Reconocimiento de Biomoleculas Celulares

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INTRODUCCIÓN

En las superficies externas o libres de las células epidérmicas de las partes


aéreas se encuentra la cutícula, que es una capa de sustancias
fundamentalmente hidrofóbicas que se secreta por las propias células
epidérmicas de manera asimétrica. “Es una capa protectora frente a la
desecación, a daños mecánicos y a patógenos, regula la tolerancia a la salinidad
y protege frente a bajas temperaturas. También protege frente a los rayos
ultravioleta, pero deja pasar la radiación necesaria para la fotosíntesis” (1).
Los estomas son el principal mecanismo de control de las plantas para reducir la
pérdida de agua y su capacidad de respuesta es muy rápida. Los estomas son
sensibles a los cambios ambientales, lo que estimula la apertura o cierre
estomático. Los estomas son el principal mecanismo de control de las plantas
para reducir la pérdida de agua. “Su función principal es permitir la entrada de
dióxido de carbono para la fotosíntesis, al tiempo que se permite la salida del
agua conforme ésta se evapora de las hojas para enfriarlas” (2). Es de
importancia también mencionar que el mecanismo que aumenta la presión de
turgencia es complejo, e implica en parte la producción de glucosa y otras
sustancias osmóticamente activas por fotosíntesis en las propias células de
protección. Los plastos son orgánulos de doble membrana y un espacio
intermembranoso entre ellas. Interiormente poseen más compartimentos
membranosos como los tilacoides de los cloroplastos o los túbulos de los
cromoplastos. Tienen ADN en su interior y la maquinaria para dividirse, al igual
que ocurre con las mitocondrias, aunque están sometidos al control de los genes
nucleares. Los plastos no se crean de nuevo, sino que provienen de otros que ya
existen (1).
Las clorofilas son una familia de pigmentos que se encuentran en las
cianobacterias y en todos aquellos organismos que contienen plastos en sus
células, lo que incluye a las plantas y a los diversos grupos de protistas que son
llamados algas. “El principal papel de las clorofilas en la fotosíntesis es la
absorción de fotones de luz con la consiguiente excitación de un electrón. Ese
electrón excitado cede su energía, volviendo al estado normal, a algún pigmento
auxiliar (a veces otras clorofilas), donde se repite el fenómeno” (3).
OBJETIVOS
● Observar y reconocer los diferentes plástidos: cloroplastos, cromoplastos y
amiloplastos que integran a las células vegetales.
● Identificar sus características específicas.

METODOLOGIA REALIZADA

Experimento 1. Observación de cloroplastos de espinaca (ver anexo 1)

Fundamento Materiales Procedimiento

Los cloroplastos al ser un organelo - Hoja de - Se toma el corcho en una


importante de la estructura de espinacas medida que encaje en el
cualquier planta, por la función de la - Cuchilla microtomo de mano.
fotosíntesis - Portaobjeto - Se corta longitudinalmente por
, es vital su identificación y - Microscopio la mitad.
reconocimiento, por ende se usa la - Cubreobjeto - Se corta una muestra de
espinaca para la identificación de s espinaca.
estos organelos con la intención de - Corcho - Se pone la muestra de
reconocer y saber cómo se - Micrótomo espinaca entre las dos partes
manifiesta dentro de esta planta y de mano del corcho.
darnos la visualidad de cómo se - Se coloca todo en el
manifiesta en diversas plantas(4). micrótomo.
- Se realizan cortes lo más finos
posibles con la cuchilla.
- Los cortes se dejan en un
pocillo de agua.
- Se elige el más fino y se
coloca en el portaobjetos.
- Se coloca el cubreobjetos y se
observa en el microscopio, con
los objetivos de 10X y 40X..

Experimento 2. Observación de cromoplastos en tomates (ver anexo 2)

Fundamento Materiales Procedimiento

Los cromoplastos son un - Tomate - Tomar un tomate


tipo de plastos que - Cubreobjetos maduro y cortarlo
sintetizan y almacenan - Cuchilla por el plano medio
pigmentos coloreados - Microscopio (corte
(carotenos y las xantofilas), - Portaobjeto transversal).
que carecen de actividad - Seleccionar una
fotosintética. El color del pequeña porción
tomate, cuando es verde al de la pulpa.
principio y rojo cuando - Depositar la
madura, se debe a una muestra en un
sustitución de clorofila en portaobjetos.
los cromoplastos de las - Cubrir la muestra
células por carotenos. con el
Por lo tanto, el uso de esta cubreobjetos y
fruta para la realización del observar la
experimento es necesario disposición
para poder visualizar con general de las
mejor claridad los estructuras con el
cromoplastos (5). objetivo de 10X y
40X .

Experimento 3. Observación de cromoplastos en zanahoria


Observar video en : Anexo 3

Fundamento Materiales Procedimiento

El color de la zanahoria - Zanahoria - Tomar una raíz de


demuestra la presencia - Pincel zanahoria y se corta un
de los cromoplastos, por - Portaobjetos trozo prismático que
lo tal el uso de esta es - Pocillo encaje en el hueco del
necesario para la - Cubreobjetos microtomo.
identificación de este tipo - Microscopio - Colocar el trozo en un
de plastos , para conocer - Navaja micrótomo de mano.
la diversidad de esto , - Realizar cortes finos con
como contraste con el la navaja
tomate (6). - Recoger con el pincel
los cortes y se dejan en
un pocillo con agua.
- Elegir los cortes más
finos y colocarlos en el
portaobjetos.
- Añadir una gota de agua
a cada corte.
- Colocar el cubreobjetos
y se observa al
microscopio con objetivo
de 10X y 40X

Experimento 4. Observación de amiloplastos en patata y plátano }


Observar video en : Anexo 4

Fundamento Materiales Procedimiento

Los amiloplastos son un - Tubérculo de - Tomar un


tipo de leucoplastos que patata tubérculo de
no contienen pigmentos - Microscopio patata y raspar
y sirven para almacenar - Plátano con la lanceta
almidón. Por la cantidad - Solución de Lugol para obtener una
alta de estos en la - Portaobjetos pequeña porción.
patata( papa) y la - Cubreobjetos - Colocar el corte
banana es importante en el portaobjetos.
analizarlo en estos - Añadir una gota
alimentos (7) . de agua y una
gota de Lugol.
- Colocar el
cubreobjetos
- Observar al
microscopio con el
objetivo de 10X y
40X.
- . Para el caso del
plátano colocar
una pequeña
porción en un
portaobjetos,luego
una gota de agua
y una de Lugol.
- Luego se observa
al microscopio con
objetivos de 10X y
40X.

RESULTADOS
Experimento 1
EXPERIMENTO IMAGEN RESULTADOS

Se puede observar a
travez del microscopio y
Observación de sin ningún tipo de tincion
cloroplastos de las celulas con
espinacas cloroplastos de color
verde llamados clorofila,
el pigmento fotosensible
Fig. 1 Observación de que ayuda a la
cloroplastos de espinacas en el fotosíntesis (fig. 1).
microscopio.

Experimento 2

EXPERIMENTO IMAGEN RESULTADOS

Se puede observar en la
muestra que las células
del tomate son grandes
(fig. 2) en comparación
con otras células
vegetales.
A mayor aumento, tiene
Fig. 2 Observación de cromoplastos
el aspecto de una esfera
Observación en tomate en el microscopio.
incolora, que contiene
de
pequeñas agujas rojas
cromoplastos
en tomate del carotenoide licopeno
cristalizado. Estas agujas
son las que confieren al
tomate su color rojo.
También se puede ver el
núcleo redondeado(fig.
3) (8).

Fig. 3 Observación de cromoplastos


en tomate maduro en el microscopio.

Experimento 3:
EXPERIMENTO IMAGEN RESULTADOS

Los cromoplastos se
dividen en cuatro
categorías: globulosos,
Observación de
cromoplastos en fibrilares o tubulosos,
zanahoria cristalosos y
membranosos.
Como resultado se puede
observar pequeñas células
Fig. 4 Observación de unidas con cromoplastos
cromoplastos en el microscopio. (criptalosos) que tienen
caroteno de color naranja
(fig. 4).

Experimento 4:

EXPERIMENTO IMAGEN RESULTADOS

Se puede observar en la
figura 5 los amiloplastos
en la papa sin ninguna
tinción son incoloros y su
forma es ovalada, por lo
general muestran capas
concéntricas.
Ahora al agregar el
Fig.5 Observación al microscopio colorante (Lugol)
Observación de de amiloplastos en la papa sin podemos observar a los
amiloplastos en ninguna tinción - vista a 400x amiloplastos que
patata y plátano pasaron de incoloro a
color violeta, eso se
debe a la presencia de
almidón almacenado en
la papa.

Fig.5 Observación al microscopio


de amiloplastos en la papa con
tinción (Lugol) - vista a 400x

DISCUSIÓN
● La espinaca, es una especie vegetal con orgánulos propios de este reino,
haciendo referencia a los cloroplastos, que como se observa en la imagen
y como lo menciona Cardemil L (9), son estructuras “discoidales” de un
tamaño aproximado a “5 nm”, en contraste a lo mencionado en la guía ( 5 a
10 um), que tienen la función de sintetizar moléculas complejas a simples
con ayuda de la luz como su fuente de energía. Además, la imagen permite
deducir que el vegetal está sometido a exposición de luz, ya que su color
verde característico producto del contenido en clorofila es muy intenso,
hecho contrario es lo que sucede cuando es expuesto a oscuridad o no hay
una fuente de luz cercana, en la que los cloroplastos se desdiferencian a
etioplastos (sin color o pigmento).
● En la observación microscópica de la muestra de tomate, se observan
pequeñas “manchas” coloreadas, las cuales corresponden a los
cromoplastos, quienes cumplen la función de almacenar pigmentos
carotenoides que puede ser de colores amarillo, rojo o anaranjado. En el
caso del tomate, el pigmento presente es el “licopeno o licopina”, el cual le
da el color rojo característico de la especie (10). En la industria, este
pigmento es útil dentro del sector farmacéutico, cosmético y el de nuestro
mayor interés: alimentario, en este último por ejemplo, se realizó un estudio
para examinar su propiedad como colorante y estudiar su posterior uso
como posible aditivo en productos tales como la gelatina y el agar-agar
(11).
● En el caso de la muestra de zanahoria o Daucus carota, al igual que el
anterior experimento, se puede observar la presencia de “manchas
coloreadas”, las cuales son cromoplastos, sin embargo, a diferencia del
tomate, el pigmento que contiene la zanahoria se denomina caroteno, el
cual proporciona el color anaranjado a la especie vegetal. Asimismo, este
pigmento viene siendo estudiado para su uso en la industria alimentaria
como un aditivo o colorante para ciertos alimentos, ya que las variedades
del caroteno pueden presentar colores como el amarillo y el anaranjado.
En el proyecto de grado titulado “Obtención del Beta-Caroteno a partir de la
zanahoria y su aplicación en la industria alimentaria” (11), se menciona que
por cada 100 g de este vegetal fresco, el contenido en β-caroteno es de
8225 μg, además su comercialización se da principalmente para la
coloración de productos como la margarina, helados, pastas y fideos.
● En el último experimento, las estructuras observadas corresponden a los
leucoplastos, los cuales son plastidios que cumplen la función de
almacenar sustancias incoloras, estos se dividen en 3 clases según la
sustancia de reserva que contienen (oleoplastos, proteinoplastos y
amiloplastos), estos últimos almacenan granos de almidón y se presentan
en el caso de la patata y el plátano (10). El color de los amiloplastos que se
observa en la figura 5, se debe a la tinción con lugol que se realiza para su
observación microscópica, este colorante a base de yodo al interaccionar
con el almidón (componentes de los amiloplastos) colorea estas
estructuras de un color violeta oscuro.

CONCLUSIÓN
● En suma, los experimentos observados sirvieron como fuente de
reconocimiento de los diversos plastos u orgánulos celulares como los
cloroplastos, los cromoplastos y por último los leucoplastos.
● De la misma manera, se pudo identificar las características propias de cada
orgánulo, como la presencia de clorofila en los cloroplastos por ello su color
verde característico, acerca de los cromoplastos que según el tipo de
especie vegetal pueden almacenar pigmentos de distinta naturaleza
(licopeno, caroteno) y por ende otorgando un distinto color , y por último en
el caso de los leucoplastos se estudió a la clase amiloplastos, quienes se
encargan de almacenar el almidón.

PREGUNTAS DE INTERÉS
1. ¿Qué función cumplen los cloroplastos en los vegetales inferiores?
La función del cloroplasto es producir alimentos mediante el proceso fotosintético,
que consiste en la combinación de moléculas de agua y anhídrido carbónico en
presencia del pigmento clorofila, utilizando la energía de la luz solar para elaborar
hidratos de carbono (azúcares), con la liberación de oxígeno, agua y energía. Los
azúcares simples (monosacáridos) producidos son transformados en una forma
más compleja, el almidón de asimilación (polisacárido que se acumula en forma
temporaria en el cloroplasto).
2. De ejemplos de vegetales inferiores
Las plantas inferiores se pueden clasificar en dos grupos, las briofitas y las
pteridofitas. En el primero se encuentran los musgos y en el segundo los
equisetos, licopodios y helechos (12).
3. ¿Qué importancia tienen los cromoplastos de la zanahoria y el tomate?
Los cromoplastos son un tipo de plastos, orgánulos propios de la célula vegetal,
que almacenan los pigmentos a los que se deben los colores, anaranjados o
rojos, de flores, raíces o frutos. Por lo tanto es importante para darle el color
característico tanto a la zanahoria como al tomate.(13)
4. ¿Qué diferencias ha observado entre las células de espinaca y tomate?
Se ha observado varias diferencias entre las células de la espinaca y tomate una
de ellas es que la célula del tomate es muy grande a diferencia de otras células
vegetales en este caso el tomate. Otra diferencia es que las células de la
espinaca tiene cloroplastos y la célula del tomate tiene cromoplasto. Otra
disimilitud que podemos encontrar es en la célula de la espinaca que el
cloroplasto tiene un movimiento giratorio llamado ciclosis que se produce por un
estímulo de la luz (14). Mientras que la célula del tomate que contiene
cromoplasto no encontramos tal movimiento.
5. ¿Qué ocurre entre el almidón de los amiloplastos con la solución de
Lugol?
El almidón al ponerse en contacto con el lugol presenta una coloración violeta,
esto se debe a que cuando el lugol reacciona con las dos estructuras que forman
el almidón ,con la amilosa proporciona un color azul y cuando reacciona la
amilopectina con lugol proporciona un color rojo y la combinación de estos dos
colores nos proporciona el color violeta característico del almidón
6. ¿Cómo podríamos observar oleoplastos y proteinoplastos en el
laboratorio?
A través de la observación de un alimento que contenga teóricamente este tipo de
plastidios (16).

ANEXO
Anexo 1: Práctica de laboratorio . Observación de cloroplastos en las células de
espinaca

URL: : https://www.youtube.com/watch?v=A1HD6IktmS4

Anexo 2: Práctica de laboratorio: Observación de cromoplastos en las células del


tomate

URL: https://www.youtube.com/watch?v=pRborh93DO4

Anexo 3: Práctica de laboratorio: Observación de cromoplastos en las células de


la zanahoria
URL: https://www.youtube.com/watch?v=Fw4xpIKnqQ8

Anexo 4: ACTIVIDAD N°4 Observación de Leucoplastos amiloplastos presentes


en papa

URL: https://www.youtube.com/watch?v=OeNz_31R5R0

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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