UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
MANUAL DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PROGRAMA DE REGENCIA EN FARMACIA

LUZ YINETH ORTIZ ROJAS M. Sc.

PRACTICA No. 1 IMPORTANCIA DEL pH EN ALIMENTOS Y SUSTANCIAS BIOLÓGICAS

OBJETIVOS
- Realizar diferentes métodos para determinación del pH, con el fin de comprender la importancia del mismo
en el funcionamiento normal del organismo humano.
-Comprender los conceptos equilibrio ácido-base, pH y soluciones amortiguadoras.
- Reconocer la importancia del pH en los diferentes metabolismos a nivel humano.
- Identificar mediante pruebas de laboratorio el pH de algunas sustancias de consumo y biológicas.

El principio biológico fundamental indica que la constancia del medio interno del cuerpo debe preservarse
dentro de los límites relativamente estrechos si requiere conservar la salud. Esto se aplica a la distribución
global del agua corporal y también al pH y a la concentración de varios electrolitos (Na+, K+, Ca+2, Mg+2 y
PO4=) en el cuerpo. El pH del líquido extracelular se conserva entre 7,35 y 7,45 en personas sanas. El
sistema amortiguador del bicabonato (HCO3-/H2 CO3) tiene particular importancia a este respecto
manteniendo el pH. Cuando el pH es menor de 7.35, se presenta un estado de acidosis, de manera inversa se
presenta alcalosis. Son numeras las cusas patológicas de acidosis (cetoacidosis diabetica, acidosis láctica, etc.)

Un buen número de intermediarios y productos metabólicos son ácidos orgánicos, considerados ácidos débiles.
Ejemplos: ácido carbónico, ácido láctico, ácido hidroxibutírico, ácido cítrico, etc. Estos compuestos se
disocian liberando H+ al medio. Otros productos metabólicos como el amoniaco (NH3), captan H+ del medio
y se comportan como bases. En último término tenemos compuestos biológicos como los aminoácidos y las
proteínas que se pueden comportar como ácidos o como base liberando o captando H+ del medio, fenómeno
de gran importancia tanto en la estructura y función de las proteínas como en la regulación del pH del medio.

1
 UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
MANUAL DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PROGRAMA DE REGENCIA EN FARMACIA

LUZ YINETH ORTIZ ROJAS M. Sc.

Mientras un ácido fuerte se disocia totalmente en solución acuosa, un ácido débil lo hace solo parcialmente. Si
representamos a un ácido débil por RH y su base conjugada por R-, su disociación será RH ------- H+ + R- ; el
grado en que se disocia el ácido se representa por su constante de disociación o de acidez Ka, siendo Ka =
[H+] [R-]
[RH]
Ejemplo de algunos ácidos orgánicos y sus constantes de acidez
Ácido Ka pKa
Ácido acético 1.8x10-5 4.75
Ácido láctico 1.38x10-4 3.86
Ácido carbónico 7.94x10-7 6.1
Ácido fosfórico 6.3x10-8(pKa2) 7.2
Similar ecuación de equilibrio se puede escribir para el agua H2O ------- H+ + OH siendo
la Ka = [H+] [OH-] , despejando Ka y considerando que [H2O] en agua Pura [H2O] es constante, tenemos
que
Ka [H2O] = Kw = [H+] [OH-] = 10-14
Siendo Kw = producto iónico del agua, de acuerdo al cuál en toda solución acuosa se cumple que [H+] [OH-]
= 10-14
A partir del producto iónico del agua se pueden derivar los conceptos de pH y la escala de pH. Así, tomando
logaritmos negativos de Kw = [H+] [OH-] = 10-14 nos da lo siguiente
-log Kw = -log H + -log OH- = -log 10-14, si -log = p,
Entonces
pKw = pH + pOH.

Tenemos entonces que:

pH = -log [H+] o log 1/ [H+],
pOH = -log [OH-] y
pH + pOH = 14.
Este valor de pKw determina una escala de pH que va de 0 ([H+] =10) a 14 ([H+] =10 -14). Se hace notar que
la escala de pH es una escala de acidez, tal como el pH es una medida de acidez.

CUESTIONARIO
1. Calcular la [H+], la [OH-], el pH y el pOH de una solución de HNO3 0.5M
2. Calcular la [H+] de una muestra de a) plasma pH 7.4 b) orina pH 5.2
3. Calcular el pH de una solución de ácido acético 0.02 M
4. Una solución 0.15 M de ácido ascórbico (vitamina C) tiene un pH = 5.4. Calcular su Ka.
5. Los glóbulos rojos de un individuo en condiciones normales producen aproximadamente 0.35 moles de
ácido láctico al día. Asumiendo un volumen sanguíneo (volemia) de 5 litros y que el ácido láctico se acumula
en la sangre determine el cambio de pH sanguíneo producido en un día.
6. Calcular el pH de 100 ml de ácido clorhídrico 0.1 M al cuál se adicionan 20 ml de NaOH 0.1 M
7. En la titulación de una muestra de 10 ml de jugo gástrico se gastaron 0.7 ml de NaOH 0.1 M. ¿Cuál es el
pH de la muestra de jugo gástrico?
8. Busque información con respecto a lo que se entiende por acidez valorable o titulable y acidez real. En base
a esa información explique que significa que una muestra de orina de pH = 5.5, tenga una acidez valorable de
fosfato igual a 6 mmol de NaOH.

2
 UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
MANUAL DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PROGRAMA DE REGENCIA EN FARMACIA

LUZ YINETH ORTIZ ROJAS M. Sc.

MATERIALES
Guantes de latex
Tapa bocas
Tubos de ensayo

REACTIVOS
Saliva*
Orina (orina que se ha mantenido durante la noche)*
Plasma sanguineo (obtenido de centrifugar la sangre de bovino durante 5min a 1.800rpm)*
Zumo de limón*
alka-seltzer en solución*
Milanta*
Cola negra*
Bicarbonato de sodio*
Leche*
Aguardiente*
Papel tornasol
Indicador Universal

NOTA Los reactivos señalados con * deben ser traídos por los alumnos

PROCEDIMIENTO

1. DETERMINACIÓN DE pH DE SOLUCIONES
Determine el pH de las soluciones de: leche, café, cola negra, zumo de limón, aguardiente, bicarbonato
de sodio, alka-seltzer y milanta. Agregue 2mL en un tubo de ensayo aparte para cada solución. Realizar
la toma de pH con papel tornasol. El papel tornasol es utilizado para determinar por viraje de color el pH
de soluciones.
Una solución ácida vira de azul a rosado y básica vira de rosado a azul. Igualmente, determine con
indicador universal el pH de cada solución comparando la coloración en la tabla estandarizada del
indicador determinando a que pH corresponde.
Utilice el pH metro para la medición de las soluciones. Compare los resultados de pH con los diferentes
métodos de determinación. Calcular la [H+], la [OH-], el pH y el pOH de las soluciones, realice una
tabla.

2. DETERMINACIÓN DE pH DE SOLUCIONES BIOLÓGICAS

Manipula las soluciones biológicas con guantes de latex y tapabocas. Determine el pH de las
soluciones biológicas (saliva, orina, plasma sanguíneo) con el papel tornasol y tornasol universal.
Agregue 2mLde cada solución en tubos de ensayo por separado. Calcular la [H+], la [OH-], el pH y el
pOH de las soluciones, realice una tabla.

El intervalo de pH para sangre arterial se representa así:

3
 UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
MANUAL DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PROGRAMA DE REGENCIA EN FARMACIA

LUZ YINETH ORTIZ ROJAS M. Sc.

ANEXO
El pH metro es un equipo utilizado para la medición precisa de pH de una solución. Existen
diferentes tipos de medidores de pH, sin embargo todos funcionan de manera similar. El
equipo posee los siguientes elementos que debe identificar.