por defecto en la síntesis de una de las cadenas
(talasemias) o de cambios en la estructura de una de las subunidades por mutaciones que cambian un aminoácido por otro
como en la hemoglobina S. En la hipoxia por altura por otro lado se produce aumento de su síntesis llevando a la policitemia,
que puede tener también otras causas como la Policitemia. En la práctica médica es por ello importante determinar la
concentración de la hemoglobina, que es sin duda uno de los exámenes más solicitados.

2) Fundamento de la Técnica:
El método en que se basa la prueba es el de la cianmetahemoglobina. Los eritrocitos son lisados por acción de un agente
tensioactivo presente en el reactivo, liberando su contenido de hemoglobina en la solución. La hemoglobina liberada es oxidada
a metahemoglobina por el ferricianuro, siendo esta última convertida en cianmetahemoglobina por la presencia de cianuro. La
absorbancia de la cianmetahemoglobina es medida a 540 nm, siendo la intensidad del color obtenida, directamente proporcional
a la concentración de hemoglobina en la muestra.

3) Muestra y Reactivos a emplear:

 Muestra: Sangre total obtenida utilizando anticoagulante.
 S. Estándar: Metahemoglobina disuelta en reactivo hemoglobina. (18 g/dl).

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 Reactivo de Drabkin: Ferricianuro de potasio 0.6 mM, cianuro de potasio 0.7 mM, sterox-SE 1 ml/l.
4) Procedimiento:
 Extracción de muestras: previa limpieza de la zona con alcohol, se extraerá 5 cc de sangre de la flexura del codo con jeringa
hipodérmica de 5 cc y aguja N° 20.
 Una vez obtenida la muestra, colocarla en un tubo de ensayo y dejarlas reposar durante 10 minutos.
 Para la determinación de hemoglobina: En 2 tubos de ensayo marcados con B (Blanco) y D (Desconocido), se debe colocar:
TUBOS DE ENSAYO
COMPONENTES
B D
Muestra (sangre total / ul) -- 10
Reactivo de Trabajo 2.5 2.5
Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (sobre 20° C), o 10
minutos si la temperatura ambiental es muy baja. Leer las absorbancias
en el espectrofotómetro a 540 nm, llevando a cero el equipo con el
blanco reactivo. El color obtenido es estable por lo menos 1 hora.
 Advertencias y Medidas de Precaución:
 Este reactivo contiene Cianuro, manipular con máxima precaución y en lo posible evitar utilizar la boca.
 No mezclar con ácidos.
 Eliminar residuos junto a grandes volúmenes de agua.

5) Resultados:
 Luego de la incubación de las muestras:

B D

 Lecturas en el espectrofotómetro:

6) Actividades a desarrollar por el alumno:

- Cálculos de resultados: Corregir las lecturas D y T restándoles el blanco (B).
 Cálculo del factor:
18 g /dl
F=
S

 Cálculo de la concentración de Hemoglobina.

Hemoglobina (g/dl) = (D-B) x F = 0.123 * 45 = 5,5

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- Interpretación de los resultados.

 Valores Referenciales:
 Hombres = 14.0 a 18.0 g/dl.
 Mujeres = 12.0 a 16.0 g/dl.

- Explique bioquímicamente lo encontrado.

1era etapa: Depleción de los depósitos de hierro, la ferritina es < 12 ug/l, ferropeina latente con hemoglobina con valores
normales.

2da etapa: Eritropoyesis con deficiencia de hierro, incremento en la transferrina, ferropeina sin anemia, hemoglobina con
valores normales

3era etapa: Hemoglobina con valores bajos a los normales.

7) Preguntas de aplicación:
a) Identifique las variables que intervinieron en el experimento realizado en la práctica.

VARIABLE INDEPENDIENTE: Sangre total

VARIABLE DEPENDIENTE: Metahemoglobina disuelta en reactivo hemoglobina

VARIABLE DE CONTROL: Reactivo de Drabkin

b) Identifique los componentes del sistema empleado en la práctica y señale sus principales características.

MUESTRA DE SANGRE: Mediante ella podemos evaluar los niveles de glucosa, hemoglobina o glóbulos blancos en sangre

REACTIVO DE DRABKIN: Consiste en hacer reaccionar la sangre con un reactivo que contiene cianuro y ferrocianuro potástico

c) ¿Cuál es el tipo de anemia más frecuente? Sustente su respuesta con datos epidemiológicos y señale cuales son los
exámenes bioquímicos que se solicitan.

La anemia ferropénica es la más frecuente en

nuestro país, actualmente en el Perú el 40.1%
de los niños, de 6 a 35 meses, sufre de
anemia; es decir estamos hablando de casi
700 mil niños menores de 3 años anémicos de
1.6 millones a nivel nacional.

EXÁMENES BIOQUÍMICOS:

Para saber el valor de la hemoglobina se

utilizará la espectrofotometría
(cianometahemoglobina) y el
hemoglobinómetro, morfología de los glóbulos
rojos.

d) Indique algunas hemoglobinas anormales, señalando el cambio de aminoácido y la cadena en que se produce.

Una cantidad anormal de hemoglobina normal o un tipo anormal de hemoglobina en la sangre pueden indicar la presencia de una
enfermedad. Los tipos de hemoglobina anormales pueden estar presentes sin ningún otro síntoma, pueden causar enfermedades

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leves que no tienen síntomas o causar enfermedades que pueden poner la vida en peligro. Por ejemplo, la hemoglobina S se
encuentra en la enfermedad drepanocítica, que es una anomalía grave de la sangre y causa serios problemas

Hemoglobinopatía E: La
hemoglobinopatía E homocigota
es una
HEMOGLOBINOPATÍA C: La Hb C se caracteriza por la sustitución del ácido glutámico de la posición 6 de la cadena β por lisina.
Es propia del África occidental, pero puede encontrarse con cierta frecuencia en España. El estado homocigoto (Hb CC) se
caracteriza por una ligera anemia hemolítica crónica con esplenomegalia. El estado heterocigoto (Hb AC) no produce trastorno
alguno. Aunque la Hb C tiende a cristalizar en condiciones de hipoxia, no produce crisis vasoclusivas como las de la Hb S. La
morfología eritrocitaria se caracteriza por la aparición de dianocitos.

HEMOGLOBINOPATÍA S: Constituye la hemoglobinopatía estructural más frecuente en el mundo. Se produce por la sustitución del
ácido glutámico por la valina en posición 6 de la cadena β. Esto origina que al descender la PO2 la molécula de Hb cristalice,
deformando los hematíes, volviéndolos falciformes y rígidos, e impidiendo su tránsito por los capilares pequeños. Las personas con
Hemoglobina S heterocigota (Hb AS) son asintomáticos (rasgo drepanocítico) y la morfología eritrocitaria es normal. La
Hemoglobina S homocigota (Hb SS) o anemia drepanocítica se caracteriza por una anemia hemolítica grave, que aparece a los
pocos meses de nacer cuando la Hb S reemplaza a la Hb fetal.

HEMOGLOBINOPATÍA J: Se caracteriza por la sustitución de la glicina en posición 16 de la cadena β por ácido aspártico. No
produce ningún trastorno en estado heterocigoto.

e) ¿Cómo se corrige el efecto de la altura sobre la concentración de hemoglobina?

Se recomienda corregir el punto de corte de la hemoglobina para definir anemia en la altura. La corrección aumenta conforme
aumenta la altitud de residencia. Esta corrección se basa en la asunción que todas las poblaciones aumentan la hemoglobina
conforme aumenta la altura de residencia. Luego de la corrección de la hemoglobina por la altura, la prevalencia de anemia
aumenta conforme aumenta la altura, sugiriendo que estos sujetos diagnosticados como anémicos luego de la corrección de la
hemoglobina son deficientes de hierro. En la actualidad se sabe que no es generalizable el aumento de la Hb con la altura.

f) Esquematice la síntesis de hemoglobina y señale los defectos enzimáticos y los tipos de porfiria.

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g) Elabore un esquema y explique cómo se libera la hemoglobina del glóbulo rojo.

La hemoglobina, un pigmento de color rojo presente en los

glóbulos rojos de la sangre, es una proteína de transporte
de oxígeno y que está compuesta por la globina y cuatro
grupos Heme. Cuando la hemoglobina se une al oxígeno
se denomina oxihemoglobina o hemoglobina oxigenada,
dando el aspecto rojo o escarlata intenso característico de
la sangre arterial. Cuando pierde el oxígeno, se denomina
hemoglobina reducida, y presenta el color rojo oscuro de la
sangre venosa (se manifiesta clínicamente por cianosis).
Los glóbulos rojos, conocidos también como eritrocitos o
hematíes, son el componente más abundante de la sangre,
y actúan (por su componente de hemoglobina)
transportando el oxígeno.

PROCEDIMIENTO 2: Determinación de Bilirrubina.

1) Introducción:
Producto del catabolismo de la hemoglobina (70 a 90%) y de otras hemoproteínas. Cada gramo de hemoglobina degradada
origina 35 mg de bilirrubina. La concentración sanguínea de bilirrubina total es de 1 mg/dl, siendo en su mayoría bilirrubina
indirecta, que no se excreta por orina. La hiperbilirrubinemia puede ser a predominio de la bilirrubina no conjugada como en las
anemias hemolíticas o en los defectos congénitos de conjugación, o de la bilirrubina conjugada en las hepatopatías, donde el
defecto limitante es la excreción, o en las enfermedades extrahepáticas obstructivas

La bilirrubina puede ser determinada en el laboratorio siendo: BILIRRUBINA INDIRECTA que es la recién formada. Requiere un
solvente para unirse al reactivo de van der Bergh. Se transporta unida a la albúmina, no se elimina por la orina. Captada por el
hepatocito a través de un sistema aún no bien dilucidado. En el citosol se une a algunas de las glutatión-5-transferasas. y al
conjugarse con dos ácidos glucurónico se convierte en directa. BILIRRUBINA DIRECTA O CONJUGADA: con una o dos
moléculas de ácido glucurónico por acción de la UDP-glucuronil transferasa formando respectivamente mono o diglucurónidos
de bilirrubina. Es excretada a través de la membrana plasmática de los canalículos, pasando a los propios conductos biliares a
través de un transporte que requiere ATP donde participa MRP2 o proteína ligada a la multidrogo resistencia-2. La bilirrubina
directa es eliminada por la bilis hacia el intestino donde es convertida en estercobilinógeno y luego a estercobilina dando el color
a las heces. La bilirrubina directa es soluble y si aumenta se elimina por la orina y la BILIRRUBINA TOTAL: que es la suma de
la bilirrubina directa e indirecta.

2) Fundamento de la Técnica:

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La fundamentación del método empleado se basa en que la bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfanílico
diazotado (reacción de Ehrlich) produciendo un pigmento de color rojo-violáceo (azobilirrubina) que se mide a 530 nm. Si bien la
bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la
presencia de un desarrollador acuoso (reactivo A) que posibilite su reacción. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina
total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción

3) Muestra y Reactivos a emplear:

 Muestra: suero sanguíneo.
 S. Estándar: solución de bilirrubina = 1 mg/l.
 A. Reactivo A: solución acuosa de benzoato de cafeína 0,13 mol/l, tamponada y estabilizada.
 B. Reactivo B: solución de ácido sulfanílico 29 mmol/l y ácido clorhídrico 0.17 mol/l.
 C. Reactivo C: solución de nitrito de sodio 0.07 mol/l.
 Diazorreactivo: de acuerdo al volumen de trabajo, mezclar 1 parte de Reactivo C con 21 partes de Reactivo B. Rotular y
fechar.

4) Procedimiento:
 Extracción de muestra: previa limpieza de la zona con alcohol, se extraerá 5 cc de sangre de la flexura del codo con jeringa
hipodérmica de 5 cc y aguja N° 20, de un paciente en ayunas.
 Una vez obtenida la muestra, colocarla en un tubo de ensayo y dejarlas reposar durante 10 minutos.
 Terminado el reposo, contrapesar los tubos conteniendo las muestras y centrifugarlos a 3000 RPM durante 10 minutos.
 Finalizado el centrifugado separar el suero para trabajar la determinación.
 Para la determinación de Bilirrubinas: En 3 tubos de ensayo marcados con B (Blanco), D (Directa) y T (Total), se debe
realizar lo siguiente:

TUBOS DE ENSAYO
COMPONENTES
B D T
Muestra (Suero / ul) 100.0 100.0 100.0
Agua destilada (ml) 1.25 1.25 --
Reactivo A (ml) -- -- 1.25
Reactivo B (ul) 100.0 -- --
Diazorreactivo (ul) -- 100.0 100.0
Mezclar de inmediato cada tubo por inversión. Luego de 5 minutos, leer en
espectrofotómetro a 530 nm, llevando el aparato a cero con agua destilada. Las
lecturas pueden efectuarse entre 4 y 15 minutos, excepto para la bilirrubina directa
que debe leerse a los 5 minutos exactos. Si lee antes, habrá subvaloración de los
resultados por reacción incompleta. Si lee después, habrá sobrevaloración porque
comienza a reaccionar la bilirrubina libre.

5) Resultados:
 Luego de la preparación de las muestras:

B D

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 Lecturas en el espectrofotómetro:

6) Actividades a desarrollar por el alumno:

- Cálculos de resultados: Corregir las lecturas D y T restándoles el blanco (B).
 Cálculo del factor:

1mg/ l
F=
S

=200 El factor debe calcularse con bilirrubina estándar.

 Cálculo de la concentración de Bilirrubina.

Bilirrubina Total (mg/l) = (T- B) x F = 8.2
Bilirrubina Directa (mg/l) = (D – B) x F= 3
Bilirrubina Indirecta (mg/l) = B. Total – B. Directa.
= 5.2

- Interpretación de los resultados.

 Valores Referenciales: Adultos.
 Directa = hasta 2 mg/l.
 Total = hasta 10 mg/l.

- Explique bioquímicamente lo encontrado.

HIPERBILIRRUBINEMIA:

7) Preguntas de aplicación:
a) Identifique las variables que intervinieron en el experimento realizado en la práctica.

VARIABLE DEPENDIENTE: Suero sanguíneo.

VARIABLE INDEPENDIENTE: Solución de bilirrubina

VARIABLE DE CONTROL: Reactivo A, B, C diazorreactivo.

b) Identifique los componentes del sistema enzimático empleado en la práctica y señale sus principales características.

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Muestra (Suero / ul): hemático es

el componente de la sangre
resultante tras permitir la
coagulación de esta y
eliminar el coágulo
resultante. Es equivalente al
plasma sanguíneo, pero sin las
proteínas involucradas en la
coagulación
 Agua destilada (ml): es la
obtenida mediante el proceso de
destilación (evaporación, y
posterior recolección del agua
condensada). Este proceso
sirve para desproveer

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al agua de sales minerales,

electrolitos, microorganismos y
posibles sustancias dañinas
disueltas en ella.
 Reactivo A (ml): solución
acuosa de benzoato de
cafeína 0,13 mol/l, tamponada
y
estabilizada.
 Reactivo B (ul): solución de
ácido sulfanílico 29 mmol/l y
ácido clorhídrico 0.17 mol/l.
 Diazorreactivo (ul): mezclar
en la siguiente proporción: 1
gota de Nitrito de sodio + 1,5

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ml de Reactivo Sulfanílico
+ 1,5 ml agua destilada.
Una vez preparado
el Diazorreactivo es estable
durante 3 días a temp.
ambiente y al abrigo de la
luz.
Emplear calibrador.
Muestra (Suero / ul): hemático es
el componente de la sangre
resultante tras permitir la
coagulación de esta y
eliminar el coágulo
resultante. Es equivalente al
plasma sanguíneo, pero sin las
proteínas involucradas en la
coagulación
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 Agua destilada (ml): es la

obtenida mediante el proceso de
destilación (evaporación, y
posterior recolección del agua
condensada). Este proceso
sirve para desproveer
al agua de sales minerales,
electrolitos, microorganismos y
posibles sustancias dañinas
disueltas en ella.
 Reactivo A (ml): solución
acuosa de benzoato de
cafeína 0,13 mol/l, tamponada
y
estabilizada.

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 Reactivo B (ul): solución de

ácido sulfanílico 29 mmol/l y
ácido clorhídrico 0.17 mol/l.
 Diazorreactivo (ul): mezclar
en la siguiente proporción: 1
gota de Nitrito de sodio + 1,5
ml de Reactivo Sulfanílico
+ 1,5 ml agua destilada.
Una vez preparado
el Diazorreactivo es estable
durante 3 días a temp.
ambiente y al abrigo de la
luz.
Emplear calibrador.
Muestra (Suero / ul): hemático es
el componente de la sangre
resultante tras permitir la
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coagulación de esta y
eliminar el coágulo
resultante. Es equivalente al
plasma sanguíneo, pero sin las
proteínas involucradas en la
coagulación
 Agua destilada (ml): es la
obtenida mediante el proceso de
destilación (evaporación, y
posterior recolección del agua
condensada). Este proceso
sirve para desproveer
al agua de sales minerales,
electrolitos, microorganismos y
posibles sustancias dañinas
disueltas en ella.

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 Reactivo A (ml): solución

acuosa de benzoato de
cafeína 0,13 mol/l, tamponada
y
estabilizada.
 Reactivo B (ul): solución de
ácido sulfanílico 29 mmol/l y
ácido clorhídrico 0.17 mol/l.
 Diazorreactivo (ul): mezclar
en la siguiente proporción: 1
gota de Nitrito de sodio + 1,5
ml de Reactivo Sulfanílico
+ 1,5 ml agua destilada.
Una vez preparado
el Diazorreactivo es estable
durante 3 días a temp.

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ambiente y al abrigo de la
luz.
Emplear calibrador.
Muestra (Suero / ul): hemático es
el componente de la sangre
resultante tras permitir la
coagulación de esta y
eliminar el coágulo
resultante. Es equivalente al
plasma sanguíneo, pero sin las
proteínas involucradas en la
coagulación
 Agua destilada (ml): es la
obtenida mediante el proceso de
destilación (evaporación, y

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posterior recolección del agua

condensada). Este proceso
sirve para desproveer
al agua de sales minerales,
electrolitos, microorganismos y
posibles sustancias dañinas
disueltas en ella.
 Reactivo A (ml): solución
acuosa de benzoato de
cafeína 0,13 mol/l, tamponada
y
estabilizada.
 Reactivo B (ul): solución de
ácido sulfanílico 29 mmol/l y
ácido clorhídrico 0.17 mol/l.

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 Diazorreactivo (ul): mezclar

en la siguiente proporción: 1
gota de Nitrito de sodio + 1,5
ml de Reactivo Sulfanílico
+ 1,5 ml agua destilada.
Una vez preparado
el Diazorreactivo es estable
durante 3 días a temp.
ambiente y al abrigo de la
luz.
Emplear calibrador.
Muestra (Suero): Es el componente de la sangre resultante tras permitir la coagulación de esta y eliminar el coágulo resultante. Es
equivalente plasma sanguíneo, pero sin las proteínas involucradas en la coagulación

Agua destilada (ml): Obtenida mediante el proceso de destilación (evaporación, y posterior recolección del agua condensada). Este
proceso sirve para desproveer al agua de sales minerales, electrolitos, microorganismos y posibles sustancias dañinas disueltas en
ella.

Reactivo A (ml): Solución acuosa de benzoato de cafeína 0,13 mol/l, tamponada y estabilizada.

Reactivo B (ul): Solución de ácido sulfanílico 29 mmol/l y ácido clorhídrico 0.17 mol/l.

Diazorreactivo (ul): Mezclar en la siguiente proporción: 1 gota de Nitrito de sodio + 1,5ml de Reactivo Sulfanílico + 1,5 ml agua
destilada. Una vez preparadoel Diazorreactivo es estable durante 3 días a temp. ambiente y al abrigo de la luz.Emplear calibrador.

c) ¿Por qué se denomina bilirrubina directa?

La conjugación es el proceso en el cual se aumenta la solubilidad en agua o polaridad de la bilirrubina. Principalmente se conjuga
con ácido glucurónico formándose monoglucorónido de bilirrubina por acción de la enzima UDP- glucuronil transferasa. En baja
proporción se forma sulfato de bilirrubina. Se obtiene así la llamada bilirrubina conjugada o directa que se caracteriza por ser
soluble en agua y no difundir a través de las membranas celulares. Bajo condiciones fisiológicas toda la bilirrubina secretada en la
bilis se encuentra conjugada. La actividad de la UDP-glucuronil transferasa es más baja en los primeros días de vida. El principal
estímulo fisiológico para aumentar su actividad son los niveles séricos de bilirrubina. Puede ser estimulada por tratamiento
farmacológico con fenobarbital.

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d) ¿Por qué se denomina bilirrubina indirecta?

La bilirrubina, denominada también bilirrubina no conjugada o indirecta, circula en el plasma unido a la albúmina. Normalmente en
estas condiciones no atraviesa la barrera hematoencefálica. Puede aparecer bilirrubina no conjugada libre (no unida a la albúmina)
en condiciones en que la cantidad de bilirrubina supera la capacidad de unión de la albúmina. Esto puede ocurrir porque hay cifras
muy altas de bilirrubina, hipoalbuminemia o presencia de sustancias y factores que desplazan o debilitan la unión de la bilirrubina
con la albúmina. La presencia de bilirrubina no conjugada libre es siempre anormal y lleva al pasaje al SNC y eventual daño del
cerebro

e) ¿Cuál es el riesgo de aumento de bilirrubina no conjugada en el recién nacido?

Esta hiperbilirrubinemia resulta de una hemólisis acelerada y de un sistema hepático inmaduro para la captación, conjugación y
secreción de la bilirrubina. Debido a que está elevada la bilirrubina no conjugada, esta puede penetrar la barrera hemoencefálica.
Esto puede resultar en un querníctero (encefalopatía tóxica hiperbilirrubinémica).

f) Esquematice y explique el metabolismo de la bilirrubina.

La bilirrubina viene a proceder principalmente de la

destrucción de la hemoglobina que se encuentra en los
glóbulos rojos. Esto se produce cuando los glóbulos rojos
son destruidos en el hígado, bazo y médula ósea. La
hemoglobina es liberada y se separa la globina del HEM,
éste es convertido en biliverdina y luego en bilirrubina.
Este pigmento insoluble en agua es transportado unido a
la albúmina. La bilirrubina indirecta o no conjugada llega
al hepatocito y se separa de la albúmina, después de un
proceso de captación y conjugación con dos moléculas de
por ácido glucurónico la enzima bilirrubina gucoronil
transferasa, se convierte en una forma soluble,
denominada bilirrubina directa o conjugada, que es 
y esta luego es eliminada mediante la bilis, el cual es
formada en el hígado. Con ello, siguiendo las vías biliares
pasa al intestino, en el que por acción de las bacterias
intestinales se transforma en urobilinógeno y
posteriormente en estercobilinas para ser eliminada con
las heces, donde da el color característico. Una pequeña
parte de lo que es el urobilinógeno es reabsorbido del intestino al hígado y luego captado por el riñón para ser eliminado por la
orina.

g) Elabore un cuadro y clasifique la hiperbilirrubinemia colocando ejemplos de cada tipo.

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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega, España, 2011
3) Huamán-Saavedra J. Laboratorio clínico. Procedimiento e interpretacion , 2 edición Edit. Universitaria . Trujillo, 2018