Informe de Laboratorio Normas de Bioseguridad y Microscopia 1 - Grupo 2

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UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA NACIONAL – FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍA –


PROGRAMA DE LICENCIATURA DE QUÍMICA – SISTEMAS BIOLÓGICOS (I) – PROFESORA
JOHANNA ALEXANDRA BASTO SILVA – 2021-1 – ESTUDIANTES: KAREN LIZETH
RODRÍGUEZ PARRA - LUZ ÁNGELA ROMÁN POVEDA - DANIEL ALFREDO LEÓN SÁNCHEZ
- DIEGO NICOLÁS SUÁREZ ROJAS - SANTIAGO TABERA LONDOÑO – PRACTICA Nº 1:
INFORME DE LABORATORIO NORMAS DE BIOSEGURIDAD Y MICROSCOPIA 1 – Fecha de
elaboración: 12 y 15 de Abril del 2021.

INFORME DE LABORATORIO NORMAS DE BIOSEGURIDAD Y MICROSCOPIA 1

RESUMEN

Durante el laboratorio virtual sobre Microscopía y Normas de Bioseguridad, se pudo


evidenciar la importancia que debe de tenerse al momento de trabajar en este espacio tanto
académico como profesional. Se profundizaron las pautas generales de usos y precauciones
importantes en el espacio; donde se utilizaron instrumentos como el Estereoscopio y el
Microscopio para observar diferente muestras in vivo, diferentes técnicas de tinción y de
montajes en seco y húmedo. Además de esto, se demostró durante los montajes las
características de dermis, fibras e insectos que están fuera del rango de resolución del ojo
normal.

Palabras clave
● Microscopía - Técnicas - Tinciones - Pictogramas – Lentes.

INTRODUCCIÓN

En toda disciplina científica se tiene importancia no solo en el Método Científico que se esté
aplicando, sino también, en el Instrumental Científico y Normas de Bioseguridad empleadas,
siendo un elemento esencial para realizar distintos ensayos. Desde hace mucho tiempo, se han
desarrollado distintos equipos de investigación científica dentro de los cuales, destaca un
aparato óptico que con el paso del tiempo ha adquirido una importancia trascendental, sin
precedentes en la historia de los grandes progresos de las ciencias y de la biología en
particular; el Microscopio. A Zacharias Janssen y su padre Hans Martens, se les atribuye la
creación del primer Microscopio alrededor de 1590 y a lo largo de la historia, se ha mejorado
este instrumento con el cual se han podido visualizar seres vivos por medio de montajes,
lentes y aumentos específicos que dan cavidad a un resultado con ayuda de tinciones y otros
materiales.
Puede decirse que todo lo que conocemos en el plano terrestre y Universal tiene una
necesidad fundamental en temas de Microscopía celular, porque otorga conocimientos
importantes de cómo es la vida Micro Celular y su estructuración celular. Incluso con la ayuda
de una Lupa de Aumentos, o la misma implementación de lentes aumentados según lo que se
esté trabajando como lo ha propuso Antanie Van Leeuwenhoek, llevando la exploración de
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nuestro entorno a nuevos mundos: como lo son las estructuras de celulosa, queratina, fibras,
etc.
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INFORME DE LABORATORIO NORMAS DE BIOSEGURIDAD Y MICROSCOPIA 1 – Fecha de
elaboración: 12 y 15 de Abril del 2021.

CAPÍTULO 1: PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. Descripción del problema

Examinar los diferentes tipos de muestras identificadas en clase virtual, para distinguir
a fondo las estructuras de montajes vistos en clase. Asimismo, es importante reconocer
las estructuras de cada una de las muestras observadas en el microscopio. Este
instrumento nos permite observar con objetivos de 4x, 10x y 40x, para diferentes tipos de
montajes, como lo son secos o húmedos. Los montajes secos, son aquellos que se
utilizan para observar la morfología individual y de agrupamiento bacteriano, estructuras
de celulosa, queratina y textiles; además, este montaje no necesita de ningún tipo de
tinción o reactivo para apreciar ciertas estructuras. Finalmente, los montajes húmedos
son aquellos que requieren de alguna tinción para apreciar ciertas estructuras. Se utiliza
para ver organismos vivos, así como sustancias líquidas. Los tipos de reactivos para
hacer las tinciones pueden ser agua destilada, Lugol y alcohol, haciendo técnicas de
aplastamiento y siendo preciso con su medida.

1.2. Pregunta problema

 Al tener una muestra acuosa ¿por qué es importante el uso de algún reactivo para
tinciones especiales?

1.3. Hipótesis

 Si tomo una muestra de catafilo de cebolla y le aplico una gota de Lugol con un
objetivo de 10x, entonces poder identificar claramente la estructura de la célula vegetal.

 Si dejó caer la lámina de manera paulatina sobre la muestra con agua destilada
entonces abre hecho un montaje correcto y podré observar la muestra detalladamente.
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elaboración: 12 y 15 de Abril del 2021.

 Si realizó la técnica de barrido rápidamente y la muestra choca sobre la muestra,


entonces observaré con un aumento más alto que el del objetivo.

OBJETIVOS

1.1 General

 Acercar a los estudiantes de primer semestre del programa de Licenciatura en


Química de la Universidad Pedagógica Nacional en el conocimiento de Microscopía,
mediante la manipulación del microscopio óptico compuesto y técnicas de enfoque
haciendo uso de la interactividad de Virtual Labs para entender el proceso.

1.2 Específicos

 Identificar y apropiar las partes del M.O.C de manera virtual.

 Aplicar diferentes técnicas de enfoque en el M.O.C y en el estereomicroscopio de


manera virtual.

 Usar herramientas digitales en otros ambientes de aprendizaje como laboratorios


virtuales que permiten ampliar y profundizar en el conocimiento científico.

JUSTIFICACIÓN

Existe una inmensa cantidad de células y microorganismos que influyen en los ecosistemas
y en la vida misma del humano, exigiendo así ser estudiadas en favor de un mayor
conocimiento y mejora en la calidad de la vida, Por tanto, realizar este tipo de prácticas en
futuros licenciados en ciencias naturales, promueve competencias procedimentales e
investigativas que co-ayudan a una formación integral de los mismos y fortalecimiento del
trabajo en equipo y el aprendizaje cooperativo.
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CAPÍTULO 2: MARCO CONCEPTUAL

Se dice que los primeros microscopios fueron creados por Zacharias Jannsen a mediados
de 1590 por medio de una lente biconvexa que le permitía alcanzar aumentos de hasta 10x, sin
embargo, no fue hasta que el holandés Antón Van Leeuwenhoek creó sus microscopios con
lentes talladas por él; que la microscopía avanzó en campos de la ciencia por sus aportes a
cerca de microorganismos protistas y de un pequeño vistazo a la pared celular.
Desde entonces los microscopios han dado pasos cada vez más grandes hasta llegar a los
microscopios ópticos que conocemos hoy en día.

2.1 Componentes mecánicos del M.O.C. (Microscopio Óptico Compuesto)

 Platina
Esta es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere observar. Su
posición vertical con respecto a las lentes del objetivo se puede regular mediante
dos tornillos para generar una imagen enfocada. La platina tiene un agujero en el
centro a través del cual se ilumina la muestra. Generalmente hay dos pinzas unidas
a la platina que permiten mantener la muestra en posición fija.

 Base o pie

Es la pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y sobre la cual


se montan el resto de elementos. Acostumbra a ser la parte más pesante para
proporcionar suficiente equilibrio y estabilidad al microscopio. Es habitual que
incluya algunos topes de goma para evitar que el microscopio se deslice sobre la
superficie donde se encuentra.

 Brazo
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El brazo constituye el esqueleto del microscopio. Es la pieza intermedia del


microscopio que conecta todas sus partes. Principalmente conecta la superficie
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donde se coloca la muestra con el ocular por donde ésta se puede observar. Tanto
las lentes del objetivo como del ocular se encuentran también conectadas al brazo
del microscopio.

 Pinzas

Las pinzas tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta se ha
colocado sobre la platina.

 Tornillo macro métrico

Este tornillo permite ajustar la posición vertical de la muestra respecto al objetivo


de forma rápida. Se utiliza para obtener un primer enfoque que es ajustado
posteriormente mediante el tornillo micrométrico.

 Tornillo micrométrico

El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la


muestra. Mediante este tornillo se ajusta de forma lenta y con gran precisión el
desplazamiento vertical de la platina.

 Revolver

El revólver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada objetivo
tiene una proporción de aumento distinto, el revólver permite seleccionar el más
adecuado a cada aplicación. Habitualmente el revólver permite escoger entre tres o
cuatro objetivos distintos.

 Tubo
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El tubo es una pieza estructural unida al brazo del telescopio que conecta el
ocular con los objetivos. Es un elemento esencial para mantener una correcta
alineación entre los elementos ópticos.
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2.2 Componentes ópticos

 Foco o fuente de luz

Este es un elemento esencial que genera un haz de luz dirigido hacia la muestra.
En algunos casos el haz de luz es primero dirigido hacia un espejo que a su vez lo
desvía hacia la muestra. La posición del foco en el microscopio depende de si se
trata de un microscopio de luz transmitida o de luz reflejada.

 Condensador

El condensador es el elemento encargado de concentrar los rayos de luz


provenientes del foco a la muestra. En general, los rayos de luz provenientes del
foco son divergentes. El condensador consiste en un seguido de lentes que
cambian la dirección de estos rayos de modo que pasen a ser paralelos o incluso
convergentes.

 Diafragma

El diafragma es una pieza que permite regular la cantidad de luz incidente a la


muestra. Normalmente se encuentra situado justo debajo de la platina. Regulando
la luz incidente es posible variar el contraste con el que se observa la muestra.

 Objetivo

El objetivo es el conjunto de lentes que se encuentran más cerca de la muestra y


que producen la primera etapa de aumento. El objetivo suele tener una distancia
focal muy corta. En los microscopios modernos distintos objetivos están montados
en el revólver. Esto permite seleccionar el objetivo adecuado para el aumento
deseado.
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 Ocular

Este es el elemento óptico que proporciona la segunda etapa de ampliación de


imagen. El ocular amplía la imagen que ha sido previamente aumentada mediante
el
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objetivo. En general, el aumento aportado por el ocular es inferior al del objetivo. Es


a través del ocular que el usuario observa la muestra.

 Prisma óptico

Algunos microscopios incluyen también prismas en su interior para corregir la


dirección de la luz.

Figura 1: partes del M.O.C. (Microscopio Óptico Compuesto).


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Tomado de: https://www.pinterest.com.mx/pin/510736413975113927/

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2.3 Técnicas de enfoque

Cuando se observa por el microscopio la mayoría olvida que se debe enfocar de


manera correcta para sacar el mejor rendimiento, esto es importante pues si no se
realiza la técnica correctamente se pueden generar fatigas visuales y además se
pueden perder detalles de la muestra.
Para enfocar correctamente se deben seguir los siguientes pasos:

● Poner la muestra en la platina.


● Ajustar la distancia inter pupilar (separación entre ambos oculares) y dioptrías en
oculares si se tiene en +2 o -2.
● Seleccionar el objetivo de mínimo aumento.
● Con el tornillo macro métrico ajustar la altura de la platina hasta que la muestra esté
enfocada.
● Usar el tornillo micrométrico para un ajuste fino. A partir de ahora, cuando cambiamos
de objetivo, casi siempre con un ajuste micrométrico será suficiente.

2.4 Técnicas de tinción

La tinción es un proceso por el cual las moléculas de un colorante se absorben a una


superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los microorganismos
y poder realizar la observación en microscopio óptico. Dado que las bacterias son casi
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incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual se encuentran suspendidas y no


pueden observarse claramente sin algún tratamiento previo.

Existen diferentes tipos de tinción.

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 Simple

El colorante utilizado sirve solo para detonar la morfología celular.

 Diferencial

El colorante utilizado pone de manifiesto diferencias entre células


bacterianas o entre partes de una misma célula, estas técnicas utilizan más
de un colorante o diferentes reactivos complementarios para la tinción.

2.5 Montajes

 Montajes en seco

Se utiliza para observar estructuras específicas de celulosa, queratina,


textiles entre otras, este tipo de montaje se caracteriza por no necesitar de
ningún tipo de tinción o reactivo para apreciar las estructuras.

 Montajes húmedos
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Es el tipo de montaje más común en el trabajo de microscopía, se


requiere de una técnica de tinción o de un reactivo para poder observar la
muestra, se utiliza agua destilada como herramienta principal. En este
montaje se pueden observar organismos vivos como líquidos de cualquier
forma.

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3. Metodología
Software y direcciones electrónicas

3.1.1 Software’s.

 http://www.madrimasd.org/cienciaysociedad/taller/animaciones/neuro/pri ncipal.asp
 https://www.biologycorner.com/microscope/index.html

3.1.2 Tutoriales.

 https://www.youtube.com/watch?v=grfZZoRA24c
 https://www.youtube.com/watch?v=70gEkF0kj1c
 https://www.youtube.com/watch?v=86RmR6Lpo1c
 https://www.youtube.com/watch?time_continue=171&v=N96x3Xtp95w&feature=emb_
logo

3.1.3 Otros materiales de laboratorio virtual.

 Microscopios ópticos compuestos.


 Microscopios estereoscopios.
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 Láminas.
 Laminillas.
 Pipetas Pasteur o goteros.
 Agujas de disección (opcional).

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3.1.4 Otros materiales de bioseguridad (solo en presencial).

 Bata.
 Guantes de cirugía.

3.1.5 Reactivos virtuales.

 Lugol.
 Agua destilada.
 Otros tintes sugeridos.

3.1.6 Biológico-digital.

 Imágenes de insectos pequeños (lepisma, cochinilla y lombriz roja).


 Corte de cebolla cabezona.
 Muestra de sangre humana.
 Acaro.
 Muestra de pelo de ratón.
 Corte de hoja de árbol.
 Corte de papel periódico impreso (letra E).
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 Corte de piel humana.


 Protozoo cíclope.
 Cristales de azúcar y sal.

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3.2 Procedimientos: Diagramas de flujo


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Figura 2: Diagrama de flujo correspondiente al Microscopio.

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Figura 3: Diagrama de flujo correspondiente a Estereoscopio montaje in vivo.

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Figura 4: Diagrama de flujo correspondiente a VirtualLabs.

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CAPÍTULO 4: ANÁLISIS Y RESULTADOS


4.1 Montajes in vivo en Estereoscopio

Imagen 1. Pececillo de plata (Lepisma sacharina) Montaje numero uno. Imagen 2. Observacion en obtetivo 2x Pececillo de plata (Lepisma Sacharina).

Imagen 3. partes reconocidas del Pececillo de plata (Lepisma Sacharina). Imagen 4. Cochinilla (Dactylopius coccus) Montaje numero dos.
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Imagen 5. Observaciòn en objetivo 2x Cochinilla (Dactylopius Imagen 6. Partes reconocidas Cochinilla (Dactylopius Coccus).
Coccus).

Imagen 7. Lombriz Roja (Eisenia foetida). Imagen 8. .Obsrvaciòn con objetivo 2x Lombriz Roja (Eisenia foetida).
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Imagen 9. Partes reconocidas .Lombriz Roja (Eisenia foetida).

4.2 Montajes en seco – Microscopio:

Imagen 10. Montaje en seco 1 hilo. Imagen 11. Observaciòn en objetivo 4x y 10x.
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Imagen 12. Montaje 2 y 3 pelo humano y granos de azucar. Imagen 13. Observaciòn en objetivos 4x y 10x.

4.3 Montajes en húmedo – Microscopio

Imagen 14. Montaje 4. Muestra de periodico con tecnica de Imagen 15. Observaciòn en objetivos 4x y 10x (exceso de liquido).
aplaztamiento en humedo.
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Imagen 16. Montaje 5. Muestra de cebolla cabezona con tecnica de Imagen 17. Observaciòn en onbejtivo 4x y 10x tinciòn con ligol cèlula
aplaztamiento y tinciòn con Lugol. vegetal.

4.4 Uso de herramientas virtuales y tutoriales

Imagen 18. Mitosis de raiz de cebolla en objetivo 10x. Imagen 19. Mitosis de raiz de cebolla en objetivo 100x.
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Imagen 20. Observaciòn globulos rojos. Imagen 21. Observaciòn acaro de polvo.

Imagen 22. Observaciòn pelo de raton. Imagen 23.. Observaciòn piel humana.

Imagen 23. Tutorial uso del Microscopio.


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4.5 Análisis de Resultados

 En los montajes in vivo realizados en el estereoscopio, se observaron tres animales:


pececillo de plata (Lepisma Sacarina), cochinilla (Dactylopius Coccus) y la lombriz de
tierra (Eisenia Foetica). Del pececillo de plata, se pudo reconocer partes de su cuerpo
como los cepillos cefálicos, las antenas, las macro quetas cefálica y abdominales, sus
extremidades y el uroterguito.

 De la cochinilla se pudo observar los ojos, el cefaleon (cabeza), los maxi lípidos (para
triturar), los pereiopodos (patas articuladas) y el pereion (segmentos). En la lombriz
de tierra se identificó la boca, el clitelo (órganos reproductores), los segmentos y el
ano.

 En los montajes en seco, se observaron tres tipos diferentes de muestras: hilo, pelo
humano y granos de azúcar. Se usaron dos tipos de enfoque, el 4x y el 10x para el
hilo y el pelo, donde se pudo reconocer en el hilo, las fibras celulosas y en el pelo, la
médula y la corteza y en un aumento de 10x se ve la cutícula o flora de queratina.

 Para los granos de azúcar, se usó el aumento 4x, ya que, si se usa el aumento 10x,
los cristales se fraccionarán.

 En los montajes en húmedo, se usaron dos materiales para la muestra: hoja de


periódico y cebolla cabezona. En la hoja de periódico, se observó la fibra celulosa
del papel y se identifica que se debe ser muy preciso en la aplicación del agua
destilada en el aplastamiento, ya que, el exceso de líquido puede dañar la muestra.

 En la muestra del catafilo de cebolla, se aplica la técnica de tinción con Lugol y se


observan las paredes celulares del tejido vegetal con la técnica de enfoque 4x. Estas
paredes toman un color caramelo y se puede observar los núcleos. En el enfoque
10x, se observa más a profundidad la organización del tejido celular y sus núcleos,
también, se analiza que los núcleos no están siempre en el centro de la célula y solo
se puede ver la pared celular, el citoplasma y el núcleo.
22

 En las ayudas audiovisuales y digitales, se utilizaron dos simuladores virtuales y un


tutorial. En los simuladores se pudo observar varias técnicas de enfoque hasta los
1000x y se vieron muestras como cebolla, sangre, piel humana, pelo de ratón, ácaros
de polvo, etc. De estos se identificaron procesos como la mitosis de la cebolla y
estructuras más detalladas de los montajes como las partes del cuerpo del acaro, la
forma y color de los glóbulos sanguíneos, la corteza y la cutícula. Con el pelo de ratón
UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA NACIONAL – FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍA –
PROGRAMA DE LICENCIATURA DE QUÍMICA – SISTEMAS BIOLÓGICOS (I) – PROFESORA
JOHANNA ALEXANDRA BASTO SILVA – 2021-1 – ESTUDIANTES: KAREN LIZETH
RODRÍGUEZ PARRA - LUZ ÁNGELA ROMÁN POVEDA - DANIEL ALFREDO LEÓN SÁNCHEZ
- DIEGO NICOLÁS SUÁREZ ROJAS - SANTIAGO TABERA LONDOÑO – PRACTICA Nº 1:
INFORME DE LABORATORIO NORMAS DE BIOSEGURIDAD Y MICROSCOPIA 1 – Fecha de
elaboración: 12 y 15 de Abril del 2021.

se pudo hacer una comparación con el pelo humano, dando como resultado, la
diferencia en la médula de ambas muestras y distintos colores, por ser de especies
diferentes. En el tutorial, se aprende las diferentes técnicas de enfoque, las partes
del microscopio, su uso correcto y se añade que para utilizar el aumento de 100x se
deben tener muestras fijas.

CONCLUSIONES

 Al observar el catafilo de la cebolla, se concluye que se puedo identificar la estructura


de la célula vegetal con ayuda de una gota de Lugol. Se pudo reconocer el
citoplasma, el núcleo, la pared celular y con el objetivo 10x se puede hacer una mejor
observación del núcleo; cabe recalcar que se debe ser muy precisos con el Lugol
para evitar daños en la muestra y desperdicio de reactivos. También se dedujo que
entre más tenga la muestra glucógeno, se va teñir de un color caramelo; por lo tanto,
la hipótesis número uno es verdadera.

 Se concluye que si se acomoda la lámina de una manera distraída o se humedece


de más la muestra, se van observar burbujas o restos del exceso de líquido, ya que
no se hizo la técnica de aplastamiento de forma correcta, entonces se debe tener
precisión y tener cuidado para hacer el aplastamiento; por lo tanto la hipótesis
numero dos es falsa.

 Se identificaron y se interiorizaron las partes del M.O.C. (Microscopio Óptico


Compuesto) de manera virtual. Adicional, se aplicaron diferentes técnicas de
enfoque en el M.O.C. y en el Estereomicroscopio de manera virtual. Por último, se
utilizaron técnicas de aplastamiento y tinción para montajes en húmedo

 Se usaron herramientas digitales como laboratorios virtuales para profundizar sobre


las técnicas de enfoque, tinción y correcto uso de los instrumentos del laboratorio.
23

Se demuestra que si se puede subir la muestra con ayuda del tornillo macro métrico
para tener mejor observación, pero no se debe subir mucho porque se puede dañar
la muestra y no va dar un aumento más alto. Por ejemplo, en el montaje de los
granos de azúcar, al acercar la muestra con el objetivo 10x se fraccionaron los
cristales. Por lo tanto, la hipótesis no es verdadera.
UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA NACIONAL – FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGÍA –
PROGRAMA DE LICENCIATURA DE QUÍMICA – SISTEMAS BIOLÓGICOS (I) – PROFESORA
JOHANNA ALEXANDRA BASTO SILVA – 2021-1 – ESTUDIANTES: KAREN LIZETH
RODRÍGUEZ PARRA - LUZ ÁNGELA ROMÁN POVEDA - DANIEL ALFREDO LEÓN SÁNCHEZ
- DIEGO NICOLÁS SUÁREZ ROJAS - SANTIAGO TABERA LONDOÑO – PRACTICA Nº 1:
INFORME DE LABORATORIO NORMAS DE BIOSEGURIDAD Y MICROSCOPIA 1 – Fecha de
elaboración: 12 y 15 de Abril del 2021.

REFERENCIAS

Ciencias UTP. (25 mar 2018). Laboratorio N°1: Introducción a los materiales y mediciones - Parte 1.
YouTube. https:// www.youtube.com/watch?v=KbuSX-iglXA

BIOSLab Plataforma de Formación en Bioseguridad en Laboratorios y Animalarios (Consul. 12 de Abril


del 2021). BiosLab. https://www.visavet.es/es/bioslab

Métodos y Técnicas de Tinción (Consul. 15 de Abril del 2021). Microbiología.


http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/

Partes del microscopio (Consul. 15 de Abril del 2021). Mundo Microscopio.


http://microbiologia3bequipo5.blogspot.com/

Mariana Lanfranconi, A. HISTORIA DE LA MICROSCOPIA. Introducción a la Biología Facultad de Cs.


Exactas y Naturales. Universidad Nacional de Mar del Plata

Optical Micoscopy Primer (Consul. 15 de Abril del 2021). Interactive Java Tutorials.
https://micro.magnet.fsu.edu/primer/virtual/magnifying/index.html

Slide 1 – Blood. (Consul. 15 de abril de 2021). Slide 1 – Blood.


https://www.biologycorner.com/microscope/index.html

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