Taller de Análisis Instrumental

TALLER #1
PRESENTADO POR
DIANERIS DE LA HOZ VILLALBA
SEBASTIÁN HERRERA CERA
CARLOS SIMANCA MADRID
PRESENTADO Al DOCENTE
MARIO ROMERO CALONGE
UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO
PROGRAMA DE FARMACIA
CURSO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL
2020-1
Taller de análisis Instrumental
1. ¿Qué es un espectro de absorción?
Es la relación de la absorbancia y la longitud de onda o cualquier función de éstas,

frecuentemente representado en forma gráfica.
El uso de la espectrofotometría de absorción en las regiones visible y ultravioleta,

para los procedimientos de ensayo, se basa en el hecho de que la capacidad de
absorción de una sustancia es, por lo general, una constante independiente de la
intensidad de la radiación incidente, la longitud interna de la celda y la concentración,
con el resultado de que la concentración se puede determinar fotométricamente,
utilizando la relación lineal de la capacidad de absorción y la concentración. Aunque
esta linealidad puede tener desviaciones, causadas por agentes físicos, químicos o
variables instrumentales. Las desviaciones debidas a errores instrumentales podrían
ser origen de efectos del ancho de ranura, la luz externa, por la radiación
policromática o por un cambio en la concentración de moléculas de soluto debido a
la asociación entre las moléculas de soluto o entre soluto y las moléculas de
disolvente, disociación o ionización. [1]
De forma detallada puede definirse como el espectro que presenta una secuencia de
frecuencias, en un intervalo relativamente ancho, correspondientes a los fotones
absorbidos por una sustancia, generalmente representando el coeficiente de
absorción en función de la frecuencia o longitud de onda. [2]
Ejemplo:
Figura 1. Espectros de absorción de cada uno de los cuatro colorantes puros,

adquiridos entre 350 y 750 nm; en concentración igual a 10 mgL-1. Pueden
observarse los picos de absorción para cada colorante (482 nm para amarillo
ocaso, 630 nm para azul brillante, 502 nm para rojo allura y 426 nm para
tartrazina).
Tomado de
https://www.researchgate.net/figure/Figura-1-Espectros-de-absorcion-de-cada
-uno-de-los-cuatro-colorantes-puros-adquiridos_fig1_282977677
2. ¿Por qué aparece de color rojo un compuesto cuyo máximo de absorción visible se
presenta a 480 nm (azul-verde)?
Este fenómeno se puede explicar mediante lo siguiente: En la región visible

apreciamos el color visible de una solución y que corresponde a las longitudes de
onda de luz que transmite, no que absorbe. El color que absorbe es el
complementario del color que transmite.
3. Explique la diferencia entre absorbancia y transmitancia, y como es su
proporcionalidad con la concentración de una disolución.
La absorbancia: Cuando un haz de luz monocromática, es decir de una determinada

longitud de onda, atraviesa una solución que contiene una especie absorbente, la
intensidad (o la potencia) de la radiación disminuye como consecuencia de la
absorción de energía por parte de las especies absorbentes presentes en la
solución. Se define la ABSORBANCIA de la solución a partir de la transmitancia de la
solución como: A = -log T
Se define TRANSMITANCIA de una solución a la fracción de luz que deja pasar dicha
solución: T = II0 I0 y I son las intensidades del haz de luz monocromática antes y
después de la luz, respectivamente. Algunos textos prefieren utilizar los símbolos P0
yP
figura 2. se observa la absorción de una radiación
monocromática; es decir, conformada por una sola longitud de onda, λ. El medio absorbente
está dentro de una celda óptica, cuyo grosor es l, y contiene especies químicas con una
concentración c.
El haz de luz tiene una intensidad inicial y final, designada con los símbolos I0 y I,
respectivamente. Se puede notar que después de interaccionar con el medio absorbente, I
es menor que I0, lo cual demuestra que hubo absorción de radiación. Mientras mayor sean c
y l, más pequeña será I respecto a I0, habrá más absorción y menos transmitancia.
Relación entre absorbancia y transmitancia
La absorbancia viene definida por el término Log(I0/I). Así, la ecuación se expresa como A=
εlc ; Donde ε es el coeficiente de extinción o absortividad molar, la cual es una constante a
una determinada longitud de onda.
Si el grosor del medio absorbente se mantiene constante, al igual que ε, la absorbancia A
dependerá únicamente de la concentración c, de las especies absorbentes. Además, se
trata de una ecuación lineal, y=mx, donde y es A, y x es c.
A medida que aumenta la absorbancia, disminuye la transmitancia; esta es, cuánta radiación
logra ser transmitida después de la absorción. Son por tanto inversos.
Si I0/I indica el grado de absorción, I/I0 es igual a la transmitancia.
Análisis gráfico
Se nota que del lado izquierdo se tiene la recta obtenida al graficar A contra c , y a la derecha
la recta correspondiente a la gráfica de LogT contra c . Una tiene pendiente positiva, y la otra
negativa; mientras mayor sea la absorbancia, menor es la transmitancia.
Gracias a esta linealidad se puede determinar la concentración de las especies químicas
absorbentes (cromóforos) si se conoce cuánta radiación absorben (A), o cuánta radiación
logra transmitirse (LogT). Cuando no se observa dicha linealidad, se dice que está ante una
desviación, positiva o negativa, de la ley de Beer-Lambert.
4. La absorbancia de una disolución 2.31 x 10-5M de un compuesto es 0.822 a la

longitud de onda de 266 nm, en una cubeta de 0.5 cm. Calcular la absortividad molar
a 266 nm.
A
e= b.c e= 0.822
0.5 cm ×2.31x10−5 M
= 71168.83 L /mol.cm
5. Una muestra de 25,0 mL de vertidos que contiene hierro se acidifican con ácido
nítrico, y se trata con un exceso de KSCN para formar un complejo rojo. (El KSCN es
incoloro) La disolución se diluye luego a 100,0 mL, y se pone en una cubeta de paso
óptico variable. Como disolución de comparación, se trata con 10,0 mL de una
muestra de referencia de Fe3+ 6.80 x 10-4 M con HNO 3 y KSCN, y se diluye a 50.0
mL. La referencia se coloca en una cubeta de 1.0 cm de paso óptico. La muestra del
vertido de la misma absorbancia que la referencia cuando el camino óptico de su
cubeta es 2.48 cm. ¿Cuál es la concentración de hierro en la muestra problema?
solución
muestra de referencia C1V1=C2V2
6.80 x 10 mg/L x 10 mL
C1= 6.80 x 10 4 C2 = 50 mL
C2= ? C2= 1.36x10-4 mol/L
V1=10 mL
V2= 50 mL
comparación
Cmp x b = Cmc x b
Cmc x b
Cmp = b
Cmp = 1.36x 10 −4 x 1 = 5.48x10-5 M

2.48 cm
concentración muestra problema
5.48x10 −5 mg/L x 100 mL

C1=? C1 = 25 mL
C2=5.48x10-5 M C1 = 2.192x10-4 M
V1=25 mL
V2= 100 L
6. Un compuesto de masa molecular 292.16 g/mol se diluye en un matraz de aforo de 5

mL. Se toma una alícuota de 1.00 mL, que se pasa a otro matraz de aforo de 10 mL,
y se afora. La absorbancia a 340 nm en una cubeta de 1.00 cm es 0.427, la
absortividad molar de este compuesto a 340 nm es 6130 L/mol.cm.
a. Calcular la concentración del compuesto en la cubeta.
A= Ꜫ*b*C
C= A/Ꜫ*B
L
C= 0.427 / 6130 /mol . cm x 1 cm
L
C= 6.97X10-5 /mol
b. ¿Cuál es la concentración del compuesto en el matraz de 5 mL?
C1.V1 = C2.V2
C1 = C2 .V2 / V1
C1 = 6.97x10-5 L /mol x 0.01 L / 1x10-3 = 6.97x10-4 L /mol

c. ¿Cuántos miligramos de compuesto se usaron para preparar la disolución de
5 mL?
n
M= L
n =mx L
n = 6.97x10-4 L/mol x 0.05 L = 3.48x10-5 mol
g
n= PM
g = n x PM
g = 3.48x10 -5 mol x 292.16 g/ mol
g = 1.02 g
Curva de calibrado!
Para la determinación del principio activo de un fármaco comercial (cafeína) se prepara una
serie de disoluciones patrones de este principio activo y se llevan al espectrofotómetro
UV-Vis, originando las siguientes señales analíticas (absorbancia) a una longitud de onda de
271 nm.
Cafeína 2.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00

(mg/L)
Abs 0.063 0.155 0.289 0.441 0.589 0.735
Para el análisis cualitativo del fármaco comercial, el analista trituró 10 comprimidos y se

disolvió en una mezcla de metanol-agua (50:50) en un matraz de aforo de 1 Lt
completando el volumen del aforo con la mezcla metanol-agua. Luego se tomó una
alícuota de 10,00 mL de esta disolución y se llevó a un matraz de 250 mL y se aforo con
la misma mezcla detallada anteriormente y, de esta disolución resultante se toma la
muestra y fue llevada al espectrofotómetro UV-Vis arrojando una valor medio de
absorbancia de 0,321.
a. Represente la señal del equipo vs la concentración de las disoluciones estandar o

patrón.
b. Ajuste los puntos experimentales a una línea recta aplicando regresión lineal simple.
c. Determine la concentración en mg de cafeína por comprimido.
d. Si en la etiqueta del formato estable que contiene 25 mg de cafeína, determine el error

absoluto con la cual se está rotulando el valor del principio activo.
solución
Curva de calibrado
- Determinación de la concentración en mg de cafeína por comprimido
y = 0.0292x + 0.0042 → A=0.0292 C + 0.0042 Abs muestra p: 0.321
0.321−0.0042
C= 0.0292 L/mg x cm
C = 10.85 mg/L
C1 V 1 = C2 V 2 C1=?
10.85 mg/L x 250 mL

C1 = 10 mL C2= 10.85 mg/L
C 1 = 271.25 mg / L V1= 10 mL
271.25 mg / L x 1 L = 2.71.25 mg V2= 250 mL
271.25 mg / 10 = 27.125 mg por tableta
- determinación del error absoluto con la cual se está rotulando el valor del principio
activo. etiqueta del formato estable que contiene 25 mg de cafeína
error absoluto= 25 mg − 27.125 mg
error absoluto = 2.125

BIBLIOGRAFÍA
1. Lenys Fernández Martínez, Luisa Rojas De Astudillo, Byron Lapo Calderón.

Desarrollos experimentales en Análisis Instrumental. Pag 15.
2. J. C. Sancho-García. Universidad de Alicante. Características generales de la
Espectroscopía (Descifrando las claves de la interacción materia-radiación).
Disponible en:
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/23438/1/QCE_GradoQuimica_Apuntes_Te
ma10.pdf [acceso el 6 de julio del 2020].

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SEBASTIÁN HERRERA CERA

CARLOS SIMANCA MADRID

MARIO ROMERO CALONGE

UNIVERSIDAD DEL ATLÁNTICO

CURSO DE ANÁLISIS INSTRUMENTAL

1. ¿Qué es un espectro de absorción?

Es la relación de la absorbancia y la longitud de onda o cualquier función de éstas,

El uso de la espectrofotometría de absorción en las regiones visible y ultravioleta,

Figura 1. Espectros de absorción de cada uno de los cuatro colorantes puros,

Este fenómeno se puede explicar mediante lo siguiente: En la región visible

La absorbancia: Cuando un haz de luz monocromática, es decir de una determinada

figura 2. se observa la absorción de una radiación

respectivamente. Se puede notar que después de interaccionar con el medio absorbente, I

εlc ; Donde ε es el coeficiente de extinción o absortividad molar, la cual es una constante a

una determinada longitud de onda.

Si el grosor del medio absorbente se mantiene constante, al igual que ε, la absorbancia A

dependerá únicamente de la concentración c, de las especies absorbentes. Además, se

trata de una ecuación lineal, y=mx, donde y es A, y x es c.

logra ser transmitida después de la absorción. Son por tanto inversos.

Si I0/I indica el grado de absorción, I/I0 es igual a la transmitancia.

negativa; mientras mayor sea la absorbancia, menor es la transmitancia.

Gracias a esta linealidad se puede determinar la concentración de las especies químicas

absorbentes (cromóforos) si se conoce cuánta radiación absorben (A), o cuánta radiación

desviación, positiva o negativa, de la ley de Beer-Lambert.

4. La absorbancia de una disolución 2.31 x 10-5M de un compuesto es 0.822 a la

muestra de referencia C1V1=C2V2

C2= ? C2= 1.36x10-4 mol/L

Cmp = 1.36x 10 −4 x 1 = 5.48x10-5 M

concentración muestra problema

5.48x10 −5 mg/L x 100 mL

6. Un compuesto de masa molecular 292.16 g/mol se diluye en un matraz de aforo de 5

a. Calcular la concentración del compuesto en la cubeta.

b. ¿Cuál es la concentración del compuesto en el matraz de 5 mL?

C1 = 6.97x10-5 L /mol x 0.01 L / 1x10-3 = 6.97x10-4 L /mol

n = 6.97x10-4 L/mol x 0.05 L = 3.48x10-5 mol

g = 3.48x10 -5 mol x 292.16 g/ mol

Cafeína 2.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00

Abs 0.063 0.155 0.289 0.441 0.589 0.735

Para el análisis cualitativo del fármaco comercial, el analista trituró 10 comprimidos y se

a. Represente la señal del equipo vs la concentración de las disoluciones estandar o

c. Determine la concentración en mg de cafeína por comprimido.

d. Si en la etiqueta del formato estable que contiene 25 mg de cafeína, determine el error

- Determinación de la concentración en mg de cafeína por comprimido

y = 0.0292x + 0.0042 → A=0.0292 C + 0.0042 Abs muestra p: 0.321

10.85 mg/L x 250 mL

271.25 mg / L x 1 L = 2.71.25 mg V2= 250 mL

271.25 mg / 10 = 27.125 mg por tableta

error absoluto= 25 mg − 27.125 mg

error absoluto = 2.125

1. Lenys Fernández Martínez, Luisa Rojas De Astudillo, Byron Lapo Calderón.

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