Practica 13

PRÁCTICA EXTRACCIÓN E El ADN contiene las instrucciones que un
organismo necesita para desarrollarse,

IDENTIFICACIÓN DEL
13
sobrevivir y reproducirse. Para realizar estas
DNA A PARTIR DE funciones, las secuencias de ADN deben ser
CÉLULAS transcritas a mensajes que puedan traducirse
Mg. Jorge E. Gonzalez Siccha para la fabricación proteínas, que son las
moléculas complejas que hacen la mayor parte
del trabajo en nuestro cuerpo.
I. INTRODUCCIÓN
El objetivo fundamental de esta práctica es:
En la investigación básica se utilizan las • Extraer el ADN de un tejido animal o vegetal
técnicas de ingeniería genética para estudiar utilizando técnicas sencillas.
los mecanismos de replicación y expresión de • Determinar por el aspecto la estructura fibrilar
genes en los procariontes, eucariontes y virus. del ADN.
Para la investigación aplicada, la ingeniería
genética permite el desarrollo de cultivos II. MATERIAL Y MÉTODO
celulares o bacterianos capaces de producir 2.1 Material: Reactivos y equipos
productos valiosos como, la insulina humana, - Una cebolla grande fresca, alverjas verdes,
hormona humana del crecimiento, interferón, hígado de pollo.
vacunas, enzimas industriales etc. - Alcohol de 96º colocarlo en la refrigedora
El Ácido desoxirribonucleico (ADN), material - Zumo de piña y zumo de papaya
genético de todos los organismos celulares y - Detergente lavavajillas
casi todos los virus. El ADN lleva la - Sal común, Arena y/ o trozo de tela yute
información necesaria para dirigir la síntesis de - Agua destilada
proteínas y la replicación. El ADN es por lo - Spectronic 20, Refrigeradora, Centrífuga,
común el constituyente básico de la cromatina Equipo de radiación ultravioleta.
(cromosoma) nuclear en las células 2.2 Método
eucarióticas, pero también existe en pequeña
cantidad en las mitocondrias y cloroplastos. En Extracción de DNA de una cebolla o
los procariontes forma el nucloide (que a arvejas
diferencia de los eucariontes no va asociado a • En primer lugar tienen que romperse la
proteínas, es desnudo) y en los virus pared celular y la membrana plasmática
(DNAvirus) que lo poseen constituyen el virión para poder acceder al núcleo de la célula.
o elemento infestante. • Luego, se debe romper la membrana
nuclear para dejar libre el ADN.
El ADN está formado por unos componentes
• Por último hay que proteger al ADN de
químicos básicos denominados nucleótidos.
enzimas que puedan degradarlo y para
Estos componentes básicos incluyen un grupo
aislarlo hay que hacer que precipite en
fosfato, un grupo de azúcar y una de cuatro
alcohol.
tipos de bases nitrogenadas alternativas. Para
formar una hebra de ADN, los nucleótidos se Procedimiento:
unen formando cadenas, alternando con los
• Cortar la cebolla en cuadrados
grupos de fosfato y azúcar. Los cuatro tipos de
bases nitrogenadas encontradas en los • En un vaso de agua agregar 1 cucharada
nucleótidos son: adenina (A), timina (T), sopera de detergente lavavajillas y
guanina (G) y citosina (C). • Una cucharadita de sal y añade agua
El orden, o secuencia, de estas bases destilada hasta llenar el vaso
determina qué instrucciones biológicas están • Mezclar esta solución con los trozos de
contenidas en una hebra de ADN. Por ejemplo, cebolla
la secuencia ATCGTT pudiera dar • Licuar el conjunto con la batidora a
instrucciones para ojos azules, mientras que velocidad máxima durante 30 segundos
ATCGCT pudiera indicar ojos de color café.
• Filtrar el líquido obtenido con un filtro de
tela muy fino
• Separar el filtrado obtenido en dos vasos III. RESULTADOS
de ensayo (aproximadamente 100 ml cada
uno). En la misma proporción, a un filtrado
agregar zumo de piña y al otro jugo de
papaya. Mezclar y volver a filtrar.
• Separar los filtrados obtenidos en tubos de
ensayo (aproximadamente 5 ml).
• Añadir un volumen de alcohol muy frío b)
c)
a)
equivalente al del filtrado, cuidadosamente,
haciéndolo resbalar por las paredes del
vaso para que forme una capa sobre el
filtrado.
• Dejar reposar durante 2 a 3 minutos hasta
que se forme una zona turbia entre las dos
capas. e) f)
• Tomar una muestra de las fibras de ADN d)

que se van depositando sobre la varilla de
vidrio y colocarlas sobre un portaobjetos.
• Teñir durante unos minutos con un
colorante básico (Bromuro de etidio
coloroea exclusivamente al DNA).
• Observar al microscopio. h)
i)
g)
¿Qué ha ocurrido? :
• El detergente es un tensioactivo y la sal
produce un cambio osmótico capaz de
romper la pared celular y las membranas
plasmáticas nuclear, y es ayudado por la
agitación mecánica (licuadora)
• El zumo de piña contiene la enzima
bromelina y el jugo de papaya, la
papaína que contribuye a hidrolizar las
proteínas que pueden degradar a las
cadenas de ADN.
• El alcohol se utiliza para precipitar el ADN
que es soluble en agua, pero cuando se
encuentra en alcohol se desenrolla y
precipita en la interfase entre el alcohol y
el agua.
• Introducir una varilla de vidrio e ir
removiendo la mezcla
2
IV. DISCUSIÓN
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFÍA
Murray Rk, Bender D. y col. (2012):
bioquímica ilustrada de harper. 29avaed.
Editorial Mc Graw Hill- Lange. España.
Sánchez Enríquez S., Flores Alvarado LJ.,
Gurrola Díaz CM.,, Heredia Chávez P.
Manual de prácticas de laboratorio de
bioquímica, 3e. Editorial Mc Graw-Hill
Interamericana Editores, S.A. de C.V.2014.
México.
3
▪ ACTIVIDADES EXTRA-AULA:
▪ Extracción del ADN
▪ Estructura de ADN
▪
Importancia del ADN en el ser vivo.
Esquematizar ejemplos ADN

Plantas
Composición del ADN Animales
Causas de mutaciones en el ADN

Bases nitrogenadas purinas
Bases nitrogenadas pirimidinas Ejemplos en plantas, animales y el hombre
▪ Proceso en la cual participa el ADN, para la

transmisión de la información genética. ▪ BIBLIOGRAFÍA DE LA ACTIVIDAD

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PRÁCTICA EXTRACCIÓN E El ADN contiene las instrucciones que un

organismo necesita para desarrollarse,

• Tomar una muestra de las fibras de ADN d)

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