Practica Inmunohematologia

Universidad Autónoma de Tlaxcala
Facultad Ciencias de la Salud

Licenciatura en Química Clínica
Practica 2
Determinación de grupo sanguíneo sistema ABO directo e inverso
en tubo, determinación de factor Rh, Fenotipo RH y Determinación
de lectina A y H
Equipo: 5
Integrantes:
León Morales Javier
Meléndez Tlilayatzi Jonathan
Portillo Diaz José Arturo
Rosas Hernández Nayeli
Teyssier Palacios Genaro
Zamora Vázquez Eduardo
Fecha de realización: 07- enero -2020
Fecha de entrega: 14- febrero-2020
Primavera 2020
OBJETIVO
Determinar la presencia o ausencia de los antígenos y/o anticuerpos del sistema ABO, en
una muestra de sangre.
Demostrar la presencia o ausencia del antígeno D y con ello, su presencia en supuestos Rh
negativos
Clasificar los grupos sanguíneos “A” o bien “AB” en sus fenotipos mas frecuentes: A 1 y A2,
A1B y A2B.
DIAGRAMA DE FLUJO
Inicio
Toma de muestra en tubo lila
Centrifugar para la obtención de eritrocitos
Lavar 3 veces el concentrado de eritrocitos a utilizar con solución salina
Prepara suspensión de eritrocitos de la muestra al 5%
Rotular 4 tubos con el correspondiente nombre de lectinas (anti-A, anti-B, anti-AB y anti-D)
Colocar una gota de cada lectina en el correspondiente tubo rotuado
Agregar a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos
Mezclar y centrifugar 30 seg a 300 rpm
¿Existe aglutinación?
diluci
Si
No
Fin
Inicio
Diagrama 1. Procedimiento para determinar grupo sanguíneo sistema ABO directo.

Centrifugar para la obtención de suero de la muestra
Realizar lavados de eritrocitos A, B y O
Prepara suspensión de eritrocitos al 5% de eritrocitos A, B y O.
Rotular 3 tubos con la letra A, B y O, y colocar 2 gotas de suero problema a cada tubo
Agregar 1 gota de eritrocitos A al tubo marcado como “A”, una gota de eritrocitos B al
tubo “B” y una gota de eritrocitos O al tubo marcado como “O”.
Mezclar suavemente
Centrifugar 30 seg a 300 rpm
diluci
Si
No
Fin
Diagrama 2. Procedimiento para determinar grupo sanguíneo sistema ABO indirecto.
Inicio

Centrifugar para la obtención de eritrocitos
Lavar 3 veces el concentrado de eritrocitos a utilizar con solución salina
Prepara suspensión de eritrocitos de la muestra al 5%
Rotular 1 tubo para la identificación de Rh
Colocar dos gotas de reactivo anti-D en tubo previamente rotulado.
Añadir dos gotas de suspensión de eritrocitos.
Mezclar y centrifugar 30 seg a 300 rpm
diluci
Si
No
Fin
Diagrama 3. Procedimiento para determinación de factor Rh.
Inicio
Toma de muestra en tubo lila de grupo sanguíneo A

Centrifugar para la obtención de suero de paquete globular
Realizar 3 lavados de paquete globular con solución salina isotónica.
Prepara suspensión de eritrocitos al 5%

Datos del donador
Generalidades
Rotular 2 tubos, uno con A1 y otro con H
Fecha: ________07/02/2020____________
Apellido paterno ___Portillo ____ Apellido materno ___Díaz _________ Nombre ___José Arturo
Colocar a los tubos una gota de reactivo A1 al tubo rotulado con la letra “A” y una gota
de reactivo
Dirección: Av Reforma 17, H al tubo Zacatelco,
sección segunda. rotulado con la letra Código
Tlaxcala “H” postal: 090740
Teléfono: 2467856556
Hijos: si ( ) NoColocar a cada 25

(X) edad: unoaños
de los tubos
sexo: una gota deEstado
masculino eritrocitos
civil: soltero
Ocupación: estudiante
Tipo de donación Mezclar y centrifugar 30 seg a 300 rpm
A) Donación autologa ( ) B) donación voluntaria (X) C) donación designada ( )
Prácticas sexuales de alto riesgo: no_

Enfermedades de trasmisión sexual: Negativo
diluci
Si
No
Fin
Diagrama 4. Procedimiento para determinar lectina A1 y H.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
La determinación de sistema ABO y el Rh por el método directo consiste en agregar un antisuero
que contiene un anticuerpo específico de tipo IgG e IgM (Anti A, Anti B, Anti AB, Anti D) para
detectar el antígeno correcto contenido en el paquete eritrocitario con la finalidad de llevar a cabo
la reacción antígeno-anticuerpo. El resultado obtenido del grupo sanguíneo de nuestro paciente
por el método directo fue “A POSITIVO” debido a que se presentó una aglutinación en los tubos
Anti A, Anti AB y Anti D (nos indica el Rh), es decir, que nuestro paciente es grupo sanguíneo A
porque presenta Anticuerpos de tipo B y antígenos de tipo A .Mientras tanto en el método
indirecto se buscara anticuerpos contenidos en plasma para afirmar si el paciente es de grupo
sanguíneo A ,lo cual fue correcto debido a que se presenta una aglutinación en el tubo con
anticuerpos tipo B.
En la determinación de la variante Du principalmente se utiliza para reafirmar si el Rh es correcto y

verificar si el paciente tiene antígeno D de carácter débil o fuerte a través del reactivo de Coombs.
Por último, nuestro paciente a realizarle la prueba de lectinas para clasificar el subgrupo, nuestro
resultado fue el que el paciente es de subgrupo A2 por que presenta las lectinas A1 Y H.
CUESTIONARIO
1. Investigue el fundamento de la tipificació n directa del grupo de sangre ABO
La tipificació n directa de grupos sanguíneos del sistema ABO se efectú a enfrentando los
gló bulos rojos del paciente con anticuerpos monoclonales Anti-A, Anti-B o Anti-AB. La
aglutinació n o no de los hematíes ensayados frente a cada uno de los reactivos indica
la presencia o ausencia de los correspondientes antígenos.
2. Investigue el fundamento de la prueba inversa de sangre sistema ABO

Identificació n de la presencia o ausencia de los anticuerpos regulares anti-A y anti-B en
plasma, utilizando eritrocitos de fenotipo conocido, donde la parte liquida sin células
se mezcla con la sangre tipo A o de tipo B es decir si la sangre de un paciente se
aglutina cuando se agregan Cel B usted tiene sangre tipo A, y si la sangre aglutina
cuando se agregan Cel A usted tiene tipo de sangre B así sucesivamente.
3. ¿Cuá l es la importancia de ocupar las células O en el grupo inverso?

la importancia que se ocupa las células O es debido a que no tiene antígenos en la membrana
de los eritrocitos y estas a su vez se pueden utilizar como grupo control debido a que
no aglutinan en los sueros.
4. ¿Cuá l es la importancia de trabajar con el antisuero AB?

se caracterizan por su alta potencia, avidez y especificidad debido, aglutinanació n de los
eritrocitos contenidos en los antígenos A y B contenidos en títulos específicos de anti
AB.
5. Resuelva el siguiente caso:
Anti A Anti B Anti AB CEL A1 CEL B ANTI-D CONTROL

Rh
4+ --- 4+ 2+ 4+ 4+ ---
a. Que grupo de sangre es A Rh positivo
b. Explique cuál sería la causa de dicha lectura
Se debe a la aglutinació n 4+ en anti A de la cual los receptores en los eritrocitos del
antígeno que se unen al antisuero provocado una aglutinació n. Por otra parte,
se debe en las células que se buscan anticuerpos del suero, que son dirigidos a
las Cel B, tendiendo como un resultado una aglutinació n en el anti-D dando
como resultado en el control Rh (+) por reacció n Ag-Ac.
6. ¿Si trabaja con un tubo control en donde solo existen eritrocitos problemas y este
resulta positivo que debe hacer?
Realizar la prueba prueba inversa para rectificar
7. ¿Esplique cuá l es la funció n del reactivo de Coombs en esta prá ctica?

Permite la comparació n de antisueros por lotes con el mismo titulo y diferentes grados de
aglutinació n. Por otra parte, la funció n de Coombs es un potencial de aglutinació n que
presenta el antisuero al reaccionar con el antígeno especifico.
8. Si un paciente resulta Du positivo como debe ser considerado en el caso de saber
transfundido
Cuando la prueba para D o la prueba para Du resulte positiva, la sangre será rotulada "Rh
Positivo". Cuando ambas pruebas resulten negativas, la sangre será rotulada "Rh
Negativo".
9. Cuá l es la importancia de determinar subtipos de sangre A

Para conocer el tipo de grupo sanguíneo y el Rh que se analiza en los gló bulos rojos de la
sangre en particular si se ha de recibir una transfusió n de sangre.
Subgrupos A Subgrupos B Subgrupos AB
✔ A1 ✔ B ✔ A1B
✔ A2 ✔ B3 ✔ A2B
✔ A3 ✔ Bel ✔ AmB
✔ Ax ✔ Bw ✔ A1B3
✔ Ay ✔ Bx ✔ A1Bel
✔ Ael ✔ Bm ✔ AelB
✔ Aend ✔ CisA2B3
✔ Aint ✔ CisA2B
✔ Am ✔ CisA1B3
✔ Aw
10. Cuá les son los subgrupos mas comunes del sistema ABO
ANEXOS
CONCLUSIÓN
En esta práctica se cumplieron los objetivos, ya que en la determinación de grupo directo
tanto inverso nos dio como resultado que nuestro donador es grupo sanguíneo A, mientras
que el Rh nos dio positivo. Por otro lado, al realizarse la prueba de las lectinas sólo hubo
aglutinación en la lectina A1 por lo que nuestro donador sería grupo sanguíneo A1 Rh
positivo. De esta forma podemos concluir que, de acuerdo a la literatura, nuestro donador
tiene antígenos A en su sangre y anticuerpos anti—B en su suero o plasma.
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Fecha de realización: 07- enero -2020

Fecha de entrega: 14- febrero-2020

Toma de muestra en tubo lila

Centrifugar para la obtención de eritrocitos

Lavar 3 veces el concentrado de eritrocitos a utilizar con solución salina

Prepara suspensión de eritrocitos de la muestra al 5%

Colocar una gota de cada lectina en el correspondiente tubo rotuado

Agregar a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos

Mezclar y centrifugar 30 seg a 300 rpm

Diagrama 1. Procedimiento para determinar grupo sanguíneo sistema ABO directo.

Realizar lavados de eritrocitos A, B y O

Prepara suspensión de eritrocitos al 5% de eritrocitos A, B y O.

Centrifugar 30 seg a 300 rpm

Diagrama 2. Procedimiento para determinar grupo sanguíneo sistema ABO indirecto.

Toma de muestra en tubo lila

Lavar 3 veces el concentrado de eritrocitos a utilizar con solución salina

Prepara suspensión de eritrocitos de la muestra al 5%

Rotular 1 tubo para la identificación de Rh

Colocar dos gotas de reactivo anti-D en tubo previamente rotulado.

Añadir dos gotas de suspensión de eritrocitos.

Mezclar y centrifugar 30 seg a 300 rpm

Diagrama 3. Procedimiento para determinación de factor Rh.

Toma de muestra en tubo lila de grupo sanguíneo A

Realizar 3 lavados de paquete globular con solución salina isotónica.

Prepara suspensión de eritrocitos al 5%

Hijos: si ( ) NoColocar a cada 25

Tipo de donación Mezclar y centrifugar 30 seg a 300 rpm

A) Donación autologa ( ) B) donación voluntaria (X) C) donación designada ( )

Prácticas sexuales de alto riesgo: no_

Diagrama 4. Procedimiento para determinar lectina A1 y H.

En la determinación de la variante Du principalmente se utiliza para reafirmar si el Rh es correcto y

2. Investigue el fundamento de la prueba inversa de sangre sistema ABO

3. ¿Cuá l es la importancia de ocupar las células O en el grupo inverso?

4. ¿Cuá l es la importancia de trabajar con el antisuero AB?

5. Resuelva el siguiente caso:

Anti A Anti B Anti AB CEL A1 CEL B ANTI-D CONTROL

7. ¿Esplique cuá l es la funció n del reactivo de Coombs en esta prá ctica?

9. Cuá l es la importancia de determinar subtipos de sangre A

Subgrupos A Subgrupos B Subgrupos AB

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