Informe de Laboratorio 3.1.1
Informe de Laboratorio 3.1.1
Informe de Laboratorio 3.1.1
INFORME DE LABORATORIO
PRESENTADO POR:
PROFESOR:
DEPARTAMENTO DE BIOGENÉTICA
SANTA MARTA
2021
INFORME DE LABORATORIO 2
TABLA DE CONTENIDO
Resumen.................................................................................................................................3
Introducción...........................................................................................................................4
Conclusiones........................................................................................................................38
Bibliografía..........................................................................................................................39
INFORME DE LABORATORIO 3
Tabla de ilustraciones
Ilustración 9. Imágenes de las células vegetales expuestas a las diferentes concentraciones de NaCl vistas al
10x y 40x, las dos primeras están en una solución al 0.6% las siguientes imágenes están al 0.9%..................25
Ilustración 10. Imágenes de las células vegetales expuestas a las diferentes concentraciones de NaCl vistas al
10x y 40x, las dos primeras están en una solución al 1.2 % las siguientes imágenes están al 10%..................26
Ilustración 12. Imágenes de células sanguíneas vistas al 10x, 40x y 100x en el microscopio...........................35
Tabla de graficas
Grafica 4. Cuadro comparativo de las anormalidades que pueden observarse en los leucocitos.....................32
Resumen
Abstract
In the academic process that we have carried out in the biogenetics bases program, we have
been able to demonstrate everything we have learned in virtual mode thanks to the
laboratories made with Professor José Bernardo, so a series of laboratories carried out
throughout the semester will be presented that will provide evidence How the student can
recognize the parts of a microscope, how to use it, see objectives in X4, X10, X40, X100,
know how to differentiate the agglutination of blood, determine the type of blood in a
patient and this is how all this will be expressed in a report consisting of 7 laboratories
already carried out.
Objetivos generales
Introducción
Como se mencionó al principio este nos permite examinar una serie de muestras en donde
encontraremos a una serie de microorganismos, los cuales, a partir de esta herramienta,
permitirá el estudio de su comportamiento, su clasificación y en algunos casos, incluso
determinar a la clase de organismo a la cual nos enfrentamos.
LABORATORIO No. 1
Materiales
Microscopio compuesto
Estereoscopio
Láminas porta objetos
Láminas cubreobjetos
Solución salina
Aceite de inmersión
Se descubre el microscopio
Se conecta el microscopio a la fuente de luz
Se enciende el microscopio
Se escoge la cantidad de luz requerida
Se utiliza como muestra un pequeño cuadro de periódico el cual contenga la letra e, a la
cual se le agrega una pequeña cantidad de agua, y luego se procede a la colocación del
cubre objetos, encima de la muestra.
Se coloca el portaobjetos entre las pinzas de la platina
Se elige el objetivo con el cual se necesite realizar la observación de la muestra
Con ayuda de los tornillos axiales se acomoda la muestra
Se acerca la platina con la muestra, con ayuda del tornillo macrométrico
Se enfoca la muestra con el tornillo micrométrico
Se procede a observar la muestra
Resultados y análisis
Estas dos dimensiones don inversamente proporcionales, es decir, que a mayor aumento
habrá menos área de campo visual
Debido a que esto nos permitirá determinar presuntivamente el organismo que se está
observando, así como clasificarlo y posteriormente va a permitir su análisis
Debido a que este va a permitir visualizar la muestra de una manera más clara y definida,
permitiendo la observación de ciertas características que con otros no sería posible.
Además, el aceite de inmersión impide que haya fricción entre el lente y la muestra, por
ende, evita que el lente se raye o se dañe.
En el microscopio óptico las muestras se pueden preparar de las siguientes formas básicas,
en fresco y en seco. La preparación en fresco se utiliza para observar microorganismos o
teidos biológicos los cuales necesiten hidratarse para su adecuada observación, entre los
cuales encontramos agua y otras sustancias. En la preparación en seco no es necesario
ninguna especie de líquido que hidrate a la muestra, como en el caso del cabello, esporas,
insectos, etc.
- Tipos de colorante
Azul brillante de Coomassie: Permite la tinción de las proteínas de un color azul fuerte.
Azul de metileno: Es frecuente utilizado para la tinción de las células animales en donde
hace más visibles sus núcleos.
Azul Nilo: Este permite la tinción de núcleos de células vivas de color azul.
INFORME DE LABORATORIO 9
Bismarck Brown: Tiñe a mucinas acidas de color amarillo, este al igual que el azul nilo
permite la tinción de células vivas.
Cristal violeta: Tiñe las paredes de las células de un color púrpura. Este es un color
importante en la coloración de Gram.
DAPI: Este es un colorante nuclear fosforescente que produce una fuerte fluorescencia
cuando es irradiado con luz ultravioleta. Es útil tanto para células vivas como fijadas.
Lugol: Permite la coloración de las células y marca más el núcleo, estos se tiñen de color
marrón.
Safranina: Se utiliza en la contra coloración, en donde tiñe de color rojo a los núcleos de la
célula.
Tetróxido de osmio: Permite la tinción de lípidos, mediante una coloración negra o marrón.
6. Investigue los cuidados que se deben tener con el microscopio antes y después de
utilizarlo, al trasladarlo de un sitio a otro.
El microscopio antes y después de uso debe permanecer cubierto para evitar que a este
entre polvo y otras clases de partículas, las lentes de los objetivos y del ocular deben
permanecer limpias, procurar no tocar los lentes; en caso de uso de aceite de inmersión se
recomienda la limpieza mediante el uso de papel especial para los lentes. Al término de su
uso se aconseja guárdalo en un armario caliente.
- Al trasladarlo
Se recomienda trasladar el microscopio con las dos manos, una sosteniendo la base y la otra
agarrando el brazo del microscopio. En lo posible evitar moverlo, y si es necesario hacerlo
de manera lenta y cuidadosa.
8. Discute a que se puede deber que se obtenga poca resolución y mal contraste de la
imagen.
Esto se puede deber a un mal ajuste del microscopio, para contrarrestar esto se recomienda
el uso de los tornillos macro y micrométricos, en especial este último, debido a que es el
que va a permitir enfocar la muestra.
10. Discute por que dos personas diferentes pueden no ver con la misma nitidez la misma
imagen.
11. Investiga a que se puede deber que los ojos del observador se cansan con largos ratos de
observación al microscopio
Esto ocurre a una contracción prolongada de los músculos oculares por un tiempo
prolongado. Este se contrae para así poder enfocar objetos a una distancia cercana, y sí esto
se mantiene puede conllevar a un cansancio ocular
10x
40x
40x
1- Ocular
2- Tubo
3- Brazo
4- Revolver
5- Tornillo Macrométrico
6- Tornillo Micrométrico
7- Tornillo de control axial
8- Objetivos
9- Base
INFORME DE LABORATORIO 13
10- Platina
11- Pinzas
12- Condensador
13- Foco
1- Oculares
2- Tornillo de enfoque
3- 1Brazo
4- Pinzas
5- Base 2
6- Platina
7
7- Objetivo
3
LABORATORIO No. 2
4
6
2. 1 Diversidad celular: células eucariotas-células 5
procariotas
Procedimiento
EXPERIENCIA 1
3. Colocar unas partículas de polen sobre un portaobjetos. Agregar una gota de agua y
colocarle un cubreobjetos cuidando de no dejar burbujas de aire. Observar la
morfología al microscopio con el objetivo de menor aumento
EXPERIENCIA 2
1. Tomar una pequeña cantidad de yogur con un palillo y extenderlo por la zona
central del portaobjeto
2. Fijación por calor: tome el portaobjeto con dos dedos por el borde, con la muestra
hacia arriba y en posición horizontal, pasarlo por la llama del mechero de modo que
se pueda tocar con la dorso de la mano sin quemarse. Repetir la operación, siempre
probando que no este demasiado caliente hasta que se haya secado la muestra.
3. Eliminación de grasas: colocar la preparación sobre una placa de Petri y poner
unas gotas de etanol sobre la muestra fijada. Esperar unos minutos. Lavar con agua
y escurrir.
INFORME DE LABORATORIO 15
ACTIVIDADES
Esquematice las células de las muestras observadas con los objetivos de 10X, 40X y 100X,
anotando el nombre de la célula, los componentes celulares identificados, así como el
aumento total empleado (para lo cual se multiplica el aumento del objetivo por el aumento
del ocular).
CUESTIONARIO
1. describa la estructura de la pared celular de las células vegetales y la pared celular de una
bacteria. ¿en que se diferencian?
Pared celular vegetal: posee una capa externa llamada lamina media la cual contiene
pectina, un polisacárido que le ayuda a la unión celular con las células adyacentes. también
encontramos la pared celular, que se compone en su mayoría de microfibrillas de celulosa
que se encuentran dentro de una matriz gelatinosa de fibras de hemicelulosa y pectina. Esta
pared celular primaria le brinda a la célula vegetal fuerza y flexibilidad para su crecimiento.
Posteriormente se engrosa y crea una capa que fortalece y sostiene a la célula.
2.Analice la teoría celular ¿Por qué es importante para comprender como funcionan los
seres vivos?
R/
Porque nos revela que las células son la base estructural y funcional de cualquier ser vivo y
esto es lo esencial para entender sus funcionamientos
R/
INFORME DE LABORATORIO 16
4. ¿Cuál es la ventaja evolutiva que representa para los eucariotas poseer un material
genético confinado en un núcleo?
R/
Se tiene una mejor protección y regulación del material genético del material
genético
Tener una organización del material genético lo cual facilita la división celular
R/ La osmosis es una difusión entre dos líquidos a través de una membrana semipermeable,
y la diálisis es un proceso de separación de dos líquidos mesclados en una misma
disolución a través de una membrana que los filtra.
R/
Pinocitosis, etc...
8. ¿Qué papel desempeña la pared celular de las bacterias y su resistencia a los antibióticos?
R/ Las bacterias producen mutaciones en las porinas de la pared que impiden la entrada de
ciertos antibióticos (betalactámicos) o alteran los sistemas de transporte (aminoglucósidos
en los anaerobios). En otras ocasiones pueden provocar la salida del antibiótico por un
mecanismo de expulsión activa, impidiendo que se acumule en cantidad suficiente para que
actúe eficazmente.
9. Elabore un cuadro con las diferencias entre los diferentes tipos de células.
10. ¿En qué consiste la teoría endosimbiótica? ¿Es esta teoría válida para explicar la
aparición de los seres eucariotas?
INFORME DE LABORATORIO 18
R/Esta teoría propone que los organelos fueron en el pasado células procariotas que
terminaron dentro de células huéspedes y se produjo una relación endosimbiótica, los
procariotas prisioneros podrían haber proporcionado nutrientes cruciales (en el caso del
cloroplasto primitivo) o haber ayudado a explotar oxígeno para extraer energía (en el caso
de la mitocondria primitiva). Los procariotas, a su vez, habrían recibido protección y un
ambiente estable para vivir.
Esta podría se runa teoría valida ya que muestra como una relación endosimbiótica
evoluciona al punto de dejar de ser una relación huésped portador, para pasar a ser parte del
portador.
ACTIVIDADES EN CLASE
Membrana
celular
Cloroplastos
Núcleo
2. OBSERVACION DE CELULAS PROCARIOTAS
Citoplasma
Pared celular
INFORME DE LABORATORIO 20
LABORATORIO No. 4
MATERIALES
INFORME DE LABORATORIO 21
PROCEDIMIENTO
1. Como primer paso se usará una lanceta estéril para obtener una gota de sangre esta
se colocará en un portaobjetos limpio y seco, después se pondrá el cubreobjetos y se
realizará la observación por medio del microscopio.
Percusión: Evitar cualquier tipo de contaminación de su muestra, como alcohol,
agua, etc.
2. Repita el primer paso, pero ahora se le agregara a la muestra de sangre dos gotas de
agua destilada.
3. Repita el primer paso y ahora adicione a la muestra dos gotas de las siguientes
soluciones: NaCl al 0.6% - NaCl al 0.9% - NaCl al 1.2% - NaCl al 10%
NOTA: No se debe realizar todas las preparaciones al mismo tiempo. Para obtener
resultados esperados es importante que termine con la observación de una preparación o
muestra antes de preparar la siguiente preparación.
Difusión
Difusión Simple
Difusión facilitada
Osmosis
4. ¿Por qué los sueros fisiológicos que se aplican a pacientes intravenosamente deben
ser isotónicos?
Soluciones.
ACTIVIDADES EN CLASE
Ilustración 9. Imágenes de las células vegetales expuestas a las diferentes concentraciones de NaCl vistas al
10x y 40x, las dos primeras están en una solución al 0.6% las siguientes imágenes están al 0.9%.
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INFORME DE LABORATORIO 29
Ilustración 10. Imágenes de las células vegetales expuestas a las diferentes concentraciones de NaCl vistas al 10x y 40x, las
dos primeras están en una solución al 1.2 % las siguientes imágenes están al 10%.
LABORATORIO No. 5
MATERIALES
PROCEDIMIENTO
Técnica manual con dos portaobjetos en ángulo: Es la técnica más usual para hacer
extendidos de sangre periférica.
Nota: Debe tenerse cuidado con el tamaño de la gota ya que es importante, si llega
ser demasiado grande crea un extendido muy largo o grueso y si es muy pequeña se
formará un extendido corto o delgado.
3. Empujar rápido y con cuidado hacia delante hasta el final del portaobjetos así
creando el extendido. Nota: Es importante que toda la gota se incluya en el
extendido.
Importante:
a) El movimiento demasiado lento puede producir una mala distribución de los leucocitos.
b) Mantener el ángulo y fuerza constante sobre el portaobjetos para evitar dificultades con
el extendido.
INFORME DE LABORATORIO 31
d) Si se hacen dos o tres extendidos, se elige el mejor para teñir y los otros se descartan de
forma adecuada.
A. Coloque una gota pequeña de sangre sobre un cubreobjetos limpio y seco (22 * 22
mm) y coloque encima otro cubreobjetos.
B. Después se hacen girar uno sobre otro para crear dos extendidos delgados, uno en
cada cubreobjetos.
Todos los extendidos de sangre deben secarse rápido para así evitar los artefactos que
produce resultados falsos positivos. En algunos laboratorios se usa un ventilador pequeño
para acelerar el secado. Una recomendación es no soplar sobre el portaobjetos es
contraproducente.
A. Posicionar el frotis secado al aire sobre una rejilla con la sangre con una posición
hacia arriba.
D. Lavar con agua cuidadosamente hasta que la extensión presente tenga un aspecto
rosado al verlo a simple vista.
E. Limpiar el portaobjetos poder ser con un algodón humedecido con alcohol para
eliminar los posibles restos del colorante.
1. Realice un diagrama de las alteraciones más comunes que presentan los eritrocitos.
INFORME DE LABORATORIO 33
Grafica 4. Cuadro comparativo de las anormalidades que pueden observarse en los leucocitos.
Este proceso se puede llevar a cabo gracias a un clasificador k-NN en combinación con la
primera métrica de Minkowski y con la participación de técnicas de procesamiento digital
de imágenes que son papaces de identificas contar y clasificar a los leucocitos en sus
diferentes agrupaciones como lo son los neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monocitos y
linfocitos. Cabe mencionar que gracias a estos métodos se han podido diagnosticar una gran
cantidad de enfermedades debido a que la mayoría de las enfermedades se detectan por un
cambio en el conteo normal de los leucocitos, ya sea porque se está combatiendo a un
agente infecciono o se presentan alteraciones en el organismo y aunque no es esencial
también se establecerán cambios en su forma que nos ayudara a entender u poco mejor que
esta ocurriendo con el paciente.
(Las patologías no se encontraban en el documento, por lo que para no legar ese espacio sin
resolver se establecieron una patología relacionas con la temática)
Ilustración 12. Imágenes de células sanguíneas vistas al 10x, 40x y 100x en el microscopio
INFORME DE LABORATORIO 40
LABORATORIO No. 6
MATERIALES
Placas de vidrio
Lancetas estériles
Palillos
PROCEDIMIENTO
INTERPRETACION
Para la Hemoclasificación, es necesario tener en cuenta, que cuando los glóbulos rojos
aglutinan con un antisuero determinado, esto indica la presencia de un antígeno de
membrana específico; de manera tal que una muestra que aglutine con anti-A, y no con
anti-B es definitivamente grupo A.
INFORME DE LABORATORIO 41
CUESTIONARIO
Una mujer Rh (-), con su primer embarazo tiene un hijo Rh (+), ¿espera usted que el
niño haga o no hemolisis? ¿Por qué?
RH: Positivo
ACTIVIDADES EN CLASE
Ilustración 15. Observación con objetivo en 40x Ilustración 14. Observación con objetivo en 40x
LABORATORIO 7
INFORME DE LABORATORIO 45
CUESTIONARIO
1. ¿De los elementos celulares de la sangre, cuales sirven como fuente de ADN y por
qué?
La sangre es una fuente excelente de ADN, este está presente en los glóbulos
blancos porque tienen núcleo
2. El EDTA contenido en los tubos en los que se obtuvo la muestra, funciona como un
anticoagulante. describa su acción en términos bioquímicos.
EL EDTA actúa como agente quelante (secuestrante) capturando los iones de calcio
imprescindible en la cascada de coagulación ya que son los ayudan a la protrombina
a convertirse trombina si está a su vez va a ser la que active al fibrinógeno y el
fibrinógeno será el que cree la fibrina para que vaya a tapar la estructura dañada. La
ventaja es que respeta la morfología eritrocitaria y leucocitaria al menos 24 horas,
permite la realización de frotis (extendido de sangre) sanguíneo 2 horas después de
la extracción de la muestra e impide una aglutinación de plaquetas.
5. ¿Cuál es la vida media del ADN en las condiciones finales en que se deja después
de esta práctica?
6. En el caso de una muestra de saliva, ¿cuáles serían las células utilizadas para para
extraer ADN?
Hay que comprobar la pureza del ADN mediante un espectrofotómetro. Este aparato
emite diferentes longitudes de onda y mide la absorbancia (medida de energía
radiante absorbida por un material) de la muestra. En función del espectro obtenido
se puede determinar si la muestra de ADN es pura o no.
1.000.000 de copias.
11. ¿Qué otras técnicas de diagnóstico molecular se podrían utilizar con la muestra de
ADN obtenida?
INFORME DE LABORATORIO 47
12. La Taq polimerasa es la enzima más utilizada en la PCR pero ¿qué inconveniente
presenta?
Conclusiones
Para finalizar podemos concluir que los laboratorios realizados permitieron adquirir
experiencia en el parte práctica te técnicas como, reconocer y entender el funcionamiento
de cada una de las partes del microscopio, Comprender la teoría celular con el fin de
identificar las células eucariotas y procariotas, observar el comportamiento de diferentes
muestras bajo diferentes concentraciones de NaCl, identificación del tipo de sangre
mediante la reacción anticuerpo- antígeno y por último la detección y cuantificación de
material genético a partir de una muestra. Empleando los conocimientos adquiridos en las
diferentes sesiones de clase.
INFORME DE LABORATORIO 50
Bibliografía
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