BACTERIAS

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Capítulo 4. Bacterias.

“Hasta las bacterias funcionan por consenso, o no funcionan”


Eduardo Punset

A partir de la composición de la secuencia genética se han identificado tres líneas


celulares filogenéticas distintas, estas líneas evolutivas se denominan dominios,
conformadas por: Bacteria, Archaea (constituidas por células procariotas) y
Eukarya (constituida por células eucariotas).

Basados en esta clasificación se ha establecido un árbol filogénico de los seres


vivos, el cual se presenta a continuación:

Figura 1. Árbol filogenético de los microorganismos de interés industrial.

Dentro de este árbol filogenético se encuentran las Bacterias, formando parte de


las procariotas. La mayor parte de procariotas mejor conocidos pertenecen a este
dominio. Actualmente se cuenta con una gran variedad de Bacterias, las cuales se
presentan en la figura 32.

1
Figura 2. Árbol filogenético del domino Bacterias.

3.1. Taxonomía.
Taxos en griego significa estructuración u orden y Nomos ley, por lo tanto
Taxonomía es la ciencia de la identificación, clasificación y nomenclatura, la
taxonomía de las bacterias por consecuencia se divide en estos tres aspectos:
identificación, clasificación y nomenclatura.

Identificación.

Se basa en la observación macroscópica y microscópica de las bacterias para


comenzar a identificarlas. Se divide en dos:

 Fenotípica: Propiedades observables, como Gram positiva y Gram


negativa, motilidad, morfología, etc.
 Filogenética: Características genéticas.

2
Tabla 1. Identificación de bacterias.

Identificación

1. Morfología celular. Tamaño celular, forma y distribución.


Macro y microscopica
2. Características de Grampositiva y Gramnegativa, ácido-alcohol

tinción. resistente, entre otras.

Presencia o ausencia de flagelos, observada en


3. Movilidad. microscopio.

4. Presencia o ausencia de Útil para identificar Bacillus, Clostridium, y especies


esporas. relacionadas.

 Rapidez de crecimiento.
 Morfología de las colonias del medio de

5. Características de crecimiento.

crecimiento.  Condiciones atmosféricas óptimas para el


desarrollo.
 Temperatura óptima de crecimiento.
 Morfología de las colonias en medios diferenciales,
selectivos y no selectivos.
6. Características Pruebas bioquímicas primarias y secundarias,

bioquímicas. pruebas enzimáticas

Valoración de anticuerpos y antígenos (producidos por


7. Pruebas serológicas. microorganismos patógenos principalmente).

8. Análisis de los productos


finales metabólicos o de Análisis de peptidoglucanos y membrana externa de la
componentes pared celular, composición lipídica, componentes de

estructurales del transporte, entre otros.


microorganismo.
9. Análisis de genética Métodos moleculares como hibridación de ADN-ADN,
molecular. secuencia de bases de DNA, entre otras.

3
Clasificación.

Conformada por la organización de microorganismos que comparten


características morfológicas, fisiológicas y genéticas similares en grupos
específicos o taxones. El sistema de clasificación es jerárquico.
En la ordenación taxonómica las distintas especies se van agrupando
sucesivamente en una serie de categorías de orden superior género, familia,
orden, clase y división (ó phylum). Esta es la llamada ordenación jerárquica, cada
categoría, en la serie descendente, agrupa un número cada vez mayor de
unidades taxonómicas, basándose en un número cada vez menor de propiedades
compartidas.[CITATION Kon06 \l 2058 ].

Tabla 2. Ejemplo de la clasificación taxonómica del Phylum Proteobacteria.

Clasificación Otros

Dominio Bacteria

Phylum Proteobactería

 α-proteobacteria
Clase γ-proteobacteria  β-proteobacteria
 δ-proteobacteria
 ε-proteobacteria
 Chromatiales
 Thiotrichales
Orden Enterobacteriales  Legionellales
 Pseudomonadales
 Vibrionales
 Pasteurellales
Familia Enterobacteriaceae

 Enterobacter
 Escherichia
Género Shigella  Klebsiella
 Proteus
 Salmonella
 Yersinia
Especie  S. boydii
 S. dysenteriae
 S. flexneri
 S. sonnel

4
[CITATION Kon06 \l 2058 ].

Tabla 3. Clasificación de las bacterias.

Ejemplo (Reino:
Clasificación
Procaryotae)

Phylum: compuesto por clases similares. Protebacteria

Clase: compuesto por órdenes similares. γ-Proteobactería

Orden: compuesto por familias similares. Suelen


Enterobacteriales
encontrarse subórdenes.

Familia: constituida por un grupo de géneros estrechamente


Enterobacteriaceae
relacionados. Suelen encontrarse subfamilias.

Género: este nivel comprende especies diferentes que


comparten varias características importantes pero difieren
Shigella
lo suficiente como para seguir manteniendo su estatus
como especies individuales.

Especie: grupo taxonómico más elemental, es una


colección de cepas bacterianas que comparten muchas
características fisiológicas y genéticas, que difieren
notablemente de otras especies. En ocasiones se
S. dysenteríae
reconocen subgrupos taxonómicos dentro de una especie
(subespecie). Debajo de estos niveles se pueden encontrar
bacterias que comparten características específicas
menores, designándose como biotipo, serotipo o genotipo.
[CITATION For09 \l 2058 ].

En taxonomía bacteriana, cuando se da nombre a una nueva especie, una cepa


concreta se designa como cepa tipo. Las cepas tipo se conservan en colecciones

5
de cultivos y es importante con fines de nomenclatura, ya que el nombre
específico va ligado a ella.

A continuación en la siguiente tabla se muestra un ejemplo de la Jerarquía


taxonómica de la bacteria púrpura del azufre, Allochromatium warmingii.

Tabla 4. Jerarquía taxonómica de la bacteria púrpura del azufre, Allochromatium


warmingii.

División Método de
Nombre Propiedades
Taxonómica confirmación

Microscopia,
análisis de
Células bacterianas, secuencia del RNA
secuencias de RNA ribosómico 16S,
Dominio Bacteria
ribosómico típicas de presencia de
bacterias. biomarcadores
únicos como
péptidoglicano.

Secuencias de RNA Análisis de la


Phylum Proteobacteria ribosómico típicas de secuencia del RNA
Proteobacterias. ribosómico 16S.

Bacterias Gram-negativas,
Gammaproteob secuencias de RNA Tinción Gram,
Clase
a-cteria ribosómico típicas de microscopía.
Gammaproteobacterías.

Bacterías fotótrofas Pigmentos


Orden Chromatiales
púrpura. característicos.

Familia Chromatiaceae Bacterias púrpura del Capacidad de


azufre. oxidar H2 S y
almacenar S0
dentro de la célula;

6
observación de
cultivos al
microscopio para
determinar
presencia de S0.

Bacterias púrpura del


Género Allochromatium azufre con forma de Microscopia.
bastón.

Medida de las
células en el
Células de 3.5 a 4 m x 5 a microscopio usando
11 m; almacenan azufre un micrómetro;
Especie Warmingii
principalmente en los determinando la
polos de las células posición de los
glóbulos de S0
dentro de la célula.
[ CITATION MarcadorDePosición2 \l 2058 ].

Tipos de clasificaciones.

Clasificaciones artificiales.
Las primeras clasificaciones bacterianas se basan en la ordenación con fines
prácticos de las diferentes especies creadas por la agrupación de cepas
caracterizadas por su igualdad o semejanza de algunas características básicas:

 Propiedades visibles: forma, color, tamaño, tinción, movilidad, presencia de


cápsula y morfología de las colonias.
 Características metabólicas.
 Formación de productos químicos característicos.
 Nutrición.
 Presencia de macromoléculas artificiales (antígenos).

7
 Relaciones ecológicas: producción de enfermedades, parasitismo, entre
otras.

Clasificación numérica.
Consiste en determinar un gran número de características independientes, 100 a
120, de todas las cepas en estudio. Se realiza una comparación con un coeficiente
de semejanza del 100% para dos cepas idénticas.

Clasificaciones con base genética.


La primera utilizada tiene en cuenta la proporción de bases nitrogenadas del ADN
cromosómico bacteriano: G-C y A-T. Si dos especies bacterianas difieren en su
contenido G+C en más de un 10 % no pueden considerarse afines.

Más adecuado para precisar pequeñas diferencias de unas especies bacterianas a


otras, es el método de hibridación molecular. Este método permite establecer el
grado de homología en la secuencia de bases del ADN y los datos obtenidos se
emplearon en la clasificación adoptada en el Manual de Bergey.

El Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology es un tratado que se ocupa de la


clasificación, taxonomía e identificación de las bacterias. Se divide en cuatro
volúmenes y las bacterias se distribuyen en secciones. Las distintas secciones se
han constituido sobre la base de caracteres descriptivos morfológicos y
metabólicos, por ejemplo: espiroquetas, cocos y bacilos aerobios gramnegativos,
cocos grampositivos etc. [CITATION Kon06 \l 2058 ].

Nomenclatura.

La nomenclatura de las bacterias está establecida en el Código Internacional de


Nomenclatura Bacteriana, el cuál ha sido revisado secuencialmente por el
International Committee of Systematic Bacteriollogy. Las prioridades y reglas para
la denominación de una bacteria se establecieron el 1° de enero del 1980 y se

8
publicaron en el International Journal of Systematic Bacteriology (IJSB); esta lista
ha sido renovada constantemente.

Tabla 5. Reglas de nomenclatura de las bacterias.

Nomenclatura Ejemplo

1. Existe sólo un nombre correcto para un microorganismo; de Alloiococcus otitis ha


existir más de uno, sólo se aceptará el más antiguo. Nombres sido cambiado por
propuestos y aceptados pueden ser cambiados. Alloiococcus otitidis.

2. Nombres que induzcan a error o confusión deben rechazarse.

3. Todos los nombres están en latín (incluyendo terminaciones).

4. La primera letra de la primer palabra (género) siempre debe ir


Escherichia
en mayúscula.

5. La segunda palabra (especie) se escribe con minúsculas. Escherichia coli

Escherichia coli
6. El nombre del género y la especie deben ir subrayados, en
Escherichia coli
cursiva o en itálica.
Escherichia coli

7. El nombre correcto de una especie o las designaciones taxonómicas superiores se


determinan por la publicación válida, la legitimidad del nombre con respecto a las reglas de
nomenclatura y la prioridad de publicación.

8. Los nombres del género y la especie que aparecen en el Campylobacter pylori se


International Journal of Systematic Bacteriology (IJSB) pueden convirtió en Helicobacter
ser cambiados de acuerdo con las siguientes reglas: pylori

 Cuando se transfiere una especie de un género a otro, el


nombre de la especie se retiene.

9
 Si se encuentra que una cepa de referencia en realidad
pertenece a otro género, el género de la cepa de
referencia no es considerado válido.
 Si un microorganismo se incluye en dos o más géneros o
tiene dos o más designaciones de especie, el nombre de
género/especie que contiene la cepa de referencia
correcta se considera como válido.
9. Después de haber escrito el nombre completo del
microorganismo, al escribirlo por segunda ocasión (dentro de un Escherichia coli
mismo texto) se puede abreviar.
Abreviación:
 Se coloca la primera letra del género seguida por un
E. coli
punto.
 Posteriormente se coloca la especie (nombre completo).
[CITATION Kon06 \l 2058 ].

4.2. Morfología.
Microbiológicamente el término morfología hace referencia a la forma de las
células. Las células bacterianas son de diversas formas y tamaños. Existen
algunas que pueden medir hasta 100 µm. Epulopiscium fishelsonii, la bacteria más
grande encontrada hasta la actualidad, vive en el intestino de un pez y mide 600
µm por 80 µm.[CITATION Mon08 \l 2058 ].

Tabla 6. División de las características morfológicas de las bacterias.

Características morfológicas
Mayores

 El micrómetro (µm) es la unidad de medida que se


utiliza para determinar el tamaño bacteriano, equivale a
1/1000 mm o 1/2500 pulgadas.
Tamaño  La mayoría de las bacterias está en un rango de 0.5 a 2
µm de ancho u de 1 a 10 µm de largo.

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 Depende de la pared celular que les proporciona rigidez
y elasticidad.
Forma
 Cada forma es propia de cada especie, por lo que
encontramos cocos, bacilos y espirales.

 Es un mecanismo por el cual ellas pueden adoptar

Ordenamiento ciertas formas cuando están en grupos.


 Este ordenamiento puede depender de factores
genéticos.
Estructuras  Pared celular, membrana externa, membrana
citoplasmática, periplasma, citoplasma, los ribosomas y
Menores

obligadas
el nucleoide.
Estructuras  Cápsula, limo, glicocáliz, gránulos de almacenamiento,
facultativas flagelos, fimbrias, pili y esporo.
Nota: Las características morfológicas menores son estructuras finas. [ CITATION Mon08 \l 2058 ].

La disposición de los cocos en pares, cadenas o racimos define los grupos de


microorganismos llamados diplococos, estreptococos y estafilococos. Los
microorganismos en forma de bastones pueden ser regulares en morfología,
pueden ser algo más cortos (cocobacilares) o pueden aparecer en forma de clava
o pesa (corineformes). Las células en forma de coma por lo general definen una
característica básica de ciertas especies.[CITATION Var15 \l 2058 ].

Tabla 7. Morfología de las bacterias.

Formas Características Ordenamientos Ejemplos

Cocos Células bacterianas Diplococos


cuya forma habitual es
esférica; eventualmente Diplococcus
aparecen formas pneumoniae
elipsoidales, entre otras.

Estreptococos Streptococcus
pyogenes

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Tétradas
Micrococcus
tetragenus

Estafilococos

Staphylococcus
aureus

Sarcinas

Sarcina ventriculi

Bacilos Los bacilos son formas Diplobasilos Corynebacterium


bacterianas alargadas
que pueden ser cortas,
rectas o cilíndricas.

Estreptobasilos

Ovillos o rosetas

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Vibrios o vibriones

Vibrio cholerae

Espirales o
helicoidales Células bacterianas que
no presentan Espirilos
ordenamiento específico
porque generalmente se Spirillum volutans
encuentran aisladas con
una o varias curvaturas.
Espiroquetas

Treponema
pallidum

[ CITATION Mon08 \l 2058 ].

Además de su forma, tamaño y disposición celular, las bacterias pueden


diferenciarse según sus características de tinción con la Tinción de Gram. Usando
esta técnica, la mayoría de las bacterias pueden clasificarse en grampositivas o
gramnegativas de acuerdo con las estructuras de la pared celular. [CITATION Var15 \l
2058 ]. En esta tinción se forma dentro de las células un complejo insoluble cristal
violeta–yodo que en el caso de las grampositivas puede extraerse con alcohol y en
las gramnegativas esto no es posible. Las bacterias grampositivas tienen paredes
celulares muy gruesas compuestas por varias capas de peptidoglicano. [CITATION
MarcadorDePosición2 \l 2058 ].

13
Figura 3. Bacteria Grampositiva y Gramnegatia.

[CITATION MarcadorDePosición2 \l 2058 ].

Figura 4. Esquema general de una bacteria Grampositiva y una bacteria Gramnegativa.

[CITATION Kon06 \l 2058 ].

14
Figura 5. Diferencias entre la membrana externa de células Grampositivas y Gramnegativas.

(a) Gram-positiva b) Gram-negativa)

[CITATION MarcadorDePosición2 \l 2058 ].

1.3. Fisiología y metabolismo.


Las bacterias son seres vivos y están compuestas al igual que las células
eucariotas por proteínas, polisacáridos, lípidos, ácidos nucleicos, entre otros.

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Estas moléculas a su vez forman parte de estructuras celulares más complejas,
como la pared celular y la membrana citoplasmática.

Una de las características de los seres vivos es la capacidad para sintetizar sus
propios constituyentes a partir de nutrientes que toman del medio externo.

El conocimiento de la fisiología y del metabolismo bacteriano tiene algunas


aplicaciones prácticas: [CITATION Var15 \l 2058 ].

 Permite conocer el modo de vida y el hábitat de diferentes especies


bacterianas.
 Permite formular medios de cultivo para el aislamiento e identificación de
los patógenos participantes.
 Permite conocer y entender el modo de acción de algunos antimicrobianos
que bloquean una vía metabólica o la síntesis de alguna macromolécula
esencial para la bacteria.

El término metabolismo se refiere al conjunto de reacciones químicas que tienen


lugar en la célula, sus funciones específicas son:

 Obtener energía química del entorno y almacenarla, para posteriormente


utilizarla en diferentes funciones celulares.
 Convertir los nutrientes exógenos en unidades precursoras de los
componentes macromoleculares de la célula bacteriana.
 Formar y degradar moléculas necesarias para funciones específicas como
movilidad y captación de nutrientes.

Durante el metabolismo se lleva a cabo una secuencia de reacciones catalizadas


enzimáticamente:

 Anabolismo: Proceso mediante el cual la célula sintetiza sus propios


componentes. También es denominado biosíntesis ya que como resultado
se obtiene un nuevo material celular. Este proceso requiere energía.
 Catabolismo: Conjunto de reacciones degradativas, donde se obtiene
energía a partir de los nutrientes. Resultan de la liberación de energía
química contenida en los nutrientes. La energía liberada como resultado de

16
las reacciones óxido – reducción debe ser almacenada y trasportada
(ATP). [CITATION MarcadorDePosición2 \l 2058 ].

Las vías metabólicas de las bacterias intervienen en la obtención de nutrientes del


amiente, la producción de metabolitos precursores y la producción de energía.

 Obtención de nutrientes.

Uno de los objetivos principales de las bacterias es transportar sustancias desde


el ambiente hasta su interior celular. Para esto, los nutrientes deben atravesar la
envoltura de la célula bacteriana, una estructura compleja que protege a las
células de agresiones ambientales, mantiene el equilibrio intracelular y transporta
las sustancias hacia el interior o exterior de la célula. Nutrientes como el agua,
CO2 y O2 entran a la celular por difusión simple a través de la envoltura, sin
embargo otras sustancias necesarias requieren energía y selectividad por parte de
la envoltura de la célula.

Se tiene dos tipos de transportes, el primero de ellos es el transporte activo, el


cual figura entre los métodos más comunes utilizados para la captación de
nutrientes como: algunos azúcares, aminoácidos, ácidos orgánicos e iones
inorgánicos. El mecanismo que se encarga de transportar los nutrientes es
impulsado por una bomba dependiente de energía, involucra moléculas
transportadoras presentes en la membrana de la envoltura celular y se combina
con los nutrientes, los trasporta a través de la membrana y los libera dentro de la
célula.

La translocación de grupo es el segundo mecanismo de trasporte, el cual requiere


energía y a diferencia del transporte activo los nutrientes sufren una modificación
química. Los nutrientes trasportados por este mecanismo son: la mayoría de los
azúcares, purinas, pirimidas y ácidos grasos.

 Producción de metabolitos precursores.

Una vez dentro de la célula muchos nutrientes actúan como materias primas a
partir de las cuales se producen metabolitos precursores para los procesos
biocinéticas que llevan a cabo las bacterias. Estos metabolitos se producen por

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tres vías metabólicas centrales: Vía de Embden-Myerhof-Parnas (EMP), Ciclo del
ácido tricarboxílico (TCA) y Vía de la pentosa fosfato. La vía de Entner-Douderoff
desempeña funciones clave en el re-direccionamiento y el re-abastecimineto de
los precursores a medida que son utilizados en procesos interiores.

La eficiencia de la producción de una célula bacteriana como resultado de estas


vías metabólicas productoras de precursores puede variar notablemente
dependiendo de las condiciones de crecimiento y la disponibilidad de nutrientes.
Esta es una consideración bastante importante, ya que la identificación de
bacterias de interés industrial a menudo depende de gran parte de métodos que
miden la presencia de productos y subproductos de estas vías metabólicas.

Tabla 8. Metabolitos precursores.

Metabolitos precursores

Glucosa-6-fosfato 3-fosfoglicerato Α-cetoglucorato

Fructuosa-6-fosfato Fosfoenolpiruvato Succinil CoA

Pentosa-5-fosfato Piruvato Oxaloacetato

Eritrosa-4-fosfato Acetil CoA

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Esquema 1. Aspectos generales del metabolismo bacteriano, que incluye los procesos de nutrición,
biosíntesis, polimerización y ensamblaje.

Nutrientes:

 Gases: CO2, O2, NH3  SO42-


 Compuestos orgánicos, entre  K+
ellos aminoácidos.  Mg2+
 H2O  Ca2+
 NO3-  Na+
 PO43-  Fe3+
 H2S  Compuestos férricos orgánicos.

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Esquema 2. Diagrama general de la visión global de las vías metabólicas centrales
(EMP), Ciclo de los ácidos tricarboxílicos (TCA) y Ciclo de las pentosas fosfato

 Producción de energía

La producción de energía se lleva a cabo mediante la degradación de sustratos


químicos (energía química) a través de procesos de degradación (catabolismo)
junto con reacciones de oxidación-reducción. En este proceso la molécula fuente
de energía (sustrato) se oxida al donar electrones a otras moléculas que se
reducen al aceptarlos. La trasferencia de electrones esta medida por moléculas
trasportadoras como Nicotinamida Adenina Dinucleótido (NAD+) y Nicotinamida
Adenina Dinucleótido Fosfato (NADP+). La energía que se libera en estas
reacciones de redox es trasferida a los compuestos que contienen fosfato, donde
se forman enlaces fosfato de alta energía. La molécula más común de este tipo es
la Trifosfato de Adenina (ATP); finalmente la energía contenida dentro de este
compuesto (ATP) se libera por hidrólisis en condiciones controladas. La liberación
de esta energía química y las actividades enzimáticas catalizan de manera
específica cada reacción bioquímica dentro de la célula y regulan casi todas las
reacciones celulares.

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En células bacterianas los dos mecanismos generales para la producción de ATP
son la fosforilación a nivel de sustrato y el trasporte de electrones, denominado
fosforilación oxidativa. En la fosforilación a nivel de sustrato los enlaces fosfato
de alta energía producidos por las vías metabólicas centrales son donados al
Difosfato de Adenosina (ADP) para formar ATP. Por otra parte el piruvato, un
intermediario fundamental en las vías metabólicas centrales sirve como sustrato
inicial para otras vías que generan ATP por fosforilación a nivel de sustrato. Estas
otras vías metabólicas constituyen el metabolismo fermentativo, que no requiere
oxígeno y genera diversos productos terminales como alcohol, ácidos, CO 2 e
Hidrógeno. Las vías metabólicas fermentativas y los productos terminales
generados dependen del tipo de bacteria.

La fosforilación oxidativa comprende un sistema de transporte de electrones que


dirige una serie de trasferencias de electrones desde moléculas trasportadoras
reducidas como las de NADH2 y NADPH2 producidas en las vías metabólicas
centrales, hasta un aceptor terminal de electrones. La energía producida por la
serie de reacciones de oxidación-reducción se utiliza para generar ATP a partir de
ADP. Cuando la fosforilación oxidativa utiliza oxígeno como aceptor terminal de
electrones, el proceso se conoce como respiración aerobia. La respiración
aerobia abarca los procesos que utilizan aceptores terminales de electrones
distintos al oxígeno.

El conocimiento de las rutas metabólicas que utilizan las bacterias parar generar
ATP es importante para el diseño de los protocolos de laboratorio para el cultivo y
la identificación de estos microorganismos. [CITATION For09 \l 2058 ].

Fermentación.

En la fermentación los electrones pasan del dador, un intermediario formado


durante la degradación de la molécula de substrato, hacia un aceptor constituido
por algún orto intermediario orgánico, también generado en el catabolismo. Por lo
tanto este proceso no requiere el aporte de un aceptor final de electrones.

Existen diferentes tipos de fermentación, en todas se llega a una oxidación parcial


de los átomos de carbono del substrato inicial y se libera solo una parte de la

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energía potencial contenida. Por lo tanto el rendimiento energético de este
proceso es menor que el de la respiración.

 La vía de Entner-Doudoroff.

A continuación en el siguiente esquema se presenta la vía glucolítica o de EMP.

22
Esquema 3. Esquema de la vía glucolítica o de EMP.

[CITATION Var15 \l 2058 ]

Tipos de fermentaciones:

 Fermentación heteroláctica

En este tipo de fermentaciones sólo la mitad de la glucosa se convierte en ácido


láctico, el resto es una mezcla de CO 2, ácido fórmico, ácido acético, etc. Se da en
bacterias del género Leuconostoc y Lactobacillus.

 Fermentación del ácido propiónico

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Característica en bacterias anaerobias como: Propionibacterium (bacilo Gram+ no
esporulado). En este tipo de fermentaciones se genera una molécula más de ATP.

 Fermentación ácido-mixta

Característica en las enterobacterias. Ej. Shigella, Salmonella y E. coli fermentan


las hexosas a través del piruvato a ácido láctico, acético succícino y fórmico.

 Fermentación del butanodiol

Bacterias como Enterobacter, Serratia y Bacillus producen 2-3 butanodiol al


fermentar la glucosa.

 Fermentación del ácido butírico

Característica en bacterias del género Clostridium (bacilo Gram+, anaerobio,


esporulado).

Respiración.

 Respiración aerobia

Proceso por el cual un substrato se oxida completamente a CO 2 y H2O, donde el


aceptor final de electrones es el oxígeno molecular. Los primeros pasos de la
respiración de la glucosa son idénticos a la glucólisis (esquema 17) con la
diferencia de que en la respiración se oxida completamente el piruvato a CO 2 a
través del ciclo de Krebs. [CITATION Var15 \l 2058 ].

24
Esquema 4. Ciclo de Krebs.

[ CITATION Var15 \l 2058 ].

25
 Respiración anaerobia

En las bacterias aerobias obligadas el O 2 es el aceptor final de e-. Sin embargo,


las bacterias anaerobias facultativas pueden utilizar, en ausencia de O 2, una
variedad de compuestos inorgánicos como aceptores finales de e- como: nitrato,
fumarato, sulfato, etc.

Cada reacción metabólica está regulada por otras reacciones y por la


concentración de nutrientes en el medio:

 Regulación de actividades enzimáticas a través de enzimas alostérica y


cooperatividad.
 Regulación de la síntesis de enzimas por inducción enzimática y represión
por productos finales. [CITATION Var15 \l 2058 ].

4.4. Métodos de aislamiento.


El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza, en la mayoría
de los casos mediante la producción de colonias aisladas en cultivos sólidos. El
crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran número de ellas a
partir de una única célula inicial de forma que, tras un periodo de incubación en las
condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia observable a simple
vista y formada por individuos iguales.[CITATION Mic15 \l 2058 ].

Los procedimientos de cultivo y aislamiento deben ser considerados de acuerdo


con la naturaleza de cada muestra, de los microorganismos que se investigan y
del patógeno que se puede encontrar.

Las bacterias son favorecidas por medios de reacción neutra (pH de 6.5 - 7.5) y
debido a su rápida multiplicación se ha encontrado que mutan más rápido que los
hongos.[CITATION RFr80 \l 2058 ].

Algunas de las técnicas de aislamiento son:

 Siembra por estriado en placa de petri.


 Vaciado en placa.

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 Cultivo por dilución y agitación.
 Aislamiento con carilla angular de vidrio.
 Aislamiento con aplicadores de algodón.
 Siembra por picadura.

4.5. Importancia industrial.


Gracias al ser humano, su evolución y sobre todo a partir del trabajo de
investigación de muchas personas, se descubrió la importancia de las bacterias en
los procesos vitales y en otros muchos que se empiezan a conocer. El hombre ha
podido entender algunos de los mecanismos por los cuales las bacterias aparecen
y se reproducen y con esta información ha logrado llevarlas al laboratorio y
utilizarlas en la producción de alimentos, fármacos y bebidas, entre otros [CITATION
RFr80 \l 2058 ].

Actualmente muchas empresas dependen en parte o enteramente de la acción


bacteriana. Gran cantidad de sustancias químicas importantes como alcohol
etílico, ácido acético, alcohol butílico y acetonas son producidas por bacterias
específicas. De igual manera se emplean bacterias para el curado de tabaco el
curtido de cueros, caucho, algodón, etc.

Las bacterias junto con levaduras y hongos se han utilizado durante miles de años
para la preparación de alimentos fermentados, como quesos, mantequilla, salsas,
vinagre, vinos y yogur.

Tabla 9. Productos industriales a bases de bacterias.

Industria Productos

Alimenticia Lacteos, vinos, salsas, etc.

Farmacéutica Antibióticos, vacunas, hormonas, etc.

Bacterias con capacidad de degradar


Biotecnología
petróleo.

Agrícola Insecticidas, etc.

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Existe un tipo de bacterias que se emplean para el control microbiológico de
algunas plagas de insectos. [CITATION RFr80 \l 2058 ].

Bacterias en la Industria Farmacéutica.

Un tipo de bacterias utilizadas en la Industria farmacéutica son las bacterias


lácticas las cuales pueden convertirse en “factorías celulares” para la producción
de moléculas de interés médico y biotecnológico. La aplicación actual de estas
bacterias, y tal vez la más prometedora, es como vehículos vivos para la entrega
de antígenos, proteínas terapéuticas y ácido desoxirribonucleico (ADN).
Actualmente estas bacterias son portadores genéticos en el campo de vacunación
por ADN.

Otra aportación de las bacterias lácticas son los probióticos, los cuales son
microorganismos vivos que al ingerirse en cantidades adecuadas, confieren
efectos benéficos al huésped. Los efectos benéficos de los probióticos se
relacionan con la modulación de la microbiota intestinal, mediante la regulación del
equilibrio existente entre bacterias benéficas y dañinas. Los probióticos son
también capaces de actuar directamente sobre el sistema inmunitario aumentando
tanto la respuesta inespecífica (fagocitosis, actividad de células natural killer)
como la específica (producción de anticuerpos, citocinas y proliferación de
linfocitos).La bacteria láctica (BL) mejor caracterizada es Lactoccocus lactis esto
debido a que es un microorganismos de fácil manipulación, fue la primer BL cuyo
genoma se secuencio y tiene un gran número de herramientas genéticas
desarrolladas. [CITATION Agr12 \l 2058 ].

28
Esquema 5. Aplicaciones de las bacterias ácido lácticas e Ingeniería metabólica.

[ CITATION MarcadorDePosición2 \l 2058 ]

Tabla 10. Ventajas y desventajas del uso de bacterias ácido lácticas para la bio-
producción de productos químicos y metabolitos.

Bacterias ácido lácticas


Compuesto
Ventajas Desventajas

Compuestos químicos

Ácido láctico Organismos fermentativos, sin Menos tolerantes a pH

2,3-Butanodiol patogenicidad, pH y temperaturas bajos en comparación con


tolerantes, alta tolerancia a ácidos grasos, las levaduras.
1,3-Propanodiol
producciones elevadas con buenos
Altos costos de
Etanol rendimientos, fermentación de diversos
crecimiento y producción
hidratos de carbono.
por su alta demanda
Butanol

29
La síntesis de Butanol se lleva a cabo con nutricional.
poca cantidad de microorganismos.
Se puede tener inhibición
Ingredientes alimenticios

Alanina Altos rendimientos (mayores al 90%).

Diacetil Altos costos de


Fermentación de diversos hidratos de
producción debido a su
carbono.
Acetaldehído gran demanda nutricional.
Producción in situ durante la fermentación.

Nutracéuticos

Polioles bajos Producción in situ durante la fermentación.


en calorías
Actividades de prebióticos o probióticos.
Vitaminas
Producción endógena para algunos
Metabolitos en etapas
compuestos.
tempranas.
Metabolitos
Fermentación de diversos hidratos de
vegetales
carbono.

Polisacáridos

Exopolisacárido No patógenos.
s
Producción in situ durante la fermentación.
No descritas hasta el
Actividades de prebióticos o probióticos. momento.
Ácido
hialurónico Producción y distribución de antígenos en
cápsulas.
[CITATION Gas13 \l 2058 ].

30
Bacterias en la Industria Alimentaria.

Bacterias Lácticas.
Las bacterias lácticas (BL) no solo son importantes en la Industria Farmacéutica
ya que al ser excelentes fermentadoras las convierte en herramientas propicias
para la Industria Alimenticia (quesos, leches fermentadas, panes, vinos, yogurt,
carnes, etc.) adicional contribuyen en la formación del sabor, conservación y
producción de aditivos o suplementos. Las BL se asocian a la preservación de
alimentos fermentados desde el 8000 a.C.

Podemos diferenciar dos tipos de bacterias lácticas de acuerdo a los productos


formados durante la fermentación de azúcares:[CITATION Agr12 \l 2058 ].

a. Homofertentativas: producen mayormente ácido láctico y en menor


proporción compuestos volátiles.
b. Heterofermentativas: producen ácido láctico y cantidades
significativas de acetato, etanol y CO2 a partir de glucosa.

31
Esquema 6. Rutas metabólicas vía Embden-Meyerhof (a) bacterias homofermentativas y (b)
bacterias heterofermentativas.

[CITATION Agr12 \l 2058 ].

Producción de sabores.
Desde la antigüedad los sabores emergen como productos secundarios de las
fermentaciones de los alimentos. Actualmente la adición de cultivos iniciadores
como: Lactobacilli, Pediococci, Streptococci, Propionibacteria, Saccharomyces y
Aspergillus proporcionan sabores no tóxicos para el ser humano al consumirse
con moderación.

Las raíces de la biotecnología se remontan en los experimentos que se realizaron


al agregar fracciones de grasa de leche a una cepa pura como Penicillum
roqueforti. Productos ricos en ácidos grasos volátiles, alcanonas, butandiona,
aldehídos y alcanoles imparten sabores fuertes a los quesos.

Las enzimas microbianas son las responsables de la producción de sabores, la


adición de precursores mejora los rendimientos de estos procesos. [CITATION Ber \l
2058 ].

Tabla 11. Bacterias en la producción de sabores.

Bacteria Compuesto (sabor)

Amycolatopsis y Pseudomonas Vainillina (vainilla)

Brevibacterium y Micrococcaceae Tioésteres (queso)

Lactobacillus lactis, Streptococcus


diacetylactis, Leuconostoc citrovorum y Butandione (mantequilla)
Enterobacter.

Acetobacter aceti, Gluconobacter oxydans,


Ácidos grasos de cadena corta
Propionibacterium, Clostridium y
(queso)
Lactococcus.

Streptomyces citreus Geosima (remolacha)

Bacillus, Pseudomanas y Streptomyces Pirazinas (panadería, notas

32
tostadas)

2-acetil-1-pirrolina (pan y
Bacillus cereus
palomitas de maíz)

Alcohol de cinamilo (canela)


Escherichia coli (recombinante)
Nootkatona (pomelo)

Ácido perílico (ruta de los


Pseudomnas y Bacillus
sabores de perilla)

Pseudomanas putida (recombinte) Alcohol perílico (cítricos).

Pseudomanas rhodesiae Isonovalal (cítricos).


[CITATION Ber \l 2058 ].

Bacterias y la producción de pigmentos.

Algunas bacterias son capaces de producir pigmentos que pueden emplearse en


la Industria Alimentaria, Industria Textil, Industria Farmacéutica, etc, siempre y
cuando no representen algún daño para el ser humano.

Ciertas bacterias producen pigmentos amarillos como: zeaxantina y cantaxantica,


los cuales se utilizan como aditivos en las aves de corral, reforzando el color de su
piel y de la yema de los huevos. Flavobacterium sp. cultivada en un medio con
metales de transición y aminoácidos que contienen azufre llega a producir hasta
190 mg de zeaxantina. Clostridium acetobutylicum llega a producir hasta 100 mg
de riboflavina, otro pigmento.

Las bacterias no son los mejores micoorganismos productores de pigmentos ya


que los hongos y las levaduras presentan mejores rendimientos y gran variedad
de pigmentos [CITATION Ber \l 2058 ].

Tabla 12. Bacterias en la producción de pigmentos.

Pigmento Color Bacterias Aplicación

Astaxantina Rosa-rojo Agrobacterium aurantiacum Proyecto de

Paracoccus carotinifaciens investigación

33
Halobacterium salinarum

Alimento para
Escherichia coli
animales.

Rojo Proyecto de
Canthaxantina Bradyrhizobium sp.
oscuro investigación

Producción
Ficocianina Athrospira platensis industrial y
alimentos.
Azul
Producción
Indigo Escherichia coli industria e Industria
Textil

Amarillo Clostridium acetobutylicum Se encuentra en


Riboflavina
Rojo Streptomyces echinoruber desarrollo

Alimento para
Flavobacterium sp.
animales.
Zeaxantina Amarillo
Paracoccus Proyecto de
zeaxanthinifaciens investigación
[CITATION Ber \l 2058 ].

Bacterias en el tratamiento de aguas residuales.

En el mundo actual estamos viviendo un cambio acelerado en la conservación del


medio ambiente, la contaminación del agua, suelo y aire, buscamos un mejor
futuro para las próximas generaciones con un ecosistema estable, tratando de
concientizarnos para evitar contaminar nuestro planeta mediante pruebas
nucleares, productos altamente tóxicos, etc.

El suelo nos provee de alimentos, el agua es vital para la vida de los seres vivos y
sin el aire no podríamos vivir. Una alternativa ante la problemática del medio
ambiente es la implementación de productos biodegradables a base de bacterias y
enzimas.

34
El tratamiento de aguas residuales es un sistema utilizado para remover
contaminantes del agua. Eventualmente el agua contaminada se descontamina a
través de medios naturales, los cuales requieres mucho tiempo, en una planta de
tratamiento se acelera este proceso. De esta manera se logra reutilizar el agua en
actividades como agricultura, industrias y recreación.

En el siguiente esquema se muestra el tratamiento que sufre el agua en una


Planta de Tratamiento de Aguas Residuales.

35
Tratamiento físico.
Remoción de sólidos (basura y arena).
PRETRATAMI-
ENTO

Físico o fisicoquímico.
Tanques de sedimentación.
TRATAMIENTO Se remueven contaminantes y se retiran como lodos (reutilizados como
PRIMARIO abono).

Tramiento biológico.
Se emplean bacterias para consumir los contaminantes que no se han
TRATAMIENTO
removido.
SECUNDARIO La aireación contribuye al crecimiento bacteriano.

Filtración a través de materiales granulares como arena fina y carbón.


Desinfección (etapa final) con productos químicos como Cloro.
TRATAMIENTO Desinfección con luz ultravioleta (la luz solar desinfecta el agua).
AVANZADO

Esquema 7. Proceso de tratamiento de aguas residuales.

36
Figura 6. Planta de tratamiento de aguas residuales.

 Lodos activados: mezclan aguas residuales con microorganismos. Mediante


aireación las bacterias pueden absorber oxígeno y comienzan a comer los
contaminantes. Después de algunas horas las aguas residuales fluyen hacia
un tanque de sedimentación donde los sólidos se sedimentan.
 Filtros percoladores: distribuyen las aguas residuales sobre un lecho de
material parecido a la roca, las airean y producen una capa de crecimiento
biológico de bacterias, protozoos y hongos que comen a los contaminantes,
eliminando la materia orgánica.
 Lagunas de estabilización: los residuos se descomponen gracias a la acción de
diversos tipos de bacterias aeróbicas, que se comen a los contaminantes y
consumen oxígeno mediante el proceso, y anaeróbicas que comen a los
contaminantes y liberan nitrógeno y fósforo que alimentan a las algas, las
cuales a su vez reemplazan el oxígeno consumido por las bacterias aeróbicas.
[CITATION CON16 \l 2058 ].

Por otra parte los metales pesados liberados en el medio ambiente representan
una amenaza significativa para los ecosistemas naturales y la salud pública debido
a su toxicidad y la su persistencia en la cadena alimenticia. La utilización de

37
biosorción para el tratamiento de metales pesados es de especial importancia,
existen microrganismos capaces de absorber metales pesados del suelo y de
aguas residuales.

El método de biosorción presenta ciertas ventajas:

 Costos bajos.
 Utiliza lodos biológicos
 Recuperación del metal.

Se pretende la utilización de bio-filtros para la eliminación de metales pesados en


aguas residuales. [CITATION Muñ12 \l 2058 ].

En los sistemas de tratamiento convencionales de aguas residuales las bacterias,


virus y protozoos son removidos en un 90%, actualmente se han diseñado lagunas
de estabilización multicelular que permiten la retención de 20 a 30 días los cuales
logran eliminar casi el 100% de los huevos de helmintos.

El proceso más eficaz para la eliminación de bacterias y virus en los estanques de


estabilización es un aumento de tiempo de retención, pH y temperatura. En climas
cálidos se alcanzan temperaturas de hasta 40°C con pH superiores a 9 debido a la
actividad fotosintética de los microorganismos.

Existen microorganismos competidores los cuales ayudan a mejorar el tratamiento


de aguas residuales, estos microorganismos dañan directa o indirectamente a los
patógenos presentes en dichas aguas. Adicional a este tratamiento la exposición a
los rayos ultravioleta (del sol o de fuente artificial) juega un papel importante en la
eliminación de patógenos.

A temperaturas mayores a 20°C, un tiempo de retención de 20 a 30 días y pH


elevados la concentración de coliformes fecales se reduce hasta un 99.99%.
[CITATION Shu \l 2058 ].

A continuación se presenta el marco legislativo en tema de Tratamiento de Aguas


Residuales en México.

38
Descarga de Aguas Residuales.

 NOM-001-SEMARNA-1996 Límites máximos permisibles  de


contaminantes en las descargas de aguas residuales en aguas y
bienes nacionales.
 NOM-002-SEMARNAT-1996 Límites máximos permisibles de
contaminantes en las descargas de aguas residuales a los sistemas
de alcantarillado urbano o municipal. 
 NOM-003-SEMARNAT-1997 Límites máximos permisibles de
contaminantes para las aguas residuales tratadas que se reúsen en
servicios al público.

Lodos y Biosílidos.

 NOM-004-SEMARNAT-2002-Proteccion ambiental- Lodos y


biosólidos-  especificaciones y límites máximos permisibles de
contaminantes para su aprovechamiento y disposición final.

Normas mexicanas técnicas.

 NMX-AA-004-SCFI-2013  Análisis de agua- Medición de sólidos


sedimentables en aguas naturales, residuales y residuales tratadas-
Método de prueba.
 NMX-AA-008-SCFI-2011Análisis de agua- Determinación del pH-
Método de prueba.
 NMX-AA-028-SCFI-2001 Análisis de agua-Determinación de la
demanda bioquímica de oxígeno en aguas naturales, residuales  y
residuales tratadas-Método de prueba.
 NMX-AA-029-SCFI-2001Análisis de aguas-Determinación de fósforo
total en aguas naturales, residuales y residuales tratadas.- Método
de prueba.
 NMX-AA-034-SCFI-2001  Análisis de agua- Determinación de sólidos
y sales disueltas en aguas naturales, residuales y residuales
tratadas.- Método de prueba.

39
 NMX-AA-036-SCFI-2001 Análisis de agua- Determinación de acidez
y alcalinidad en aguas naturales, residuales y residuales tratadas.-
Método de prueba.
 NMX-AA-072-SCFI-2001 Análisis de agua- Determinación de dureza
total en aguas naturales, residuales y residuales tratadas.- Método
de prueba.
 NMX-AA-093-SCFI-2000 Análisis de agua-Determinación de la
conductividad electrolítica.- Método de prueba.

Biogas.

Para reducir los desechos orgánicos, las emisiones de gases de efecto


invernadero y para producir metano como fuente de energía alternativa, la
digestión anaerobia de residuos orgánicos generados de forma continua es una
excelente elección y una tecnología respetuosa con el medio ambiente.

Cultivos energéticos, residuos de cosecha, estiércol, residuos domésticos,


residuos de la industria de madera, residuos de industria cervecera y lodos de
plantas de tratamiento de aguas residuales son ejemplos de sustratos
lignocelulósicos.

Lignocelulosa es el recurso renovable más abundante en el mundo, ampliamente


disponible y barato, pero su hidrólisis suele ser incompleta debido a su estructura
compleja. Existen bacterias que participan en la hidrólisis de la lignocelulosa
completándola y produciendo biogas. [CITATION Cat15 \l 2058 ].

Tabla 13. Bacterias que participan en la hidrólisis de la lignocelulosa.

Bacteria Características

Bacteria anaerobia, Gram (-) que sintetiza muchas enzimas


Pseudobutyrivibri
hidrolíticas, velulolíticas, xilanolíticas, amilolíticas y
o xylanivorans
pectinolíticas.

40
Ruminococcus Bacteria anaerobia, Gram (+) que sintetiza enzimas con
flavefaciens actividades celulolíticas y hemicelulolíticas.

Fibrobacter Bacteria anaerobia, Gram (-) que sintetiza enzimas


succinogenes celulolíticas más eficientes que otras bacterias.

Clostridium Bacteria anaerobia, Gram (-) que sintetiza enzimas


cellulovorans celulolíticas y xilanolíticas.

Biorremediación.

Gracias a las actividades antropogénicas como el uso de pesticidas y herbicidas el


suelo se ve notablemente perjudicado.

Los microorganismso son capaces de adaptarse y crecer en diversas condiciones


extremas de pH, temperatura y disponibilidad de nutrientes, así como
concentraciones altas de metales. Por tal motivo los sitios contaminados son las
principales fuentes de microorganismos resistentes a estas condiciones extremas,
es importante explorar microorganismos autóctonos de tales nichos contaminados
para desarrollar una biorremediación.

Debido a que los microorganismos han desarrollado estrategias de supervivencia


en los hábitats contaminados con metales pesados, por ejemplo, sus diferentes
mecanismos de desintoxicación microbiana como la biosorción pueden aplicar
para el diseño de procesos de biorremediación que resulten económicos.

Existen microorganismos que contienen en su pared celular componentes con


excelentes propiedades de unión con metales. [CITATION Muñ12 \l 2058 ].

Los hidrocarburos de petróleo son contaminantes persistentes en el medio


ambiente, liberaciones incontroladas de estos compuestos afecta el suelo, agua y
aires. La contaminación del suelo con hidrocarburos es causada por la fuga de
depósitos subterráneos, refinerías de petróleo, instalaciones de almacenamiento y
vertido accidental de unidades de producción y tuberías de trasporte. La
presencia de estos contaminantes afecta física, fisiológica y bioquímicamente las
propiedades del suelo. Las plantas son susceptibles a la exposición de aceite

41
debido a la naturaleza fitotóxico de los hidrocarburos, y la inmovilización de los
nutrientes en el suelo. Propiedades mutagénicas inherentes de algunos
hidrocarburos y sus bajas tasas de degradación requieren especial atención para
remediar estos contaminante. La biorremediación se ha sugerido como un método
de mitigación de contaminantes en el suelo. En este método la capacidad de los
agentes biológicos se explota para degradar hidrocarburos.

Existen algunos factores naturales que afectan el proceso de biorremediación:

 Humedad del suelo.


 Población microbiana.
 Disponibilidad de nutrientes.
 Tipo de suelo.
 Salinidad.
 Transporte de oxígeno.

El contenido de humedad debe estar en un rango óptimo, bajos niveles


disminuyen la actividad microbiana, mientras que el exceso de agua puede crear
resistencia a la trasferencia de oxígeno y producir un lixiviado no deseado. La
actividad microbiana óptima se consigue por el contenido máximo de agua que no
restrinja la difusión de oxígeno.

Nitrógeno, fósforo, azufre y algunos otros nutrientes son necesarios para el


crecimiento y la actividad microbiana. Como regla general la proporción de
carbono: nitrógeno: fósforo debe ser de 100:10:1 para asegurar un medio de
equilibrado para el crecimiento microbiano.

Otro factor importante para el proceso de biorremediación es el tipo y la textura del


suelo. Suelos de grano fino como la arcilla tienen una baja permeabilidad al
oxígeno y transporte de nutrientes en el suelo. Controlar la humedad en suelos de
grano fino resulta difícil debido a que tiene pequeños poros y área superficial
elevada.

Experimentos actuales han revelado que la biorremediación es un método factible


para la remediación de suelos contaminados por hidorcarburos, preferentemente

42
suelos arenosos, removiendo más del 70% de estos contaminantes en 270 días
aproximadamente. La aplicación de tensiactivos es una manera posible para
desorber hidrocarburos a partir de arcilla y mejorar su biodisponibilidad. Materiales
orgánicos de desecho es otro método posible para mejorar la biorremediación de
suelos arcillosos. [CITATION Hag16 \l 2058 ].

Bacterias y detergentes biológicos.

Los detergentes son sustancias químicas que tienen la capacidad de deshacer o


separar la suciedad que está en la superficie de un objeto sin corroerlo ni dañarlo.
Los detergentes se dividen en dos partes:

 Lipofílica: tiene afinidad con grasas y aceites.


 Hidrofílica: tiene afinidad con el agua, dando a los detergentes la
característica de mantener sus capacidades limpiadoras en agua.

Los detergentes modifican la tensión superficial del agua para llevar a cabo el
proceso limpiador.

Los biodetergentes son detergentes adicionados de enzimas para aumentar su


efectividad. Este tipo de detergentes atacan proteínas, grasas y carbohidratos
transformando las estructuras moleculares complejas en otras más simples
aumentando la eficacia de los tensoactivos. Estas enzimas hidrolizan las
impurezas y rompen los enlaces que las unen.

Propiedades:

 Enzimas que catalizan la hidrólisis de enlaces de péptidos en


sustratos de proteínas.
 Aceleran la degradación de proteínas y producen pequeños péptidos
o aminoácidos individuales los cuales pueden ser fácilmente
solubilizados y removidos de los tejidos.
 Son utilizados a temperaturas superiores a 60°C y pH altos.
 Alrededor del 80% de los biodetergentes contienen entre 0.015 y
0.025% de enzimas del tipo proteasa.

43
Tabla 14. Enzimas involucradas en la producción de biodetergentes.

Enzima Características

Proteasas bacterianas extracelulares, pertenecen al grupo de


proteasas de serina que atacan en enlace (éster) péptido. Pueden
Subtilisina
ser obtenidas a partir de cierto tipo de bacterias del suelo, como
s
Bacillus amyloliquefaciens de la que son secretadas en grandes
cantidades.

Enzimas bacterias hidrolasas que tienen la función de catalizar la


reacción de hidrólisis de los enlaces 1-4 del componente alpha-
amilosa.

Amilasas Se emplean como detergentes para disolver almidones de


determinados procesos industriales. El empleo de alpha-amilasas
en los detergentes facilita la eliminación de suciedad proveniente
de pasta, chocolate y alimentos con azúcar.

No actúan sobre las manchas, sino sobre los las fibras celulósicas
(algodón) eliminando las microfibrillas de las fibras evitando las
Celulasas
bolitas en la ropa, restauran colores, suavizan los tejidos, pulen la
superficie y elimina las partículas de suciedad.

Enzimas hidrolasas, se usan en el organismos para disgregar las


grasas de los alimentos, actúan sobre los enlaces esteres

Lipasas carboxílicos.

En los detergentes hidrolizan los triglicéridos dando mono y


diglicéridos, ácidos grasos libres y glicerina.
[CITATION Ric13 \l 2058 ].

44
Biominería.

La industria minera ocupa el 14.4% de la economía mundial y abarca el 1% de la


superficie de la Tierra. El consumo de los productos de la industria minera va en
aumento en países de desarrollo medio y alto, llegando a países de desarrollo
bajo, cuyo apetito por minerales refleja su rápido desarrollo.

La industria minera se enfrenta a una seria de desafíos sostenibles que incluyen


cuestiones económicas, ambientales y sociales. Las malas prácticas de gestión de
residuos pueden dar lugar a graves y largas consecuencias ambientales y
sociales.

Una manera de aliviar las consecuencias negativas de la minería es la aplicación


de procesos microbianos, denominando genéricamente “biominería”. La
biominería no requiere grandes cantidades de dinero, gran consumo de energía,
no produce dióxido de azufre ni emite gases contaminantes.

Existen dos procesos que conforman la biominería:

 Biolixiviación: recuperación de metales mediante la oxidación del


metal y/o compuestos sulfúricos ya sea por oxidación química o
enzimática causada por el catabolismo de los micoorganismos.
 Bio-oxidación: recuperación principalmente de oro.

Estos procesos están regidos por un consorcio de bacterias Gram (-)


(Acidithiobacillus, Leptospirillum, Sulfobacillum, Acidimicrobium) y el género
arquea (Ferroplasma, Sulfolobulus y Metallosphaers).

Existen muchos factores a considerar para la elección de microorganismos


(poblaciones mixtas o cultivos aislados), como: el tipo de mineral, la temperatura,
el tipo de reactor y las aplicaciones industriales.

El proceso de biolixiviación se emplea en la extracción de cobre:

Paso 1: Pulverización de minerales de cobre.

Paso 2: Adición de microorganismos. El consorcio microbiano oxida Fe(II) a Fe


(III).

45
Paso 3: El Fe(III) generado se emplea para oxidar Cu(I) en la forma soluble
Cu(II).

Acidithiobacillus ferrooxidans es una de las mejores bacterias empleadas en la


biolixiviación. Se trata de una bacteria Gram (-), altamente acidófila y
quimiolitotrofa. Crece en pH extremo (2 o menos), utilizando la oxidación de iones
ferrosos (Fe(II)) por el oxígeno O2 produciendo iones férricos Fe(III) y agua (H2O).

A. ferrooxidans aún se encuentra en investigación para demostrar su eficiente


implementación en procesos de biolixiviación. [CITATION Cam16 \l 2058 ].

Biopolimeros.

La acumulación de plásticos en el medio ambiente se ha convertido en un


problema universal importante debido a su baja biodegradación. Las soluciones
que se dan a la gestión de los residuos plásticos incluyen métodos de
incineración, que genera residuos tóxicos, reciclaje y disposición de desechos.
Estos procesos son muy largos y costosos. Los biopolímeros son importantes
alternativas ante la problemática de los residuos plásticos derivados del petróleo;
los biopolímeros se obtiene a partir de procesos respetuosos con el medio
ambiente, presentan una alta biodegradabilidad y biocompatibilidad.

Actualmente existen biopolímeros como polilactida, polisacáridos, poliésteres


alifáticos y polohidroxialcanoatos que presentan cierto interés. Los poliésteres de
hidroxialcanoatos (PHA) se producen a partir de fuentes renovables mediante el
uso de micoorganismos; estos biopolímeros son 100% biodegradables y
prometedores como biopolímeros, sin embargo el costo de producción limita su
aplicación a escala industrial. [CITATION Anj16 \l 2058 ].

Tabla 15. Ejemplos de PHA´s.

Biopolímero Historia Características Aplicaciones

Biopol Fabricado por Termoplástico con Botellas, máquinas


primera vez en punto de fusión de de afeitar
1970 en 140 a 180°C. desdechables (vasos

46
Inglaterra,
actualmente lo Puede ser moldeado
y cubiertos), forro de
produce y formado por
pañales, entre otros.
Metabolix en inyección a vacío.
Estados Unidos.

Adición reciente Consiste en 3- Espumas, fibras o


materiales no
Nodax al grupo de los hidroxibutirato.
tejidos, películas,
PHA´s
látex, entre otros.

Materiales de
embalaje, películas
de bolsas,
contenedores de
cosméticos, botellas,
vasos, cartones de
Mitsubishi Biopolímero a partir leche, látex, papel,
desarrolló un de metanol. desechable,
Biogreen producto a partir productos de higiene
de metanol y lo Consiste en poli 3- fenemina, bolígrafos,
nombra Biogreen. hidroxibutirato. peines, balas,
pelotas de golf,
aditivos alimentarios
(sustituyendo crema
de leche), placas
óseas, injertos
vasculares etc.
[CITATION Anj16 \l 2058 ].

47
Esquema 8. Ruta metabólica para la biosíntesis de PHA´s.

[CITATION Kit14 \l 2058 ].

48
Esquema 9. Ruta metabólica para la biosíntesis de mcl-PHA

[CITATION Kit14 \l 2058 ].

Tabla 16. Bacterias productoras de PHA´s.

Con limitación de nutrientes Sin limitación de nutrientes

Bacterias Gram (+) y Gram (-), Alcaligenes eutrophus, Azotobacter


Pseudomonas, Aeromonas, Bacillus, vinelandii UWD, Alcaligenes latus y
Alcaligenes, Enterobacter, Escherichia coli (recombinante).
Rhodobacter, Cupriavidus netacor.
[CITATION Kit14 \l 2058 ].

Los PHA’s se pueden dividir en dos grupos considerando el número de átomos de


carbono que constituyen su cadena.

49
Tabla 17. Microorganismos productores de biopolímeros.

Biopolímeros Microorganismos que los producen

PHA´s con C3 – C5 Alcaligenes latus y Cúpricoavidus necátor.

PHA´s con C6 – C14 Aeromonas caviae y Pseudomonas purida.


[CITATION Kit14 \l 2058 ].

A pesar de que existe una gran cantidad de microorganismos capaces de producir


PHA´s son pocos los que consiguen la producción de estos biopolímeros a escala
industrial como: Cúpricoavidus necátor, Methylobacterium organophillum,
Pseudomonas olovorans, Alcaligenes latus, Protomonas extorquens, Azotobacter
vinelandii, Paracoccus denitrificans y E. coli (recombinante). [CITATION Kit14 \l 2058 ].

50
Esquema 10. Producción de diversos monómeros (diaminas, ácidos dicarboxílicos, hidroxi ácidos,
dioles y productos aromáticos) a partir de microorganismos.

[CITATION Chu15 \l 2058 ].

51
52

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