CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO LABORATORIOS DE

LA FACULTAD DE LA SALUD HUMANA

Abril-Septiembre 2021

Práctica No.: 2 Manual de Prácticas de Laboratorio de: Hematología

Semana: 9 Ciclo - Paralelo: V “A”

Docente: BQ. María del Cisne Luzuriaga. Mg.Sc.

Estudiante (s): Erika Arévalo

Natalia Betancour

Jomaira Gaona

Fabián Rosales

INFORME/REPORTE DE PRÁCTICA DE LABORATORIO N° 2

1. Tema: Determinación de una Biometría Hemática.

2. Objetivos:

- Aprender a realizar una biometría hemática manual

- Conocer su importancia en el diagnóstico de enfermedades hematológicas y la

forma adecuada de su procedimiento

3. Fundamento de la práctica

El hemograma se puede realizar por diferentes métodos: el semi automático y

electrónico que han surgido a partir de la existencia del método manual el cual a pesar

de no ser tan preciso por el uso de las destrezas y las cualidades de los humanos, fue

el método que ayuda a mantener una idea de valores tentativos debido a que existe

márgenes de errores y por lo tanto no serían valores exactos, sin embargo, muestran

una gran contribución a la determinación de patologías hematológicas (Campuzano,

2017).
 La biometría hemática es una de las pruebas de laboratorio más solicitadas

debido a su gran importancia en el aporte médico y diagnóstico. Es un estudio que se

considera completo debido a que mediante esta se pueden evaluar las 3 líneas

sanguíneas: la eritrocitaria, leucocitaria y plaquetaria que en conjunto ayudan a poder

determinar la existencia de patologías de carácter hematológico o alteraciones que

puede estar atravesando el paciente en distintos tejidos del organismo (López, 2016).

4. Procedimientos

1. Se realizó la extracción de sangre por venopunción con el sistema al vacío

recogiendo la sangre en un tubo con EDTA previamente rotulado.

Procedimiento para el contaje de células rojas

- Se rotuló un tubo de ensayo y se colocó 995 ul de reactivo de Dacie

(compuesto de formaldehído y citrato de sodio) y 5 ul de sangre (proporción

1:200).

- Se cargó la cámara de Neubauer con aproximadamente 10 ul de la dilución

anteriormente preparada en cada cuadrante, se dejó reposar la cámara de

Neubauer por 2 minutos en ambiente húmedo y se llevó a visualizar en el

microscopio.

- Con el lente de 10x se realizó el contaje de células rojas que se encuentran

ubicadas en la retícula central (está dividida en 25 cuadrantes y cada uno se

subdivide en 16 cuadrantes), el contaje de eritrocitos se realiza en los 4

cuadrantes de los extremos y en el del centro.

 - Se hace el cálculo para obtener el contaje de eritrocitos:

Eritrocitos/mm3 = eritrocitos contados x dilución x 10 x 5.

Eritrocitos/mm3 = eritrocitos contados x 200 x 10 x 5.

- Se cambia las unidades contadas a la nomenclatura con notación científica.

- Se comparan las unidades contadas con los valores referenciales (hombres: 4,5

- 6 x 10^6. Mujeres: 4 - 5,5 x 10^6).

Procedimiento para el contaje de células blancas

- Se rótulo un tubo de ensayo para realizar la dilución respectiva para el contaje

glóbulos blancos con el reactivo de Turk (violeta de genciana y ácido glacial)

en una proporción 1:20.

- En el tubo de ensayo en base a la proporción se colocó 475 ul del reactivo de

Turk y 25 ul de la muestra de sangre y se homogeneizó.

- Se realizó la carga de la dilución preparada con anterioridad en la cámara de

Neubauer, aproximadamente 10 ul por cada cuadrante.

- Se llevó al microscopio dejándola reposar por unos 3 minutos

- Posteriormente con el lente de 10x se procedió a contabilizar los leucocitos en

los cuadrantes de las esquinas de la cámara (que se encuentran divididos en 16

cuadrantes), tal como se representa en la siguiente imagen:

 - Luego de contabilizar se procedió a realizar los respectivos cálculos, los cuales

son los siguientes:

Leucocitos/mm3= Leucocitos contados x dilución x 2,5

Leucocitos/mm3= Leucocitos contados x 20 x 2,5

Leucocitos/mm3= Leucocitos contados x 50

- Una vez obtenido el valor de los leucocitos se comparó con los valores de

referencia (5000-10000 leu/mm3).

Contaje de plaquetas

- Se realizó un frotis de sangre periférica, para lo cual se rotuló un portaobjetos,

para realizar el extendido el procedimiento fue el siguiente:

- En un extremo del portaobjetos se colocó una gota de sangre.

- Con ayuda de otro portaobjetos se realizó un movimiento de arriba

hacia abajo para que la gota de sangre tome la extensión del ancho del

portaobjetos por capilaridad.

- En un ángulo de 45º y en un solo movimiento se extendió la gota de

sangre.
 Nota: el frotis debe tener 3 partes para que sea de utilidad: cabeza,

cuerpo y cola

- Se dejó secar el frotis a temperatura ambiente.

- Una vez seco el frotis, se realizó la tinción, para esto se colocó las placas en

una gradilla y se añadió tinción de Wright durante 2 minutos.

- Se lavó las placas con agua destilada y se dejó secar a temperatura ambiente.

- Se colocó una gota de aceite de inmersión en la cola del frotis y se llevó al

microscopio con el lente de 100X.

- Se contó el número de plaquetas en 10 campos de aproximadamente 100

células sanguíneas.

- Se calculó la media del número de plaquetas con la siguiente fórmula:

- Para la cuantificación del número de plaquetas por mm3 de sangre, se aplicó la

siguiente fórmula:

- Se comparó las unidades contadas con los valores referenciales (150000 -

450000 PTL/mm3)

5. Esquema de procedimiento (dibujado)

6. Resultados

En la práctica de biometría hemática mediante el método manual, se realizó el

contaje de glóbulos blancos o también denominados leucocitos donde se obtuvieron

los siguientes valores:

 Integrantes Leucocitos/mm3

1 7350

2 5450

3 9150

Se puede observar una varianza entre los valores del contaje de leucocitos en

los 3 valores esto se pudo deber a posibles errores al momento del contaje, sin

embargo, se puede evidenciar que los tres valores se encuentran dentro de los valores

de referencia que va de 5000 - 10000 leucocitos/mm3.

Por otro lado, también se realizó el contaje de plaquetas en la cola del frotis de

sangre periférica según la técnica mencionada en el procedimiento.

Luego del contaje de plaquetas en 10 campos de 100 células sanguíneas se

obtuvieron los siguientes valores de plaquetas por mm3.

 Integrantes Plaquetas/mm3

1 252,000

2 326,000

3 268,00

En este caso se observa una menor varianza entre el valor 1 y valor 3, donde la

diferencia es casi mínima y se puede establecer que los valores se encuentran

mediante ese intervalo, mientras que, en el caso del valor 2 este valor es el que varía

con una diferencia más marcada y puede deberse a algún error al momento de contar

las plaquetas, sin embargo los 3 valores contados se encuentran dentro de los valores

normales que son de 150000 a 400000 plaquetas/mm3.

7. Discusión

El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de

sangre completa. La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para el

diagnóstico de enfermedades (Campuzano, 2017). Segun Rengifo (2018), los

resultados obtenidos del “Informe Recuento Leucocitario” fueron los siguientes:

- 150 leucocitos X 50= 7600/mm3

Los resultados obtenidos de la práctica realizada en la UNL del recuento

leucocitario fueron los siguiente:

- Integrante 1: 7350

- Integrante 2: 5450

- Integrante 3: 9150

Haciendo referencia a los valores obtenidos del “Informe Recuento

Leucocitario”, se puede rescatar que son valores cercanos y se encuentran dentro de

 los valores de referencia. Los valores de referencia propuestos en la práctica fueron

5000-10000/mm3, haciendo contraste con los obtenidos en ambas prácticas se puede

inferir que el paciente se encuentra dentro de los valores de referencia.

El recuento de plaquetas consiste en la determinación del número de

trombocitos en un volumen determinado de sangre, generalmente en 1 mm3. En la

práctica denominada “Recuento de plaquetas en frotis sanguíneo” se obtuvieron los

siguientes resultados (Revoledo, 2015).

- PLT/mm3 = PLT/C x 20.000 = 9,7 x 20.000 = 194.000 PLT/mm3

Los resultados obtenidos de plaquetas realizados por los estudiantes de la

UNL fueron los siguientes:

- Integrante 1: 252,000

- Integrante 2: 326,000

- Integrante 3: 268,00

Los resultados obtenidos en la práctica “Recuento de plaquetas en frotis

sanguíneo” como en la práctica realizada por estudiantes de la UNL, se infiere que se

encuentran dentro de los valores referenciales que son de 150000 a 400000

plaquetas/mm3. En caso de que los valores se encuentren por debajo del referencial se

denominaría una trombocitopenia; pero si se encuentran sobre los valores

referenciales se denomina trombocitosis.

8. Recomendaciones

- Al tratarse de una práctica realizada de forma presencial es importante llevar

puesto los implementos de bioseguridad correspondientes al EPP

 - Durante la práctica realizada es importante considerar las diferentes pautas a

lo que corresponde la extracción de sangre por venopunción como el tiempo

del torniquete, ubicar el bisel de la aguja hacia arriba, reconocer correctamente

la vena a punzar, rotular previamente los tubos de extracción, evitar la

hemólisis de la muestra.

- Con respecto a las diluciones para el contaje de células blancas y rojas, se

debe pipetear correctamente los reactivos y la muestra de sangre para evitar

errores en la mezcla de estos de igual manera al momento de cargar la dilución

en la cámara de Neubauer se debe procurar no colocar demasiada muestra,

evitando que se salga de los bordes del cubreobjetos.

- En el caso de realizar el frotis de sangre se debe procurar que este contenga las

partes principales como cabeza, cuerpo y cola para poder realizar un conteo

correcto de plaquetas, de igual manera cuando se tiñan las placas con el

colorante de Wright es importante tomar en cuenta el tiempo de coloración y

al momento de lavar hacerlo despacio para evitar que se pele el frotis.

9. Preguntas de control

● ¿Qué parámetros se determinan en una biometría hemática?

En una biometría hemática se determinan varios parámetros que son

importantes para un correcto diagnóstico médico.

- Conteo de células rojas (RBC): Indica cuántos glóbulos rojos tiene en la

sangre determinado paciente (Cafasso, 2014).

- Hemoglobina (HGB): Estructura proteica formada por 4 cadenas de globina y

un grupo hemo que contiene insertado hierro, da color rojo a los eritrocitos y

transporta oxígeno por todo el cuerpo (Ambuludí, 2013).

- Hematocrito (HTC): Representa el porcentaje de sangre que está ocupado

por los eritrocitos (Ambuludí, 2013).

- Eritrocitos nucleados (NRBC): Se refiere a los eritrocitos que tienen un

tamaño y núcleo similares a los linfocitos, en caso de ser detectados es preciso

contar los eritrocitos nucleados en un hemograma manual. Su presencia puede

ser indicador de aumentos extremos en la actividad eritropoyética (Sysmex,

2020).

- Reticulocitos (RET): Se refiere al conteo de eritrocitos inmaduros en la

sangre (National Institutes of Health, 2021).

- Volumen corpuscular medio (MCV): Se refiere al tamaño promedio de los

glóbulos rojos en la sangre del paciente (Ambuludí, 2013).

- Hemoglobina corpuscular media (MCH): Indica la cantidad promedio de

hemoglobina en cada eritrocito (Ambuludí, 2013).

- Concentración de hemoglobina corpuscular media (MCHC): Mide el

volumen que ocupa la hemoglobina en el interior de los glóbulos rojos

(Ambuludí, 2013).

- Ancho de distribución eritrocitaria (RDW): Indica la variación en el

tamaño de los glóbulos rojos, por lo que representa la anisoc0itosis, se la

puede definir de dos maneras:

- Desviación estándar del ancho de distribución eritrocitaria

(RDW-SD): Mide la desviación estándar de la curva, se puede definir

como la anchura del histograma al 20% de frecuencia (Zumalacárregui,

2018).
 - Coeficiente de variación del ancho de distribución eritrocitaria

(RDW-CV): Mide el coeficiente de variación de la curva

(Zumalacárregui, 2018).

- Conteo de células blancas (WBC): Indica cuántos leucocitos tiene en la

sangre determinado paciente.

- Fórmula diferencial de leucocitos:.

- Conteo de neutrófilos (NEUT): Indica cuántos neutrófilos tiene en la

sangre determinado paciente.

- Conteo de linfocitos (LYMPH): Indica cuántos linfocitos tiene en la

sangre determinado paciente.

- Conteo de monocitos (MONO): Indica cuántos monocitos tiene en la

sangre determinado paciente.

- Conteo de eosinófilos (EO): Indica cuántos eosinófilos tiene en la sangre

determinado paciente.

- Conteo de basófilos (BASO): Indica cuántos basófilos tiene en la sangre

determinado paciente.

- Plaquetas (PLT): Representa el porcentaje de la sangre que está ocupada por

las plaquetas (Acevedo & Jaramillo, 2010).

- Plaquetocrito (PCT): Representa el porcentaje de sangre que está ocupado

por las plaquetas (Acevedo & Jaramillo, 2010).

- Ancho de distribución plaquetaria (PDW): Cuantifica la distribución del

tamaño de las plaquetas (Heterogeneidad en el tamaño plaquetario) (Acevedo

& Jaramillo, 2010).

- Volumen plaquetario medio (MPV): Mide el tamaño promedio de las

plaquetas en femtolitros (Acevedo & Jaramillo, 2010).

 - Rango de plaquetas grandes mayores de 12 fL (P-LCR): Indica la cantidad

de plaquetas con un tamaño superior a 12 fL, sirve para el diagnóstico de

trombocitopenias, trombocitosis o alteraciones en la forma y el tamaño de las

plaquetas en caso de obtenerse valores normales (Acevedo & Jaramillo, 2010).

Diferencia manual:

- Leucocitos en banda: Se refiere al conteo de neutrófilos ligeramente maduros

(Lemos, 2020).

- Leucocitos segmentados: Se refiere a los leucocitos que presentan su núcleo

dividido en varias partes, los neutrófilos que se encuentran en mayor cantidad

en la sangre son los neutrófilos segmentados (Lemos, 2020).

● ¿Cuál es la utilidad diagnóstica de la biometría hemática?

La biometría hemática tiene una gran utilidad diagnóstica ya que se analizan

las tres líneas celulares sanguíneas (eritroide, leucocitaria y plaquetaria); el análisis de

los datos que nos brinda la biometría da la capacidad al médico de reconocer

patologías hematológicas y variedad de enfermedades que afectan a los órganos y

sistemas, esto debido a que las tres líneas celulares se alteran en presencia de muchos

procesos en donde se altera la homeostasis del organismo (Lopez, 2016).

En otras palabras la biometría es importante como examen paraclínico (ayudan

al médico a comprobar o descartar un diagnóstico) ya que como se mencionó

anteriormente muchas patologías producen alteraciones hemáticas; por ejemplo una

disminución del conteo de glóbulos rojos y hemoglobina se relaciona con anemias, un

aumento de los glóbulos blancos se relacionan con procesos infecciosos o como

ejemplo más específico un incremento de eosinófilos (eosinofilia) se relaciona con

infecciones parasitarias y alergias (Universidad Autónoma de Tamaulipas, 2020).

● ¿Cuáles son los valores de referencia de todos los parámetros de una biometría

según edad, sexo y estado fisiológico?

Los valores normales de los elementos formes de la sangre cambian según la

edad, sexo y hasta ubicación geográfica.

Valores referenciales según Díaz, y otros (2012).

Valores referenciales de leucocitos según la organización médica National Jewish

Health (2016)
.
Valores de referencia de plaquetas según (Acevedo & Jaramillo, 2010)

- Recuento de plaquetas: 150 a 450 x 10^3/µL.

 - Ancho de distribución plaquetaria (PDW): 15,4% - 16 ,8%.

- Volumen plaquetario medio (MPV): 6,5 a 10,5 fL.

- Rango de plaquetas grandes mayores de 12 fL (P-LCR): 10% a 30%.

- Plaquetocrito: 0,159% a 0,385%.

Valores de referencia en los trimestres de embarazo según Canalejo, Tentoni,

Aixalá, & Jelen (2007).

Valores de referencia de leucocitos en los trimestres de embarazo según Sanci, y

otros (2017)
Bibliografía

Acevedo, P., & Jaramillo, P. (2010). Utilidad de los índices plaquetarios en el

diagnóstico diferencial de enfermedades que cursan con alteraciones en las

plaquetas. Obtenido de Universidad de Antioquia:

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Ambuludí, D. (2013). Hematocrito, hemoglobina, índices eritrocitarios y hierro

sérico como parámetros en la ayuda diagnóstica y preventiva de anemia

ferropénica en los niños del barrio Pasallal-Cantón Calvas. Obtenido de

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Cafasso, J. (2014). Recuento de glóbulos rojos (RBC). Obtenido de AARP:

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Campuzano, G. (2017). Evolución del hemograma manual. Medicina & Laboratorio,

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hemograma en embarazadas, con tecnología actual. Obtenido de Redalyc:

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Diaz, P., Olay, G., Hernández, R., Cervantes, D., Presno, J., & Alcántara, L. (2012).

Determinación de los intervalos de referencia de biometría hemática en

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Revoledo, D. (2015). Recuento de Plaquetas en frotis sanguíneo.

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Universidad Autónona de Taumalipas. (2020). Importancia de la biometría hemática

para el médico general. Obtenido de StuDocu:

https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-autonoma-de-tamaulip

as/bioquimica/practicas/importancia-de-la-biometria-hematica-para-el-medico

-general/8155398/view

Zumalacárregui, J. (2018). RDW. Obtenido de Tuotronedico:

https://www.tuotromedico.com/temas/rdw-analisis-sangre.htm#apartDenomin

acion