Identificación de Lípidos

UNIVERSIDAD DE SUCRE
FACULTAD DE INGENIERÍA
INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
BIOQUÍMICA
IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS
AUTORA: Laura Vanessa Aguas Palencia.
INTRODUCCIÓN
Los lípidos biológicos integran un grupo de moléculas orgánicas diversas que se

caracterizan por su solubilidad en solventes orgánicos como cloroformo, benceno y otros.
Entre las funciones se pueden mencionar: Reserva energética (fosfolípidos, grasas, ceras),
moléculas que hacen parte de la estructura de las biomembranas (fosfolípidos, glucolípidos,
lípidos éter en Archaea, esfingolípidos y esteroles); finalmente, entre 5% a 10% actúan
como cofactores enzimáticos, transporte de electrones, emulsiones, hormonas, mensajeros
intracelulares y vitaminas liposolubles. Los lípidos por su estructura son moléculas
insolubles en un ambiente acuoso, por lo tanto para su reconocimiento, extracción e
identificación se requiere de métodos y solventes orgánicos que son poco usados para los
estudios de carbohidratos, proteínas y ácidos nucleicos; en consecuencia, entre los
métodos más comunes se encuentran las pruebas de: solubilidad, tinción (Prueba de
Sudán), saponificación, instauración (Prueba de Yodo), para la glicerina (prueba de
acroleína), glicerol, fusión (presencia de fósforo inorgánico), valor de acidez, reacción de
Lieberman; asimismo. Los lípidos se pueden extraer con éter etílico, cloroformo, benceno,
etanol, metanol y se separan mediante cromatografía de capa fina, absorción, gas-líquido,
cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), finalmente la espectrofotometría de masas
revela la estructura molecular del lípido de forma completa.
OBJETIVOS
● Identificar la presencia de lípidos de origen vegetal y animal.

● Cada grupo elabora los objetivos específicos y los presenta al inicio del laboratorio.
MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
POR GRUPO:
- 2 Pipetas graduadas de 2 y 5 ml. - 6 tubos de ensayo por grupo.
- 6 tapones para los tubos de ensayo. - 1 pinza para tubos de ensayo.
- 1 Beaker de 50 o 100 ml. - Gradilla para los tubos de ensayo.
- Aceite vegetal. - Grasa animal usada.
- Leche.
DE USO COMÚN
-4 Baños de agua hirviendo para el experimento. - 4 mecheros.
-Soluciones de sacarosa 1% p/v. - Tinta roja.
-Cloroformo. - Éter.
-Solución alcohólica de Sudán lll.
PROCEDIMIENTO
1. PRUEBA DE SOLUBILIDAD
En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:

- Tubo 1: 2 ml de aceite vegetal y agregue 2 ml de agua.
- Tubo 2: 1 ml de aceite vegetal y agregue 1 ml de éter o cloroformo.
- Tubo 3: 1 ml de grasa animal usada y agregue 1 ml de agua.
- Tubo 4: 1 ml de grasa animal usada o no y agregue 1 ml de éter o cloroformo. Agitar
en forma muy fuerte y dejar reposar. Observe y anote los resultados.
https://www.youtube.com/watch?v=bO1NRNtPUGk
2. ENSAYO DE TINCIÓN

- Tubo 1: 2 ml de aceite vegetal y añada 0.25 ml de solución alcohólica de sudán III
- Tubo 2: 1 ml de grasa animal usada más 0.25 ml de solución alcohólica de sudán III
- Tubo 3: 1 ml de leche y añada 0.25 ml de solución alcohólica de sudán III
- Tubo 4: 1 ml de aceite vegetal agregue 0.25 ml de tinta roja
https://www.youtube.com/watch?v=0bYjxHaG40w
3. SAPONIFICACIÓN

- Tubo 1: 2 de aceite vegetal y añada 2 ml de una solución de NaOH 20% p/v.
- Tubo 2: 2 ml de grasa animal usada más 2 ml de una solución NaOH 20% p/v.
- Tubo 3: 2 ml de leche y añada 2 ml de una solución de NaOH 20% p/v. Agitar
fuertemente y ubicar los tubos en un baño de maría por 20 o 30 minutos. Después
del tiempo anterior (20 a 30 minutos), observe la formación de varias capas.
https://www.youtube.com/watch?v=TdV4OD5eGns
4. ENSAYO DE LIEBERMANN - BURCHARD
- En un beaker se colocan 10 ml de cloroformo y se le agrega 1 ml de yema de huevo.

- A un tubo de ensayo seco se le adiciona 1 ml de la solución anterior; posteriormente,
se adiciona 1 ml de anhídrido acético y enseguida se agrega 0.2 ml (4 gotas) de
H2SO4 con precaución.
- Un color verde azulado indica una prueba positiva para colesterol; mientras, la
formación rápida de un color rojo señala la presencia de ergosterol.
https://www.youtube.com/watch?v=T8TiSjLgO4s
ANÁLISIS DE RESULTADOS.
PREGUNTA
¿Cuál es el fundamento de cada uno de los ensayos, y las reacciones generadas?
PRUEBA DE SOLUBILIDAD.
FUNDAMENTO: Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella
se dividen en pequeñísimas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es
transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotitas de grasa en una
capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua. Por el contrario, las grasas son
solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetona, benceno, etc.
REACCIÓN GENERADA: En el vídeo de la práctica realizada pudimos identificar que en el

tubo 1 con el solvente se observa que no hubo una división de fases mientras que en el
tubo 2 se observan dos fases puesto a que los lípidos no son solubles en una solución
acuosa.
ENSAYO DE TINCIÓN.
FUNDAMENTO: Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante

Sudán III.
REACCIÓN GENERADA: Para el ensayo de tinción se pudo observar que se tiñe el aceite
de un color rojizo, mientras que el agua no. Por consiguiente, el sudán III identifica los
lípidos, en esté caso el aceite.
SAPONIFICACIÓN.
FUNDAMENTO: Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico

descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos. Éstos
se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en
consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En los seres vivos, la
hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicas (lipasas)
que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.
REACCIÓN GENERADA: Para la saponificación de lípidos se observaron 3 fases como se

observa en la imagen. Una fase de hidróxido de sodio, una de aceite y por último el lípido
saponificado.
ENSAYO DE LIEBERMANN - BURCHARD.
FUNDAMENTO: La prueba de Liebermann-Burchard o anhídrido acético se utiliza para la

detección del colesterol. La formación de un color verde o verde-azul después de unos
minutos es positiva.
Lieberman Burchard es un reactivo que se utiliza en una prueba colorimétrica para detectar
el colesterol, que le da un color verde intenso. Este color comienza como un color rosado
violáceo y avanza a un color verde claro y luego a un verde muy oscuro. El color se debe al
grupo hidroxilo (-OH) del colesterol que reacciona con los reactivos y aumenta la
conjugación de la falta de saturación en el anillo fusionado adyacente. Dado que esta
prueba utiliza anhídrido acético y ácido sulfúrico como reactivos, se debe tener precaución
para no recibir quemaduras graves.
REACCIÓN GENERADA: Para el ensayo de Liebermann, el aceite y la leche entera

tuvieron una reacción positiva para la presencia de lípidos en esté. En la imagen se puede
observar con suma claridad la reacción que esté tuvo (coloración verde).

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AUTORA: Laura Vanessa Aguas Palencia.

Los lípidos biológicos integran un grupo de moléculas orgánicas diversas que se

● Identificar la presencia de lípidos de origen vegetal y animal.

MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

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En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:

En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:

4. ENSAYO DE LIEBERMANN - BURCHARD

- En un beaker se colocan 10 ml de cloroformo y se le agrega 1 ml de yema de huevo.

¿Cuál es el fundamento de cada uno de los ensayos, y las reacciones generadas?

REACCIÓN GENERADA: En el vídeo de la práctica realizada pudimos identificar que en el

FUNDAMENTO: Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante

FUNDAMENTO: Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico

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REACCIÓN GENERADA: Para el ensayo de Liebermann, el aceite y la leche entera

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