UNIVERSIDAD ESTATAL AMAZÓNICA – SEDE SUCUMBÍOS

TEXTO GUÍA DE MICROBIOLOGÍA

MICROBIOLOGÍA 14

Tema III: Nutrición y medios de cultivo.

Subtema: Tipos de medio de cultivo.
Objetivo: Describir qué es un medio de cultivo y sus tipos.

TIPOS DE NUTRIENTES

Los nutrientes son sustancias que las células necesitan para crecer; son empleados en la síntesis de
los componentes celulares y brindan energía.

Los macronutrientes son sustancias que se necesitan en grandes cantidades, por ejemplo: C, H,
O, N, P, S, K, Ca, Mg y Na.

El carbono representa aproximadamente el 50% del peso de una célula seca y se lo encuentra en
las biomoléculas. El nitrógeno representa aproximadamente el 12% del peso de una célula seca y
se lo encuentra en aminoácidos y ácidos nucleicos. El fósforo se lo encuentra en ácidos nucleicos
y fosfolípidos. El azufre está presente en aminoácidos como la cisteína y la metionina; en vitaminas
como la tiamina, biotina y el ácido lipoico; además, se encuentra en la coenzima A. El potasio y
el magnesio son necesarios para las actividades de varias enzimas. El potasio es utilizado por
enzimas que participan en la síntesis de proteínas. El magnesio funciona como estabilizador de los
ribosomas, membranas celulares y los ácidos nucleicos. El calcio ayuda a estabilizar la pared
celular bacteriana y juega un papel importante en la resistencia de las endosporas al calor. El sodio
es utilizado por algunos microorganismos y no por otros; su necesidad suele ser un reflejo del
hábitat del microorganismo.

Los micronutrientes son sustancias inorgánicas que se necesitan en cantidades muy pequeñas
(cantidades traza), por ejemplo: B, Co, Cu, Fe, Mn, Mo, Ni, Se, V y Zn. En general, los
micronutrientes actúan como cofactores de las enzimas.

Uno de los micronutrientes más importantes es el hierro, el cual participa en la síntesis de la

hemoglobina. Además, forma parte de los citocromos (proteínas que participan en el transporte de
electrones). El hierro forma parte de los sideróforos, los cuales son sustancias sintetizadas por los
microorganismos que les ayudan a tomar el hierro del medio.

Sideróforos: sustancias que solubilizan el hierro de los minerales y lo transportan dentro de las
células. Por ejemplo, algunos derivados del ácido hidroxámico reducen el Fe+3 a Fe+2 y lo
solubilizan.

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Los factores de crecimiento son sustancias orgánicas que se necesitan en cantidades muy
pequeñas (vitaminas, aminoácidos, bases nitrogenadas); las vitaminas actúan generalmente como
coenzimas. Si los microrganismos no pueden sintetizar estas sustancias deben tomarlas del medio,
por ejemplo, los aminoácidos esenciales.

Aminoácidos esenciales: aminoácidos que un organismo no puede sintetizar por sí mismo. Los
microorganismos pueden sintetizar la mayoría de los 20 aminoácidos que forman las proteínas,
pero el ser humano no.

MEDIOS DE CULTIVO

Medio de cultivo: solución con nutrientes que permite el crecimiento de microorganismos a

valores adecuados de temperatura y pH.

Inocular o sembrar: colocar microorganismos en un medio de cultivo; se realiza a través de un

instrumento llamado asa.

Figura 1. Asas de siembra

Incubar: mantener los medios de cultivo a una temperatura adecuada que permita el crecimiento
microbiano.

Colonia: población visible macroscópicamente de células que crecen sobre un medio sólido,
provenientes de una sola célula

Cultivo: una cepa o diferentes tipos de microorganismos que se desarrollan bajo condiciones de
laboratorio.

Cultivo puro o axénico: cultivo que contiene un solo tipo de microorganismo.

Cepa: población de células de una sola especie descendientes de una única célula.

Tenemos medios de cultivo líquidos y sólidos. Los medios líquidos se preparan añadiendo agua
destilada a los nutrientes.

Los medios sólidos se preparan adicionando al medio líquido un agente solidificante, por ejemplo,
agar al 1,5 %. Estos medios inmovilizan a las células, permitiéndolas crecer y formar colonias. El
agar es un polisacárido que se obtiene de las algas rojas y no es degradado por ningún
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microorganismo. El agar es una mezcla de agarosa y agaropectina; el monosacárido que forma el

agar es un derivado de la galactosa.

El agar permanece sólido hasta los 45°C, por lo tanto, permite realizar investigaciones a 37°C que
es la temperatura óptima para el crecimiento de microorganismos patógenos para el ser humano.
Antes se utilizaba gelatina (constituida por colágeno) para este fin, pero había el problema que se
volvía líquida a 37°C.

TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

Tenemos varios tipos de medios de cultivo:

Medios de cultivo definidos: son medios de cultivo de los que se conoce su composición exacta.
Se preparan añadiendo agua destilada a cantidades precisas de compuestos orgánicos e
inorgánicos. La concentración de cada compuesto depende del microorganismo que se quiere
cultivar.

Medios de cultivo complejos: son medios de cultivo de los que no se conoce su composición
exacta. Están constituidos de productos animales o vegetales hidrolizados como caseína (proteína
de la leche), carne, soya y extractos de levaduras que no han sido analizados químicamente para
determinar su composición exacta. Estos hidrolizados se encuentran en forma de polvo y pueden
ser pesados y disueltos en agua fácilmente. Se utilizan cuando se quiere cultivar varios tipos de
microorganismos.

Alimento hidrolizado: alimento cuyas moléculas se han subdividido. Esto se hace por medio de
enzimas, ácidos o bases. Las proteínas de verduras hidrolizadas se emplean para preparar cubos
de sopa.

Medios de cultivo enriquecidos: son medios de cultivo complejos a los que se añaden sustancias
de alto poder nutritivo como suero o sangre. Se utilizan para el cultivo de microorganismos
nutricionalmente exigentes. Por ejemplo, las bacterias de los géneros Streptococcus (enfermedades
respiratorias) y Staphylococcus (enfermedades de la piel).

Medios de cultivo selectivos: medios de cultivo que contienen compuestos que permiten el
crecimiento de algunos microorganismos e inhiben el crecimiento de otros.

Medios de cultivo diferenciales: medios de cultivo que permiten la identificación de

microorganismos basados en su apariencia. Contienen colorantes que permiten la diferenciación
de reacciones químicas particulares. Son útiles para distinguir especies de bacterias porque unas
realizan una reacción particular y otras no.

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Los microrganismos que necesitan cantidades pequeñas de carbono para sintetizar sus
componentes celulares, se dice que tienen una mayor capacidad biosintética.

Para cultivar correctamente un microorganismo determinado es necesario conocer sus exigencias

nutritivas y suministrarlas en los medios de cultivo adecuados.

CULTIVO DE LABORATORIO

Antes de realizar la inoculación o siembra de los medios de cultivo, estos deben esterilizarse en un
autoclave.

Esterilizar: eliminar todos los microorganismos, incluidos virus y endosporas.

Autoclave: dispositivo sellado de calentamiento que permite la entrada de vapor de agua a

presiones altas, por lo tanto, el agua alcanza temperaturas de ebullición superiores a los 100 °C.

El autoclave emplea vapor de agua bajo una presión de 1,1 kg/cm2, lo que le permite tener un
punto de ebullición de 121 °C.

Para lograr la esterilización de material con endosporas se coloca el material en un autoclave a

121°C por 15 minutos.

Una vez preparado un medio de cultivo y esterilizado, se pueden inocular microorganismos e

incubar el cultivo en condiciones que propicien el crecimiento. La inoculación se hace a través de
una técnica aséptica o estéril.

Técnica aséptica: serie de pasos que se realizan para evitar la contaminación de los cultivos puros
y de los medios de cultivo estériles. Su aprendizaje es esencial para tener éxito en el laboratorio
microbiológico. El problema más común son los contaminantes aéreos ya que el aire siempre
contiene polvo en suspensión que lleva comunidades de microrganismos.

A continuación, se describen los pasos de una técnica aséptica.

a) El asa de siembra se calienta hasta la incandescencia y se enfría brevemente al aire

b) Se retira el tapón del tubo.
c) Se pasa el extremo del tubo por la llama para esterilizarlo.
d) Se extrae la muestra con el asa esterilizada y se transfiere a un medio estéril.
e) Tras tomar la muestra con el asa, se vuelve a flamear el extremo del tubo.

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f) Se tapa de nuevo el tubo; se vuelve a esterilizar el asa.

Figura 2. Transferencia aséptica

SIEMBRA POR ESTRÍAS

La siembra por estrías es un método para obtener cultivos puros a partir de soluciones que
contienen varios microrganismos. La técnica consiste en que mediante un asa de siembra
esterilizada se toma un poco de muestra del inóculo; luego, con el asa se raya la superficie del
medio de cultivo de forma en que en cada pasada sea menor el número de células depositado.
Después de una estría inicial se hacen estrías subsiguientes en ángulo. Las últimas pasadas deberán
depositar un número tan bajo de células que una vez incubadas forman cultivos puros.

Figura 3. Método de siembra por estrías

CRECIMIENTO MICROBIANO

Crecimiento microbiano: incremento en el número de células de una población.

Población: conjunto de organismos de la misma especie que habitan en un lugar determinado.

División celular: proceso en el que una célula madre se divide en dos células hijas; en los
procariotas (bacterias y arqueas) se realiza por fisión binaria o bipartición.

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Los bacilos bacterianos como la Escherichia coli se alargan hasta el doble de su longitud y después
forman una pared que divide a la célula en dos células hijas. La pared que se forma se llama septo
y es el resultado del crecimiento hacia adentro de la membrana plasmática y la pared celular desde
posiciones opuestas.

Tiempo de generación (g): tiempo necesario para que una célula madre se divida y forme dos
células hijas.

El tiempo de generación es muy variable y depende de la temperatura y de factores nutricionales

y genéticos. El tiempo de generación de E. coli en un cultivo de laboratorio y en las mejores
condiciones nutritivas es de 20 minutos.

Fisión binaria: división celular que ocurre luego que una célula aumenta su tamaño mínimo dos
veces. Los procariotas primero duplican el ADN de su cromosoma único y circular.

Proteínas Fts (proteínas filamentosas sensibles a la temperatura): proteínas que forman el

divisoma.

Divisoma: conjunto de proteínas que dirigen la división celular en los procariotas.

Proteínas Mreb: proteínas que determinan la forma de los procariotas. Las bacterias en forma de
coco carecen de proteínas Mreb y de los genes que la codifican; esto nos sugiere que la forma por
defecto de una bacteria es la esférica. Forman un citoesqueleto similar al de la actina en los
eucariotas.

Actina: proteína globular que forma los microfilamentos del citoesqueleto de los eucariotas.

Tubulina: proteína globular que forman parte de los microtúbulos de los eucariotas.

Crescentina: proteína en forma de filamento que determina la forma curva de algunos procariotas
como Caulabacter crescentus.

Autolisinas: enzimas que rompen el peptidoglicano de las bacterias durante la división celular; se
parecen a las lizosimas.

Glicolasas: enzimas que unen el peptidoglicano preexistente con el peptidoglicano nuevo durante
la división celular.

Bactoprenol: alcohol de 55 carbonos que transporta la N-acetilglucosamina y el ácido N-acetil

murámico durante la síntesis de peptidoglicano.

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Transpeptidación: formación de enlaces peptídicos entre las unidades de ácido N-acetil

murámico durante la síntesis de peptidoglicano. Esta reacción conduce al entrecruzamiento de dos
cadenas de peptidoglicano: la penicilina inhibe esta reacción durante la división celular.

REPRESENTACION DE LOS DATOS DE CRECIMIENTO MICROBIANO

A continuación, se muestran los datos de crecimiento de un microorganismo que tiene un tiempo

de generación de 30 minutos (0,5 h).

tiempo (horas) número de células log (número de células)

0 1 0.00
0.5 2 0.30
1 4 0.60
1.5 8 0.90
2 16 1.20
2.5 32 1.51
3 64 1.81
3.5 128 2.11
4 256 2.41
4.5 512 2.71
5 1024 3.01
5.5 2048 3.31
6 4096 3.61

Crecimiento exponencial: patrón de crecimiento en el que el número de células de una población

se duplica en intervalos constantes de tiempo.

Durante el crecimiento exponencial el aumento del número de células es lento al inicio, pero se
incrementa cada vez más con el tiempo. En las últimas etapas el aumento del número de células
es realmente explosivo.

Si se grafica el logaritmo del número de células en función del tiempo, se obtiene una línea recta.

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Figura 4. Patrón de crecimiento exponencial

La relación entre el número inicial de células en un cultivo y el número de células en un instante

dado, viene dado por la ecuación:

𝑁 = 𝑁𝑂 2𝑛

Donde N es el número de células en un instante dado, No es el número de células iniciales y n es

el número de generaciones.

De la ecuación anterior se puede despejar n de la siguiente manera:

log 𝑁 = 𝑙𝑜𝑔𝑁𝑜 + 𝑛 𝑙𝑜𝑔 2

𝑛 = 3.3(𝑙𝑜𝑔𝑁 − 𝑙𝑜𝑔𝑁𝑜 )

El tiempo de generación (g) es una medida del tiempo que tarda una población en duplicar su
número de células y se calcula con la siguiente ecuación:

𝑡 𝑡
𝑔= ; 𝑛=
𝑛 𝑔

Donde t es la duración del crecimiento exponencial expresada en días, horas o minutos y n es el

número de generaciones.

El tiempo de generación (g) también se puede calcular directamente a partir de la pendiente de la

recta obtenida graficando el logaritmo del número de células en función del tiempo.

Reemplazando n en la ecuación 𝑙𝑜𝑔 𝑁 = 𝑙𝑜𝑔𝑁𝑜 + 𝑛 𝑙𝑜𝑔 2, tenemos:

𝑡
𝑙𝑜𝑔 𝑁 = 𝑙𝑜𝑔𝑁𝑜 + 𝑙𝑜𝑔 2
𝑔

𝑙𝑜𝑔 2
𝑙𝑜𝑔 𝑁 = 𝑙𝑜𝑔𝑁𝑜 + 𝑡
𝑔

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0.301
𝑙𝑜𝑔 𝑁 = 𝑙𝑜𝑔𝑁𝑜 + 𝑡
𝑔

Por lo tanto, si se grafica el logaritmo del número de células en función del tiempo se obtiene una
recta cuya “intersección con el eje” y “pendiente” son:

𝑎 = 𝑙𝑜𝑔𝑁𝑜

0.301
𝑏=
𝑔

A la pendiente de la ecuación anterior se le llama velocidad específica de crecimiento (k) y es

igual a:

0.301
𝑘=
𝑔

La inversa del tiempo de generación se denomina velocidad de división (𝑣). La velocidad de

división es una medida del número de generaciones que se producen por unidad de tiempo en un
cultivo con crecimiento exponencial.

1
𝑣=
𝑔

Los valores calculados anteriormente nos sirven para optimizar las condiciones de cultivo de un
microorganismo particular o para probar el efecto positivo o negativo de algún tratamiento en un
cultivo microbiano.

CRECIMIENTO EN SISTEMAS CERRADOS

El crecimiento en sistemas cerrados o discontinuos es el más habitual en el laboratorio. Se

caracteriza porque ocurre en un volumen fijo de medio de cultivo que es continuamente
modificado por los microorganismos. No hay aporte nuevo de nutrientes, ni es posible eliminar
desechos, por lo que los microorganismos crecen hasta que el medio ya no es adecuado.

Un microorganismo que es inoculado en un sistema cerrado como en un tubo o un matraz presenta

las siguientes fases: latencia, exponencial, estacionaria y de muerte.

Fase lag o de latencia: fase en la cual no hay crecimiento microbiano, pero se producen enzimas
necesarias para que los microorganismos puedan crecer en un nuevo ambiente; es una fase de
preparación y adaptación al medio.

La fase de latencia no se presenta si un cultivo exponencial se inocula en el mismo medio y bajo

las mismas condiciones de crecimiento.
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Fase exponencial: fase en la cual el número de células se duplica en intervalos regulares de

tiempo. Es la mejor fase para realizar estudios enzimáticos y estructurales debido a que las células
están en el estado fisiológico más sano. En general, los microorganismos procariotas crecen más
rápido que los microorganismos eucariotas ya que presentan un intercambio de nutrientes y de
desechos más rápido.

Cuando el crecimiento exponencial cesa, la población entra en la fase estacionaria.

Fase estacionaria: fase donde no hay aumento ni descenso neto en el número de células. El
crecimiento exponencial no dura indefinidamente, ya que se agotan los nutrientes del medio y se
acumulan desechos hasta niveles inhibitorios.

A veces se presenta un crecimiento lento en la fase estacionaria, algunas células crecen, pero otras
mueren y los dos procesos se equilibran; este fenómeno se llama crecimiento críptico. Finalmente,
los microorganismos entran en la fase de muerte.

Fase de muerte: fase donde los microorganismos mueren. La fase de muerte es también
exponencial, sin embargo, es más lenta que la fase de crecimiento exponencial.

En un sistema cerrado la concentración de nutrientes condiciona tanto la velocidad de crecimiento

como la densidad de población (número de células por mililitro). En un cultivo cerrado el ambiente
cambia constantemente a causa del consumo de nutrientes y la producción de desechos; para evitar
esto se usan los sistemas abiertos o continuos.

Figura 5. Fases del crecimiento bacteriano en un sistema cerrado.

CRECIMIENTO EN SISTEMAS ABIERTOS

Los sistemas abiertos o continuos son aquellos que presentan un ambiente constante durante largos
periodos. Se caracterizan porque el medio de cultivo se renueva constantemente y su composición
no cambia una vez alcanzado el equilibrio (estado estacionario).
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Estadio estacionario: estado en el cual el volumen del medio, el número de células, y la relación
nutrientes-desechos permanecen constantes.

Quimiostato: dispositivo que mantiene un volumen constante al que se añade continuamente

medio fresco y del que rebosa medio usado con células a la misma velocidad.

Velocidad de dilución: velocidad con la que se añade medio fresco y rebosa medio usado.

Una ventaja práctica del quimiostato es que una población de microorganismos se puede mantener
en la fase de crecimiento exponencial durante largo periodos (días o semanas) y se puede disponer
de tales células en cualquier momento. Además, los experimentos se pueden repetir sabiendo que
la población celular es prácticamente la misma cada vez.

Figura 6. Esquema de un quimiostato

Un quimiostato permite controlar la velocidad de crecimiento ajustando la velocidad de dilución

y permite controlar la densidad de la población variando la concentración de un nutriente limitante.

El aumento en la concentración de un nutriente limitante produce un incremento en el número de

microorganismos, pero la misma velocidad de crecimiento. Además, a velocidades muy altas de
dilución, los microorganismos no pueden crecer lo bastante rápido para mantenerse con esa
dilución y desaparecen por lavado; en cambio, a velocidades de dilución muy bajas los
microorganismos pueden morir por la falta de nutrientes porque el nutriente limitante no se añade
lo bastante rápido para que se lleve a cabo el metabolismo celular.

EJERCICIOS

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1. Si partimos de un medio de cultivo que tiene 104 células/mL y un tiempo de generación de

2 h. ¿Cuántas células cultivables tendremos al cabo de 4, 24 y 48 horas de cultivo?
2. ¿Cuál es el tiempo de generación de un cultivo que tiene una velocidad específica de
crecimiento de 0,01 min-1? ¿Cuál será su velocidad de división?
3. Si se quiere conseguir que un cultivo crezca hasta una densidad celular de 10 8 células/mL
en 3 horas y el tiempo de generación es de 30 minutos. ¿Cuál debe ser la densidad celular
al comienzo del cultivo?
4. Tenemos un cultivo de densidad 108 células/mL, con un tiempo de generación de 30
minutos. Si la densidad inicial fue de 105 células/mL. ¿Qué tiempo de incubación ha sido
necesario para alcanzar la densidad final mencionada?
5. Supongamos un cultivo en fase exponencial que en un momento dado tiene 10.000
células/mL y cuatro horas más tarde 100.000.000 células/mL. Calcular k y g.
6. En una comida campestre se contaminó la paella con 46 células de Propionibacterium
acnes. Si P. acnes tiene un tiempo de generación de 120 minutos y una fase de latencia de
1,5 h. ¿Cuántas células de esta bacteria estarán presentes en la paella al cabo de 10 h?
7. Un carnicero, portador asintomático de Salmonella, picó carne sin proteger sus manos con
guantes. La carne picada se contaminó con 25 células de Salmonella spp y con 32 células
de Salmonella enterica. Sabiendo que Salmonella spp tiene un tiempo de generación de 30
minutos y una fase de latencia de 3 h y que la velocidad específica de crecimiento de
Salmonella enterica en la carne es 0,17 h-1 y la duración de su fase de latencia 5 h. Calcule
el número de células del género Salmonella que habrá en la carne 10 h después de ser
picada.
8. Los datos de la fase exponencial de crecimiento de tres especies bacterianas que utilizan
glucosa como fuente de carbono son las siguientes. Indique cuál de las tres especies crecerá
más rápidamente.

9. Los resultados para E. coli en dos medios diferentes (mismas condiciones de incubación)
son los reflejados en la tabla. ¿Cuál de los dos medios seleccionaría para estudios
posteriores?
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10. Con el objetivo de hacer una curva de crecimiento de la bacteria E. coli en caldo nutritivo
se inocula un matraz con caldo nutritivo (37°C, 100 r.p.m.). Cada hora se extraen 2 mL del
matraz y se mide la absorbancia, obteniendo los siguientes resultados. Paralelamente, a
partir de un cultivo de E. coli, se preparan suspensiones celulares en las que se determina
el número de bacterias/mL y la absorbancia, obteniéndose la siguiente ecuación: ln
N=20,688 Abs + 15,387 Calcular k y g.

MEDIDA DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

El crecimiento de la población se mide a partir de los cambios en el número de células o en la

concentración de algún componente celular como estimación del número de células. Estos
componentes pueden ser proteínas, ácidos nucleicos o el peso seco de las células

CONTEO POR MICROSCOPIA

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El conteo total de células microbianas se lleva a cabo simplemente por observación y conteo de
las células presentes.

Las muestras secas se colocan en un portaobjetos y luego se tiñen y se observan al microscopio.

Las muestras líquidas se colocan en una cámara de conteo llamadas “cámaras de Petroff-Hausser”.
Estas consisten en una rejilla con cuadrados de área conocida grabados en la superficie de un
portaobjetos de un cristal. Se realiza el conteo de células por cada unidad de área. Luego se puede
calcular el número de células por volumen de la cámara y luego se calcula el número de células
por mililitro de muestra a través de un factor de conversión basado en el volumen de la muestra.

El conteo microscópico es un método fácil y rápido de estimar el número de células microbianas;

sin embargo, tiene limitaciones. Por ejemplo, es difícil ver las células pequeñas al microscopio,
las células con motilidad deben estar muertas o inmovilizadas antes de contarlas y los desechos
presentes en la muestra se pueden confundir fácilmente con células.

Figura 7. Recuento directo en el microscopio usando la cámara de Petroff-Hausser. Normalmente

se usa un microscopio de contraste de fases para contar células y evitar tener que teñirlas.

CONTEO DE CÉLULAS VIABLES

Una célula viable es la que es capaz de dividirse y formar descendencia. En la práctica son las que
más interesan y por eso se ha desarrollado el método “conteo de viables o conteo en placas” porque
son necesarias placas de agar.

En un conteo en placas se supone que cada célula viable crecerá y se dividirá para formar una
colonia, de manera que el número de colonias refleja el número de células.

Existen dos métodos para llevar a cabo un conteo en placa: el método de siembra por extensión en
placa y el método de siembra por vertido en placa.

En el método de extensión en placa, sobre la superficie de una placa de agar se extiende, con ayuda
de un asa de vidrio estéril, un volumen de 0,1 mL o menos de un cultivo diluido adecuadamente.
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En cambio, en el método de vertido en placa se pipetea un volumen conocido (normalmente 0,1-

1,0 mL) de cultivo en una caja Petri estéril; a continuación, se añade medio de agar fundido y se
mezcla con cuidado moviendo suavemente la placa.

Con ambos métodos es importante que el número de colonias no sea demasiado alto ni demasiado
bajo. En las placas demasiado llenas, es posible que las colonias se fusionen lo que provocaría
mediciones erróneas. En cambio, si el número de colonias es bajo la significación estadística del
conteo será baja.

La práctica habitual, que es la más válida a efectos estadísticos, es contar colonias solamente en
placas que tengan entre 30 y 300 colonias.

Para obtener el número de colonias adecuado, casi siempre hay que diluir la muestra que se va a
contar. Como normalmente no se conoce el número aproximado de viables antes de realizar el
conteo, suele ser necesario más de una dilución.

Figura 8. Dos métodos para la determinación de viables.

ANEXOS

REGRESIÓN LINEAL

El análisis de regresión lineal es una técnica estadística utilizada para estudiar la relación entre una
variable dependiente “Y” una variable independiente “X”. Si los datos experimentales tienen una
tendencia lineal, se puede realizar una regresión lineal para buscar un modelo que se ajuste (que
explique en mayor cantidad) el comportamiento de los datos experimentales.

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La ecuación de una línea recta es Y= a + bX, donde “a” es la ordenada (valor en el eje Y) y “b” es
la pendiente de la recta. En Excel “a” y “b” se calculan con las funciones “INTERSECCION.EJE”
y “PENDIENTE”, respectivamente.

La correlación "r" de la recta determinará la calidad del ajuste. Si r es cercano o igual a 1, el ajuste
será bueno y las predicciones realizadas a partir del modelo obtenido serán muy fiables; si r es
cercano o igual a 0, se tratará de un ajuste malo en el que las predicciones que se realicen a partir
del modelo obtenido no serán fiables.

ESPECTROFOTOMETRÍA

La espectrofotometría es el conjunto de técnicas que utilizan la luz para medir la concentración de

sustancias químicas.

Un espectrofotómetro consta básicamente de una fuente de radiación (fuente de luz), un sistema

dispersor (filtro), una celda para la muestra, un fotodetector y un registrador de datos

Absorbancia: es una cantidad matemática que se calcula como el logaritmo de la relación entre
la intensidad de la luz incidente (luz inicial, Io) y la intensidad de la luz transmitida (luz que llega
al detector, I).
𝐼𝑜
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 = 𝑙𝑜𝑔
𝐼

Curva calibración: representación gráfica de una señal que se mide en función de la

concentración del analito (sustancia que se desea analizar).

REFERENCIAS

 Madigan, M.T., Martinko, J.M., Bender, K.S., Buckley, D.H., y Stahl, D.A. (2015). Brock.
Biología de los microorganismos (14a ed.). Madrid, España: Pearson Educación.
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