Reporte 1. Columna de Winogradsky

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CAMPECHE

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS

LICENCIATURA EN INGENIERO BIOQUÍMICO AMBIENTAL

MATERIA: MICROBIOLOGÍA BASICA.

SEMESTRE Y GRUPO

2 “A”

TAREA: REPORTE 1. COLUMNA DE WINOGRADSKY

DOCENTES: BENJAMIN OTTO ORTEGA MORALES.

RODRIGO E. TUN CHE.

ALUMNO: ABEL JONATHAN RIVERA MORALES.

FECHA: 12 DE MAYO DEL 2021.


Objetivos generales.
 Analizar las diferentes observaciones e investigaciones generales de la
forma de vida de la comunidad ambiental que permiten identificar diferentes
microorganismos por medio de técnicas como es la columna de
winogradsky por medio de cultivo de muestra ambiental de comunidades
microbianas extremófilas.
 Comparar los diferentes microorganismos que crecen a lo largo de la
columna en diferente tiempo y sus diferentes características fisiológicas.
 Explicar las causas que originan la sucesión de microorganismos
observada.
 Diferenciar los grupos microbianos presentes en un microambiente.

Introducción.
En nuestro diario vivir los seres humanos necesitamos alimentos para conseguir
nutrientes y hacer todas las funciones bioquímicas. Para procesar y sintetizar
estos nutrientes todas las formas de vida en la tierra dependen de reacciones
bioquímicas y una de ellas es la de oxidación y reducción que operan mediante
transferencia de electrones. En los seres vivos, estas reacciones aparecieron
originalmente en microorganismos procariotas y forman en la actualidad una forma
de vida dentro de la biosfera, este procesos en el cual hacen todos los seres vivos
en la tierra se necesita que las sustancias oxidantes y las reductoras estén de
algún modo conectadas, permitiendo la continuidad del metabolismo en cada
organismos y microorganismo. Los organismos intercambian gases y sustancias
con el medio ambiente, y la evolución de estas reacciones ha modelado en parte
la química de la superficie terrestre.

Las bacterias al igual que los humanos necesitan nutrientes para vivir. Sin
embargo, las bacterias a la hora de comer pueden ser estrictas para escoger sus
nutrientes. Por ejemplo, algunas bacterias solo crecerán cuando haya mucho
oxígeno presente; mientras otras bacterias niegan el oxígeno y esas bacterias
prefieren nutrirse con azufre (presente en los huevos) u otras sustancias. En la
columna de Winogradsky, los nutrientes se distribuyen de una manera que las
diferentes bacterias de la tierra se separen (esta dispersión de los nutrientes es
una gradiente). Las bacterias que les gusta el oxígeno se moverán hacia la parte
superior, donde el oxígeno está más disponible. Mientras las bacterias que en sus
procesos de nutrición desechan el oxígeno, y utilizan el azufre se moverán al
fondo del envase. La columna de Winogradsky es un dispositivo que consiste en
un cilindro de vidrio lleno de agua con diferentes tipos de sustratos. Incubando
este recipiente bajo la luz solar, se desarrolla con el tiempo una amplia variedad
de microorganismos que aparecen en forma estratificada en función del gradiente
de gases y de sustancias que ellos mismos crean, formando microambientes
oxidantes y reductores a lo largo de la columna. En las zonas inferiores se forman
bandas de microorganismos anaerobios (ambiente reductor) y en las superiores
crecen microorganismos aerobios (ambiente oxidante). Este complejo sistema
microbiano y su posible relación con la geología pueden visualizarse mediante el
uso de la columna de winogradsky. Se trata de un ejemplo de ecosistema de
laboratorio que modeliza el estudio de los microorganismos acuáticos y los
sedimentos que los albergan. El desarrollo en la columna de bacterias
fotosintéticas capaces de utilizar el sulfuro de hidrógeno como donador
electrónico, bajo la influencia de la luz (metabolismo fotoautótrofo), permite
explicar una parte del ciclo del azufre y de los microorganismos responsables.

Sergei N. Winogradsky (1856-1953) y Martinus Willem Beijerinck (1851- 1931),


fueron los primeros en estudiar las relaciones entre diferentes tipos de
microorganismos en un mismo hábitat y esta columna lleva su nombre del
microbiólogo ruso que lo utilizo por primera vez. El estudio de esta columna simula
un microambiente o un microecosistema que muestra cómo los microorganismos
ocupan microespacios altamente específicos de acuerdo con sus necesidades
fisiológicas y metabólicas, como la exigencia de carbono, energía y oxígeno, así
como la interdependencia, de forma tal que la actividad metabólica de un
microorganismo posibilita el crecimiento de otros y viceversa. Las columnas de
Winogradsky se preparan con muestras de suelo colectadas en ambientes
húmedos, las cuales son enriquecidas con compuestos orgánicos e inorgánicos y
finalmente son expuestas a una fuente de luz natural. En ellas se observa que
después de 3 ó 4 semanas de incubación aumenta la cantidad de los distintos
tipos de microorganismos, mismos que de acuerdo con sus características
fisiológicas se establecen en las diferentes zonas a lo largo de la columna, lo que
se conoce como sucesión. De esta forma, el resultado es una columna
estratificada tanto en el suelo como en el agua, donde cada estrato se relaciona
con un proceso bioquímico.

La columna de Winogradsky es un modelo de ecosistema que imita los procesos


de los sustratos como es el agua o fango que recibe la luz sin penetrar
completamente en su interior. Es un sistema similar a las sulfuretas naturales
halladas en aguas dulces, aguas marinas o salobres en las que la reducción de
sulfato por parte de las bacterias genera sulfuro de hidrógeno. Los sulfuros son
fuente electrónica para el metabolismo de una gran variedad de bacterias rojas y
verdes fotosintéticas del azufre, tales como Chromatium, Thiocapsa o
Thiospirillum. El desarrollo masivo de estos microorganismos generará manchas
de colores rojos y verdes en las paredes de la columna. A partir de estas zonas de
acumulación masiva de bacterias pigmentadas es posible recoger y analizar
muestras que faciliten la observación de las comunidades microbianas
dominantes.

Materiales.
 500g de muestra de suelo.
 1 500 mL de agua de estanque.
 1 botella de 3.785 ml recipiente alto de boca ancha, de paredes
trasparentes.
 1 yema de huevo cocido.
 3 tornillos de hierro.
 Papel periódico finamente cortado.
 Una espátula.

Método utilizado.
Colecte una cantidad de sustrato de materia orgánica en el suelo (tierra negra) y
removí las piedras o partículas grandes del material para el estudio. Luego en el
envase de plástico de 3.785 ml metí los sustratos hasta ocupar aproximadamente
el volumen 1/3 del recipiente y junte el material orgánico junto con el papel
finamente cortado, los tres clavos en estado de oxidación y la yema de un huevo y
lo mezcle hasta homogenizar completamente, lo compacte con la ayuda de una
espátula a fin de eliminar las burbujas de aire. Mezcle la muestra de agua que
recolecte de una salida de agua que iba al manglar de Campeche con el medio
mineral en proporción ya compactado, al momento de mezclar el agua lo hacía de
una manera suave para que no se revolviera con el sustrato y no se formada
fango, luego agite la solución con la espátula para eliminar burbujas de aire.
Registre el aspecto final de la columna (color del sedimento y del líquido), marque
el nivel de agua y cubrí la boca de la botella con el plástico auto adherible y le hice
algunas perforaciones para reducir la evaporación y por ultimo puse la columna
en temperatura ambiente (25 a 30°C) cerca de una ventana para que reciba
iluminación.

Observaciones semanales.
 Primera semana (20 de febrero al 26 de febrero del 2021). Realice
alrededor de las 11:00 la recolección de materiales, a las 12:00 pm empecé
a preparar y a homogenizar los materiales para que a las 12:06 pm finalice
su preparación, en ese momento el color era un café bajo. Los primeros
tres días el agua se estaba asentando en la parte superior de la botella, el
color del agua se tornó un poco más transparente del día de la realización.
Al finalizar la primera semana el color le agua empezaba a tomar un color
café y los sustratos empezaban a compactarse.

Imágenes tomadas durante la realización

 Segunda semana (27 de febrero a 5 de marzo del 2021). Empezando y la


mayoría de los días de la segunda semana de este experimento, la
composición morfológica y física de esta etapa de la columna no presento
ningún cambio visible al ojo humano, el agua seguía de ese color café bajo
y todo parecía estar normal. Pero en los últimos días de la semana el agua
empieza a tornarse un poco más oscura la parte superior del agua empieza
a formarse como una base y formarse burbujas, en esta etapa se desarrolla
toda una variada comunidad microbiana caracterizada por cianobacterias y
microalgas.

Imágenes tomadas la segunda semana.


 Tercera semana (6 de marzo a 12 de marzo del 2021). En esta semana ya
se empieza a ver cambios físicos de la muestra, la parte superior del
sustrato orgánico (tierra), ya empieza a tomar un color rojo esto por la
concentración de azufre y la capa de superior del agua empieza a tomar un
color como naranja amarillento y a formarse más burbujas.

 Cuarta semana (13 de marzo a 19 de marzo del 2021).

 Quinta semana (20 de marzo a 26 de marzo del 2021).


 Sexta semana (27 de marzo a 2 de abril del 2021).

 Séptima semana (3 de abril a 9 de abril del 2021).

 Octava semana (10 de abril a 16 de abril del 2021).


Resultados hasta ahora y discusión.
La incubación de esta columna durante dos semanas y cuatro días, a
temperatura ambiente, estando en un lugar abierto y durante el día con una
fuente luminosa, ofreció unos cambios de coloración importantes en la
columna, tanto en el agua como en el fango. Lo que parecía al principio de
un experimento que no daba resultados y manejando sustratos como un
agua sucia, terrosa, pasó a tornarse en una experiencia intrigante y la tierra
color café oscuro y el agua de color café y luego transparente empezó a
cambiar, el agua un color café oscuro y formarse algas.
La actividad oxigénica de la columna de winogradsky está formada por
algas y bacterias fotosintéticas. La fotosíntesis puede definirse como un
proceso anabólico autotrófico, por el que algunas bacterias, células
vegetales o algas utilizan sustancias inorgánicas y energía luminosa, para
su transformación en sustancias orgánicas[ CITATION Raw89 \l 2058 ].
Hablando de la fotosíntesis oxigénica, X es el oxígeno molecular (O2), por
lo que el reactivo inicial es el agua (H2O). La molécula Y pasa a ser el
dióxido de carbono (CO2), caso de nitratos (NO3), que podrán reducirse
con los hidrógenos del agua para constituir moléculas orgánicas. La
molécula de oxígeno será responsable de las bolsas de gas que se alojan
entre la pared de plástico y el biopelicula microbiano [ CITATION Voe92 \l 2058 ].
Las cianobacterias, organismos dominantes en la masa acuosa de la
columna, son un claro ejemplo de organismos fotoautótrofas, capaces de
utilizar la luz como fuente de energía y común mente se les puede conocer
algas verdeazuladas [ CITATION Mar88 \l 2058 ].
En la actividad anoxigénica los procesos metabólicos y morfológicos se
mostraron en dominó en la columna diseñada en la estratificación
correspondiente con el fango. La ausencia de oxígeno se mostró,
inicialmente, por la aparición de colores negros en el fondo de la botella.
El metabolismo microbiano llevado a cabo en condiciones de anaerobiosis
determinó la oxidación parcial de la materia orgánica presente en el barro,
liberándose con ello energía en forma de ATP y poder reductor, en el
procesos reductor mediante el ATP la molécula de sulfato pasará a sulfuro
de hidrógeno gracias al complejo enzimático sulfito reductasa
citoplasmático[ CITATION Lóp08 \l 2058 ] . Si en el medio hace presencia
cualquier sal de hierro, se provocará la precipitación de sulfuro de hierro y
esto es responsable del color negro. Un poco por encima de esta zona nos
encontramos una franja de bacterias púrpuras no del azufre, como
Rhodospirillum y Rhodopseudomonas, que adquiere un color rojo
anaranjado que todavía se están empezando a formar. Su mayor o menor
abundancia dependerá de la cantidad de sulfuro de hidrógeno que se haya
producido y de la cantidad que, no utilizada por otros organismos, difunda
hacia arriba, ya que su presencia inhibe a estas bacterias. Son anaerobios
fotoorganótrofos que sólo pueden realizar la fotosíntesis en presencia de
una fuente de carbono orgánico. [ CITATION Cur00 \l 2058 ] [ CITATION Mar \l
2058 ]

Bibliografía.

 Curtis, Barnes, Schnek, & Massarini. (2000). Curtis Biología. Madrid :


medica panamericana .

 López, J. (2008). La columna de Winogradsky. Eureka sobre Enseñanza y


Divulgación de las Ciencias.

 Margulis, L. y. (1988). Five kingdoms. New York: Freeman and Company.

 Rawn, J. (1989). Bioquímica. Madrid: Interamericana-McGraw-Hill.

 Sagardoy, M. A., & E., M. (s.f.). Biología del suelo, guía. Universidad
Nacional del Sur.

 Voet, D. y. (1992). Bioquímica. Barcelona: Omega.

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